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Actinobacillus pleuropneumoniae Integrantes Caballero Huerta Jose Moises Hernández Alejandro Francisco Hernández Nieto Carlos Alfonso Rangel Garcia Roberto Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán. Medicina Veterinaria y Zootecnia. Bacteriología y Micología

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Actinobacillus pleuropneumoniae

Integrantes● Caballero Huerta Jose Moises● Hernández Alejandro Francisco● Hernández Nieto Carlos Alfonso● Rangel Garcia Roberto

Universidad Nacional Autónoma de México.Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán.

Medicina Veterinaria y Zootecnia.Bacteriología y Micología

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Actinobacillus pleuropneumoniae

Dominio: BacteriaPhylum: ProteobacteriaClase: GammaproteobacteriaOrden: PasteurellalesFamilia: PasteurellaceaeGénero: Actinobacillus

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Actinobacillus pleuropneumoniaeSon bastones o cocobacilos Gram negativos, anaerobios facultativos, ureasa y oxidasa positivos.

Patógeno obligado del cerdo, coloniza las tonsilas y el tracto respiratorio superior.

Es el agente etiológico de pleuroneumonía porcina; enfermedad de cerdos en crecimienton, con presentación aguda, subaguda y crónica.

es

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Factores de virulencia

Para poder crecer y colonizar al hospedero, A. pleuropneumoniae cuenta con los siguientes mecanismos

● Cápsula con actividad antifagocitica.● Toxinas Apx I, II, III, IV con actividad citotóxica.● Proteasas de IgA secretora

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Signos

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Otras especies de interés veterinario

● A. lignieressi (afecta sobre todo a los bovinos y a los ovinos)● A. equuli (Patógeno de equinos y poco importante en porcinos)● A. suis (Importante sólo en porcinos)● A. seminis (Principalmente de ovinos y caprinos, causa problemas reproductivos)

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Caso Clínico

Descripción: Se realizó un estudio para determinar que pruebas de PCR son más sensibles al momento de detectar Actinobacillus pleuropneumoniae en cerdos infectados subclinicamente.

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Pruebas utilizadas

Se utilizaron 8 pruebas diferentes de PCR para identificar los diferentes serotipos y especies con los que se trabajo los cuales son:

I.- Test descrito por Sirois.II.- Test omlA descrito por Savoye. III.- Test dsbE-like descrito por Chiers.IV.- Test aroA descrito por Hernanz Moral.V.- Test apxIVA nested PCR descrito por Schaller.VI.- Test cps-cpx multiplex PCR descrito por Lo.VII.- Test omlA multiplex PCR descrito por Gram.VIII.- Kit comercial multiplex PCR (Adiavet App PCR, Adiagéne)

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Resultados

● omlA, omlA multiplex test y apxIVA eran pruebas específicas para A. Pleuropneumoniae. Las pruebas cps-cpx y la PCR comercial (Adiavet) dieron positiva a la especie A. Lignieresii. Cepas de A. Porcitonsillarum dieron positivo en las pruebas dsbE. Las pruebas de omlA y PCR multiplex (Adiavet App) amplificaron las bandas descritas que corresponden a los diferentes serotipos de pleuropneumoniae. Sin embargo diferentes cepas probadas no eran detectadas por cps-cpx PCR.

● Las tonsilas almacenadas a -20°C, permiten la identificación del patógeno al menos por 120 días. A diferencia de aquellas mantenidas a 4°C que sólo arrojan resultados positvios a A. Pleuropneumoniae por lo menos 2 semanas. Tonsilas mantenidas a temperatura ambiente, únicamente por 8 días. Muestras con 2 días de almacenamiento arrojan resultados negativos.

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Discusión

Varias pruebas de PCR para la detección de A. pleuropneumoniae en cerdos portadores han sido descritos e incluso comercializados, en este estudio se llevó a cabo una comparación de la especificidad y la sensibilidad de 8 de estos PCR con las mismas muestras, es esencial la especificidad de éstas pruebas por especie para validar resultados positivos.

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Discusión.

● EL PCR apxIVA (5°) y los dos omlA (2° y 7°) probaron estricta especificidad para A. pleuropneumoniae, siendo por lo tanto pruebas muy confiables para ésta especie.

● Otros como Adiavet App PCR (8°) señalaron positivo con A. linieresii y A. equuli. no implica que se deba evitar su uso, ya que es poco probable que estas especies sean aisladas de los cerdos.

● El dsbE-like (3°) dió positivo con A. porcitonsillarum (especie no descrita al tiempo que fué la prueba fue creada) complicando la interpretación y la fiabilidad.

● aroA (4°) mostró una baja sensibilidad analítica, pese a que se reportó una alta sensibilidad cuando se probó en cultivos puros.

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SE: sensibilidadSP: especificidadb: utilizando un cultivoc: sin cultivo previo.

Sensibilidad, especificidad y acuerdo (k) de la técnica de aislamiento estándar, aislamiento IMS y pruebas de PCR para la detección de A. pleuropneumoniae de tonsilas de especímenes de biopsia

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Conclusión

La detección bacteriana por PCR se ha propuesto como una prueba complementaria para confirmar resultados serológicos positivos para la identificación de cerdos que son portadores de A. pleuropneumoniae. Si bien sólo estudios epidemiológicos más extensos con un mayor número de rebaños puede confirmar la idoneidad de este estrategia, los datos presentados en este estudio sugieren que la aplicación de pruebas de detección basadas en PCR aumentaría la precisión de la detección de animales infectados al confirmar los resultados de ensayos serológicos, especialmente en situaciones conflictivas. Además, estos ensayos pueden tener un papel importante que desempeñar en comprender la base biológica de la persistencia de la infección en cerdos inmunológicamente positivos e inmunológicamente no sensibles clínicamente sanos.