Óxido nítrico sintetase e o seu papel na inflamação
TRANSCRIPT
![Page 1: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/1.jpg)
Óxido Nítrico Sintetase
E o seu papel na inflamação
![Page 2: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/2.jpg)
![Page 3: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/3.jpg)
![Page 4: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/4.jpg)
![Page 5: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/5.jpg)
OXIDO NITRICO SINTASE ENDOTELIAL
INFLAMACAO - defesa do organismo comum em muitas patologias aparentemente distintas.
PROCESSO INFLAMATORIO - eh iniciado por complexas series de eventos, sendo os passos prévios fundamentais mudanças vasculares que começam imediatamente e se desenvolvem nas primeiras horas.
eNOS (oxido nítrico sintase endotelial) e NO (oxido nítrico) ligados a permeabilidade vascular envolvidos na inflamação
![Page 6: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/6.jpg)
Mediadores envolvidos em mudanças na permeabilidade vascular
Histamina 5-HT Bradicinina Prostaglandinas Óxido nítrico (NO)
Citocininas inflamatórias
Fatores de crescimento
![Page 7: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/7.jpg)
Mediadores iniciais
Histamina liberados rapidamente armazenados nas
células5 – HT
![Page 8: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/8.jpg)
Fator de necrose tumoral induz
iNOS produz
óxido nítrico (NO)
aumenta a permeabilidade vascular
![Page 9: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/9.jpg)
Tipos de óxido nítrico sintetase Óxido nítrico sintetase neural (nNOS) Óxido nítrico sintetase endotelial (eNOS) Óxido nítrico sintetase indutível (iNOS)
![Page 10: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/10.jpg)
Óxido Nítrico Sintetases - NOS NO é gerado pelo metabolismo da Arginina
Arginine + Ca2+ + Nitric Oxide Synthase
Nitric Oxide
![Page 11: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/11.jpg)
![Page 12: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/12.jpg)
Óxido Nítrico Sintetases - NOS 3 Formas: Neural (n-NOS)
Endotelial (e-NOS) Indutível (i-NOS)
![Page 13: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/13.jpg)
![Page 14: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/14.jpg)
Óxido Nítrico Sintetases - NOS i-NOS
- Contolada por mediadores inflamatórios e citocinicas- Produz quantidades (desreguladas) de NO
e-n-NOS- Produzem quantidades
![Page 15: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/15.jpg)
Características desta enzimas Estrutura tridimensional e-n-NOS contém sítios autoinibitório que é
regulador da sensibilidade de Ca++ Possui um N-terminal que corresponde ao sítio de
ligação para vários grupos, como: heme, arginina e hidrobiopterina (BH4). Estes grupos são ligados através de seu carbono terminal ao N-terminal e tal ligação é regulada por calmodulina.
![Page 16: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/16.jpg)
![Page 17: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/17.jpg)
eNOS: Uma Enzima de Indução
![Page 18: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/18.jpg)
Aumento da concentração de eNOS em células endoteliais humanas:
Fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF);
Modulador de receptor de estrógeno seletivo; Exercícios físico (aumenta a expressão de RNAm
que codifica eNOS; Neurite autoimune (células endoteliais e de
Schwann nos nervos ciáticos).
![Page 19: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/19.jpg)
Reguladores de eNOS: Dinâmicos alvos subcelulares; Interações de proteína-proteína; Fosforilações; Estimulação de Ca2+ dependente-independente; Autocóides (danos no tecido e mudança do fluxo
sanguíneo).
![Page 20: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/20.jpg)
Reguladores da atividade de eNOS CAV-1- Forma um inibidor fisiológico de e-NOS. É uma
proteína que regula respostas vascvulares a NO. CaM e CaM co-imunoprecipates HSP90 (Heat shock protein 90) –
Liga ao NO e NOS o ativa. Aumenta a sua atividade e a liberação de NO.
Influencia a fosforilação e a junção de e-NOS ao HSP 90 e CaM
![Page 21: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/21.jpg)
Fosforilação proteíca e-NOS é primariamente fosforilada em resíduos de
serina, tirosina treonina. A serina cinase B fosforila diretamente e-NOS na 1177 Ser (e-NOS humano) que aumenta a atividade de e-NOS.
![Page 22: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/22.jpg)
Funções do e-NOS na Inflamação
e-NOS é fonte dinâmica de NO, abastecem as células constantemente
i-NOS produz grande quantidade de NO
Produz os efeitos Patológicos do NO
![Page 23: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/23.jpg)
Os 2 principais linhas de pesquisa 1- in vitro ou admistração in vivo de NO exogénos 2- Utilizando inibidores de NOS
Pontos fracos
![Page 24: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/24.jpg)
Formas de Investigação Usando e-NOS, i-NOS, n-NOS “inválidas” em
camundongos Microsópio intravitalO nº de Rolagem de Leucócito = iNOS Microscopia de ContrasteSe há estimulação há de rolagem:
i-NOS (2x) e eNOS (6x)
![Page 25: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/25.jpg)
Ferramentas farmacológicasFalta de seletividade dos inibidores para as
isoformas;nNOs, eNOs e iNOs.
Ação variável: local e tempo de açãoFalta de estudos na regulação e modulação
de Nos
![Page 26: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/26.jpg)
eNOs Cav 1HPS 90 e calmodulina (CaM) fosforilação de eNOs
eNOs fosforilado forma ativa
Ap-Cav (derivado Cav-1) liga-se ao eNOs-anti-inflamatório inibindo o NO
Drogas: Geldanamicina & Radicicol(efeito semelhante) Wortmannin & LY294002(efeito contrário)
-inibe a fosforilação de eNOs fosfatidilinositol 3-cinase
![Page 27: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/27.jpg)
Síntese de eNOs(Cav 1) síntese de Ap-Cav
Inibe os efeitos: hemorragias,vasodilatação, edema, etc.
Mecanismo de modulação
-modificação estrutural da proteína, via Ap-Cav- inibição da fosforilação (fosfatidilinositol 3-cinase)
pelas drogas(Wortmannin e LY294002).
![Page 28: Óxido Nítrico Sintetase E o seu papel na inflamação](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062400/570638461a28abb8238f30eb/html5/thumbnails/28.jpg)
Considerações Finais