prediktivní a prognostická patologie

Prediktivní a prognostická Prediktivní a prognostická patologiepatologie

Část I Část I

Prediktivní a prognostická patologiePrediktivní a prognostická patologie

Úloha v diagnostice a léčběÚloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principyRegulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavkyMetodiky a požadavky Interpretace výsledkůInterpretace výsledků Klinické aplikace (část II)Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II)Perspektivy (část II)

Diagnostika (onkopatologie)Diagnostika (onkopatologie)

Zpřesnění diagnózy (typizace nádorů)Zpřesnění diagnózy (typizace nádorů) Určení prognózy nádoru – odhad biologického chování Určení prognózy nádoru – odhad biologického chování

resp. přežitíresp. přežití Studium prognostického významu nových markerů Studium prognostického významu nových markerů

(buněčný cyklus, apoptóza) v diagnostice nádorů(buněčný cyklus, apoptóza) v diagnostice nádorů

Prognostické faktoryPrognostické faktory

KlinickéKlinické

- věkvěk

- recidivarecidiva Histologické Histologické

- mitózymitózy

- nekrózy nekrózy

- jaderná polymorfiejaderná polymorfie

- neovaskularizaceneovaskularizace Genetické Genetické Molekulárně biologickéMolekulárně biologické

LéčbaLéčba

Predikce – odhad reakce nádoru (nádorových buněk) Predikce – odhad reakce nádoru (nádorových buněk) na terapiina terapii

Stanovení citlivosti nádoru na terapiiStanovení citlivosti nádoru na terapii Sledování efektivnosti protinádorové léčbySledování efektivnosti protinádorové léčby Studium protinádorového efektu nových potencionálně Studium protinádorového efektu nových potencionálně

účinných látekúčinných látek

CDK, cykliny a inhibitory CDKCDK, cykliny a inhibitory CDK

SSttááddiiuumm CCDDKK CCyykklliinnyy IInnhhiibbiittoorryy CCDDKK

GG11 CCDDKK 22,, 44,, 66 DD11-- 33,, EE CCDDKK 44,, 66 -- IINNKK44 ((pp1155,, pp1166,, pp1188,, pp1199))

CCDDKK 22 -- KKIIPP//CCIIPP ((pp2211,, pp2277,, pp5577))

SS CCDDKK 22 AA

GG22//MM CCDDKK11 ((CCDDCC22)) AA,, BB

Přehled a lokalizace onkogenů a nádory Přehled a lokalizace onkogenů a nádory suprimujících genůsuprimujících genů

(převzato z R. Hesketh, The Oncogene Facts Book, Academic Press, p 41, 1995(převzato z R. Hesketh, The Oncogene Facts Book, Academic Press, p 41, 1995)

Struktura proteinu p53Struktura proteinu p53

(převzato z Cell. Mol. Life Sci., Vol 55, p 17, 1999)(převzato z Cell. Mol. Life Sci., Vol 55, p 17, 1999)

Funkce p53Funkce p53

(převzato z Cell. Mol. Life Sci., Vol 55, p 22, 1999)(převzato z Cell. Mol. Life Sci., Vol 55, p 22, 1999)

Protein 27 a jeho role v buněčném cykluProtein 27 a jeho role v buněčném cyklu

Metodiky běžně používanéMetodiky běžně používané Metodiky používané nedostatečněMetodiky používané nedostatečně Metodiky běžně nepoužívanéMetodiky běžně nepoužívané PožadavkyPožadavky

- odebrání a zpracovaní materiáluodebrání a zpracovaní materiálu

- archivace materiáluarchivace materiálu

- archivace výsledkůarchivace výsledků

MetodikyMetodiky

Metodiky běžně používanéMetodiky běžně používané

Určení proliferační aktivity (imunohistochemické Určení proliferační aktivity (imunohistochemické stanovení Ki67, PCNA)stanovení Ki67, PCNA)

Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková cytometrie)průtoková cytometrie)

Stanovení diferenciačních markerů (CD), Stanovení diferenciačních markerů (CD), onkoproteinů, onkofetálních antigenů onkoproteinů, onkofetálních antigenů (imunohistochemie, průtoková cytometrie) (imunohistochemie, průtoková cytometrie)

Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory (imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…)(imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…)

Stanovení chromozomálních poruch – především v Stanovení chromozomálních poruch – především v hematoonkologii (FISH, CGH)hematoonkologii (FISH, CGH)

Metodiky používané nedostatečněMetodiky používané nedostatečně

Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu a apoptózybuněčného cyklu a apoptózy

Stanovení exprese proteinů regulovaných růstovými Stanovení exprese proteinů regulovaných růstovými faktory a hormonyfaktory a hormony

Stanovení apoptotického (nekrotického) indexu pro Stanovení apoptotického (nekrotického) indexu pro monitorování průběhu léčbymonitorování průběhu léčby

Stanovení exprese proteinů zapojených do MDRStanovení exprese proteinů zapojených do MDR Stanovení exprese a aktivity telomerázyStanovení exprese a aktivity telomerázy

Metodiky používané nedostatečněMetodiky používané nedostatečně

Stanovení exprese klíčových nádorových supresorů Stanovení exprese klíčových nádorových supresorů jejichž exprese souvisí s činností reparačních jejichž exprese souvisí s činností reparačních mechanizmůmechanizmů

Stanovení exprese produktů genů odpovědných za Stanovení exprese produktů genů odpovědných za reparaci chybného párováníreparaci chybného párování

Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace cytochromu P450cytochromu P450

Stanovení exprese NO-SStanovení exprese NO-S

Metodiky běžně nepoužívanéMetodiky běžně nepoužívané

Proteinové a DNA „micro-arrays“Proteinové a DNA „micro-arrays“

Metodiky běžně používanéMetodiky běžně používanéStanovení exprese receptorů pro růstové faktory Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory

(imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…)(imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…)

Metodiky běžně používanéMetodiky běžně používanéStanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková

cytometrie)cytometrie)

Metodiky běžně používanéMetodiky běžně používanéStanovení diferenciačních markerů (CD), onkoproteinů, atd. Stanovení diferenciačních markerů (CD), onkoproteinů, atd.

Metodiky používané nedostatečněMetodiky používané nedostatečněStanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu

a apoptózya apoptózy

Exprese p27: dobře diferencováný spinocelulární karcinomExprese p27: dobře diferencováný spinocelulární karcinom

Metodiky používané nedostatečněMetodiky používané nedostatečněStanovení exprese klíčových nádorových supresorů jejichž exprese Stanovení exprese klíčových nádorových supresorů jejichž exprese

souvisí s činností reparačních mechanizmůsouvisí s činností reparačních mechanizmů

Linie U87-MGLinie U87-MG

Exprese p21 a p53 Exprese p21 a p53 v buněčnýcyh liních v buněčnýcyh liních gliálních nádorů mozkugliálních nádorů mozku

PožadavkyPožadavky(odebrání a zpracovaní materiálu)(odebrání a zpracovaní materiálu)

Šetrný odběr (rizika artefaktů!!)Šetrný odběr (rizika artefaktů!!) FixaceFixace Zalití do parafínuZalití do parafínu ZmraženíZmražení Přenesení do živného media (explantace, primokultura)Přenesení do živného media (explantace, primokultura)

PožadavkyPožadavky(archivace materiálu)(archivace materiálu)

Fixovaný materiálFixovaný materiál

- archiv blokůarchiv bloků Nefixovaný materiálNefixovaný materiál

- lednice (4 lednice (4 °°C)C)

- mrazicí boxy (-20 mrazicí boxy (-20 °°C)C)

- hlubokomrazící boxy (-80 hlubokomrazící boxy (-80 °°C)C) Živé buňkyŽivé buňky

- tekutý dusík (-196 tekutý dusík (-196 °°C)C)

PožadavkyPožadavky(archivace výsledků)(archivace výsledků)

Obrazové databáze (CD, software)Obrazové databáze (CD, software)

Interpretace výsledkůInterpretace výsledků

Jednoznačné prognostické indikátoryJednoznačné prognostické indikátory Součást komplementární diagnostikySoučást komplementární diagnostiky Součást studiíSoučást studií

prediktivní a prognostická patologie

Documents