polimorfisme tonsil (autosaved)

Upload: deviyanti-aulia-umili

Post on 25-Feb-2018

218 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    1/8

    Toll - Like Receptor 4 Gene (TLR4), tapi bukan TLR2, Modifikasi

    Polimorfisme Risiko Penyakit Pada Tonsil an! "isebabkan ole#

    $akteri StreptococcusandHaemophilus influenzae

    Kyriaki Liadaki, Efthimia Petinaki, ]Charalampos Skoulakis, Paraskeui Tsirevelou,

    Dimitra Klapsa, Anastasios E. ermenis, dan !atthaios Speletas

    Departemen "munolo#i dan $isto%ompati&ility, 'niversitas Thessaly !edi%al S%hool,

    (iopolis, Larissa, )unani

    Departemen !ikro&iolo#i, 'niversity of Thessaly !edi%al S%hool, (iopolis, Larissa,

    )unani* dan

    Departemen T$T, +umah Sakit 'mum olos, olos, )unani

    Penyakit tonsil -tonsilitis &erulan# dan atau hipertrofi tonsil/ adalah salah satu

    #an##uan palin# umum yan# ter0adi pada manusia, &akteri penye&a& yan# palin#serin# adalah Streptococcus-kelompok A Streptococcus beta-Haemolitic1AS]/ and

    Haemophilus influenzae. Sampai saat ini, &elum ada penelitian yan# menyelidiki

    men#apa &e&erapa individu le&ih rentan terhadap infeksi tonsil yan# dise&a&kan oleh

    &akteri tertentu daripada yan# lain. Tu0uan dari penelitian ini adalah untuk

    men#un#kap kemun#kinan hu&un#an antara polimorfisme Toll2like reseptor #ene

    -TL+/ den#an penyakit tonsil. Polimorfisme TL+32+4567, TL+82D399, dan

    TL+82T699" di&a#i dalam 634 kelompok pasien yan# men#alami tonsilektomi karena

    tonsilitis &erulan# -n : 385/ dan hipertrofi tonsil -n : ;3/ dan 385 donor sumsum

    tulan# yan# sehat. $u&un#an polimorfisme terse&ut den#an terisolasinya

    strain &akteri setelah tonsilektomi 0u#a diselidiki. !enariknya, pem&a, 95? %onfiden%e interval 1C"] >,>@2

    @,49, P : ,6;* untuk polimorfisme TL+82T699", =+ : 6.>, 95? C" : >,3924,3, P

    : ,36/, dan hu&un#an ini le&ih mendalam pada pasien den#an tonsilitis &erulan#.

    Se&aliknya, yan# Kehadiran polimorfisme TL+82T699" dikaitkan den#an 3 kali lipat

    penurunan risikoHaemophilus influenzae%arria#e -=+ : ,6;, 95? C" : ,>52,9@, P

    : ,6;/. Pada akhirnya, tidak ada per&edaan yan# si#nifikan yan#

    men#amati, men#in#at #enotipe dan alel frekuensi dari polimorfisme yan# dise&utkan

    di atas, antara pasien dan kontrol. Temuan kami menun0ukkan &ah8264? dan >@263? dari pasien, masin#2masin#, adalah

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    2/8

    &akteri yan# palin# umum menye&a&kan penyakit tonsil ->, >5, >9, 6, 68/. (akteri

    yan# sama, &a#aimanapun, 0u#a telah diisolasi dari tonsil individu sehat -68/. Se%ara

    umum, tidak ada per&edaan yan# si#nifikan pada variasi flora mikro&a pasien den#an

    penyakit tonsil dan pada kontrol sehat yan# telah diamati -63, 68/. =leh karena itu,

    mun%ul dan masih terdapat pertanyaan yan# &elum ter0a/, perlu di%atat &ah8/.

    Studi a, >6/. Pada akhir ini, sekumpulan

    Toll Like +eseptors -TL+s/ merupakan peran utama, evolusi &akteri yan# telah

    diakui Asso%iated !ole%ular Patterns -PA!Ps/ hadir pada se&a#ian &esar 0enis

    mikroor#anisme -9/. Di antara mereka, TL+3 dan TL+8 yan# terletak di

    permukaan sel dan men#enali produk &akteri unik untuk menyeran# or#anisme,termasuk AS danHaemophilus influenzae-3, 38, 6>/. (aru2&aru ini, polimorfisme

    Sin#le u%leotide Polymorphisms -SPs/ dari TL+3 dan TL+8 telah dikaitkan

    den#an reseptor hyporesponsiveness dan immunopatholo#y, termasuk kerentanan

    terhadap &akteri, 0amur, dan infeksi virus -36/. amun, kontri&usi yan# mun#kin dari

    SP ini menu0u immunopatholo#y tonsil &enar2&enar tidak diketahui.

    Tu0uan dari penelitian ini adalah untuk meneliti apakah

    SP dari TL+3 and TL+8, khususnya, TL+32+4567 -SP data&ase 1d&SP]

    penam&ahan nomor rs54864;/, TL+82D399 -d&SP penam&ahan nomor

    rs89;@49/, dan TL+82T699" -d&SP penam&ahan nomor. rs89;@49>/, terkait

    den#an AS and infeksi Haemophilus influenzae, mempen#aruhi virulensi dan

    kemampuan untuk menye&a&kan penyakit tonsil.

    M%T&"% "' $''

    Kelompok sampel. Ti#a ratus dua puluh tu0uh pasien ->46 laki2laki,

    >58perempuan* usia rata2rata, >3,@ tahun* rentan# usia, 6259 tahun/ yan# men0alani

    tonsilektomi total atau parsial antara anuari 3@ dan anuari 3> yan# terdaftar di

    penelitian. Para pasien dikate#orikan ke dalam dua kelompokF tonsilitis &erulan#

    -+T/ kelompok -n : 385 pasien* >6> laki2laki, >>8 perempuan/ dan kelompok T$ -n :

    ;3 pasien* 83 laki2laki, 8 perempuan/. Pasien den#an tonsilitis &erulan# yan#

    memiliki setidaknya ti#a episode di masin#2masin# 6 tahun se&elumnya, lima episodedi setiap 3 tahun, atau tu0uh episode dalam > tahun dikate#orikan ke dalam kelompok

    >, sementara pasien den#an hipertrofi tonsil disertai den#an menden#kur, disfa#ia,

    pernapasan mulut, dan sindrom apnea tidur tapi tanpa tonsilitis &erulan#

    dikate#orikan ke dalam kelompok 3. Pasien yan# menerima anti&iotik 3 min##u

    se&elum operasi dikeluarkan. =perasi dilakukan selama periode ketika pasien &e&as

    dari #e0ala. Spesimen ten##orokan s

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    3/8

    Se&uah penelitian kohort dari 385 donor sumsum tulan# yan# sehat -(!Ds/

    ->> laki2laki, >65 perempuan* usia rata2rata, 65,5 tahun* rentan# usia, >92@5 tahun/

    direkrut di#unakan se&a#ai kelompok kontrol yan# sehat untuk men#estimasi

    prevalensi dari SP yan# dianalisis dalam populasi )unani se%ara umum.

    Semua sampel &erasal dari individu2individu yan# tidak &erhu&un#an yan#

    etnis )unani, dinilai den#an kuesioner. Studi ini disetu0ui oleh "nstitusi De hari. ram stain dilakukan pada

    semua spesimen untuk men#evaluasi leukosit dan flora mikro&a apa yan# ditemukan.

    Pada isolasi &akteri dalam kultur murni, diperoleh den#an memilih koloni yan#

    terisolasi, kemudian diidentifikasi den#an tes &iokimia yan# tersedia se%ara komersialdan &ila diperlukan men##unakan metode identifikasi molekuler ->;, 33/.

    "eteksi molekuler "' dan R' bakteri. Empat individu diam&il

    poton#an 0arin#an tonsil dari setiap pasien yan# dipilih untuk ekstraksi simultan

    DA dan +A, men##unakan kit komersial -"nvitro#en, CA/, &erdasarkan

    instruksi pem&uatan. Selain itu, identitas ekstrak +A dikonfirmasi den#an

    elektroforesis, setelah >2menit di%erna pada suhu 64 G C den#an &e&as Dase

    +ase -7ia#en, Cra

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    4/8

    pada L( medium -'S(, Cleveland, =$/, men#in#at PC+ dan peruntunan yan#

    telah dilakukan dan di0elaskan seperti di atas -3@/.

    'ntuk menferifikasi hasil yan# diperoleh den#an men##unakan >@S r+A,

    semua spesimen yan# diperiksa, men##unakan primer spesifik untuk AS and

    Haemophilus influenzae->;, 33,3@/. Se%ara khusus, primer PC+ untuk #en AS yan#

    primer for5 detik, 5GC selama 6 detik, dan 43GC selama

    6 detik dan > menit pada 43GC setelah siklus terakhir. PC+ primer untuk #en

    Haemophilus influenzayan# primer for@, 39/. Se%ara sin#kat, di kedua reaksi primer for

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    5/8

    'ntuk semua PC+ yan# di0elaskan di sini, total > sampai 3 n# DA

    diamplifikasi dalam %ampuran 6l reaksi %ampuran men##unakan @3,5! setiaptrifosfat deoIynu%leoside, 3 pmol primer masin#2masin#, >,5 m! !#Cl3, dan >, '

    Taq polymerase -"nvitro#en,'nited Kin#dom/ dalam &uffer yan# disediakan oleh

    pem&uatnya. Semua PC+ dan prosedur pen%ernaan di&a6* Chi%a#o, "L/. Selain itu, penyimpan#an

    dari $ardy2Nein&er# eOuili&rium dievaluasi men##unakan ArleOuin soft>*httpF%mp#.uni&e.%hsoft?

    dan @,48?, masin#2masin#, untuk TL+82T699" 1P : ,853]* dan >,4? dan ,@>?,

    masin#2masin#, untuk TL+32+4567 1P : ,56]/. Selain itu, tidak ada per&edaan

    yan# si#nifikan dalam #enotipe dan alel yan# frekuensinya telah terse&ut di atas SP

    ditemukan ketika dua kelompok tonsil yan# dipisah kemudian di&andin#kan den#an(!Ds -untuk kelompok +T, P : .@; dan P : ,5>3, masin#2masin#, untuk TL+82

    D399* P : .;9 dan P : ,@6, masin#2masin#, untuk TL+82T699"* dan P : ,669

    dan P : ,338, masin#2masin#, untuk TL+32+4567* untuk kelompok T$, P : ,>4

    dan P : ,;5, masin#2masin#, untuk TL+82D399* P : .83 dan P : ,3@4,

    masin#2masin#, untuk TL+82T699"* dan P : ,54@ dan P : ,544, masin#2masin#,

    untuk TL+32+4567/.

    Pada akhirnya, tidak ada korelasi yan# si#nifikan dari setiap SP den#an

    kelompok penyakit tonsil -r : 2 ,@8 dan P : ,>34 untuk TL+82D399, r : 2 ,64

    dan P : ,6; untuk TL+82T699", r : ,4 dan P : ,;@@ untuk TL+32+4567/ atau

    usia -r : 2 .>8 dan P : ,485 untuk TL+82D399, r : 2 ,>5 dan P : ,4>6 untuk

    TL+82T699", r : ,65 and P : .8> untuk TL+32+4567/ diamati -&r. >/.

    http://cmpg.unibe.ch/software/arlequin3http://cmpg.unibe.ch/software/arlequin3
  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    6/8

    ubun!an antara polimorfisme TLR den!anStreptococcus pyogenesdan

    infeksi Haemophilus influenzae. Di antara pasien den#an penyakit tonsil,

    $aemophilus influenae telah diisolasi dari >5 pasien -63,>?/ dan AS diisolasi

    dari 6; ->>,@?/, sedan#kan kedua &akteri diidentifikasi di > pasien ini. Aki&atnya,

    kami mem&andin#kan prevalensi TL+ polimorfisme dalam su&kelompok pasien

    sesuai den#an penye&a& penyakit tonsil. Seperti terlihat pada Ta&el >, TL+82D399dan polimorfisme TL+82T699" yan# san#at terkait den#an AS, karena pem&a/.

    Temuan ini 0u#a mendalam &ahkan untuk pem&a,@? di&andin#kan ;,8?, rasio odds : 6,, 95?

    C" >,3624,3;, P : ,>9* frekuensi alel, >,;? di&andin#kan 8,3?, rasio odds : 3,98,

    95? C" : >,3>24,>6, P : .3>/. Pada Se&aliknya, tidak ditemukan hu&un#an antara

    polimorfisme TL+32+4567 den#an AS -P : ,8>; dan P : ,8>9 untuk #enotipe

    dan frekuensi alel, masin#2masin#/. Selain itu, kami 0u#a men#amati &ah,>32@,35/, sedan#kan kehadiran polimorfisme TL+82D399 0u#a dikaitkan

    den#an 3,3 kali menin#katkan risiko, tetapi per&edaannya tidak &ermakna se%ara

    statistik -P : ,45, 95? C" : ,982@,63/. Pada akhirnya, pem&a@2>,35, P : ,>6>/. Di

    sisi lain, kehadiran SP TL+32+4567 tidak mempen#aruhi infeks Haemophilus

    influenzae -Ta&el 3/. Se&uah analisis le&ih lan0ut men#enai kelompok +T dan T$tidak men#un#kapkan hu&un#an yan# si#nifikan antara polimorfisme TL+ dan

    infeksiHaemophilus influenzae-data tidak ditun0ukkan/.

    Seperti dise&utkan di atas, kedua strain &akteri yan# diisolasi

    dari > pasien -5 laki2laki, 5 perempuan* &erarti standar deviasi 1SD] usia, 9,> Q @,6

    tahun* ; pasien den#an +T dan 3 den#an T$/. !enariknya, dalam kelompok ini

    #enotipe dan alel frekuensi kedua polimorfisme TL+8 yan# san#at tin##i

    -6? dan >5?, masin#2masin#/* amun, karena memiliki an#ka yan# rendah dari

    pasien2pasien ini, analisis statistik le&ih lan0ut tidak dilakukan.

    P%M$'''

    'ntuk yan# ter&aik dari pen#etahuan kita, ini adalah studi pertama yan#men#hadirkan hu&un#an yan# kuat antara polimorfisme TL+ dan penyakit tonsil.

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    7/8

    Analisa &esar kohort pasien dilakukan tonsilektomi karena tonsilitis &erulan# dan

    atau hipertrofi tonsil, adanya ke0elasan &ukti yan# menun0ukkan &ah/. amun, ia telah

    diusulkan operator &ah

  • 7/25/2019 Polimorfisme Tonsil (Autosaved)

    8/8

    terhadap komponen seluler yan# spesifik dari spe%ies AS and Haemophilus

    influenzaemasih &elum tersedia.

    Seperti dise&utkan di atas, kehadiran SP TL+82D399, sendiri atau dalam

    kom&inasi den#an TL+82T699", dikaitkan den#an penin#katan risiko yan# si#nifikan

    untuk ter0adinya infeksi AS di tonsil dan penurunannya, namun tidak si#nifikan,

    kemun#kinan spe%ies Haemophilus influenzae. !eskipun sel2sel men#ekspresikankedua mutasi menun0ukkan ekspresi reseptor TL+8 kuran# dan mereka kuran#

    responsif terhadap stimulasi den#an LPS -63/, a