“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.

Alumno: Lidia Elizabeth Guzman Heras

Curso: Quinto Paralelo: A

Grupo N° 5

Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 23 de junio del 2014

Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 30 de Junio del 2014

PRÁCTICA N° 5

Título de la Práctica: Intoxicación por cloroformo.

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Intraperitonial

Tiempos:

o Inicio de la práctica: 08:24am

o Hora de administración del toxico al cobayo: 08:34 am

o Deceso del animal: 09:02 am (28 minutos)

o Inicio de la destilación: 10:15 am

o Finalización de la destilación: 10:45 am

o Final de la práctica: 12:45 am

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por cloroformo.

2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el

toxico.

3. Adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de

identificación.

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MATERIALES

o Jeringa de 5 cc

o Varilla

o Espátula

o Probeta

o Campana

o Panema

o Bureta

o Soporte universal

o Cinta plástica

o Lámpara de alcohol

o Fosforo

o Pinzas

o Cocineta

o Porta tubo

o Tabla de disección

o Cronómetro

o Equipo de disección

o Bisturí

o Vasos de precipitación 200 y

500 ml.

o Erlenmeyer

o Equipo de destilación.

o Tubos de ensayo

o Pipetas

o Guantes de látex

o Mascarilla

o Mandil

o Gorro

o Zapatones en caso de usar

sandalias

SUSTANCIAS

Cloroformo.

Acido tartárico.

Nitrato de plata.

Ácido clorhídrico.

Potasa alcohólica.

Percloruro de hierro.

Beta naftol.

Timol.

Resorcinol.

Clorhidrato de piperacina.

Cristal de yodo.

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PROCEDIMIENTO

1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.

2. Colocamos el cobayo en el panema.

3. Tener todos los materiales a utilizar listos.

4. Administramos al cobayo, 5 ml de cloroformo por vía intraperitoneal y

anotamos el tiempo.

5. Observamos los efectos que produce en el cobayo.

6. Después de 17 minutos pasado la primera dosis, inyectamos 5 ml más del toxico

y con esto se llegó a la muerte del animal.

7. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del bisturí.

8. Observamos el estado de las vísceras.

9. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras

(picadas lo más finas posibles).

10. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación.

11. Armamos correctamente el equipo de destilación (método de soxhleth),

asegurando que no existan fugas que conlleven a pérdidas del destilado.

12. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara

de alcohol esto con movimiento circular durante 30 minutos (el destilado fue

recibido en NaOH).

13. Con el destilado procedimos a realizar las reacciones de identificación del

cloroformo en medios biológicos.

14. Una vez terminada la práctica se limpia todo el material y el área utilizada.

REACCIONES DE RECONICIMIENTO

1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo

con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se

inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y

que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto

originando un precipitado de cloruro de plata.

2. REACCIÓN DE DUMAS.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene

cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan

formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH ----- ClK + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega

percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en

caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un

precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.

3. REACCIÓN DE LUSTGARTEN.- al calentar la muestra con unos miligramos

de beta naftol y solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un

trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

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Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro;

con resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

4. REACCIÓN DE ROSEBOOM.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la

solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de

piperacina; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta

inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

GRÁFICOS:

Animal de experimentación

cobayo

Extraer las vísceras del

cobayo

Inyectar 10 ml el toxico

(cloroformo)

Preparar el equipo de

destilación

Triturar las vísceras

Observar los síntomas del

cobayo luego de la

administración del toxico

Obtener el destilado para

realizar el análisis

Colocar al cobayo en la tabla

de disección

1

4

8 5 2

7

3

6

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS

REACCIÓN:

Reacción positivo característico precipitado de AgNO3

REACCIÓN DE DUMAS.

Reacción positivo característico color rojo

Reacción positivo característico precipitado de cloruro

de plata

Antes

Antes

Después

Después

En frìo En caliente

Antes Después

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REACCIÓN DE LUSTGARTEN

Reacción positivo característico se observó el color azul.

Reacción positivo característico se observó el

color amarillo.

Reacción positivo característico se observó el color

rojo - violaceo.

Después Antes

Antes Después

Antes Después

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REACCIÓN DE ROSEBOOM

Reacción positivo no se observó la coloración

amarillo-rojiza.

OBSERVACIONES

Hemos observado que al administrar el toxico (cloroformo) por vía intraperitoneal el

cobayo presentó respiración agitada, a los 5 minutos depresión del SNC, perdida de la

actividad motora, lagrimeo, convulsiones y a los 7 minutos presento hipoxia y

finalmente a los 28 minutos murió.

CONCLUSION

Al término de esta práctica podemos darnos cuenta que el cloroformo es muy tóxico, al

observar la rápida acción de depresión del SNC, perdida de movilidad, además de las

convulsiones y la hipoxia que llevaron a la muerte del animal en un periodo de 28

minutos con una dosis de 10 ml de toxico administrada en 2 volúmenes de 5 ml y

finalmente mediante las reacciones de identificación constatamos la presencia de

cloroformo en el destilado de las vísceras.

RECOMENDACIONES

Realizar la asepsia del área a trabajar.

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,

mascarilla.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así

intoxicaciones.

Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y

que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del

toxico.

Después Antes

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CUESTIONARIO

¿QUE ES EL CLOROFORMO?

El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de

fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o

del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y

ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no

inflamable, incoloro, de olor penetrante, dulzón y cítrico.

¿CUAL ES EL EFECTO DEL CLOROFORMO EN LA SALUD?

Inhalación: Actúa como anestésico relativamente potente. Irrita el tracto respiratorio y

produce efectos en el sistema nervioso central, incluyendo dolor de cabeza,

somnolencia, mareos. La exposición a altas concentraciones puede resultar en

inconsciencia e inclusive muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes sanguíneos.

La exposición prolongada puede llevar a la muerte debido a una frecuencia cardíaca

irregular y desórdenes renales y hepáticos.

Ingestión: Causa quemaduras severas de boca y garganta, dolor pectoral y vómitos.

Grandes cantidades pueden causar síntomas similares a los de la inhalación.

Contacto con la Piel: Causa irritación cutánea causando enrojecimiento y dolor.

Elimina los aceites naturales. Puede ser absorbido a través de la piel.

Contacto con los Ojos: Los vapores causan dolor e irritación ocular. Las salpicaduras

pueden causar severa irritación y posible daño ocular.

Exposición Crónica: La exposición prolongada o repetida a los vapores puede causar

daño al sistema nervioso central, corazón, hígado y riñones. El contacto con el líquido

elimina las grasas y puede causar irritación crónica de la piel con grietas y resequedad y

la correspondiente dermatitis. Se sospecha que el cloroformo es un carcinógeno en

humanos.

¿CUALES SON LAS MEDIDAS DE PREACUSION ANTE EL CLOROFORMO?

Tener un límite de Exposición Aérea

Un Sistema de Ventilación adecuado: Se recomienda un sistema de escape local

y/o general para las exposiciones de empleados debajo de los Límites de

Exposición Aérea. En general, se prefiere la ventilación de extractor local

debido a que puede controlar las emisiones del contaminante en su fuente

impidiendo dispersión del mismo al lugar general de trabajo.

Protegerse la piel lo más que se pueda para evitar contacto con el toxico. Usen

vestimenta protectora impermeables, incluyendo botas, guantes, ropa de

laboratorio, delantal o monos para evitar contacto con la piel.

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Protección para los Ojos: Utilice gafas protectoras contra productos químicos

y/o un protector de cara completo donde el contacto sea posible. Mantener en el

de trabajo un área instalación destinada al lavado, remojo y enjuague rápido de

los ojos.

¿CUÁL ES LA TOXICOLOGIA DEL CLOROFORMO?

Datos Toxicológicos: Cloroformo: LD50 oral en ratas: 908 mg/kg; LD50 piel de

conejos: > 20 gm/kg; LC50 inhalación en ratas: 47702 mg/m3/4H; irritation data: piel

de conejos 10 mg/24H abierta leve; Ojo de conejos: 20 mg/24H moderada; Ha sido

investigado como tumorígeno, mutagénico y causante de efectos reproductivos.

Toxicidad Reproductiva: Se han observado defectos al nacimiento en ratas y ratones

expuestos a la inhalación de cloroformo a concentraciones en el aire mayores de 100

ppm. La ingestión de cloroformo por animales de laboratorio gestantes, ha causado

fetotoxicidad pero no defectos al nacimiento y sólo a niveles que causan severos efectos

en la madre.

¿HAY ALGÚN EXAMEN MÉDICO QUE DETERMINE SI HE ESTADO

EXPUESTO AL CLOROFORMO?

Pese a que se puede medir la cantidad de cloroformo en el aire que usted exhala, en la

sangre, en la orina y en los tejidos del cuerpo, no contamos con pruebas fiables que

determinen cuánta exposición de cloroformo ha habido, o si usted experimentará efectos

nocivos en la salud. La medición del cloroformo en los líquidos y los tejidos del

organismo puede ayudar a determinar si usted ha estado en contacto con grandes

cantidades de cloroformo. Sin embargo, estas pruebas solo son de utilidad si se realizan

poco después de que ha habido exposición, debido a que el cloroformo sale rápidamente

del cuerpo.

Las pruebas de sangre para medir la cantidad de enzimas del hígado pueden ayudar a

saber si el hígado presenta daños, pero no se puede determinar si éstos fueron causados

por el cloroformo.

¿EN DONDE SE PUEDE ENCONTRAR EL CLOROFORMO?

Agua: En el medio acuático, el cloroformo se descompone con extrema lentitud.

Debido a su gran volatilidad escapa en forma de gas de los cuerpos de agua

superficiales.

Aire: Debido a su alto grado de volatilidad, el cloroformo llega a la atmósfera, donde se

acumula en pequeñas cantidades. Se descompone por fotólisis.

Degradación, productos de la descomposición: En presencia de agentes oxidantes, el

cloroformo se descompone formando fosgeno y ácido hidroclórico.

Cadena alimentaria: El cloroformo se encuentra en todas partes y, por lo tanto,

también ha sido hallado en los alimentos. El agua potable contiene, en ciertas ocasiones,

grandes concentraciones de cloroformo resultante de la cloración del agua.

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USOS

Hoy en día el cloroformo tiene un importante número de usos tales como:

En química se utiliza en la separación orgánica.

En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión.

Se utiliza en síntesis orgánica.

Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente).

En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química.

Como anestésico.

BIBLIOGRAFÍA

Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-Médico.

Madrid. España

WEBGRAFÍA

http://www.dorwil.com.ar/msds/Cloroformo.pdf

http://cloroformo.org/usos/

http://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs6.html

AUTORIA

Bioq. Farm. Carlos García MSc.

FIRMAS DE LOS INTEGRANTES

__________________ __________________

Elizabeth Guzmán Geovanny Ramón

_________________________

Gisela Fernández

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GLOSARIO

CARCINÓGENO: Cualquier sustancia o agente capaz de desencadenar un cáncer en

las células sanas; no necesariamente tiene que ser un agente que provoque mutación en

el material genético de las células.

FETOTOXICIDAD: Alteración del proceso de desarrollo fetal causado por la

exposición materna a agentes como radiación, virus, gases, drogas o fármacos. Sus

efectos incluyen malformaciones, defectos de crecimiento o muerte fetal.

GESTANTE: Estado de embarazo o gestación. Estado fisiológico de la mujer que se

inicia con la fecundación y termina con el parto.

SOMNOLENCIA: Se refiere a sentirse anormalmente soñoliento durante el día. Las

personas que son soñolientas pueden quedarse dormidas en situaciones o momentos

inapropiados.

TUMORÍGENO: Este adjetivo se aplica a cualquier sustancia que cause formación de

tumores.

ANEXOS: