“AÑO DE LA CONSOLIDACION DEL MAR DE GRAU”

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TEMA: DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACION DE GLUCOSA EN SUERO SANGUINEO.

DOCENTE: Q.F MARIO CARHUAPOMA YANCE

CURSO: BIOQUÍMICA

ALUMNA:

GOZME RAMOS STEFANY

PAREDES HUANUQUEÑO OSCAR RAUL

I. FUNDAMENTO TEORICO

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas.La glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía al combinarlo con el oxígeno de la respiración. Cuando comemos el azúcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el páncreas (islotes pancreáticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucógeno, aminoácidos, y ácidos grasos. Cuando la glucosa en sangre está muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre.

Principio del Método de Determinación cuantitativa de glucosa IVD (Spinreact)

La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido gluconico. El peróxido de hidrogeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromo génico de oxígeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD):

Reacción:

Fundamento:

En el metodo GOD-POD, en un primer paso la glucosa oxidasa cataliza la oxidación de la D-glucosa a acido D-gluconico con formación de peróxido de hidrogeno. Este es utilizado por la peroxidasa para oxidar a la 4-aminofenazona y al fenol, dando lugar a una quinonaimina coloreada. La intensidad de color será proporcional a la concentración de glucosa presente inicialmente. (En ocasiones se utilizan otros sustratos en lugar de 4-aminofenazona+fenol, tales como o-dianisidina, guayacol y ABTS.)

DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACION DE GLUCOSA EN SUERO

SANGUINEO

I. PROCEDIMIENTO.

Preparar los siguientes medios de ensayo:

BLANCO ST MPMP (mL) - - 0.01ST (mL) - 0.01 -

REACTIVO (mL) 1.00 1.00 1.00

Colocar en los 4 tubos de ensayo de acuerdo a los requerimientos del cuadro.

Mezclar e incubar en baño maría a 37º C durante 5 minutos y leer en el espectrofotómetro a 505 nm.

RESULTADOS.

Determinar la concentración mg/dL utilizando el método del factor de calibración.

Datos de lectura del espectrofotómetro:

ST. 2,341Blanco: 0.257Muestra: 1898

Glucosa¿|MP|−|blanco||ST|x|Blanco| x [ST ]

Glucosa (mg)¿1,898−0,2572,341−0,257

¿ 1,6412,081

x 0,01

= 0,787x0, 01

= 0.0078

Llevándolo a mg/dl

= 78,7mg/dl

COMENTARIO

En las dos muestras tomadas de la mesa 1 y 3 los resultados obtenidos son 76,78 y

76,82 mg/dl. Respetivamente. Por lo tanto se encuentra dentro del margen para

considerar valores ubicados dentro de lo normal.

El valor normal está considerado entre 70 y 100 miligramos por decilitro (mg/dL).

DISCUSIÓN

En la presente práctica se logró obtener los resultados del nivel de glucosa de dos

personas. En la actualidad existen varios métodos de análisis de la glucemia, siendo

utilizada en el laboratorio el método GOx. La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada

para la determinación y cuantificación de glucosa libre en los fluidos biológicos, tales

como sangre y orina, en materia prima vegetal y en la industria de los alimentos. Tiene

además muchas aplicaciones en biotecnología, y se utiliza para la fabricación de

biosensores sensibles a glucosa

CONCLUSIÓN

En esta práctica se pudo determinar la concentración de glucosa en sangre utilizando

el método glucosa oxidasa GOx. De la misma forma los niveles de glucemia obtenidos

a través de los cálculos están dentro de los parámetros normales establecidos.

La glucosa oxidasa oxida a la glucosa originando ácido glucónico y H2O2. El peróxido de

hidrógeno liberado reacciona con un cromógeno (fenol/4-aminoantipirina) por la

reacción de Trinder, para dar una quinona que absorbe entre 492 y 550 nm. La

intensidad de color producida es directamente proporcional a la concentración de

glucosa. Puede analizarse por este método cualquier muestra: suero libre de hemólisis,

plasma, líquido cefalorraquídeo, orina, etc.

CUESTIONARIO

1. Cuáles son los valores normales de glicemia?

El valor normal de glucosa se sitúa entre 70 y 100 mg/dl en jóvenes y personas adultas.

En niños, tiende a ser considerado normal entre 40 a 100 mg/dl.

2. En qué condiciones debe tomarse la muestra?

Estar completamente en ayuno el día del examen.

La noche anterior al día del examen se puede ingerir alimentos hasta las 7:00

p.m.

Disponer de tiempo suficiente (tres horas) para permanecer en reposo en el

laboratorio.

No debe fumar antes ni durante la realización del examen.

3. Como procedería si el resultado es 220 mg/dL?

Acudir de inmediato a un médico para realizar una consulta sobre el problema

que acontece.

Cumplir con los pedidos que manda el médico.

Mejorar la calidad de vida en cuanto a la alimentación.

BIBLIOGRAFIA

Blanco A. Química biológica 8va ed. Buenos Aires: El Ateneo; 2006.

Rodolfo H. Química general. 4ta edición. Barcelona: Reverte S.A; 2002.

Freilderfer E. Técnicas de bioquímica y biología molecular. 3ra Ed. España: Reverte S.A; 2004.

Lozano - Galindo. Bioquímica para Ciencias de la Salud. España McGraw - Hill- Interamericana. 2001.

Luque L. y Hermoza A. Biología Molecular e Ingeniería Genética. Barcelona. Hartcourt. 2001.