patohistoloŠki i imunohistohemijski parametri...

233

* Rad primljen za štampu 24. 03. 2015. godine**Drsc.vet.med.SanjaAleksić-Kovačević,redovniprofesor;drsc.vet.med.IvanaVučićević,asistent;MilanAničić,drvet.med.,studentdoktorskihakademskihstudijaKatedrazapa-tološkumorfologiju,Fakultetveterinarskemedicine,Beograd

DOI:10.2298/VETGL1504233A UDC636.7/.8.09:616-006-074

PATOHISTOLOŠKI I IMUNOHISTOHEMIJSKI PARAMETRI ZNAČAJNI ZA PROGNOZU I TERAPIJU TUMORA PASA I MAČAKA*

PATHOHISTOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL PARAMETERS SIGNIFICANT FOR PROGNOSIS AND THERAPY OF TUMOURS IN CATS AND DOGS

Aleksić-Kovačević Sanja, Vučićević Ivana, Aničić M.**

Razvoj tumora podrazumeva nesklad između proliferacije, ras-ta i diferencijacije, što je praćeno značajnim genotipskim i fenoti-pskim varijacijama kod obolele jedinke. Brojni onkogeni efekti inhibišu starenje ćelije, apoptozu i maturaciju, a stimulišu proliferaciju, ćelijsku migraciju i tkivnu invaziju kod ljudi i životinja. Kvalitativno i kvantitativ-no određivanje bioloških prognostičkih faktora u tkivu obolelih pasa i mačaka govori direktno o sposobnosti metastaziranja tumora, a time i o prognozi neoplastične bolesti. Praćenje kliničkih i bioloških prog-nostičkih faktora značajno je za terapiju i predikciju tumora kod lju-di i životinja. Određivanje proliferativnog potencijala tumorskih ćelija, imunohistohemijskom detekcijom Ki-67 i PCNA koristi se u gradiranju nekih tumora kod pasa i mačaka. Faktore angiogeneze i brojne akti-virajuće i inhibitorne proteine, moguće je takođe imunohistohemijski dokazati u tkivu tumora. Oni su uz ostale histološke, kliničke i biološke parametre značajni za dalju prognozu i terapiju neoplastičnih bolesti.

Ključne reči: prognostički markeri, tumori, imunohistohemija, psi, mačke

Normalnatkivauprocesuobnavljanjairastaispoljavajuravnotežuizmeđućelijskeproliferacije,diferencijacijeiprogramiranećelijskesmrti.Nasuprotovome,razvojtumorapodrazumevaneskladizmeđuproliferacije,rastaidiferencijacije,štojepraćenoznačajnimgenotipskimifenotipskimvarijacijamakodobolelejedinke.Scenario brojnih onkogenih efekata na inhibiciju starenja i sazrevanja ćelije,zatimnastimulacijuproliferacije, ćelijskemigracije i tkivne invazije, odgovoran

PREGLEDNI RAD / REVIEW PAPER

234

Vet.glasnik69(3-4)245-254(2015)Aleksić-KovačevićSanjaisar.:Patohistološkiiimunohistohemijskiparametriznačajnizaprognozuiterapijutumorapasaimačaka

jezanastanaktumorakodljudiiživotinja.Danasseovomaspektuveterinarskeonkologije pridaje sve veći značaj. Postalo je sasvim jasno, da kvalitativno ikvantitativnoodređivanjebiološkihprognostičkih faktorau tkivuobolelihpasa imačakagovoridirektnoosposobnostimetastaziranjatumora,atimeioprognozineoplastične bolesti. Istovremeno, praćenje kliničkih i bioloških prognostičkihfaktora značajno je za terapiju i predikciju tumorakod ljudi i životinja (Aleksić-Kovačevićisar.,2005;Stevanovićisar.,2013).

Volumen primarnog tumora (T-stadijum) je kod nekih karcinoma veomavažanfaktorzapredikcijutumora.Studijekojesusebavilekoreliranjemveličinetumoramlečnežlezdeimetastatskogpotencijala,odnosnostopepreživljavanjakodpasa,ukazujunaznatnokraćepreživljavanjeuslučajuvećih(T3)primarnihtumora (Magaš i sar., 2007). Veći T stadijum je takođe i u vezi sa češćimnalazommetastatskihćelijaukrvnimi limfnimsudovima(Ferreira isar.,2009).Uposlednjevremesve jeznačajnijakliničkakorelacijaveličine tumoramlečnežlezde sa ekspresijom estrogenih (ER) i progesteronskih (PR) receptora.Uz to, izučavanje ekspresije citoskeletnih proteina ukazuje na postojanjemezenhimske transformacije u nekim epitelnim neoplazmama, što korelira sastepenom dediferencijacije i malignitetom u tumorima mlečne žlezde. Ovo seimunohistohemijskimmetodamalakodokazujeuneoplastičnomtkivu,primenomodgovarajućihantitelazavimentinidezmin(Jovićisar.,2007).Rezultatiovakvihispitivanjamoguseupotrebitikaoznačajanprognostičkifaktorrasta,aposebnosuvažnisaaspektaterapije.

U nekim karcinomima kod ljudi, kao što su adenokarcinom kolona iadenokarcinom mlečne žlezde, ustanovljena je značajno povećana aktivnostenzima ciklooksigenaze (COX-2) (Kang i sar., 2011; Rahman i sar., 2012;Roelofs i sar., 2014). Novija ispitivanja izvedena na tkivu pasa i mačakasa adenokarcinomima ukazuju na povećanu ekspresiju COX-2 kako upreneoplastičnim tako i u neoplastičnim lezijama (Knudsen i sar., 2013).Ustanovljenoje,imunohistohemijskimispitivanjima,daCOX-2nijeeksprimiranau normalnom žlezdanom tkivu kod pasa imačaka. Intenzivna ekspresija ovogenzimauočavasevećuranimhistološkimgradusimatumoramlečnežlezde,aznačajnorastesastepenommaligniteta.NajintenzivnijaekspresijaCOX-2zapažase kod slabo diferentovanih tumora mlečne žlezde, sa najvećim histološkimgradusom,bezobziranamorfološkitiptumora(tubulopapilarni,solidni,cistični)(vanNesisar.,2011).Danasjejasnodaciklooksigenazaimauloguuprocesurasta i angiogeneze tumora. Naime, ustanovljena je direktna korelacija COX-2ekspresije saekspresijomvaskularnogendotelnog faktora rasta (VEGF).Naanimalnim modelima je dokazano da inhibitori koji zaustavljaju angiogenezu,inhibišuidelovanjeciklooksigenaze.Prematome,COX-2jeznačajanfarmakološkitargetuterapijiadenokarcinomakodljudiiživotinja(Millantaisar.,2006).

Poznatojedauneoplastičnimprocesimakodljudiiživotinjainfiltracijalimfnihčvorova(N-stadijum)korelirasarizikomnastankametastaza.Ovdetrebaimatiuvidu i činjenicudasevećinaneoplastičnihprocesakodpasa imačakaklinički

235


dijagnostikujetekumomentukadasunastupileudaljenemetastaze.Metastazetumora(M-stadijum)čestoseslučajnonalazenaobdukciji,adapretogaživotinjanijepokazivala,zavlasnikauočljivekliničkemanifestacijebolesti.Ovoseposebnoupraksiodnosinanekesekundarnedepoziteujetri.Nasuprottome,karcinomištitaste žlezde kod pasa, u preko 60% slučajeva postaju veoma brzo kliničkidetektibilnipalpacijom.Tvrdesukonzistencijeivršećipritisaknatrahejuuzrokujurespiratorne poremećaje, što je takođe veoma rano klinički uočljivo. Kod ovihmalignihtumoraN-stadijumnijepouzdankliničkiparametarjerkarcinomištitastežlezderetkometastazirajuuretrofaringealneicervikalnelimfnečvorove.Naime,zbogvrlo ranogprodoraćelija tireoidnogkarcinomauogranke tireoidnihvena,prvemetastazesenačešćezapažajuuplućima(Kurishimaisar.,2014).

Ostali klinički prognostički faktori se razlikujumeđu različitim studijama ukojimaseizučavajutumoripasaimačka.Mnogiautorisugerišudapolistarostne utiču značajno na prognozu većine tumora kod životinja. Izuzetak u tomepredstavljaju tumori mlečne žlezde čija prognoza je znatno lošija pri istomhistološkomgradusukodmužjakanegokodženki(Uvaetal.,2009).

Unekimslučajevimapresudanznačajzadaljuprognozuiterapijutumoraimavirusnistatus.Naime,poznato jedakodljudisanediferentovanimkarcinomomnazofarinksa, pozitivan EBV status (Epstein-Barr virus) predstavlja značajanprognostičkifaktor.Razlogzaovojemogućnostprimeneterapijskihprotokolakodovevirusneinfekcije(Terzić,2010).Nasuprottome,pozitivanretrovirusni(FeLV)status kodmačaka umanjuje smisao terapije neoplastične bolesti, favorizujućieutanazijukaojedinorešenjeuslučajuretrovirusimaindukovanoglimfomamačaka.Takođe,imunofenotipizacijalimfomakodmačakanemaprediktivniznačaj,ukolikoježivotinjaFeLVpozitivna(Kovačevićisar.,1997).Nasuprottome,kodpasajeimunofenotipizacija limfomadragocenadijagnostička iprognostičkaprocedura ipredstavljapreduslovzaprimenuodgovarajućeterapije.DvafaktoraznačajnazaprognozulimfomakodpasasuimunofenotipipodstadijumbolestiodređenpremaklasifikacijitumorapokriterijumimaSvetskezdravstveneorganizacije-WHO(Valliisar.,2002).VećinaautorasmatradasupsisaCD3imunoreaktivnimtumorima(T-ćelijski limfomi) izloženi kraćoj remisiji i vremenu preživljavanja, od onih saB-ćelijskim limfomima (Aleksić-Kovačević i Jelesijević, 2001). Nakon primeneodgovarajućeghemioterapijskogprotokola,80%pasasaB-ćelijskim limfomomulazeu remisiju u prvoj godini.Takođe, psi koji imajupremaWHOklasifikacijipodstadijumbolestiB(kliničkioboleleživotinje),imajulošijuprognozuodpasasapodstadijumomAlimfoma.

Za razliku od pasa, CD3 imunoreaktivnost limfoma nije loš prognostičkiznakkodmačaka.KodovihživotinjasvakakojenajznačajnijiprognostičkičinilacFeLV status, pa je neophodno prvo isključiti FeLV infekciju, a onda primenitiodgovarajući hemioterapijski protokol. U tom slučajumogućnost preživljavanjakod trećine mačaka sa ovakvim limfomima iznosi oko osamnaest meseci odmomenta postavljanja dijagnoze (Aleksić-Kovačević, 2005; Aleksić-Kovačević,1999).

236

Terapijskipristupneoplastičnimprocesimajeznačajanzadaljepreživljavanje,azasprovođenjeodgovarajućeiefikasneterapijehistološkiiimunohistohemijskidijagnostički parametri imaju presudnuulogu.Evidentno je, kao i kod ljudi, dasvipsisaistimhistološkimtipomtumora,uistomkliničkomstadijumuisaistimterapijskim pristupom, nemaju istu dužinu preživljavanja. Postoje danas brojnipokušaji u humanoj i u veterinarskoj medicini, da se istraživanjem genetskeosnovemalignih tumora utvrde prognostički faktori od značaja za individualnudužinu preživljavanja. U tom smislu definisanje prognostičkih faktora koji seodnose na genotipska i imunofenotipska obeležja tumorske ćelije, bilo biznačajnoza terapijskoodlučivanje.Mnogobrojnedosadašnjestudijeoznačajuprognostičkih biomarkera odnose se na neoplastične procese kod ljudi. Takoje genetskim ispitivanjima utvrđeno da je kod ljudi sa akutnom limfoblastnomleukemijompostojanjeFiladelfijahromozoma,povezanosalošijomprognozomikraćimpreživljavanjem.Drugagenetskaispitivanjaukazujudajebrojhromozomau ćelijama transmisivnog veneričnog tumora (TVT) kodpasa57do64, dok jenormalanbrojhromozomakodpasa78.Uzto,novijaispitivanjaimunofenotipizacijeovihtumora,ukazujenanjihovoporekloizmonocitnihprekursoraukostnojsržiinaklonskutransmisiju(Kabuusuisar.,2010).

Regulacija ćelijskog ciklusa obuhvata brojne aktivirajuće i inhibitorneproteine čiji je poremećaj evidentan u mnogim malignim tumorima kod ljudi iživotinja. Proteinski produkt p53 tumor supresor gena, nadzire integritet DNK.Naime, u slučaju oštećenja DNK utiče na zaustavljanje ćelijskog ciklusa kakobiseoštećenjepopravilo, ilizavršiloapoptozom.Takosesprečavaprenošenjemutacijenaćelijećerke.Gubitakilimutacijap53jeudružensapovećanimrizikomzanastanaktumoraipredstavljadalekonajčešćugenetskualteracijuutumorima.Poznatojedasuproteinimutiranogp53genamnogostabilniji,iakumulirajuseu jedru tumorskihćelijagdese lakodetektuju imunohistohemijskimmetodama.Ekspresijap53opisujesekaoprognostičkifaktorpreživljavanjaumnogimmalignimtumorima: neoplazmama pluća (Yamashita i sar., 2008), tumorima limfatičnogtkiva(Zenzisar.,2008)iutumorimakožekodpasaimačaka(Murakamiisar.,2000).Zamutacijup53genamogubitiodgovorniilatentnivirusnigenikaoštosuEBVkodljudiilaboratorijskihglodara,FeLViFeSVgenikodmačaka,BLVkodgovedaidrugi.Većinaautoraiznosipodatkedamutacijap53kodpasakorelirasaprogresijombolestiiodgovoromnaterapiju(Leeisar.,2004).

Relativno česta karakteristika maligne ćelije je rezistencija na apoptozu.Jedan od proteina koji sprečava tumorsku ćeliju da uđe u proces apoptozeje Bcl-2. Ovaj protein je lokalizovan na unutrašnjoj membrani mitohondrija,endoplazmatskom retikulumu i jedrovoj membrani. Mnogobrojni faktori kojiizazivaju oštećenje ćelije dovode do interakcije anti- i pro-apoptotskih članovaBcl-2porodice.Oduzajamnereakcijeovihproteinazavisida lićeproteolitičkakaskada kaspaza, egzekutora apoptoze, biti aktivirana. Ako su u ravnoteži,obezbeđenajehomeostaza,aakopostojipovećanaekspresijaanti-apoptotskihili smanjena ekspresija pro-apoptotskih proteina, nastaje tumor. Pored glavne


237

ulogeBcl-2u inhibicijiapoptoze,proteiniBcl-2 familijeutiču inaćelijskiciklus,odnosno na prelaz između fazemirovanja i proliferacije.Aberantna ekspresijaBcl-2opisanajekodmnogihkarcinoma.PovećanaekspresijaBcl-2utumorskimćelijamamoglabiuzdrugeprognostičkefaktoreukazatinalošuprognozu(YouleiStrasser,2008).

Poremećaj regulacije ćelijskog ciklusa može dovesti do nekontrolisanogćelijskograstairazvojamalignogtumora.Ciklinisupozitivniregulatorićelijskogciklusa i njihova povećana ekspresija je povezana sa ubrzanomproliferacijomtumorskihćelija.TokomraneG1fazećelijskogciklusaizraženajeekspresijaciklinaD1,kojidelujenamestimapoznatimkao „mestaprovere“ (checkpoints, engl.).Prognostički značaj ciklinaD1 ispitivan je u tumorima ljudi, ređe kod životinja,aliseunekimkarcinomimaopisujepovećanaekspresijaciklinaD1 idovodiseu vezu sa nastankom rane ponovne pojave tumora i kraćim preživljavanjem(Dong i sar., 2014). Postojemeđutim i rezultati ispitivanja ovog prognostičkogfaktorakodljudikojiukazujudagubitakekspresijeciklinaD1dovodidolokalnogrecidiva(Wangisar.,2014).EkspresijaciklinaD1praćenajenatumorimamlečnežlezdekujaitouprekancerskimirazvijenimkancerskimlezijama.Rezultatiovihispitivanja,ukazali suda jeekspresijaciklinaDbilanezavisnaodmorfološkogtipa proliferativne lezije. Naime, ciklin D1 bio je eksprimiran u 60% slučajevau prekancerskim lezijama i u 44% slučajeva u kancerskim lezijama umlečnojžlezdikuja.ObelezijesapovećanomekspresijomciklinaD1pokazivalesuvećiproliferativnipotencijal(Sfacteriaisar.,2003).

SobziromnatodasemutacijeK-Rasgenasmatrajuranimdogađajemukarcinogenezi i tumorskojprogresiji, ida jeonkogenaaktivacijaRassignalnogputauključenaumnogeaspektemalignogprocesa,pretpostavljasedaK-Rasmutacionistatusmožebitiprognostičkifaktorumnogimtumorima.PremanekimstudijamaK-Rasmutacijesuasociranesatumorimavišegstadijuma,povećanimmetastatskim potencijalom, lošijom prognozom i smanjenim sveukupnimpreživljavanjem (Overall survival – OS, engl.) i preživljavanjem bez progresijebolesti(Progression free survival–PFS,engl.)(Andreyevisar.,1998;Pinhoisar.,2009).Međutim,podacioprognostičkojvrednostiK-Rasmutacijakod različitihtumorasukontroverzniizahtevajudodatnepotvrde(Uvaisar.,2009).

CD117 (c-Kit protein) pripada porodici receptora tirozin kinaza i ključni jemedijatorproliferacijeprogenitorskihćelija.NormalnaekspresijaCD117opisanaje u mastocitima, ćelijama hematopoeze, duktalnom epitelu, melanocitima,parijetalnim ćelijama želuca i ćelijama jajnika. Pored toga što ima ulogu unormalnomrastuidiferencijaciji,CD117koreliraisaprognozommnogihmalignihtumora,asvevećiznačajimakaotargetterapijskimolekul.Malobrojnisupodacionjegovomznačajuupatogeneziiprognozitumorakodpasaimačaka,aodnosesenaprocenubiološkogponašanjamastocitomakodpasa.Zarazlikuodranijihistraživanja koja proučavaju odnos između intenziteta imunohistohemijskogbojenja, koji ukazuje na stepen ekspresije KIT proteina, i stepenamaligniteta


238

tumora (Reguera i sar., 2000), novije studije ispituju povezanost ekspresijeaberantnih (citoplazmatskih) tipova CD117 i histološkog stepena mastocitoma(slika1i2)(Kiupelisar.,2004;DaCostaisar., 2007;Vučićević,2014;Marinkovićisar.,2015).


Slika 1. Mastocitomi visokog stepena maligniteta – membranska i fokalno citoplazmats-ka ekspresija CD117 , CD117, LSAB2, x 400

Picture 1. High grade mast cell tumor - CD117 expression, membranous and focal cytoplasmic expression,CD117, LSAB2, 400x

Slika 2. Mastocitom niskog stepena maligniteta - membranska ekspresija CD117 , CD117, LSAB2, x 400

Picture 2. Low grade mast cell tumor - CD117 expression, membranous expression, CD117, LSAB2, 400x

239

Syndecan-1 (CD138) je površinski ćelijski proteoglikan koji učestvuje umeđućelijskoj i ćelijsko-stromalnoj reakciji i u migraciji. Normalno se ispoljavanaepitelnimiendotelnimćelijamakaoiglatkomišićnimćelijamakrvnihsudova.GubitakekspresijeCD138natumorskojćelijidovodidosmanjenjameđućelijskekohezije i povećanog invazivnog imetastatskogpotencijala tumora (Ishikawa iKramer,2010).Međutim,udružennalazekspresijeCD138natumorskimćelijamalimfoma kod pasa i odmaklog kliničkog stadijuma, predstavlja izazov za daljaispitivanja.

Rastmetastatskog tumora je autonoman,mada je u izvesnoj meri i poduticajem faktora rasta domaćina (Tumor growth factor - TGF, engl. iPlatelets derived growth factor - PDGF, engl.) koji stimulišu rast novih krvnih sudova.Angiogenezapredstavlja stvaranje novih kapilara iz postojećih krvnih sudova iključni je faktoruodržavanju tumorskog rasta imetastaziranja.Tumorkojinijeu stanju da organizuje sopstvenu vaskularizaciju ne raste, već ostaje u oblikugrupe ćelija koja se hrani izmenjujući hranljive materije prostom difuzijom saokolinom. Tumorske ćelije, posebno dobri klonovi, imaju osobinu stvaranjafaktorakojistimulišeangiogenezu(Tumor angiogenesis factor - TAF,engl.).Ovajribonukleoproteindirektnodelujenastimulacijudeobeendotelnihćelijakapilara.

Faktoreangiogenezemogućejeimunohistohemijskidokazatiutkivutumora,štoihuzostalehistološke,kliničkeibiološkeparametrečiniznačajnimzadaljuprognozu i terapiju neoplazme. Angiogeneza je posredovana faktorima rasta,odkojihposebanznačajzastimulacijumigracije iproliferacijeendotelnihćelijaimavaskularniendotelnifaktorrasta(Vascular endothelial growth factor – VEGF,engl.).Produkuju gamakrofagi, glatko-mišićne ćelije krvnih sudova i tumorskećelije.Ovajfaktorsvojedelovanjenaendotelnećelijeispoljavaposredstvomdvevrstereceptorakojiimajuaktivnosttirozinkinaze.PrognostičkiznačajekspresijeVEGF dokazan je u nekim malignim tumorima: u kolorektalnom karcinomu,adenokarcinomimamlečnežlezdeiskvamozno-ćelijskimkarcinomima.PovećanaekspresijaVEGFupojedinimmalignimtumorimakodpasaimačaka,dovodiseuvezusa tumorskomprogresijom ivećimrizikomzametastaziranjemu limfnečvorove,štokorelirasalošomprognozom(Patrunoisar.,2009).

Određivanjeproliferativnogpotencijalatumorskihćelija,imunohistohemijskomdetekcijomKi-67(MIB-1),koristisečestougradiranjunekihtumorakodpasaimačaka,presvegalimfoma,tumoramlečnežlezde,mastocitomaitumoranervnogsistema.PoredekspresijeKi-67,zautvrđivanjeproliferativnogpotencijalatumorakoriste se i detekcija ćelijskog antigena proliferacije (proliferating cell nuclear antigen - PCNA, engl.) kao i argirofilnog nukleolarnog organizacionog regiona–AgNOR. Međutim, od svih navedenih metoda, detekcija Ki-67 i AgNOR sesmatrajunajjednostavnijim inajpouzdanijim tehnikama (Jelesijević i sar.,2003;Webster i sar., 2007). Posebno korisni rezultati dobijeni su kod određivanjaproliferativnogpotencijalamastocitomakodpasaprimenomovihtehnika(Aleksić-Kovačevićisar.,2005;Majkić-Singh,2006).Takođejeunekimneoplazmamakod


240

ljudidokazanodaekspresijaKi-67imaprediktivanznačajzareakcijutumoranahemioterapiju.

Pored navedenih markera ćelijske proliferacije u tkivima, u onkologiji sedanasintenzivnoodređujeprisustvo ikoncentracijatumorskihmarkeraukrvi ilitelesnimtečnostima.Tumorskimarkerisusupstancekojestvarajuilisamitumoriilidomaćinkaoodgovornatumor,akoristesezautvrđivanjeprisustvatumora.Takve supstance senalazeu ćelijama, tkivima ili telesnim tečnostima, ameresekvalitativnoilikvantitativno,hemijski,imunološki,genomskimiliproteomskimmetodama. Tumorski markeri mogu biti biohemijski ili imunološki pokazateljistadijumatumora.Brojnitumorskimarkeriodražavajusupstancekojesenormalnoembriološki stvaraju u odgovarajućim tkivima. Prvi opisani tumorski marker jebio Bence-Jonesov protein.Mnogogodinaposleovogotkrića, identifikovanisubrojnihormoni,enzimi,izoenzimiidrugiproteini,čijasekoncentracijautelesnimtečnostimamenjausledpostojanjamalignogprocesa.Primenatumorskihmarkeraje ograničena u oblasti skrininga, dijagnostikovanja, procenjivanja prognoze,utvrđivanjastepenailokalizacijetumora.Toznačidajevećinatumorskihmarkeraprvenstvenoznačajnazapraćenjeterapije,adajesamonekolikonjihkorisnozaranootkrivanjetumora.Skoronijedantumorskimarkernijeznačajanuprevencijioboljenja.Novetehnologijeubiomedicinićesvakakoomogućitirazvojiprimenunovihbiomarkerakaotumorskihmarkera(Majkić-Singh,2006).

Zaključujemo da je za postavljanje valjane dijagnoze, predikcije i terapijetumora od neprocenjivog značaja izučavanje bioloških prognostičkih faktora usamomtkivnomisečkutumora.Ovofavorizujeimunohistohemijskoodređivanje,pre svega, prognostičkih faktora rasta, odnosnomarkera ćelijske proliferacije,faktora angiogeneze i brojnih aktivirajućih i inhibitornih proteina. Rezultatiimunohistohemijskihmetoda,dobijeniprimenomodgovarajućihprimarnihantitela,predstavljaju danas esencijalni preduslov za prognozu i terapiju neoplastičnihbolestikodpasaimačaka.

1. Aleksić-Kovačević S, Jelesijević T. Morphological, histopathological and immunohistochemicalstudyofcaninemalignantlymphoma.ActaVet2001;51:245-54.

2. Aleksić-KovačevićS,KukoljV,JelesijevićT,JovanovićM.Retrospectiveanalysisofcaninemes-enchimaltumorsofskinandsofttissues.ActaVet2005;55:521-9.

3. Aleksić-KovačevićS,KukoljV,MarinkovićD,KneževićM.Retrospectivestudyofcanineepithelialandmelanocytictumors.ActaVet2005;55:319-26.

4. Aleksić-KovačevićS.Limfomipasaimačaka.Srbija,Beograd:Mladostbiro,2005.5. Aleksić-KovačevićS.Retrovirusneinfekcijemačaka.Srbija,Beograd:Minax,1999.6. AndreyevN,NormanR,CunninghamD.Kirstenrasmutationsinpatienswithcolorectalcancer:

theRASCALIIstudy.BrJCancer2001;85:692-6.7. DaCostaRMG,MatosE,RemaA,LopesC,PiresMA,GärtnerF.CD117immunoexpressionin

caninemastcelltumours:correlationswithpathologicalvariablesandproliferationmark-ers.BMCVetRes2007;3:19-29.


Literatura / References

241

8.DongM,WeiH,HouJM,GaoS,YangD,LinZH.Possibleprognosticsignificanceofp53,cyclinD1andKi-67inthesecondprimarymalignancyofpatientswithdoubleprimarymalignan-cies.IntJClinExpPathol2014;7(7):3975-83.

9. FerreiraE,BertognoliAC,CavalcantiMF,SchmittF,CassaliGD.Therelathionshipbetweentumorsizeandexpressionofprognosticmarkersinbenignandmalignantcaninemammarytu-mors.VetCompOncology2009;7:230-5.

10. IshikawaT,KramerRH.Sdcl1negativelymodulatescarcinomacellmotilityandinvasion.ExperCellRes2010;316:951-65.

11. JelesijevićT,JovanovićM,KneževićM,Aleksić-KovačevićS.QuantativeandqualitativeanalysisofAgNORinbenignandmalignantcaninemammaryglandtumors.ActaVet2003;53(5-6):353-60.

12. JovićS,MagašV,Aleksić-KovačevićS.Co-expressionofvimentinandcytokeratininbitchmam-maryglandtumors.ActaVet2007;57:247-55.

13. KabuusuRM,StroupDF,FernandezC.RiskfactorsandcharacteristicsofcaninetransmissiblevenerealtumorsinGrenada,WestIndies.VetCompOncol2010;8:50-5.

14. KangH,SongKH,JeongKC,KimS,ChoiC,LeeCH,OhSH.InvolvementofCox-2inthemet-astaticpotentialofchemotherapy-resistantbreastcancercells.BMCCancer2011;11:334.

15. KiupelM,WebsterJD,KaneeneJB,MillerR,Yuzbasiyan-GurkanV.Theuseofkitandtryptaseexpressionpatternsasprognostictoolsforcaninecutaneousmastcelltumors.VetPathol2004;41(4):371-7.

16.KnudsenCS,WilliamsA,BrearleyMJ,DemetriouJL.COX-2expressionincanineanalsacadeno-carcinomasandinnon-neoplasticcanineanalsacs.VetJ2013;197(3):782-7.

17.KovačevićS,KiparA,KremendahlJ,TeebkenschulerD,GrantCK,ReinacherM.Immunohisto-chemicaldiagnosisoffelineleukemiavirusinfectioninformalin-fixedtissue.EJournVetPathol1997;3:67-72.

18.KurishimaK,KagohashiK,IshibashiA,TakayashikiN,SatohH.Nodularmetastatic lungtumorfromthyroidcarcinoma.AnnThoracCardiovascSurg2014;20:449-52.

19.LeeCH,KimWH,LimJH,KangM,KimD,KweonOK.Mutationandoverexpressionofp53asprognosticfactorincaninemammarytumors.JVetSci2004;5(1):63-9.

20. MagašV,JovićS,NešićV,BacetićD,Aleksić-KovačevićS.Morphologicalandimmunohistochem-icalassaysofsurgicallyremovedmammaryglandtumorsinbitches.ActaVet2007;57:37-45.

21. Majkić-SinghN.Tumorskimarkeri:biohemijaiklasifikacija.JugoslovMedBiohem2006;25:79–88.

22. MarinkovićD,Milčić-MatićN,JovanovićM,VučićevićI,Aleksić-KovačevićS.Morphologicalfea-turesandKITreceptorexpression indogswithcaninecutaneousmastcell tumorandsystemiocmastocytosisActaVet2015;65(inpress).

23. MillantaF,CitiS,DellaSantaD,PorcianiM,PoliA.COX-2expressionincanineandfelineinva-sivemammarycarcinomas:correlationwithclinicopathologicalfeaturesandprognosticmolecularmarkers.BreastCancerResTreat2006;98:115-20.

24. MurakamiY,TateyamaS,RungsipipatA,UchidaK,YamaguchiR.ImmunohistochemicalanalysisofcyclinA,cyclinD1andP53inmammarytumors,squamouscellcarcinomasandbasalcelltumorsofdogsandcats.JVetMedSci2000;62:743-50.

25. PatrunoR,ArpaiaN,GadaletaCD,PassantinoL,ZizzoN,MisinoA,LucarelliNM,CatinoA,Vale-rioP,RibattiD,RanieriG.VEGFconcentrationfromplasma-activatedplateletswhichcor-relateswithmicrovasculardensityandgradingincaninemastcelltumourspontaneousmodel.JCellMolMed2009;13(3):555-61.

26.PinhoS,CarvalhoS,CabralJ.Caninetumors:aspontaneousanimalmodelofhumancarcinogen-esis.TranslResVolume2012;159(3):214-9.


242

27.RahmanMA,DharDK,YamaguchiE,MaruyamaS,SatoT,HayashiH,OnoT,YamanoiA,KohnoH,NagasueN.CoexpressionofinduciblenitricoxidesynthaseandCOX-2inhepatocel-lularcarcinomaandsurroundingliver:possibleinvolvementofCOX-2intheangiogenesisofhepatitisCvirus-positivecases.ClinCancerRes2001;7:325-32.

28.RegueraMJ,RabanalRM,PuigdemontA,FerrerL.Caninemastcelltumorsexpressstemcellfac-torreceptor.AmJDermatopathol2000;22(1):49-54.

29.RoelofsHM,TeMorscheRH,vanHeumenBW,NagengastFM,PetersWH.Over-expressionofCOX-2mRNAincolorectalcancer.BMCGastroenterol2014;14:1.

30. SfacteriaA,BertaniC,CostantinoG,DelBueM,PaiardiniM,CervasiB,PiedimonteA,DeVicoG.CyclinD1expressioninpre-cancerousandcancerouslesionsofthecaninemammarygland.JCompPathol2003;128:245-51.

31. StevanovićO,DamjanR,VučićevićI,MarinkovićD,Aleksić-KovačevićS.Morphology,gradationandfrequencyofmastocytomaindogs.Veterinarskiglasnik2013;67(3-4):153-62.

32. TerzićT.Patohistološkiiimunohistohemijskiparametriznačajnizaprognozuiterapijunediferento-vanogkarcinomanazofarinksa.Doktorskadisertacija2010.

33. UvaP,AurisicchioL,WattersJ,LobodaA.Comparativeexpressionpathwayanalysisofhumanandcaninemammarytumors.BMCGenomics2009;10:135-9.

34. vanNesJG,deKruijfEM,FaratianD,vandeVeldeCJ,PutterH,FalconerC.COX2expressioninprognosisandinpredictiontoendocrinetherapyinearlybreastcancerpatients.BreastCancerResTreat2011;125(3):671-85.

35. ValliV,JacobsR,ParodiA,VernauW,MooreP.WHOinternationalhistologicalclassificationofhematopoietictumorsofdomesticanimals.2ndseries,volVIII.WashingtonDC:ArmedForcesInstituteofPathology,2002.

36.VučićevićI.Ekspresijaantigenaćelijskeproliferacijenamastocitimainjihovznačajzagradacijumastocitoma pasa. Doktorska disertacija 2014.

37.WangN,WeiH,YinD,LuY,ZhangY,JiangD.CyclinD1boverexpressioninhibitscellprolifera-tionandinducescellapoptosisincervicalcancercellsinvitroandinvivo.IntJClinExpPathol2014;7(7):4016-23.

38.WebsterJD,Yuzbasiyan-GurkanV,MillerRA,KaneeneJB,KiupelM.Cellularproliferationinca-ninecutaneousmastcelltumors:associationswithc-KITanditsroleinprognostication.VetPathol2007;44:298–308.

39.YamashitaSI,MasudaY,YoshidaN,MatsuzakiH,KurizakiT,HagaY,IkeiS,MiyawakiM,KawanoY,ChujyoM,KawaharaK.p53AIP1Expressioncanbeaprognosticmaker in non-smallcelllungcancer.ClinOncol2008;20:148-51.

40. YouleRJ,StrasserA.TheBcl-2proteinfamily:opposingactivitesthatmediatecelldeath.NatRevMolCellBiol2008;9:47-59.

41. ZenzT,HabeS,DenzelT,WinklerD,DohnerH,StilgenbauerS.Howlittleistoomuch?P53inac-tivation:fromlaboratorycutofftobiologicalbasisofchemotherapyresistance.Leukemia2008;22:2257-8.


243

ENGLISH

РУССКИЙ

PATHOHISTOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL PARAMETERS SIGNIFICANT FOR PROGNOSIS AND THERAPY OF TUMOURS IN CATS AND DOGS

Aleksić-Kovačević Sanja, Vučićević Ivana, Aničić M.Thedevelopmentof tumours impliesadisproportionbetweenproliferation,growth

anddifferentiation,which isaccompaniedbysignificantgenotypicandphenotypicvaria-tionsinthediseased.Thescenarioofmultipleoncogeniceffectsontheinhibitionofcellgrowth,apoptosisandmaturation,onthestimulationofproliferation,oncellmigrationandtissueinvasion,isresponsiblefortheoccurrenceoftumoursbothinhumansandinani-mals.Thequalitativeandquantitativedeterminationofbiologicalprognosticfactorsinthetissueofaffectedcatsanddogsdirectly indicatesapossible tumourmetastasizing,andconsequentlyalsotheprognosisofneoplasticdisease.Monitoringofclinicalandbiologicalprognosticfactorsisimportantfortherapyandpredictionoftumoursinhumansandani-mals.Thedeterminationoftheproliferativepotentialoftumourcellsbyimmunohistochem-icaldetectionofKi-67andPCNAisusedingradingcertaintumoursincatsanddogs.Itisalsopossibleimmunohistochemicallytoprovefactorsofangiogenesisandnumerousac-tivatingandinhibitingproteinsinthetumourtissue.Inadditiontootherhistological,clini-calandbiologicalparameters,theyaresignificantforthefurtherprognosisandtherapyofneoplastic diseases.

Keywords:prognosticmarkers,tumours,immunohistochemistry,dogs,cats

ГИСТОПАТОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ, СУЩЕСТВЕННЫЕ ПРИ ПРОГНОЗИРОВАНИИ И ЛЕЧЕНИИ ОПУХОЛЕЙ

У СОБАК И КОШЕКАлексич-Ковачевич Саня, Вучичевич Ивана, Аничич М.

Развитие опухоли предполагает диссонанс между пролиферацией, ростом идифференцировкой,чтосопровождаетсясущественнымигенотипическимиифено-типическими вариациями у больной особи.Многочисленные онкогенные эффектыингибируютстарениеклетки,апоптозисозревание,истимулируютпролиферацию,клеточную миграцию и тканевую инвазию у людей и животных. Качественное иколичественное определение биологических прогностических факторов в тканяхбольныхсобакикошекдаетинформациюоспособностиметастазированияопухоли,и, тем самым, о прогнозе опухолевого заболевания. Мониторинг клинических ибиологическихпрогностическихфакторовимеетсущественноезначениедлятерапииипрогнозированияопухолиучеловекаиживотных.ОпределениепролиферативногопотенциалаопухолевыхклетокпутемиммуногистохимическойдетекцииKi-67иPC-NA используется при классификации некоторых опухолей у собак и кошек. Такжеиммуногистохимическим методом можно доказать присутствие в ткани опухолифакторовангиогенезаимногочисленныхактивирующихиингибиторныхпротеинов.Нарядуспрочимигистологическими,клиническимиибиологическимипараметрами

244

они имеют существенное значение для прогнозирования и лечения опухолевыхзаболеваний.

Ключевые слова: прогностические маркеры, опухоли, иммуногистохимия,собаки,кошки

patohistoloŠki i imunohistohemijski parametri...

Documents