PRINSIP fluoresensi

Hal itu ditunjukkan dalam latihan terakhir bahwa cahaya ada

sebagai bentuk energi disebarkan dalam bentuk gelombang. Sebuah menarik

karakteristik elektromagnetik seperti

gelombang adalah bahwa hal itu dapat mempengaruhi elektron dari molekul

bahwa itu pertemuan, menyebabkan interaksi yang signifikan.

Mereka elektron dalam molekul yang tidak

diadakan terlalu aman dapat digerakkan oleh osilasi

dari berkas cahaya. Tidak hanya elektron ini

terputus dari jalur normal mereka, tetapi mereka

juga dipaksa untuk berosilasi dalam resonansi dengan meninggalnya

gelombang cahaya. Eksitasi ini, yang disebabkan oleh osilasi tersebut,

membutuhkan energi yang disediakan oleh cahaya

balok. Ketika kita mengatakan bahwa molekul menyerap cahaya, ini

pada dasarnya apa yang sedang terjadi.

Setiap kali tubuh fisik menyerap energi, seperti dalam

kasus molekul aktif, energi tidak hanya menghilang, melainkan harus muncul kembali lagi dalam beberapa lainnya

bentuk. Ini manifestasi energi baru mungkin dalam

bentuk reaksi kimia, panas, atau cahaya. Jika cahaya

dipancarkan oleh molekul energi, fenomena

disebut sebagai fotoluminesen. Dalam fotoluminesen

selalu ada selang waktu tertentu antara

penyerapan dan emisi cahaya. Jika waktu

lag lebih besar dari 1/10, 000 dari kedua umumnya

disebut pendar. Di sisi lain, jika

selang waktu kurang dari 1/10, 000 per detik, itu

dikenal sebagai fluoresensi. Dengan demikian, kita melihat bahwa fluoresensi dimulai ketika molekul menyerap energi dari gelombang yang lewat cahaya. The bersemangat molekul, setelah jangka waktu singkat, akan

kembali ke keadaan energi yang mendasar setelah memancarkan

lampu neon. Hal ini penting bahwa panjang gelombang

fluoresensi selalu lebih lama daripada menarik

cahaya. Ini mengikuti hukum Stokes ', yang berlaku untuk cairan

tetapi tidak untuk gas. Fenomena ini disebabkan oleh

Fakta bahwa kehilangan energi terjadi dalam proses sehingga

memancarkan cahaya harus dari gelombang yang lebih panjang. Ini

kehilangan energi, kebetulan, terjadi sebagai akibat dari mobilisasi

dari inti atom relatif berat

molekul daripada perpindahan dari

elektron ringan.

Bahan mikrobiologi yang akan dipelajari dengan

mikroskop fluoresensi harus dilapisi dengan khusus

senyawa yang memiliki kualitas ini fluoresensi.

Senyawa-senyawa tersebut disebut fluorochromes. Auramine

O, acridine orange, dan fluorescein terkenal

fluorochromes. Apakah senyawa akan berpendar

akan tergantung pada struktur molekulnya, suhu,

dan pH medium. Persiapan yang tepat

dan penggunaan bahan fluorescent untuk mikrobiologi

kerja harus mengambil semua faktor ini menjadi pertimbangan.