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Title Aspergillus nigerのacid phosphatase生産様式に関 する研究 Author(s) 島田, 裕司 Citation Issue Date Text Version ETD URL http://hdl.handle.net/11094/1479 DOI rights Note Osaka University Knowledge Archive : OUKA Osaka University Knowledge Archive : OUKA https://ir.library.osaka-u.ac.jp/ Osaka University

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Title Aspergillus nigerのacid phosphatase生産様式に関する研究

Author(s) 島田, 裕司

Citation

Issue Date

Text Version ETD

URL http://hdl.handle.net/11094/1479

DOI

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Note

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Osaka University

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