INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL CIENCIAS BIOLOGICAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA No. 13 Aislamiento de DNA Plasmidico

Guarneros Hernndez Jorge Luis, 4QM1, Seccin IV

INTRODUCCION:

cidos nucleicos: Son compuestos orgnicos de elevado

peso molecular, formados por carbono, hidrgeno,

oxgeno, nitrgeno y fsforo. Cumplen la importante

funcin de sintetizar las protenas especficas de las

clulas y de almacenar, duplicar y transmitir los

caracteres hereditarios. Los cidos nucleicos,

representados por el ADN (cido desoxirribonucleico) y

por el ARN (cido ribonucleico), son macromolculas

formadas por la unin de molculas ms pequeas

llamadas nucletidos.

NUCLETIDOS

Son molculas compuestas por grupos fosfato, un

monosacrido de cinco carbonos (pentosa) y una base

nitrogenada. Adems de constituir los cidos nucleicos

forman parte de coenzimas y de molculas que

contienen energa. Los nucletidos tienen importantes

funciones, entre ellas el transporte de tomos en la

cadena respiratoria mitocondrial, intervenir en el

proceso de fotosntesis, transporte de energa

principalmente en forma de adenosina trifosfato (ATP) y

transmisin de los caracteres hereditarios. Presentes en

el DNA.

NUCLESIDOS

Es la unin de una pentosa con una base nitrogenada, a

travs del carbono 1 del monosacrido con un nitrgeno

de la base. Al establecerse la unin qumica se desprende

una molcula de agua.

Los nuclesidos se identifican de acuerdo a la base

nitrogenada de la cual provienen. Si derivan de bases

purnicas llevan el sufijo osina. Si lo hacen de bases

pirimidnicas se agrega la terminacin idina. Adems, si

el nuclesido est unido a la desoxirribosa se le agrega el

prefijo desoxi. Estas estn presentes en el RNA difiere

con el DNA en una base pirimidica que es el uracilo

OBJETIVOS:

Aislar DNA plasmidico bacteriano, comprobando dicho

aislamiento por medio de una electroforesis

RESULTADOS:

Figura 1 grafica del espectro de absorcin de DNA

purificado.

Calculo de DNA obtenido

=260

22500 . =

0.626

22500 (

1

20)

=1.4x10-6 g/mL

Por el mtodo del nomograma la concentracin es

2.0x10-5 g/mL.

DISCUSIN:

Se hizo una dilucin de DNA puro como patrn para

obtener el espectro UV con el fin de ver como es la

absorcin de luz ultravioleta en dicho polmero,

desacuerdo las bases que lo componen. Adems se

determin la concentracin de DNA por dos mtodos

que es usando un Nomograma y por medio de un siendo

mayor la calculada por el nomograma y esto es porque

no es una prueba tan exacta ya que es a base de tablas

donde en el que se pueden dar errores de medicin.

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

200 220 240 260 280 300

Ab

sorb

anci

a Longitud de onda (nm)

Espectro de absorcion de DNA

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PRACTICA No. 13 Aislamiento de DNA Plasmidico

Resultados de la Cromatografa

Figura 2. Cromatograma obtenido en la prctica.

Muestra RF

Adenina 0.4375

Citosina 0.3544

Guanina 0.3717

Uracilo 0.5696

Timina 0.6282

RNA 0.3205 Citosina

0.4102 Guanina

0.4871 Adenina

0.5769 Uracilo

DNA 0.3376 Citosina

0.3896 Guanina

0.4805 Adenina

0.6233 Timina

Tabla de RF calculados a partir del cromatograma

obtenido.

De acurdo a los resultados los el RNA y DNA contiene

bases nitrogenadas y de acuerdo a los RF comprobamos

que el DNA contiene las bases nitrogenadas, GUANINA,

ADENINA, TIMINA, Y CITOSINA. Mientras que el RNA

contiene las bases nitrogenadas: GUANINA, ADENINA,

CITOSINA Y URACILO. Difiriendo del DNA por la base

pirimidica TIMINA.

.

CONCLUSION

Se comprob las bases nitrogenadas que estn

presentes en DNA y RNA por medio de un

cromatograma

Se obtuvo un espectro de DNA en un intervalo

de longitud de onda de 200 a 300 nanmetros

que corresponde a los Rayos Ultravioleta.

Se vieron diferentes formas de calcular la

concentracin de DNA.

Se conocieron los paso para realizar una

hidrlisis de DNA y RNA

BIBLIOGRAFIA:

1. http://www.terradaily.com/reports/Building_Life_On

_Earth_999.htmlDato del descubrimiento del ADN

en terradaily.com

2. Volver arriba Dahm R (2008). Discovering DNA:

Friedrich Miescher and the early years of nucleic

acid research. Hum Genet 122 (2): 565

581. PMID 17901982.

3. Volver arriba Levene P, (1919). The structure of

yeast nucleic acid. J Biol Chem 40 (2): 415424.