PREPARASI BAHAN ELISA Bicarbonate BufferNa2CO3: 0,0329 gramNaHCO3: 0,073 gramDI Water: 25 mLNaN3 (Pengawet) : 0,01 grampH: 9,6 PBST Kebutuhan PBSu/ washing: 4 x 3 x 96 well x 250 l = 288 mLu/ blocking: 200 l x 96 well =19, 2 mLu/ Ab diluen: 2 x 50 l x 96 well = 9,6 mL= 316,8 mL => 350 mLpembuatan PBS 10 LNaCl: 80 gramNa2HPO4: 14,4 gramKH2PO4: 2,4 gramKCl: 2 gramH2O: 10 Luntuk 350 mL PBSNaCl: 80 / 10.000 x 350 = 2,8 gram Na2HPO4: 14,4/ 10.000 x 350= 0,504 gramKH2PO4: 2,4 / 10.000 x 350= 0,084 gramKCl: 2 / 10.000 x 350 = 0,07 gramH2O: 350 mL

PBST = PBS + Tween 0.05 %Tween 0,05 % = 0,05/100 x 350 = 175 l

Blocking Buffer & Ab Dilution35 mL PBST + 1 % BSABSA 1 % = 1/100 x 35 mL = 0,35 gramNB : Tween memiliki viskositas tinggi , unjung tip dipotong sedikit dan harus steril

Serum / Ab PrimerSerum + blocking buffer Ab sekunder1 : 5000 -> 1 l Ab sekunder + 4999 l blocking buffer