pengaruh jus buah pepaya (carica papaya l) …repository.ub.ac.id/7287/1/anna mariana zainnuriah...
TRANSCRIPT
-
PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) TERHADAPJUMLAH
LIMFOSIT PADA PENYEMBUHAN LUKA PASCA GINGIVEKTOMI TIKUS
WISTAR JANTAN (Rattus norvegicus)
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Gigi
Oleh:
Anna Mariana Zainnuriah Wahdah
NIM : 135070400111010
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER GIGI
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2017
-
ii
HALAMAN PENGESAHAN
SKRIPSI
PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) TERHADAP JUMLAH
LIMFOSIT PADA PENYEMBUHAN LUKA PASCA GINGIVEKTOMI TIKUS
WISTAR JANTAN (Rattus norvegicus)
Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Gigi
Telah diuji pada
Hari: Jumat
Tanggal: 21 Juli 2017
Telah dinyatakan lulus oleh:
Penguji 1
Dr. drg. Nur Permatasari., MS
NIP. 19601005 199103 2001
Penguji II/ Pembimbing I Penguji III/ Pembimbing II
Dr. dr. Nurdiana., M. Kes drg.Joko Widyastomo, Sp. BM
NIP. 19551015 198603 2001 NIP. 19610520 198711 1 001
Mengetahui,
Dekan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Brawijaya
Drg. R. Setyohadi, MS
NIP. 195802121985031003
-
iii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis hanturkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, Allah
SWT, atas berkat dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Skripsi
dengan judul “Pengaruh Jus Buah Pepaya (Carica papaya L. ) Terhadap Jumlah
Limfosit pada Penyembuhan Luka Pasca Gingivektomi Tikus Wistar Jantan
(Rattus norvegicus)”.
Skripsi ini telah penulis susun semaksimal mungkin dengan bantuan
berupa masukan, motivasi, kritik dan saran dari berbagai pihak sehingga dapat
mempermudah dan memperlancar penulisan skripsi.
Dengan selesainya Skripsi ini, penulis mengucapkan terima kasih
kepada:
1. R. Setyohadi, drg. MS., selaku Dekan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas
Brawijaya.
2. Kartika Andari Wulan, drg. Sp. Pros., selaku Ketua Program Studi
Pendidikan Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Brawijaya.
3. Dr. Nurdiana, dr., M. Kes., sebagai pembimbing pertama yang telah
memberikan bimbingan, saran, dan masukan, sehingga penulis dapat
menyelesaikan Skripsi ini.
4. Joko Widyastomo, drg., Sp. BM sebagai pembimbing kedua yang telah
memberikan bimbingan dalam pembuatan Skripsi ini selesai.
5. Dr. Nur Permatasari, drg., MS selaku dosen penguji skripsi kesediaannya
memberikan koreksi, saran dan masukan.
6. Kedua orang tua penulis, Ayahanda Prof. Dr. M. Syafiie Idrus, M.Ec, PhD
(Alm.) dan Dr. Ibunda Rahayu Puji Suci,SE. MS adik penulis, Rina Auliya
Wahdah yang selalu menjadi motivasi.
-
iv
7. Teman seperjuangan penelitian Farmakologi : Anta Seri K., Eliza Rahma P,
Juwita Ladu A., Wafa Aprilia yang menjadi rekan, memberi dukungan dan
membagi ilmunya selama proses pembuatan Skripsi ini.
8. Teman terdekat Anta Seri K, Eliza Rahma P, Fadhilah Laksmita, Kartika
Dian L, Ayu Ramayani dan Dita Ajeng yang selalu membantu, memotivasi
dan membesarkan hati.
9. Teman-teman Fakultas Kedokteran Gigi Uiversitas Brawijaya Angkatan 2013
yang selalu membantu dan mendukung.
10. Sahabat yang selalu setia Dewi Ristya, Rista Choirun, Amalia Amanda,
Risna Rasyida, Regina Anky, Aisiyah Agustina, Bagas Paramajana, Andrian
Pramana dan Satrio Nugroho
11. Semua pihak yang telah membantu dalam menyelesaikan Skripsi ini yang
tidak dapat penulis sebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa penulisan ini masih jauh dari sempurna, oleh
karena itu penulis tetap membuka diri untuk kritik dan saran yang membangun.
Akhirnya, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi yang membutuhkan.
Malang, 21 Juni 2017
Penulis
-
v
DAFTAR ISI
JUDUL COVER ................................................................................................... 1
HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................................ ii
KATA PENGANTAR ............................................................................................ iii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ................................................................................................. vii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ viii
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................... viii
ABSTRAK ..............................................................................................................
BABI .................................................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang .......................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................. 5
1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................... 5
1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................. 5
BAB II .................................................................................................................. 6
2.1 Gingiva .................................................................................................. 6
2.2 Gingivektomi .......................................................................................... 9
2.3 Luka .................................................................................................... 15
2.4 Limfosit ................................................................................................ 22
2.5 Pepaya ................................................................................................ 26
2.6 Tikus wistar ......................................................................................... 28
BAB III ............................................................................................................... 31
3.1 Kerangka Konsep ..................................................................................... 31
3.2 Hipotesis Penelitian ............................................................................. 32
BAB IV ............................................................................................................... 33
4.1 Rancangan Penelitian .......................................................................... 33
-
vi
4.2 Sampel ................................................................................................ 34
4.3 Variabel Penelitian ............................................................................... 35
4.4 Lokasi dan Waktu Penelitian ................................................................ 35
4.5 Definisi Operasional............................................................................. 35
4.6 Alat dan Bahan Penelitian ................................................................... 36
4.7 Prosedur Penelitian ............................................................................. 37
4.8 Alur Penelitian ..................................................................................... 43
4.9 Analisis Data ....................................................................................... 46
BAB V ................................................................................................................ 47
5.1 Hasil Penelitian .................................................................................... 47
5.2 Analisis Data ............................................................................................ 53
BAB VI ............................................................................................................... 59
BAB VII .............................................................................................................. 64
7.1 Kesimpulan .......................................................................................... 64
7.2 Saran ................................................................................................... 64
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 65
LAMPIRAN ........................................................................................................ 69
-
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Kandungan Buah Pepaya ................................................................. 26
Tabel 2.2 Biologi Tikus....................................................................................... 30
Tabel 5.1 Jumlah limfosit hari ke-3 .................................................................... 52
Tabel 5.2 Jumlah limfosit hari ke-5 .................................................................... 52
Tabel 5.3 Histogram .......................................................................................... 53
Tabel 5.4 Uji Normalitas hari ke-3 ...................................................................... 54
Tabel 5.5 Uji Normalitas hari ke-5 ...................................................................... 54
Tabel 5.6 Uji Homogenitas hari ke-3 .................................................................. 55
Tabel 5.7 Uji Homogenitas hari ke-5 .................................................................. 55
Tabel 5.8 Uji Anova hari ke-3 ............................................................................. 56
Tabel 5.9 Uji Anova hari ke-5 ............................................................................. 56
Tabel 5.10 Uji Post Hoc Tukey hari ke-3 ............................................................ 57
Tabel 5.11 Uji Post Hoc Tukey hari ke-5 ............................................................ 57
-
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Gingiva ............................................................................................. 6
Gambar 2.2 Limfosit .......................................................................................... 22
Gambar 2.3 Pepaya (Caricca papaya L) ............................................................ 25
Gambar 2.4 Tikus strain Wistar(Rattus norvegicus) ........................................... 28
Gambar 3.1 Kerangka Konsep........................................................................... 31
Gambar 4.1 Contoh Prosedur Gingivektomi pada Manusia ............................... 40
Gambar 4.2 Limfosit pada Gingiva ..................................................................... 43
Gambar 5.1 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok KP hari ke-3 ....... 48
Gambar 5.2 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok P1 hari ke-3 ....... 49
Gambar 5.3 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompokP2 hari ke-3 ........ 49
Gambar 5.4 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompokP3 hari ke-3 ........ 49
ambar 5.5 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok KP hari ke-5 ......... 50
Gambar 5.6 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok P4 hari ke-5 ....... 50
Gambar 5.7 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok P5 hari ke-5 ....... 51
Gambar 5.8 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok P6 hari ke-5 ....... 51
-
ix
DAFTAR SINGKATAN
1. PMN : Polimorfonuklear
2. CO2 : Karbondioksida
3. Nd : YAG : Neodymium-doped yttrium aluminium garnet
4. NSAID : Non steroid anti-inflammatory
5. H2O : Hidrogen Monoksida
6. HE : Hematoxillen- Eosin
7. BNF : Buffered Neutral Formalin
8. HSD : High Standar Deviation
9. IFN-Ɣ : limfokin interferon Ɣ
10. NO : Nitric Oxide
11. ROS : Reactive Oxygen Species
12. TGF-β :Transforming Growth Factor
13. VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor
-
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Gingivektomi adalah suatu tindakan bedah untuk mengeksisi gingiva,
dengan tujuan menghilangkan dinding poket sebagai jalan untuk menghilangkan
kalkulus atau karang gigi disertai penghalusan dinding akar. Hal ini menciptakan
lingkungan yang baik bagi penyembuhan gingiva dan pemulihan kontur gingival.
(Carranza,2012). Teknik ini memiliki banyak keuntungan, dengan cara yang
sederhana dan kemudahan penguasaan untuk operator. (Cohen,2007). Prosedur
gingivektomi ini menyebabkan daerah luka di lapisi oleh gumpalan darah dan
terjadi inflamasi akut.
Luka adalah rusak atau terbukanya suatu jaringan yang berkelanjutan
dari kulit, mukosa membran dan tulang atau organ tertentu. Luka mengakibatkan
efek seperti hilangnya seluruh atau sebagian fungsi organ, respon rasa sakit,
perdarahan dan pembekuan darah, kontaminasi bakteri, dan kematian sel
(Kozier, 1995).
Luka ada bermacam-macam sesuai dengan faktor penyebab, bentuk,
kedalaman dan lokasi. Dalam dunia kedokteran gigi, luka sering berada pada
rongga mulut atau daerah sekitar rongga mulut. Luka di dalam rongga mulut
umumnya terletak pada gusi atau gingiva bisa disebabkan banyak hal dan proses
penyembuhan luka yang berbeda.
Wound healing atau penyembuhan luka adalah suatu proses alami, baik
secara selular maupun biokimia, yang dilakukan oleh tubuh untuk regenerasi
jaringan dermis atau epidermissebagai respon jejas. Daerah luka yang terbuka
akan mengalami epitelialisasi untuk menutup luka pada hari ke 7-14 dan
keratinisasi terjadi pada minggu ke 2- 3. (Hawks, 2005)
-
2
Luka pada gingiva dapat sembuh secara klinis dalam waktu beberapa
minggu, tetapi penyembuhan sempurna dan pembentukan serabut gingiva
memerlukan waktu hingga beberapa bulan. Dalam proses penyembuhan luka
terdapat fase inflamasi. Pada fase ini pembuluh darah dan sel radang yang
berperan. Sel radang terdiri dari PMN (Polimorfonuklear), limfosit dan makrofag.
Sel radang ini akan bekerja pada daerah yang berjejas untuk menghancurkan
mikroorganisme yang masuk melalui luka. (Price,2011)
Penyembuhan luka ada empat fase yaitu fase inflamasi, proliferasi,
maturasi, remodeling. Proses penyembuhan ini membutuhkan waktu yang lama
untuk mencapai kembali normal dan didalam proses ini fase inflamasi merupakan
fase yang penting karena pada fase ini terjadi netralisasi yaitu proses
pembuangan agen penyerang, perusakan jaringan dan juga pembentukan
kondisi yang diperlukan untuk pemulihan atau perbaikan jaringan. Fase inflamasi
ini berperan penting pada tingkat seluler. Segera setelah dimulainya proses
peradangan, daerah yang mengalami radang akan diserbu oleh neutrofil dan
makrofag. Aktifasi sistem imun spesifik akibat keradangan akan mengaktifkan
makrofag untuk memproduksi sejumlah sitokin dan faktor pertumbuhan yang
berperan pada proliferasi kolagen dan fibroblas, meningkatkan sintesin protein,
memfagositosis sisa sel, mikroorganisme serta mempengaruhi matriks
ekstraseluler sehingga penyembuhan luka dapat segera tercapai. Fase inflamasi
ini terjadi mulai pada hari pertama setelah perlukaan sampai hari keempat.
Salahsatu mediator inflamasi yang keluar ke jaringan yang terluka adalah sel
limfosit dari hari ke-1 sampai pada hari yang ke-5 dan mencapai puncak pada
hari ke-7 (Robbins dan Kumar, 2007).
Limfosit merupakan sel inti dari sistem ketahan tubuh atau imunitas yang
memiliki peranan penting dalam proses keradangan dengan menghancurkan
mikroorganisme yang masuk ke dalam tubuh (antigen), mensintesis dan
-
3
mensekresi sebuah pertahanan tubuh (antibodi) berupa immunoglobulin ke
dalam jaringan darah sebagai respon terhadap keberadaan benda asing (Sheeler
dan Bianchi, 1982).
Luka pasca gingivektomi biasanya akan sembuh kurang lebih 14-21 hari.
Luka ini biasanya akan dilindungi dengan periodontal pack sebagai periodontal
dressing. Tujuan dari periodontal pack ini adalah untuk melindungi benda asing
masuk kedaerah luka terbuka seperti makanan, pasta gigi dan lainnya.
Periodontal dressing ini bukan sebagai obat melainkan hanya penutup luka agar
luka tersebut cepat kering. Namun cukup banyak pasien yang mengeluh tidak
nyaman memakai periodontal dressing tersebut karena terasa mengganjal.
Kekurangan dari periodontal dressing ini selain tidak nyaman, sering lepas
sebelum luka mengering. Periodontal dressing biasanya dibuka setelah satu
minggu. Setelah semua kotoran sudah dibersihkan dan luka diirigasi dengan air
hangat. Bila luka masih belum terepitelisasi dengan baik dan masih rentan,
makakembali dipasang dressing yang baru selama 1 minggu kemudian. Pasca
Gingivektomi, dokter gigi akan menyertakan obat berupa analgesik untuk
menghilangkan rasa nyeri setelah efek obat bius hilang. (Carranza, 2012).
Saat ini belum terdapat solusi lain untuk mempercepat penyembuhan luka
pasca gingivektomi. Penggunaan periodontal dressing bukan sebagai obat
penyembuh luka, melainkan hanya sebagai pelindung. Penyembuhan luka pada
gingiva pasca gingivektomi berbeda dengan luka oral mukosa lain.
Penyembuhan luka pada rongga mulut sebenarnya bisa dibantu dengan
menggunakan bahan herbal. Bahan herbal berasal dari tumbuhan atau buah-
buahan yang memiliki senyawa aktif untuk mempercepat penyembuhan luka.
Buah yang memiliki senyawa aktif salah satunya adalah buah pepaya.
Tanaman Pepaya ( Carica Pepaya L. ) merupakan buah yang sangat
mudah ditemukan dan sering dijual di pasaran. Awalnya, buah ini berasal dari
-
4
Meksiko, lalu berkembang banyak dan dibudidayakan di Indonesia. Pepaya
memiliki beberapa nama lain, seperti kates atau gandul (jawa), gedang (sunda).
Pepaya memiliki berbagai manfaat bagi kesehatan, daging buah pepaya
termasuk rendah kalori. Kandungan zat gizi utama dalam pepaya yaitu 0,6%
protein, 9,8% karbohidrat dan 0,1% lemak. Sementara itu , senyawa aktif yang
terkandung di dalamnya adalah serat, vitamin C , vitamin A, Vitamin B kompleks
dan kalium. Kandungan vitamin C pada pepaya lebih tinggi dibandingkan dengan
kandungan vitamin C pada jeruk manis (Desty, 2013). Pada bagian buah pepaya
terdapat kandungan beta- karoten, pectin, d- galaktosa,1-arabinosa, papain,
papayotomin dan vitokinose. Buah pepaya juga kaya antioksidan seperti karoten,
vitamin C, dan flavonoid (Yellia Mangan, 2009).
Erna Septiningsih sudah pernah meneliti tentang keefektifan tanaman
pepaya yaitu efek ekstrak etanol 70% daun pepaya terhadap penyembuhan luka
bakar pada kelinci dengan bentuk sediaan berupa gel sehingga mempermudah
aplikasinya pada luka bakar. Menurut Erna Septiningsih dalam penelitiannya,
kandungan pada daun pepaya adalah enzim papain, flavonoid, alkaloid karpain,
pseudo karpain, glikosida, karposid, dan saponin. Ada beberapa kesamaan
senyawa aktif yang terkandung dalam daun pepaya dengan buah pepaya.
Berdasarkan informasi tentang buah pepaya ( Carica Pepaya L.) tersebut
perlu dilakukan penelitian tentang pengaruh buah pepaya terhadap peningkatan
limfosit darah pada penyembuhan luka post gingivektomi tikus wistar jantan
(Rattus novergicus).
1.2 Rumusan Masalah
Apakah pemberian jus buah pepaya ( Carica pepaya L.) dapat
meningkatkanlimfosit pada jaringan gingiva pasca gingivektomi pada tikus
wistar jantan ?
-
5
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan umum
Mengetahui pengaruh buah pepaya ( Carica papaya L.) terhadap proses
pembentukan limfosit pada penyembuhan luka gingival pasca
gingivektomi.
1.3.2 Tujuan Khusus
1. Membandingankan jumlah limfosit antara kelompok perlakuan tanpa
diberikan jus buah pepaya dengan kelompok perlakuan yang diberikan
jus buah pepaya.
2. Mengetahui hubungan antara jumlah limfosit dan konsentrasi buah
pepaya.
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Bagi Ilmu Pengetahuan dan Penulis
1.4.1.1 Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai dasar penelitian
selanjutnya untuk penggunaan buah pepaya ( Carica Pepaya L.)
1.4.1.2 Menambah pengetahuan dalam ilmu kedokteran gigi tentang buah
pepaya ( Carica Pepaya L.) tehadap penyembuhan luka pasca
gingivektomi.
1.4.2 Bagi Masyarakat Umum
1.4.2.1 Hasil Penelitian ini diharapkan dapat membantu masyarakat dalam
mempercepat penyembuhan luka dengan menggunakan buah pepaya.
-
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Gingiva
Gambar 2.1 Gingiva Sumber http://pocketdentistry.com
2.1.1 Definisi
Gingiva adalah bagian mukosa rongga mulut yang mengelilingi gigi dan
menutupi lingir (ridge) alveolar. Gingiva merupakan bagian dari jaringan
penyangga atau pendukung gigi, periodonsium (Manson,2013). Gingiva berupa
jaringan ikat fibrosa yang ditutupi epitel, mengelilingi dan melekat ke gigi dan
tulang alveolar dan meluas ke pertautan muko-gingiva (Harty,2013)
Fungsi gingiva adalah melindungi akar gigi, selaput periodontal dan tulang
alveolar terhadap rangsangan dari luar, khususnya dari bakteri-bakteri dalam
mulut (Itjiningsih, 1995).
2.1.2 Anatomi Gingiva
Gingiva yang normal meliputi tulang dan gigi akar alveolar ke tingkat
hanya koronal cementoenamel junction. Gingiva dibagi anatomis menjadi
marginal, terpasang (attached), dan interdental. (Carranza, 2002). Meskipun
-
7
masing-masing jenis gingiva menunjukkan variasi dalam diferensiasi, histologi,
dan ketebalan sesuai dengan fungsional tuntutan, semua jenis secara khusus
disusun untuk berfungsi tepat terhadap anti mekanik dan mikroba Artinya,
struktur spesifik gingiva yang berbeda mencerminkan efektivitas sebagai
penghalang untuk penetrasi oleh mikroba dan agen berbahaya ke jaringan yang
lebih dalam. (Manson, 2013)
Marginal Gingiva
Tepi atas dari gingiva. Bentuknya mengikuti kurva dari garis servikal gigi.
Biasanya sekitar 1 mm lebar, gingiva marginal membentuk dinding jaringan lunak
dari sulkus gingiva. (Carranza, 2009)
Sulkus Gingiva
Sulkus gingiva adalah ruang antara gingiva margin dan gigi. Sulkus
gingiva yang sehat memiliki kedalam ≤ 2. Gambaran klinisnya berupa celah
dangkal di sekitar gigi yang dibatasi oleh permukaan gigi di satu sisi dan epitel
melapisi free margin gingiva. Pada tes kedalaman probing dari sulkus gingiva
normal secara klinis pada manusia adalah 2 sampai 3 mm.
Attached Gingiva
Attached Gingiva merupakan anatomi lanjutan dari margin gingiva.
Gingiva yang melekat dari dasar sulkus hingga mucogingiva junction.
(Harty,2013) Pada Attached Gingiva ini terasa keras dan melekat erat pada
periosteum yang mendasari tulang alveolar.
Interdental Gingiva
Interdental gingiva adalah gingiva yang berada diantara gigi geligi.
Gingiva interdental menempati lubang di dinding gingiva, yaitu ruang
interproksimal di bawah area kontak gigi. bentuknya meruncing ke arah
-
8
interproksimal, sedangkan permukaan sisi mesial dan distal sedikit cekung.
Perbatasan lateral dan ujung papila interdental dibentuk oleh gingiva marginal
gigi sebelahnya. Epitelium lajur biasanya sangat tipis, tidak ada keratinisasi dan
terbentuk dari beberapa lapis sel. Daerah interdental berperan sangat penting
karena merupakan daerah pertahanan bakteri yang paling persisten dan
strukturnya menyebabkan daerah ini sangat peka yang biasanya timbul lesi awal
pada gejala radang pada gingiva (Putri, 2009)
2.1.3 Gambaran Klinis Gingiva Sehat
1. Warna Gingiva
Warna gingiva normal umumnya berwarna merah muda atau merah
jambu yang diakibatkan oleh adanya suplai darah dan derajat lapisan keratin
epitelium serta sel-sel pigmen. Warna ini bervariasi pada setiap orang dan erat
hubungannya dengan pigmentasi kutaneous. Pigmentasi pada gingiva biasanya
terjadi pada individu yang memiliki ras warna kulit gelap. Pigmentasi pada
attached gingiva mulai dari merah kecoklatan sampai hitam. Warna pada alveolar
mukosa lebih terlihat terang atau merah disebabkan oleh mukosa alveolar tidak
mempunyai lapisan keratin dan tipisnya lapisan pada sel epitel
2. Ukuran Gingiva
Ukuran gingiva ditentukan oleh jumlah elemen seluler, interseluler dan
suplai darah. Perubahan ukuran gingiva merupakan gambaran yang paling
sering dijumpai pada penyakit periodontal. Ukurannya menyesuikan sesuai
dengan ukuran gigi. Tidak tampak terlalu menonjol atau pembesaran.
3. Kontur Gingiva
-
9
Kontur dan ukuran gingiva sangat bervariasi. Keadaan ini dipengaruhi
oleh bentuk dan susunan gigi geligi pada lengkungnya, lokalisasi dan luas area
kontak proksimal dan dimensi embrasur (interdental) gingiva oral maupun
vestibular. Interdental papil menutupi bagian interdental gingiva sehingga tampak
lancip meruncing.
4. Konsistensi Gingiva
Gingiva melekat erat ke struktur dibawahnya dan tidak memiliki lapisan
submukosa sehingga gingiva tidak dapat digerakkan.
5. Tekstur Gingiva
Tekstur gingva yang sehat akan terasa kenyal. Pada permukaan attached
gingiva akan tampak berkerut atau berbintik seperti kulit jeruk. Gambaran ini
biasanya disebut stippling. Stippling akan muncul dan terlihat jelas bila
permukaan gingiva dikeringkan. (Carranza, 2002)
2.2 Gingivektomi
2.2.1 Definisi
Bedah periodontal yang dilakukan dengan mengeksisi jaringan gingiva
yang membesar untuk menciptakan bentuk anatomis yang baru dapat disebut
dengan gingivektomi. Tujuan dari prosedur bedah periodontal ini untuk
menghilangkan poket gingiva pada penyakit periodontal atau pada pembesaran
gingiva karena obat-obatan sehingga dapat tercipta suatu gingiva yang normal
baik dari fungsi kesehatan maupun estetika (Suryono, 2012). Dengan mengambil
dinding poket, gingivektomi memungkinkan pandangan dan akses yang lebih
baik untuk melakukan eliminasi kalkulus dan penghalusan permukaan akar
-
10
dengan baik. Sehingga dapat tercipta lingkungan yang lebih baik untuk
penyembuhan gingiva dan restorasi kontur gingiva fisiologis (Yusrini, 2014).
2.2.2 Indikasi dan Kontraindikasi
Indikasi gingivektomi menurut Cohen (2009) adalah sebagai berikut:
- Poket supraboni
- Jaringan keratin yang adekuat
- Poket dengan kedalaman lebih dari 3 mm
- Kehilangan tulang horizontal yang tidak membutuhan bedah tulang
- Pembesaran gingiva
- Daerah dengan akses terbatas
- Topigrafi gingiva yang tidak estetik dan asimetri
- Menghilangkan jaringan lunak yang menghalangi erupsi gigi
- Menciptakan kontur gingiva yang baik pasca akut necrotizing gingivitis
ulseratif dan prosedur bedah flap
Sedangkan kontraindikasi gingivektomi menurut Cohen (2009) adalah
sebagai berikut:
- Jaringan keratin yang inadekuat
- Poket yang meluas hingga ke mukogingiva line
- Kebutuhan akan reseksi tulang
- Jaringan yang inflamasi dan edema
- Area yang butuh estetik
- Bagian palatal yang dangkal
- Perawatan poket infraboni
- Oral hygiene yang buruk
-
11
2.2.3 Prosedur Gingivektomi
Fase Presurgical
Hal yang harus dilakukan pertama kali sebelum melakukan gingivektomi
adalah mengurangi keradangan dan menghilangkan faktor lokal, seperti kalkulus,
plak, atau tumpatan yang overhanging. Ketika mengawali proses gingivektomi,
yang dilakukan adalah melakukan anastesi lokal yang adekuat dan
vasokonstriktor yang berperan untuk mengendalikan perdarahan. Jika anastesi
telah diberikan, kemudian melakukan probing pada poket gingiva untuk
mengetahui kedalamannya dan untuk memastikan bahwa poket gingiva tidak
meluas hingga ke mucogingiva junction. Yang perlu diperhatikan adalah perlu
atau tidaknya dilakukan bedah tulang, karena salah satu kontraindikasi
dilakukannya gingivektomi adalah kebutuhan akan bedah tulang (Cohen, 2009).
Mengukur Kedalaman Poket
Periodontal probe digunakan untuk menandai dasar poket dengan
serangkaian titik perdarahan kecil. Tiga titik (mesial, distal, dan bukal) dibuat
pada setiap permukaan bukal dan lingual. Tanda ini menggambarkan batas
penghilangan poket. Kemudian langkah selanjutnya adalah pembuatan bleeding
point dengan menggunakan poket marker untuk menunjukkan batas dari poket
yang harus dihilangkan. Penanda poket atau pocket marker diletakkan kedalam
poket dan diposisikan sejajar dengan gigi. Saat dasar poket telah tercapai,
jaringan tersebut ditandai. Kemudian setelah titik-titik perdarahan ditetapkan,
titik-titik tersebut akan membentuk garis putus-putus yang menguraikan sayatan.
Penanda poket tidak boleh diletakkan miring karena dapat membentuk garis
sayatan yang terlalu dalam (Cohen, 2009).
-
12
Insisi
Ada dua macam jenis insisi untuk prosedur gingivektomi, yaitu continuous
dan discontinuous. Kedua jenis insisi tersebut dimulai dari gigi paling ujung pada
daerah yang akan dilakukan gingivektomi. Skalpel atau pisau gingivektomi
adalah alat yang dapat dipakai untuk melakukan insisi. Pisau gingivektomi lebih
mudah digunakan sebab angulasi dan bentuk pisaunya. Ujung pisau digunakan
sebagai insisi primer yang dimulai dari bagian sedikit apikal dari bleeding point.
Untuk menghilangkan poket dengan maksimal serta menghasilkan bevel jaringan
sebesar 45° dengan cara memegang pisau sedemikian rupa agar insisi yang
dilakukan sangat dengat dengan tulang. Pisau Orban atau Pisau Kirkland
interproksimal digunakan untuk membebaskan jaringan interproksimal,
ditempatkan pada interdental dengan sudut 45°, baik bukal maupun lingual
setelah itu, jaringan dibuang menggunakan hoe atau scaler. Dilanjutkan dengan
melakukan scalling dan root planing untuk menghilangkan jaringan granulasi
yang tersisa, kalkulus dan sementum dengan menggunakan scaler atau kuret
(Cohen, 2009). Setelah dilakukan perawatan scalling dan root planing, jaringan
yang nekrose dibersihkan dengan saline agar bersih dan tidak terjadi
pendarahan, kemudian dipasang periodontal dressing. Periodontal dressing
dipasang untuk meningkatkan kenyamanan pasca operasi. Dressing ini akan
menghalangi pembentukan jaringan granulasi yang berlebihan dan melindungi
luka dari trauma mekanis dan kimia. Penempatan dressing harus menutupi
daerah luka, menempati sepanjang leher gigi dan tidak menutupi permukaan
oklusal, serta membentuk kerucut pada daerah interdental. Dressing tidak boleh
menutup perlekatan otot ataupun mukosa orovestibular (Suryono,2012).
-
13
Gingivektomi juga dapat dilakukan dengan teknik lain:
Gingivektomi dengan elektrokauter/bedah listrik
Untuk pembentukan kontur gingiva diindikasikan gingivektomi dengan
teknik bedah listrik atau elektrokauter. Pengangkatan jaringan gingiva hiperplasi,
koreksi frenulum dan otot-otot perlekatan, insisi abses periodontal, serta flep
perikoronal adalah batasan pada prosedur superfisial dari teknik ini.
Memungkinkannya pembentukan kontur jaringan yang baik dan kontrol
pendarahan adalah keuntungan teknik ini. Sedangkan kerugian teknik ini tidak
dapat digunakan pada penderita jantung yang menggunakan pacemaker (alat
pacu jantung) yang tidak kompatibel. Saat prosedur dilakukan akan menimbulkan
aroma yang tidak sedap. Kerusakan tulang dapat tidak bisa diperbaiki jika ujung
alat bedah listrik bersentuhan dengan tulang. Serta panas dari pemakaian alat
yang berlebihan akan menyebabkan kerusakan jaringan dan kehilangan
pendukung. Sementum dapat terbakar jika elektroda bersentuhan dengan akar
(Yusrin, 2014)
Gingivektomi dengan laser
Laser karbondioksida (CO2) dan laser neodymium: yttriumalumunium-
garnet (Nd:YAG) yang mempunyai panjang gelombang 10,600 nm dan 1064 nm
adalah laser yang paling sering digunakan dalam praktik kedokteran gigi. Sinar
laser (CO2) digunakan untuk eksisi gingiva, meskipun penyembuhannya agak
lama dibandingkan dengan penyembuhan bila menggunakan scalpel secara
konvensional. Penggunaan sinar laser untuk bedah mulut harus memenuhi
ukuran yang dianjurkan, untuk menghindari pantulan sinar pada permukaan alat
yang dapat menimbulkan luka terhadap jaringan sekitarnya dan penglihatan
operator (Yusrin, 2014).
-
14
2.2.4 Gingivoplasty
Gingivektomi sering diikuti dengan prosedur gingivoplasti. Gingivoplasti
merupakan proses pembentukan kembali gingiva yang telah kehilangan bentuk
fisiologisnya (Suryono, 2012). Setelah melakukan gingivektomi, perlu dilakukan
gingivoplasti yang bisa dilakukan dengan menggunakan gunting, tissue nipper,
atau diamond stone untuk mendapatkan kontur gingiva yang lebih baik.
Gingivoplasti diperlukan untuk membentuk permukaan interradikular dan
membuat kontur lebih rata. Jaringan yang sembuh akan tipis, daerah dari
interdental ke permukaan interradikular akan lebih rata sehingga tidak mudah
untuk dijadikan retensi makanan (Cohen, 2009). Tujuan utama gingivoplasti
adalah restorasi kontur fisiologis gingiva yang dapat membantu mencegah
terjadinya rekurensi peyakit periodontal. Pada akhirnya gingivoplasti harus dapat
meningkatkan akses untuk melakukan kontrol plak dengan efisien oleh pasien.
Biasanya prinsip-prinsip dari gingivoplasti digabungkan dengan gingivektomi,
kedua prosedur tersebut seringkali dilakukan bersamaan (Yusrin, 2014).
2.2.5 Penyembuhan pasca gingivektomi
Sel epitel pinggiran luka mulai bermigrasi keatas jaringan granulasi
setelah 12-24 jam. Setelah 5-14 hari epitelisasi permukaan pada umumnya telah
selesai. Selama 4 minggu pertama setelah gingivektomi, keratinisasi akan
berkurang. Keratinisasi permukaan mungkin tidak tampak hingga hari ke 28-42
setelah operasi. Setelah satu bulan, perbaikan epitel selesai dan perbaikan
jaringan ikat selesai sekitar 7 minggu setelah gingivektomi. Setelah hari keempat
penyembuhan, vasodilatasi dan vaskularisasi mulai berkurang serta tampak
hampir normal pada hari keenambelas. Gingiva tampak sehat, berwarna merah
-
15
muda dan kenyal sekitar enam minggu setelah gingivektomi. Perawatan gingiva
hiperplasi dengan perawatan gingivektomi pada kenyataannya sering
menimbulkan kekambuhan (Ruhadi, 2005)
Nyeri pasca gingivektomi dan tindakan bedah lain merupakan hal yang
penting. Nyeri pasca bedah biasanya berakhir setelah 3-4 hari. Pemberian obat
analgesik pada pasien dapat dilakukan untuk mengurangi rasa nyeri dan
dikonsumsi setiap 6 jam. Tidak dianjurkan memberikan NSAID, terutama pada
pasien yang mempunyai resiko perdarahan (Manson, 2013).
2.3 Luka
2.3.1 Definisi
Luka adalah rusak atau terbukanya suatu jaringan yang berkelanjutan dari kulit,
mukosa membran dan tulang atau organ tertentu. Luka mengakibatkan efek
seperti hilangnya seluruh atau sebagian fungsi organ, respon rasa sakit,
perdarahan dan pembekuan darah, kontaminasi bakteri, dan kematian sel
(Kozier, 1995).
2.3.2 Klasifikasi luka
Luka sering digambarkan berdasarkan bagaimana cara mendapatkan
luka itu dan menunjukkan derajat luka (Taylor, 1997).
Berdasarkan kedalaman dan luasnya luka
a. Stadium I
Luka Superfisial yaitu luka yang terjadi hanya pada lapisan teratas kulit atau
epidermis kulit.
b. Stadium II :
-
16
Luka Partial Thickness yaitu luka yang mengakibatkan hilangnya lapisan kulit
pada lapisan epidermis dan bagian atas dari dermis. Luka ini ditandai
dengan adanya tanda klinis seperti abrasi, blister atau cekungan yang
dangkal.
c. Stadium III
Luka Full Thickness yaitu luka yang mengakibatkan hilangnya lapisan kulit
keseluruhan meliputi kerusakan atau kematian (nekrosis) jaringan subkutan
yang dapat meluas sampai jaringan bagian bawah tetapi tidak melewati
jaringan baguan dasar. Luka ini mengenai dari lapisan epidermis, dermis dan
fasia tetapi tidak sampai mengenai otot.
d. Stadium IV
Luka Full Thickness yaitu luka yang telah mencapai atau menembus lapisan
otot, tendon dan tulang dengan adanya kerusakan yang luas. (Baranoski,
2008)
Berdasarkan waktu penyembuhan luka
a. Luka akut
Luka ini akan sembuh dengan masa penyembuhan sesuai dengan konsep
penyembuhan yang ada.
b. Luka kronis
Luka ini terjadi karena mengalami kegagalan dalam proses penyembuhan,
yang dapat dipengaruhi dari faktor intrinsik maupun kestrinsik.
Mekanisme terjadinya luka
-
17
a. Luka insisi (Incised wounds)
Luka ini terjadi karena teriris oleh benda yang tajam. Seperti akibat
pembedahan.
b. Luka memar (Contusion Wound)
Luka ini terjadi akibat benturan atau tekanan keras pada jaringan sehingga
muncul daerah yang bengkak membiru.
c. Luka lecet (Abraded Wound)
Luka ini terjadi akibat abrasi atau kulit bergesekan dengan benda lain yang
sifatnya keras tetapi tidak tajam.
d. Luka tusuk (Punctured Wound)
Luka ini terjadi akibat adanya benda asing yang masuk kedalam jaringan
dari arah luar dengan luka yang tidak luas
e. Luka tembus (Penetrating Wound)
Luka ini terjadi karena benda asing yang menembus organ atau jaringan
dalam tubuh, yang dapat meluas ke jaringan sekitarnya.
2.3.3 Penyembuhan luka
Penyembuhan luka adalah proses penggantian dan perbaikan fungsi
jaringan yang rusak. Penyembuhan luka melibatkan integrasi proses fisiologis.
2.3.3.1 Proses Penyembuhan Luka
Fase Inflamasi
Fase inflamasi adalah adanya respon vaskuler dan seluler yang terjadi
akibat perlukaan yang terjadi pada jaringan lunak. Tujuan yang akan dicapai
adalah menghentikan perdarahan dan membersihkan area luka dari benda asing,
sel-sel mati dan bakteri untuk mempersiapkan dimulainya proses penyembuhan.
-
18
Pada awal fase ini kerusakan pembuluh darah akan menyebabkan keluarnya
platelet yang berfungsi sebagai hemostasis. Platelet ini akan menutupi vaskuler
yang terbuka (clot) dan juga mengeluarkan substansi vasokonstriksi yang
mengakibatkan pembuluh darah kapiler bervasokonstriksi. Selanjutnya terjadi
penempelan endotel yang akan menutup pembuluh darah. Periode ini 5-10 menit
lamanya, setelah itu vasodilatasi kapiler terjadi akibat stimulasi saraf sensoris
dan adanya substansi vasodilator yaitu berupa histamin, bradikinin, serotonin dan
sitokin. Peningkatan permeabilitas vena membuat cairan plasma darah keluar
dari pembuluh darah dan masuk ke daerah luka sehingga oedema jaringan
terjadi akibat dari kerja Histamin Secara klinis rasa sakit pada fase inflamasi
akan terasa sampai hari ke-3 atau ke-4. Proses fase inflamasi ini berlangsung
sampai hari ke-6 (Price, 2011).
Fase Proliferatif
Pada fase ini adalah fase memperbaiki dan menyembuhkan luka.
Munculnya fase ini ditandai dengan proliferasi sel. Fibroblas sangat besar
perannya pada proses perbaikan untuk bertanggung jawab menghasilkan produk
struktur protein yang akan digunakan selama proses rekonstruksi jaringan.
Paparan sel fibroblast pada jaringan lunak yang terluka biasanya sangat jarang
dan bersembunyi di matriks jaringan penunjang. Fibroblas baru akan aktif
bergerak jika terdapat luka. Pergerakkannya dari jaringan sekitar luka ke dalam
daerah luka, kemudian akan berkembang (proliferasi) serta mengeluarkan
beberapa substansi berupa kolagen, elastin, hyaluronic acid, fibronectin dan
proteoglycan yang berperan dalam membangun jaringan baru. Kolagen disini
berfungsi membentuk calon jaringan baru dan dengan dikeluarkannya substrat
-
19
oleh fibroblas, yang nantinya akan memberikan pertanda bahwa makrofag,
pembuluh darah baru dan juga fibroblas sebagai satu kesatuan dapat memasuki
daerah yang luka. Dari sejumlah sel dan pembuluh darah baru yang tertanam
didalam jaringan baru tersebut disebut dengan jaringan granulasi. Jika epitel
dermis dan lapisan kolagen yang baru telah terbentuk maka fase ini akan
berhenti. Proses ini terlihat saat kontraksi akan dipercepat oleh berbagai growth
faktor yang dibentuk oleh makrofag dan platelet. (Sugiaman, 2011)
Fase Maturasi
Fase ini adalah fase pematangan yang biasanya dimulai pada minggu
ke-3 setelah perlukaan. Fase ini kurang lebih akan berakhir sampai 12 bulan.
Pada fase ini jaringan baru akan terbentuk sempurna menjadi jaringan sembuh
dan kuat. Jaringan granulasi akan mulai ditinggalkan oleh fibroblast. Jaringan
yang awalnya berwarna kemerahan akan mulai berkurang karena pembuluh
mulai regresi dan serat fibrin dari kolagen bertambah banyak untuk memperkuat
jaringan parut. Kekuatan dari jaringan parut akan mencapai puncaknya pada
minggu ke-10 setelah perlukaan. (Sussman, 2007)
Penyembuhan yang optimal akan dicapai ketika antara kolagen yang
diproduksi seimbang dengan yang dipecahkan. Saat mencapai ke pembentukan
jaringan parut, jika terjadinya penebalan atau hypertrophic scar itu terjadi karena
kolagen berlebihan, sebaliknya produksi yang berkurang maka akan menurunkan
kekuatan jaringan parut dan luka akan selalu terbuka. (Sussman, 2007)
Fase Remodelling
-
20
Fase ini adalah fase terakhir dalam proses penyembuhan luka. Luka
dikatakan sembuh jika terjadi kontinuitas lapisan kulit dan kekuatan jaringan
parut mampu atau tidak mengganggu untuk melakukan aktifitas normal.
Meskipun proses penyembuhanluka sama bagi setiap penderita, namun outcome
atau hasil yang dicapai sangat tergantung pada kondisi masing-masing individu,
lokasi terjadi serta luasnya luka. (Hess,2008)
2.3.4 Faktor yang mempengaruhi penyembuhan luka
a. Usia dan Nutrisi
Kemampuan dan percepatan dalam penyembuhan luka dipengaruhi dari
usia individu dan asupan nutrisi yang baik. Karena semakin tua usia individu,
sel yang diproduksi tidak secepat sel yang diproduksi oleh usia muda.
Sedangkan nutrisi memiliki peran membantu menghasilkan sel-sel
pematangan agar luka cepat tertutup.
b. Infeksi
Infeksi dapat menghambat proses penyembuhan luka dan menyebabkan
kerusakan pada jaringan sel penunjang, sehingga dapat memperparah
ukuran dari luka tersebut (William, 2008)
c. Hipovolemia
Ketika kuurangnya volume darah , maka oksigen yang tersedi akan
menurun dan akan mengakibatkan vasokonstriksi. Sehingga penyembuhan
luka akan terhambat.
d. Hematoma
Hematoma adalah bekuan darah. Pembekuan darah sangatdibutuhkan
dalam proses oenyembuhan luka. Tanpa adanya pembekuan darah atau
-
21
jikaterdapat kelianan dalam pembekuan darah, maka proses penyembuhan
luka dapat berlangsung lebih lama dari yang seharusnya.
e. Benda asing
Benda asing seperti debu pasir atau mikroorganisme dapat menginfeksi
dan menyebabkan terbentuknya suatu abses sebelum benda tersebut
diangkat. Abses ini timbul dari serum, fibrin, jaringan sel mati dan lekosit
(sel darah merah), yang membentuk cairan kental dengan warna dari putih
susu sampai kekuningan yang disebut dengan pus (William, 2008)
f. Iskemia
Iskemi adalah suatu keadaan dimana terdapat penurunan suplai darah
pada bagian tubuh akibat dari obstruksi dari aliran darah. Balutan pada luka
yang terlalu ketat biasanya menjadi hal yang paling sering terjadi.
g. Diabetes
Diabetes adalah salah satu penyakit sistemik yang mempengaruhi karena
sekresi insulin yang terhambat akan mengakibatkan peningkatan gula darah.
sehingga luka lama mongering. (Brem, 2007)
h. Pengobatan
Obat yang masuk ke dalam tubuh bisa juga mempengaruhi kinerja dalam
proses penyembuhan luka. Seperti antikoagulan yang berfungsi untuk
mengencerkan darah dapat mengakibatkan perdarahan. (Franz, 2007)
i. Stress
Tingkat rasa khawatir atau stress dalam masa penyembuhan juga dapat
menghambat proses penyembuhan. Rasa khawatir dan stress mampu
membuat pergerakan yang tidak terkendali seperti sering menyentuh daerah
yang terkena luka (P Mahendra, 2012 ).
-
22
2.4 Limfosit
Gambar 2.2 Limfosit Sumber http://www.pathologystudent.com/wp-content/uploads/2010/07/normal-
lymphs.jpg
2.4.1 Definisi
Limfosit adalah jenis sel darah putih yang merupakan sel pusat dari
sistem ketahan tubuh atau imunitas yang memiliki peranan penting dalam proses
keradangan dengan menghancurkan mikroorganisme yang masuk ke dalam
tubuh (antigen), mensintesis dan mensekresi sebuah pertahanan tubuh (antibodi)
berupa immunoglobulin ke dalam jaringan darah sebagai respon terhadap
keberadaan benda asing (Sheeler dan Bianchi, 1982).
Limfosit merupakan sel yang berbentuk bulat, mempunyai diameter yang
bervariasi antara 7 sampai 12 µm. Jumlah limfosit adalah 20 sampai 35 persen
dari leukosit darah normal. Limfosit merupakaan sel yang paling kecil diantara sel
bebas pada jaringan ikat. Mereka memiliki inti bulat, gelap karena khromatinnya
berkelompok dan tidak nampak nukleolus. yang hampir memenuhi seluruh sel.
Disekitar inti terdapat sedikit sitoplasma homogen yang basofil (Leeson et al.,
1996). Sitoplasmanya yang sedikit tampak mengelilingi inti sebagai cincin
berwarna biru muda.
-
23
Kebanyakan limfosit dalam jaringan ikat longgar diduga berasal dari
sirkulasi darah. Pada biakan jaringan, limfosit terbentuk didalam jaringan ikat dan
menetap disana. (Leeson et al., 1996). Limfosit paling banyak ditemukan dalam
nodus limfe, namun juga dijumpai dalam jaringan limfoid khususnya, seperti
limpa, daerah submukosa saluran cerna,timus dan sumsum tulang. Jaringan
limfoid tersebar di lokasi-lokasi yang sangat menguntungkan di dalam tubuh
untuk menahan invasi organisme atau toksin sebelumdapat menyebar luas
(Guyton & Hall, 2007).
Limfosit umumnya dalam jumlah yang sangat kecil untuk waktu yang
cukup lama yaitu sampai reaksi peradangan menjadi kronik (Price dan Wilson,
2005). Limfosit berfungsi memberikan respon imunologik untuk melawan agen
asing dengan fenomena humoral dan seluler spesifik (Bellanti, 2011).
Limfosit T secara langsung menghancurkan sel-sel sasaran spesifik,
suatu proses yang dikenal sebagai respon imun yang diperantarai sel hidup
(respon imun seluler). Sel yang menjadi sasaran limfosit T mencakup sel-sel
tubuh yang dimasuki oleh virus dan sel kanker (Sherwood, 2001).
Baik limfosit T maupun limfosit B juga memperlihatkan peristiwa memori
imunologik. Setiap limfosit disiapkan untuk memberikan respon hanya terhadap
satu antigen saja. Beberapa sel yang dihasilkan itu akan berkembang menjadi
sel efektor misalnya sebuah limfosit B akan berkembang menjadi sel plasma
yang menghasilkan antibodi. Pada saat jumlah sel radang meningkat, saat itulah
sel-sel sebagai antibodi yang dihasikan dari sumsum tulang belakang keluar
menuju daerah yang terkena luka . (Junqueira et al., 2007).
-
24
2.4.2 Peran Limfosit dalam Penyembuhan Luka
Respon penyembuhan luka berawal dari saat pertama muncul cedera
atau luka. Pada luka tersebut terdapat peningkatan permeabilitas dan
vasodilatasi sehingga menyebabkan munculnya edema dan rasa sakit. Proses
tersebut adalah produksi dari kinin dan prostaglandin. Pada luka awal sel yang
berperan paling banyak adalah PMN. Setelah PMN muncul sebagai fagositosis
bakteri lalu diikuti dengan munculnya makrofag dan diikuti limfosit. Peranan
limfosit dalam penyembuhan luka, limfosit melepaskan limfokin interferon Ɣ (IFN-
Ɣ) yang mengaktivasi makrofag. Setelah makrofag diaktifkan oleh limfosit akan
menghasilkan Nitric Oxide (NO) dan Reactive Oxygen Species (ROS) yang
berperan dalam fagositosis. Makrofag juga melepaskan faktor pertumbuhan yaitu
Transforming Growth Factor (TGF-β) dan Vascular Endothelial Growth Factor
(VEGF) yang mengawali dan mempercepat pembentukan formasi jaringan
granulasi berupa fibroblas dan angiogenesis sehingga terjadi penyembuhan luka
(Robbins, 2007)
Fase inflamasi ini terjadi mulai pada hari pertama setelah perlukaan
sampai hari keempat. Pada awal terjadinya keradangan, limfosit tidak begitu
banyak berperan aktif pada proses tersebut karena yang berperan pada saat itu
adalah sel radang akut seperti PMN dan makrofag yang keluar ke jaringan luka.
Sel limfosit muncul dari hari ke-1 sampai pada hari yang ke-5 mencapai puncak
dan akan mengalami penurunan pada hari ke-7 (Robbins dan Kumar, 2007).
-
25
2.5 Pepaya
Gambar 2.3 Pepaya (Caricca papaya L) Sumber http://tiraskita.com/foto_berita/34pepaya.jpg
2.5.1 Klasifikasi Ilmiah
Kingdom : Plantae
DIvisi : Spermatophyta
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Caricales
Famili : Caricaceae
Genus : Carica
Spesies : Carica papaya L
2.5.2 Penyebaran Pepaya
Tanaman Pepaya awalnya berasal dari luar negeri yaitu Amerika Tengah,
daerah sekitar Meksiko bagian selatan dan Nicaragua. Lalu masuk ke Indonesia
yang dibawa oleh bangsa Portugis. Saat ini Indonesia masuk dalam salah satu
Negara yang cukup besar menghasilkan buah papaya (Warisno, 2007). Dan
juga iklim di Indonesia yang mendukung pertumbuhan pesat. Sehingga buah
papaya mudah di dapatkan secara bebas dipasaran.
-
26
Dari hasil survey Produksi Buah-Buahan di Jawa tahun 1991 menunjukan
bahwa tanaman buah papaya cukup banyak dihasilkan dari kota Malang,
Jember dan Banyuwangi, Jawa Timur. (Rukmana. 2012)
2.5.3 Kandungan Buah Pepaya untuk Proses Penyembuhan Luka
Unsur Komposisi Buah Masak Buah Mentah Daun
Energi (kalori) 46 26 79
Air (g) 86,7 92,3 75,4
Protein (g) 0,5 2,1 8
Lemak (g) - 0,1 2
Karbohidrat (g) 12,2 4,9 11,9
Vitamin A (IU) 365 50 18.250
Vitamin B (mg) 0,04 0,02 0,15
Vitamin C (mg) 78 19 40
Kalsium (mg) 23 50 353
Besi (mg) 1,7 0,4 0,8
Fosfor (mg) 12 16 63
Tabel 2.1 Kandungan Buah Pepaya Sumber : Direktorat Gizi, Depkes RI (1979) dalam Kalie (2008)
Kandungan senyawa pepaya
1. Daun
Enzim papain, alkaloid karpaina, pseudo-karpaina, glikosid, karposid dan
saponin, sakarosa, dekstrosa, dan levulosa. Alkaloid karpaina mempunyai
efek seperti digitalis.
-
27
2. Buah
β-karotena, pektin, d-galaktosa, l-arabinosa, papain, papayotimin papain,
serta fitokinase
3. Biji
Glukosida kakirin dan karpain. Glukosida kakirin berkhasiat sebagai obat
cacing, peluruh haid, serta peluruh kentut (karminatif)
4. Getah
Papain, kemokapain, lisosim, lipase, glutamin, dan siklotransferase
Seluruh bagian tanaman pepaya dapat digunakan sebagai obat.Daging
buah, bunga, tangkai, maupun akar pepaya. Daging pepaya matang banyak
mengandung vitamin A, C, dan B kompleks, asam amino, kalsium, besi,
enzim dan lain-lain (Jagadeesh, 2014). Proteinyang terkandung di dalam pepaya
sangat mudah dicerna. Pepayasangat bermanfaat bagi seseorang yang
mengalami gangguan pencernaan, menjalankan pola makan yang tidak sehat
danbanyak mengonsumsi protein yang sulit tercerna. Pepaya tidak hanya banyak
mengandung protein yang mudah diserap, tetapi juga membantu penyerapan
berbagai protein lain di dalam tubuh. (Effendi, 2014)
Menurut Journal of Medicinal Plants Studies (2013) yang telah diuji oleh
Aravind menyatakan bahwa enzim papain yang ditemukan pada pepaya dapat
membantu dalam menurunkan peradangan dan penyembuhan luka bakar.
Pepaya juga mempunyai efek anti-koagulan karena dapat meningkatkan
protrombin dan koagulasi tiga kali lipat. Enzim papain tersebut dapat
menghilangkan jaringan nekrotik pada jaringan yang luka kronis, luka bakar.
-
28
2.6 Tikus wistar
Gambar 2.4 Tikus strain Wistar(Rattus norvegicus) Sumber Bioterio
2.6.1 Klasifikasi Ilmiah
Tikus adalah hewan percobaan yang sering digunakan. Di laboratorium.
Keunggulan dari tikus adalah jumlah kelahirannya yang tinggi, siklus hidup yang
relative pendek, sifat anatomi dan fisiologis yang baik, tingkat penanganan yang
mudah, sifat bereproduksi sama seperti mamalia besar.
Kingdom : Animalia
DIvisi : Chordata
Kelas : Mammalia
Ordo : Rodentia
Famili : Muridae
Genus : Murinae
Spesies : Rattus norvegicus L.
Ada dua sifat yang membedakan tikus dari hewan percobaan lain, yaitu
bahwa tikus tidak dapat muntah karena struktur anatomi yag tidak lazim di
-
29
tempat esofagus bermuara ke dalam lambung, dan tikus tidak mempunyai
kantung empedu. (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988)
Bentuk tubuh tikus wistar lebih besar dari famili tikus pada umumnya yang
dapat mencapai 40 cm diukur dari hidung hingga ujung ekor. Serta tikus jantan
biasanya memiliki ukuran lebih besar dari tikus betina, dan berwarna agak
kecoklatan, kadang-kadang ada bercak hitam atau putih dan memiliki ekor yang
lebih panjang daripada tubuhnya (Sugiyanto, 1995).
Tikus dalam percobaan Kedokteran Gigi, yaitu memakai daerah rongga
mulutnya. Sasaran yang digunakan adalah gusi atau gingiva. Struktur dari
daerah gingiva gigi mirip dengan yang diamati pada manusiadengan sulkus
gingiva dangkal dan attacthed junctional yang epitel pada permukaan gigi.
Namun, ada beberapa perbedaan seperti keratinisasi dari sulkus yang epitel
pada tikus. Perbedaan lain berkaitan dengan hubungan antara gingiva dan epitel
junctional dengankontak desmosomal antara sel-sel yang paling dangkal dari
epitel gingiva dan sel-sel non keratin dari junctional yang epitel (Listgarten,
1998).
-
30
Tabel 2.2 Biologi Tikus Sumber Smith dan Mangkoewidjojo (1989)
Data Nilai
Lama hidup
Berat lahir
Umur disapih
Umur dewasa
Berat badan jantan dewasa
Berat badan betina dewasa
Suhu rektal
Kecepatan tumbuh
Kebituhan minum dewasa
Kebutuhan makan dewasa
Umur saat dikawinkan
Jantan
Betina
Volume maksimal zat uji peroral
2-3 tahun
5-6 gr
21 hari
40-60 hari
300-400 gr
250-300 gr
36-39 °C
5 gr per hari
± 100 ml air / 100 gr BB per hari
± 5 gr / 100 gr BB per hari
-
65-110 hari
65-110 hari
5 ml
-
31
BAB III
KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN
3.1 Kerangka Konsep
Gambar 3.1 Kerangka Konsep
Mempengaruhi :
Variabel yang diteliti :
Flavonoid, Vitamin C Sebagai antioksidan
Limfosit meningkat
Mempercepat fase Inflamasi
Muncul PMN sebagai fagositosis bakteri pada
awal luka
Fase Inflamasi
Produksi kinin dan prostaglandin
Makrofag yang diikuti limfosit
Aktivasi mengaktifasi makrofag meningkat
Makrofag menghasilkan
TGF-β dan VEGF sebagai permulaan pembentukan
formasi jaringan
Mempercepat proses penyembuhan luka
Luka pasca gingivektomi
Jus Buah Pepaya
Meningkatkan sistem pertahanan tubuh
-
32
3.2 Hipotesis Penelitian
3.2.1 Keterangan Kerangka Konsep
Pasca Gingivektomi, terjadi luka terbuka pada gingiva. Adanya luka
terbuka pada gingiva maka akan memicu munculnya keradangan. Tahap awal
peruses penyembuhan luka adalah pada fase inflamasi. Pada tahap awal fase
ini PMN akan muncul didaerah luka yang berperan sebagai fagositosis bakteri
tahap awal. Setelah kemunculan PMN lalu muncul makrofag yang diikuti oleh
munculnya limfosit. Makrofag dapat teraktivasi setelah limfosit menghasilkan
limfokim interferon. Saat makrofag sudah teraktivasi, sel ini akan menghasilkan
TGF-β dan VEGF yang menjadi permulaan pembentukan formasi jaringan
granulasi.
Jus buah pepaya memiliki beberapa senyawa aktif seperti flavonoid dan
vitamin C. Senyawa ini berguna sebagai antioksidan yang dapat meningkatkan
sistem pertahanan tubuh. Meningkatnya sistem pertahanan tubuh maka akan
meningkatkan jumlah sel limfosit. Jika limfosit meningkat, maka dapat
meningkatkan aktivasi makrofag. Ketika makrofag yang teraktivasi meningkat,
maka fase inlfamasi akan lebih cepat.
3.2.2 Hipotesis
Pemberian jus buah pepaya ( Carica Pepaya L.) dapat meningkatkan
limfosit pada jaringan gingiva pasca gingivektomi pada tikus wistar jantan
-
33
BAB IV
METODE PENELITIAN
4.1 Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian ini menggunakan metode true eksperimental yang
dikerjakan di labolatorium secara in vivo dengan menggunakan rancangan
percobaan Randomized Group Post Test Only Design. Penelitian ini dibagi
menjadi 8 kelompok dengan 2 time series. Desain Penelitian adalah sebagai
berikut :
Keterangan:
K1 : Kel. Kontrol 1 tanpa perlakuan, pembedahan hari ke – 3
P1 : Kel. Perlakuan 1 pemberian jus buah pepaya 60% dekapitasi hari ke – 3
P2 : Kel. Perlakuan 2 pemberian jus buah pepaya 80% dekapitasi hari ke – 3
P3 : Kel. Perlakuan 3 pemberian jus buah pepaya 100% dekapitasi hari ke – 3
K2 : Kel. Kontrol 2 tanpa perlakuan, pembedahan hari ke – 5
P4 : Kel. Perlakuan 4 pemberian jus buah pepaya 60% dekapitasi hari ke – 5
P5 : Kel. Perlakuan 5 pemberian jus buah pepaya 80% dekapitasi hari ke – 5
P6 : Kel. Perlakuan 6 pemberian jus buah papaya 100% dekapitasi hari ke – 5
RANDOM
K1 P1 P2 K2 P4 P5 P6 P3
SAMPEL
Pengamatan limfosit pada gusi pasca gingivektomi
-
34
4.2 Sampel
Hasil penelitian ini diharapkan dapat berguna sebagai bahan bacaan dan
menambah literatur serta pengembangan ilmu pengetahuan dibidang
farmakognosi mengenai penelitian ini adalah tikus jenis Rattus norvegicus strain
wistar yang dipelihara di Labolatorium Farmakologi Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya Malang. Pemeliharaan dilakukan dalam kandang yang
bersih. Sampel penelitian dipilih berdasarkan ketentuan kriteria inklusi dan
eksklusi. Termasuk kriteria inklusi yaitu :
Tikus jenis kelamin : Jantan
Usia : 2,5 – 3 bulan
Berat badan : 250 – 300 gram
Sehat : Gerakannya yang aktif, mata jernih
Bulu : Tebal dan berwarna putih mengkilap
Termasuk kriteria ekslusi yaitu tikus yang selama penelitian tidak mampu
makan, berat badannya kurang dari 250 gram, tikus yang mengalami diare
selama penelitian ditandai dengan feses yang tidak terbentuk, tikus yang
mengalami tanda – tanda infeksi gingiva, tikus yang kondisinya menurun atau
mati selama penelitian berlangsung.
Pada penelitian ini terbagi atas 8 kelompok sampel. Jumlah sampel yang
dibutuhkan tiap perlakuan didapat dari perhitungan dengan rumus (Hanafiah,
2005) :
(t-1) (n-1)≥ 15
(8-1) (n-1)≥ 15
8n-8-1n+1≥ 15
7n-7≥ 15
-
35
7n≥ 22
N≥ 3,14
Sehingga sampel yang digunakan adalah 4 tikus untuk setiap kelompok
perlakuan. Total tikus yang digunakan pada 2 time series sejumlah 32 tikus.
4.3 Variabel Penelitian
Variabel dalam penelitian ini dibagi menjadi 3 variabel, yaitu :
4.3.1 Variabel Bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah jus buah pepaya dengan
konsentrasi 60%, 80% dan 100%
4.3.2 Variabel Terikat
Variabel terikatnya adalah jumlah sel limfosit.
4.3.3 Variabel Kontrol
Variabel kontrol terdiri dari nutrisi makanan dan minuman hewan coba,
kebersihan kandang, serta umur dan jenis hewan coba.
4.4 Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Laboratorium
Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang dalam
jangka waktu +3 bulan.
4.5 Definisi Operasional
4.5.1 Jus Buah Pepaya
Buah pepaya (Carica papaya) yang digunakan didapat dari Kebun Raya
Purwodadi. Buah yang dipilih harus matang warna kulit hijau dengan warna
-
36
daging buah merah – orange, konsistensi daging yang tidak terlalu keras dan
tidak terlalu lunak . Selanjutnya buah pepaya diproses menjadi jus menggunakan
juicer. Konsentrasi yang digunakan dalam pemberian jus buah pepaya ini adalah
60%, 80% dan 100%.
4.5.2 Jumlah Sel limfosit
Jumlah sel limfosit adalah banyaknya sel limfosit yang terlihat pada
preparat yang diambil dari gingiva tikus yang dipotong secara melintang dengan
pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE) dilihat menggunakan mikroskop cahaya
dengan pembesaran 400x per 10 lapangan pandang. Limfosit memiliki ukuran 7-
12 µm, Sitoplasmanya yang sedikit tampak mengelilingi inti sebagai cincin
berwarna biru muda, Intinya gelap karena khromatinnya berkelompok dan tidak
nampak nukleolus.
4.5.3 Gingivektomi
Gingivektomi adalah membuat luka dengan memakai bur kecil pada
gingiva tikus Rattus norvegicus dengan luas 0,5cm x 0,5 cm dengan ketebalan
0,5 mm. Dengan tujuan membuat luka terbuka gingivektomi yang nantinya akan
dilihat pengaruh jus buah pepaya terhadap sel limfositnyanya. Letak gingivektomi
adalah pada rahang bawah karena memilki ketebalan epitel gingiva paling baik
dan kontur yang paling sehat.
4.6 Alat dan Bahan Penelitian
4.6.1 Alat
Beberapa alat yang diperlukan selama proses penelitian ini berlangsung
adalah timbangan OHAUS atau neraca Sartorius untuk menghitung berat badan
tikus, kandang tikus sebanyak 8 buah, juicer untuk membuat juice buah pepaya,
-
37
diamond bur diameter kecil untuk melakukan gingivektomi, kuret/scaller, pinset
bedah, tempat antiseptik, syringe steril, jangka sorong untuk penghitungan luas
penampang luka, kaca mulut. Selain itu juga diperlukan alat untuk pengambilan
sampel seperti gunting bedah, jarum pentul, stereoform, kapas. Alat – alat untuk
pembuatan sediaan histologi, kotak kaca/toples sebagai ruangan pembiusan
dengan eter, botol kecil untuk tempat merendam mandibula dengan formalin
sebanyak 24 buah, slide glass dan mikroskop cahaya.
4.6.2 Bahan
Bahan – bahan yang diperlukan selama penelitian ini adalah masker,
handscoon, kasa, makanan tikus berupa pakan (pelet), serat kasar, umbi –
umbian, dan jagung, serat hijau – hijauan. Selain itu juga diperlukan eter 10%
untuk sacrifice (mengorbankan) tikus, ketamin 0,2 ml untuk anastesi, aquades
steril, tabung organ 28 buah jus buah pepaya yang dibuat setiap hari, alkohol
70%, formalin 10%, Povinde iodine 3%, xilol, parafin, bahan pewarnaan
Hematoxilen Eosin (HE), asam format 50%, alkohol asam, entelan dan novalgin.
4.7 Prosedur Penelitian
4.7.1 Pengambilan Buah Pepaya
Buah pepaya diperoleh di Malang yang didapat dari Kebun Raya
Purwodadi. Buah yang dipilih harus matang warna kulit hijau dengan warna
daging buah merah – orange, konsistensi daging yang tidak terlalu keras dan
tidak terlalu lunak. Diambil dengan cara memotong secara miring buah pepaya
yang berumur sekitar 3 – 4 bulan setelah bunga mekar.
-
38
4.7.2 Pembuatan Jus Buah Pepaya
Pertama – tama dilakukan pemilihan buah pepaya yang akan digunakan.
Buah pepaya dipotong – potong dengan pisau dengan mengelupas tipis – tipis
kulitnya, biji dibuang dan dilakukan penghancuran buah dengan juicer dengan
penambahan sedikit air mineral atau aquades. Selanjutnya akan didapatkan jus
buah pepaya dengan konsentrasi 100%.
Untuk mendapatkan konsentrasi yang diinginkan menggunakan rumus.
M1 V1 = M2 V2
Keterangan :
M : Massa buah dalam persen (%)
V : volume aquades dalam milliliter (ml)
Buah papaya yang di jus tanpa menggunakan air = 100 %
Konsentrasi jus:
Konsentrasi 80% :
V1 x 100 % = 100 ml x 80 %
V1 = 80 ml
Vair = 100ml - 80 ml
= 20
campuran 80 ml jus buah papaya dengan 20ml aquades
Konsentrasi 60% :
V1 x 80 % = 80 ml x 60 %
V1 = 60 ml
-
39
Vair = 80 ml – 60 ml
= 20 ml
campuran 60 ml jus buah papaya dengan 20ml aquades
Maka akan didapatkan jus buah pepaya dengan konsentrasi 60%, 80%, 100%.
4.7.3 Pemberian Jus Buah Pepaya
Pemberian jus buah pepaya diberikan satukali per hari secara per oral
setelah gingivektomi. Pemberian pada kelompok perlakuan I (60%), perlakuan II
(80%) dan perlakuan III (100%) per oral dengan menggunakan spuit yang
ujungnya dipasang sonde gastric sehingga dapat masuk dalam mulut tikus
hingga ke lambung. Konsentrasi yang diberikan berdasarkan konsentrasi
penelitian sebelumnya tentang efek perasan buah kepel dalam mempercepat
penyembuhan luka secara klinis (Pribadi, 2014). Pemilihan konsentrasi pada
buah pepaya sama dengan konsentrasi perasan air buah kepel, karena memiliki
kandungan yang sama dalam proses penyembuhan luka. Yaitu saponin dan
flavonoid. Jus diberikan sebanyak satu kali dalam sehari, dilakukan selama 5
hari. Pemberian jus disesuaikan dengan ukuran volume lambung tikus yaitu 5ml.
Sehingga setiap tikus akan diberikan jus dengan volume 2ml. (Febriani, 2011).
4.7.4 Prosedur Gingivektomi pada Hewan Coba
Prosedur pembuatan luka gingiva dilakukan pada tikus Wistar Rattus
novegicus yang tidak mengalami hiperplasia gingiva, tahapan yang dilakukan
antara lain :
1. Hewan coba diberikan anestesi menggunakan ketamine 0,2 ml.
2. Hewan coba diaplikasikan antiseptik pada daerah perlakuan
-
40
3. Insisi gingiva di regio anterior bawah. Penggunaan alat diamond bur
diameter kecil.
4. Kontrol perdarahan menggunakan kasa. Irigasi dengan antiseptic
5. Pemberian jus buah pepaya dengan konsentrasi 60%, 80% dan 100%.
Untuk kontrol dibiarkan tanpa pemberian jus buah pepaya.
6. Perawatan pasca gingivektomi dilakukan dengan pemberian pakan yang
lunak.
Gambar 4.1 Contoh Prosedur Gingivektomi pada Manusia Gambar dari hasil case base
Sumber: Oneallena. Quizlet.com
Keterangan gambar:
1. Kondisi gingival yang hiperplasia
2. Pemotongan bagian jaringan yang hyperplasia
3. Pengambilan kalkulus atau penyebab hyperplasia
4. Pengambilan sisa jaringan yang hyperplasia pada daerah marginal
atau papilla
-
41
5. Merapikan bagian marginal dan kontur gingiva dengan menggunakan
bur
6. Hasil prosedur gingivektomi
7. Pemberian periodontal pack sebagai pelindung luka jaringan
8. Hasil setelah penyembuhan
4.7.5 Pengambilan Sampel Jaringan
Pengambilan sampel jaringan dilakukan pada hari keenam. Proses
mengorbankan tikus dengan menggunakan eter 10%. Tikus yang telah diberi
perlakuan, dimasukkan kedalam toples kaca yang berisi kapas dan eter 10%.
Tetapi mengorbankan tikus dengan menggunakan eter kini sudah jarang atau
tidak dipakai lagi karena dapat membahayakan operator. Maka cara lainnya
adalah cervical dislocation. Apabila tikus yang dikorbankan sudah tidak
menunjukan tanda-tanda kehidupan atau mati, maka dipersiapkan proses
dekapitasi. Dekapitasi menggunakan gunting bedah. Bagian yang diambil adalah
mandibula tikus yang telah digingivektomi. Jasad tikus strain wistar jantan
kemudian dikuburkan secara layak. Mandibula direndam dalam botol – botol
yang berisi formalin 10% sebelum diproses ketahap selanjutnya. Kemudian
dilakukan pembuatan sediaan di labolatorium patologi anatomi dengan
menggunakan teknik pewarnaan HE.
4.7.5.1 Pembuatan Preparat dan Pengamatan Histologi Luka Gingiva
Pembuatan preparat dilakukan dengan estimasi setiap luka dengan 2 kali
pembuatan preparat. Sehingga dengan 4 perlakuan, 1 sampel dan 1 hari
pengamatan, masing – masing 4 preparat untuk setiap perlakuan akan
membutuhkan total 32 preparat.
-
42
Pengambilan jaringan gingiva beserta tulang rahang tikus yang telah
dilakukan prosedur gingivektomi dengan pemotongan secara melintang. Jaringan
gingiva tersebut dimasukkan ke dalam botol organ dengan Buffered Neutral
Formalin (BNF) 10% dengan waktu perendaman minimal 2 hari bertujuan
sebagai fiksasi jaringan dan diberi label penamaan sesuia konsentrasi perlakuan
dan hari pembedahan. Setelah itu diberikan larutan dekalsifikasi menggunakan
asam format 50% proses dekalsifikasi ini dilakukan selama 24 – 48 jam dan
harus diganti setiap hari, setelah proses dekalsifikasi selesai pencucian air
mengalir selama 3 – 8 jam untuk menghilangkan sisa bahan dekalsifikasi.
Kemudian dilakukan dehidrasi dengan merendam pada alkohol bertingkat, yaitu
pada konsetrasi 30%, 50%, 70%, 85%, 95% dengan masing – masing selama 30
menit. Stelah itu dilakukan clearing dengan xilol 2x selama 1 jam kemudian
proses infiltrasi dengan paraffin lunak pada suhu 42 – 46 C selama 2 x 1 jam.
Lalu blocking dengan paraffin keras pada suhu 46 – 52 C selama 1 jam
dilanjutkan sliding pada rotari mikrotom 4 – 6 um kemudian dipanaskan pada
suhu 60C. Selanjutnya dilakukan deparafinisasi yaitu dengan perendaman
dengan xilol 2x selama 5 menit, kemudian pada alkohol bertingkat dengan urutan
2x alkohol absolut, 30%, 50%, 70%, 85%, 95% dan H2O; masing – masing
selama 3 menit. Langkah terakhir dilakukan pewarnaan Hematoxilen – Eosin
(HE). Pertama pemberian Haris Hematoxilen selama 15 menit, lalu ditetesi
alkohol asam selama 3-10 detik dilanjutkan dengan pemberian larutan amunium
selama 3-10 detik. Kemudian diberi counter staining selama 15-20 detik
dilanjutkan dengan dehidrasi pada alkohol bertingkat. Terakhir pemberian xilol
selama 5 menit dan mounting menggunakan entelan kemudian pengamatan
dilakukan dengan menggunakan mikroskop
-
43
Gambar 4.2 Limfosit pada Gingiva Sumber: Nitawati, Ni Putu et.all. 2014. Respon Limfosit T Sitotoksik Pada Gingivitis Setelah
Pemberian Kurkumin.
4.7.6 Prosedur Pengambilan Data
Gingiva yang telah di gingivektomi dibuat sediaan preparat histologi
dengan teknik pewaranaan HE. Sampel pada sediaan dibagi menjadi 10 lapang
pandang dan sel limfosit dihitung di setiap lapang pandang menggunakan
mikroskop cahaya, pembesaran 400x dan presentase dibandingkan percepatan
penyembuhan dalam hitungan hari dan jumlah limfosit antara masing – masing
konsentrasi.
4.8 Alur Penelitian
Pada tahap awal penelitian, dilakukan pembuatan sediaan berupa jus
buah pepaya dengan berbagai konsentrasi, persiapan alat dan bahan penelitian,
kemudian perlakuan adaptasi hewan coba selama 1 minggu. Dilakukan
pemilihan sampel teknik randomisasi lalu sampel dikelompokkan, setelah alat
dan bahan dipersiapkan, dilanjutkan dengan melakukan prosedur gingivektomi
pada seluruh tikus, setelah itu pemberian perlakuan sesuai dengan kelompok
yang sudah ditentukan. Setelah perlakuan maka tikus dikelompokkan dalam
kandang dengan masing – masing kandang 3 ekor tikus berdasarkan kelompok
-
44
perlakuan. Dilakukan pembedahan pada hari ke 3 dan 5 untuk pengamatan
limfosit. Pembuatan preparat dan penghitungan sel limfosit. Selanjutnya
dilakukan analisis data dan pembuatan kesimpulan.
-
45
K 1
P 1
P 5
P 4
K 2
P 3
P 2
P 6
Prosedur Pengambilan Data
Analisis data
Pengamatan
Sampel berupa irisan tipis dari gingival pasca gingivektomi
Sampel dibawa ke Lab Patologi Anatomi
Adaptasi selama 1 minggu
Tikus Wistar (Rattus norvegicus)Pengamatan
sampel di bawah mikroskop
Pembagian hewan coba dalam 8 kelompok
Pengambilan sampel jaringan
Tikus dengan perlakuan gingivektomi pembedahan H-3
Tikus dengan perlakuan gingivektomi + jus buah pepaya 40%
pembedahan H-3
Tikus dengan perlakuan gingivektomi + jus buah pepaya 60%
pembedahan H-3
Tikus dengan perlakuan gingivektomi + jus buah pepaya 80%
pembedahan H-3
Tikus dengan perlakuan gingivektomi pembedahan H-5
Tikus dengan perlakuan gingivektomi + jus buah pepaya 40%
pembedahan H-5
Tikus dengan perlakuan gingivektomi +jus buah pepaya 60%
pembedahan H-5
Tikus dengan perlakuan gingivektomi + jus buah pepaya 80%
pembedahan H-5
Dilakukan anestesi dan dekapitasi pada hari ke 3 dan 5
-
46
4.9 Analisis Data
Hasil pengukuran jumlah yang positif pada tikus kontrol dan perlakuan
dianalisa secara statistik dan dilakukan uji hipotesis kompratif dan korelatif
adalah sebagai berikut :
a. Uji One-Way Anova : bertujuan untuk membandingkan nilai rata – rata dari
masing – masing kelompok perlakuan dan mengetahui bahwa minimal ada
dua kelompok yang berbeda signifikan.
b. Post Hoc Tes (Uji Least Significant Difference) : Bertujuan untuk mengetahui
kelompok mana yang berbeda secara signifikan dari hasil tes Anova. Uji
Post Hoc yang digunakan adalah uji Tukey dengan tingkat kemaknaan 95%
(p=0,05).
Uji Korelasi Pearson : Untuk mengetahui besarnya persamaan secara kualitatif
kelompok yang berbeda secara signifikan yang telah ditentukan sebelumnya dari
hasil Uji Post Hoc (LSD).
-
47
BAB V
HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA
5.1 Hasil Penelitian
Penelitian menggunakan tiga kelompok hewan coba. Hewan coba yang
digunakan adalah Tikus Wistar Jantan (Rattus norvegicus) yaitu kelompok positif
dan kelompok perlakuan. Kelompok kontrol positif merupakan kelompok yang
diberikan perlakuan gingivektomi menggunakan bur dengan ukuran diameter
0,5mm pada gingival bagian anterior, tanpa diberikan jus pepaya setelah
perlakuan selama tiga hari yaitu kelompok K3 dan lima hari yaitu kelompok K5.
Kelompok perlakuan merupakan kelompok yang diberikan perlakuan
gingivektomi menggunakan bur dengan ukuran diameter 0,5mm pada gingival
bagian anterior, dan diberikan jus pepaya (Caricca papaya L) secara oral setelah
perlakuan selama tiga hari dengan konsentrasi jus 60% merupakan kelompok
perlakuan P1, 80% merupakan kelompok perlakuan kelompok perlakuan P2 dan
100% merupakan kelompok perlakuan P3 . Perlakuan lima hari dengan
konsentrasi jus 60% merupakan kelompok perlakuan P4, konsentrasi jus 80%
merupakan kelompok perlakuan P5 dan konsentrasi jus 100% merupakan
kelompok perlakuan P6.
Sebelum dilakukan penelitian ini, dilakukan uji pendahuluan terlebih
dahulu. Uji pada 4 hewan coba dengan perlakuan untuk kontrol positif dan
perlakuan yang diberi jus buah pepaya dengan konsentrasi 40%, 60% dan 80% ,
kemudian diamati secara klinis. Namun tidak ada perbedaan pada kontrol positif
dan hewan coba perlakuan yang diberikan jus buah pepaya (Carica papaya L)
dengan konsentrasi 40%, sehingga penelitian ini menggunakan konsentrasi 60%,
80% dan 100%.
-
48
Sampel didapatkan dengan mengambil jaringan gingival pada tikus
(Rattus norvegicus)yang didekapitasi pasca gingivektomi.Lalu dilakukan
pembuatan preparat dengan pewarnaanmenggunakan Haematoxylin-Eosin.
Untuk mengamati gambar hasil pewarnaan Haematoxylin-Eosin diamati
menggunakan software OlyVIA (Olympus Viewer for Imaging Applications).
dengan perbesaran 400 kali.
Berikut ini adalah gambaran dari limfosit pada irisan gingiva pasca
gingivektomi yang didekapitasi pada hari ketiga. Gambaran limfosit yang tampak
berbentuk bulatatau oval dengan sitoplasma berwarna biru keunguan.
Gambar 5.1 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok kontrol positif hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
-
49
Gambar 5.2 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok P1 hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan: O = gambaran limfosit
Gambar 5.3 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompokP2 hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
Gambar 5.4 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompokP3 hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
-
50
Berikut ini adalah gambaran dari limfosit pada irisan gingiva pasca
gingivektomi yang didekapitasi pada hari kelima. Gambaran limfosit yang tampak
berbentuk bulatatau oval dengan sitoplasma berwarna biru keunguan..
Gambar 5.5 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok kontrol positif hari ke-5 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
Gambar 5.6 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok P4 hari ke-5 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
-
51
Gambar 5.7 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok P5 hari ke-5 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
Gambar 5.8 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi P6 hari ke-5 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x
Keterangan : O =gambaran limfosit
-
52
Kelompok Jumlah limfosit hari
ke- 3
K1 30.8
K1 29.8
K1 30.4
K1 30.2
P1 34.3
P1 31.0
P1 30.4
P1 32.0
P2 32.4
P2 30.8
P2 31.7
P2 34.1
P3 35.2
P3 33.7
P3 31.6
P3 37.3
Tabel 5.1 Jumlah limfosit hari ke-3
Kelompok Jumlah limfosit hari
ke -5
K2 29.8
K2 32.0
K2 31.6
K2 32.5
P4 34.5
P4 32.5
P4 34.0
P4 30.8
P5 33.0
P5 32.5
P5 36.4
P5 31.3
P6 38.3
P6 36.0
P6 33.3
P6 35.2
Tabel 5.2 Jumlah limfosit hari ke-5
Keterangan
K1 : Kel. Kontrol 1 tanpa perlakuan, pembedahan hari ke – 3
P1 : Kel. Perlakuan 1 pemberian jus buah pepaya 40% dekapitasi hari ke – 3
P2 : Kel. Perlakuan 2 pemberian jus buah pepaya 60% dekapitasi hari ke – 3
P3 : Kel. Perlakuan 3 pemberian jus buah pepaya 80% dekapitasi hari ke – 3
K2 : Kel. Kontrol 2 tanpa perlakuan, pembedahan hari ke – 5
P4 : Kel. Perlakuan 4 pemberian jus buah pepaya 40% dekapitasi hari ke – 5
P5 : Kel. Perlakuan 5 pemberian jus buah pepaya 60% dekapitasi hari ke – 5
P6 : Kel. Perlakuan 6 pemberian jus buah papaya 80% dekapitasi hari ke – 5
-
53
Tabel 5.3 Histogram efektifitas dari jus buah pepaya terhadap peningkatan limfosit pada gingival pasca gingivektomi
5.2 Analisis Data
Data hasil penelitian berupa jumlah sel limfosit menggunakan analisa
metode One-Way Anova. Sebelum dilakukan pengujian dengan One-Way
Anova., dilakukan uji normalitas dan uji homogenitas ragam. Uji normalitas yang
digunakan adalahShapiro-Wilkkarena jumlah data yang digunakan kurang dari 50
data dan uji homogenitas menggunakan Levene’s Test.Hipotesis ditentukan
melalui suatu rumusan pada uji One-Way Anova. yaitu Ho diterima bila nilai
signifikansi lebih dari 0,05. Ho dari penelitian ini adalah Jus Buah Pepaya (Carica
papaya)tidak berpengaruh terhadap jumlah limfosit pada proses penyembuhan
luka pada gingivapasca gingivektomi tikus wistar (Rattus norvegicus), sedangkan
H1 adalah Jus Buah Pepaya (Carica papaya) berpengaruh terhadap jumlah
30.3
31.925 32.25
34.45
31.47532.95 33.3
35.7
0
5
10
15
20
25
30
35
40
Kontrol Positif Jus 60% Jus 80% Jus 100%
Hari ke-3
Hari ke-5
-
54
limfosit pada proses penyembuhan pasca gingivektomi tikus wistar (Rattus
norvegicus).
5.2.1 Uji Normalitas Data
Pengujian normalitas dilakukan dengan menggunakan uji Shapiro-Wilk.
Uji normalitas terpenuhi jika nilai signifikansi hasil penghitungan p>0,05.
Didapatkan hasil pengujian normalitas sebagai berikut.
Tabel 5.4 Uji Normalitas hari ke-3
Tabel 5.5 Uji Normalitas hari ke-5
Berdasarkan pada tabel diatas, didapatkan nilai signifikansi sebesar
0,069 pada hari ketiga dan 0,760 pada hari kelima. Jika nilai signifikansi
dibandingkan dengan p=0,05 maka dapat disimpulkan bahwa nilai signifikansi
lebih besar daripada 0,05. Sehingga, dari pengujian ini dapat diketahui bahwa uji
normalitas terpenuhi dan data berdistribusi normal.
5.2.2 Uji Homogenitas Ragam
Pengujian homogenitas ragam dilakukan dengan menggunakan Levene’s
Test. Uji homogenitas ragam dikatakan terpenuhi jika nilai signifikansi hasil
penghitungan p>0,05. Dari hasil analisis data didapatkan pengujian homogenitas
ragam sebagai berikut.
Tests of Normality
.148 16 .200* .965 16 .760J Limfosit hari-5Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk
This is a lower bound of the true significance.*.
Lilliefors Significance Correctiona.
Tests of Normality
.168 16 .200* .896 16 .069J Limfosit hari-3Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk
This is a lower bound of the true significance.*.
Lilliefors Significance Correctiona.
-
55
Test of Homogeneity of Variances
J Limfosit hari-3
1.998 3 12 .168
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
Tabel 5.6 Uji Homogenitas hari ke-3
Tabel 5.7 Uji Homogenitas hari ke-5
Data pada Tabel menunjukkan koefisien Levene statistissebesar
1,998dengan nilai signifikansi sebesar 0,168 pada hari ketiga kemudian koefisien
Levene statistissebesar 0,394 dan nilai signifikasi 0,759 pada hari kelima. Jika
nilai signifikansi dibandingkan dengan p=0,05 maka dapat disimpulkan bahwa
nilai signifikansi lebih besar daripada 0,05. Sehingga, dari pengujian ini dapat
diketahui bahwa uji homogenitas ragam telah terpenuhi.
5.2.3 Uji One-Way Anova
Setelah kedua pengujian yang melandasi uji One-Way Anova telah
terpenuhi, selanjutnya dilakukan pengujian untuk mengetahui perubahan jumlah
limfosit. Sebagaimana telah dijelaskan dalam metode penelitian, hewan coba
yang telah digingivektomi akan diberi jus buah pepaya dengan konsentrasi 60%,
80% dan 100% sebanyak 3 kali sehari, kemudian pada kelompok kontrol positif
hewan coba hanya dilakukan gingivektomi saja. Berikut hasil penghitungan uji
one way Anova.
Test of Homogeneity of Variances
J Limfosit hari-5
.394 3 12 .759
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
-
56
ANOVA
J Limfosit hari-3
34.987 3 11.662 4.297 .028
32.567 12 2.714
67.554 15
Between Groups
Within Groups
Total
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
ANOVA
J Limfosit hari-5
36.802 3 12.267 3.710 .043
39.677 12 3.306
76.479 15
Between Groups
Within Groups
Total
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Tabel 5.8 Uji Anova hari ke-3
Tabel 5.9 Uji Anova hari ke-5
Data pada Tabel menunjukkan nilai p = 0,028 pada hari ketiga dan p =
0,043 pada hari kelima menunjukan bahwa nilai signifikansi lebih kecil daripada
p = 0,05, maka Ho ditolak sehingga dapat disimpulkan bahwa penggunaan Jus
Buah Pepaya (Carica papaya) berpengaruh terhadap jumlah limfosit pada proses
penyembuhan luka gingival pasca gingivektomipada tikus wistar (Rattus
norvegicus). Kesimpulan yang dapat diambil berdasarkan uji One-Way anova
adalah terdapat perbedaan yang jumlah peningkatan limfosit dari tiap kelompok.
5.2.4 Uji Post Hoc Test
Analisis mengenai perbedaan rata-rata dari ketiga kelompok dapat
diketahui melalui uji Post-Hoc Tukey. Metode Post-Hoc yang digunakan adalah
Uji High Standard Deviation (HSD). Pada uji ini, suatu data dikatakan berbeda
secara bermakna apabila nilai signifikansi p
-
57
Kelompok Kelompok Pembanding P Keterangan
K3 P1 (60%) 0.525 Tidak signifikan
P2 (80%) 0.378 Tidak signifikan
P3 (100%) 0.018 Signifikan
P1 K3 0.525 Tidak signifikan
P2 0.992 Tidak signifikan
P3 0.188 Tidak signifikan
P2 K3 0.378 Tidak signifikan
P1 0.992 Tidak signifikan
P3 0.188 Tidak signifikan
P3 K3 0.018 Signifikan
P1 0.188 Tidak signifikan
P2 0.238 Tidak signifikan
Tabel 5.10 U