ZAVOD ZA FIZIOLOGIJU I RADIOBIOLOGIJU

Odjel za temeljne prirodne i pretkliničke znanosti

Sveučilište u Zagrebu, Veterinarski fakultet

Probava preživača

http://www.geekologie.com/2009/01/20/holy-cow-1.jpg

Građa složenog želuca

• Predželuci

• Burag (rumen)

• Kapura (reticulum)

• Knjižavac(omasum)

• Želudac

• Sirište (abomasum)

kutana (bežljezdana) sluznica

fermentacijska razgradnja složenih

UH, osobito celuloze

nastajanje masnih kis (octena,

propionska, maslačna) uz pomoć

mikroorganizama

žljezdana sluznica

građom i funkcijom odgovara

jednostavnom želucu

Građa složenog želuca

http://www.mnzoo.com/education/cowDigestive.asp

Predželuci unutrašnjost

burag kapura knjižavac

H.E. König, H.G. Liebich (2009): Anatomija domaćih sisavaca.

Urednici hrvatskog izdanja: M. Zobundžija, K. Babić, V. Gjurčević Kantura

• zadržavanje, vlaženje, miješanje vlaknate hrane

• fermentativna razgradnja

Pu

t h

ran

e

• Faze preživanja (RUMINATIO):

• REGURGITACIJA – povrat hrane u usta

• REMASTIKACIJA – ponovno žvakanje

• REINSALIVACIJA – ponovno natapanje slinom

• REDEGLUTACIJA – ponovno gutanje

• Eruktacija (CO2, CH4)

www.mun.ca/biology/scarr/142097_ruminant_digestion.jpg

Probava u predželucima

• Sluznica ne luči enzime !!!

• Mikroorganizmi: bakterije, protozoa, gljivice

• pH: 6,5 – 6,8

• organske kiseline nastale mikrobnom razgradnjom

• Anaerobni uvjeti

• mikroorganizmi su anaerobi ili fakultativni anaerobi

Životni ciklus Gustoća (po ml)

Masa (g/L sadržaja)

Udio u masi mikroorganizama (%)

Bakterije 1 x 1010 15 - 27 50 - 90

Amilolitičke 20 - 30 min

Celulolitičke 18 h

Protozoa 6 – 36 h 4 x 105 3 - 15 10 - 50

Gljivice 24 h 1 x 104 1 - 3 5 - 10

Tvorba masnih kiselina

Marshall H. Jurgens (2002): Animal Feeding and Nutrition

O2

Razgradnja ugljikohidrata u buragu

• Izvor energije za za mišiće; ml. žlijezdu i dr. organa

• Omjer ovih kiselina ovisi o vrsti UH kojima se životinja hrani

• Određivanjem KONCENTRACIJE NMK → posredan UVID U

AKTIVNOST MIKROFLORE PREDŽELUDACA

Ugljikohidrati Niže masne

kiseline (NMK)

Octena

Propionska

Maslačna

Mliječna

enzimi

mikroorganizama

↓

Dokaz prisutnosti mliječne

kiseline u sadržaju buraga

• Princip

FERIFENOLAT + MLIJEČNA KISELINA → FERILAKTAT

↑

FERIKLORID + FENOL

UFFELMANOV REAGENS: 10 ml ot. fenola + nekoliko

kapi željezo (III) klorida (ljubičasta boja)

• Pribor i kemikalije

• otopina FENOLA (20 g/L),

• ŽELJEZO (III) KLORID (100 g/L),

• buragov sadržaj,

• kapaljka, epruvete

Postupak

• Ljubičasti ferifenolat uz dodatak mliječne kis. mijenja

se u žuti ferilaktat

Uffelmanov reagens: 2 ml fenola + par kapi feroklorida

Ferilaktat

Buragov sadržaj

(procijeđen)

Razgradnja dušičnih spojeva i

sinteza aminokiselina u buragu

• bakterije u buragu mogu SINTETIZIRATI AMINOKISELINE

• iz NEBJELANČEVINASTIH DUŠIKOVIH SPOJEVA (urea,

nitrati, nitriti) uzimaju N u obliku AMONIJAKA (NH3) i prenose ga na KETOKISELINE → AMINOKISELINE

• intenzitet iskorištavanja nebjelančevinastih N-spojeva

ovisi o AKTIVNOSTI MIKROORGANIZAMA u sadržaju

buraga

↓

PROCJENA AKTIVNOSTI MIKROORGANIZAMA !!!

Dokaz razgradnje nitrita

u sadržaju buraga

• pribor i kemikalije

• REAGENS ZA NITRITE: smjesa reagensa A i reagensa B (3-4 prsta)

• ot. KALIJEVOG NITRITA, KNO2 (0,25 g/L)

Dokaz razgradnje nitrita

u sadržaju buraga

• nakon 15 minuta:

• iz svake epruvete odliti u čistu epruvetu po oko 1 prst sadržaja

• dodati reagens za nitrite u dio koji smo odvojili (ne u izvorne

epruvete!!!)

+ + -

1 2 3

Dokaz razgradnje nitrita

u sadržaju buraga

• nakon 5 minuta ponoviti postupak samo sa pozitivnim probama

• u navedenom primjeru:

2 3

Dokaz razgradnje nitrita

u sadržaju buraga

• nakon još 5 minuta ponoviti postupak samo sa pozitivnim probama

• u navedenom primjeru:

3

Dokaz razgradnje nitrita

u sadržaju buraga

• postupak se ponavlja (sa pozitivnim probama) dok ne dođe do

potpune razgradnje nitrita tj. dok i u zadnjoj epruveti ne

dobijemo negativnu reakciju na nitrite

• zbroji se ukupno utrošeno vrijeme i zabilježi rezultat

• u navedenom primjeru: 15 min. + 5 min. + 5 min. = 25 min.

• ŠTO JE VRIJEME ZA RAZGRADNJU KRAĆE

↓

• AKTIVNOST MIKROORGANIZAMA JE VEĆA

UREA mokraćevina, karbamid, CO(NH2)

• metabolit sinteze bjelančevina

• nastaje u jetri sisavaca iz CO2 i NH3

• transportira se krvotokom do bubrega i

izlučuje mokraćom

• RUMINOHEPATIČKI OPTOK DUŠIKA

Dokaz oslobađanja amonijaka iz

mokraćevine u sadržaju buraga

• Pribor i kemikalije

• buragov sadržaj, mokraćevina, NESSLER-ov reagens

• Promiješati i ostaviti 30 min. nakon čega dodati

sadržaj buraga sadržaj buraga

urea

Nesslerov reagens Nesslerov reagens

POZITIVNO NEGATIVNO

http://www.milkbar.co.nz/Product%20Pages/MBT.htm

Grušanje mlijeka

• MLIJEKO → emulzija masti u koloidnoj otopini bjelančevina i

pravoj otopini mliječnog šećera i soli

• Bjelančevine mlijeka

• KAZEIN → najzastupljenija (20-40 g/L)

• ALBUMINI i GLOBULINI (10 g/L)

• Prije probave mlijeka u SIRIŠTU mlijeko se mora zgrušati

Grušanje mlijeka

Pribor i kemikalije

• mlijeko, lab-enzim, CaCl2, Na-citrat, epruvete, kapaljka

mlijeko mlijeko

Na-citrat (par kapi)

lab-enzim lab-enzim

Promiješati i ostaviti stajati 30 min.

CaCl2

mlijeko mlijeko lab-enzim Na-citrat

lab-enzim

UGRUŠAK NEUGRUŠANO UGRUŠAK

Grušanje mlijeka