UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVAFACULTAD DE RECURSOS NATURALES RENOVABLESDEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS EN CONSERVACION DE SUELOS Y AGUA

INCORPORACIN DE RESIDUOS SOLIDOS DE UN BIODIGESTOR EN UN CAMPO DE RECUPERACIN DE SUELOS PARA EL RECONOCIMIENTO DE IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS SUPTE TINGO MARIACURSO : MICROBIOLOGIA DE SUELOS PROFESOR : ING. GUERE SALAZAR, Fiorella.ALUMNOS : CARHUAPOMA HORNA, Xiomara Yajayra. COLQUIER CORONADO, ROBERTO FLORES GUZMAN, Rudy. MARIN RENGIFO, Janina. CICLO : 2014 I

Tingo Mara Per2014

I. INTRODUCCIONHoy en da la energa de la biomasa es el poder de los residuos. La biomasa incluye la madera, plantas de crecimiento rpido, algas cultivadas, restos de animales, etc. Es una fuente de energa procedente, en ltimo lugar, del sol, y es renovable siempre que se use adecuadamente.La Unin Europea ha destacado el biogs obtenido de degradacin anaerobia como una fuente de energa renovable de gran valor, con mltiples ventajas ambientales y de contribucin al desarrollo econmico sostenible en zonas rurales.En este proyecto que realizaremos, se utilizara biomasa orgnica (estircol de cuy y rastrojo) cuya finalidad es obtener un residuos slidos; mediante la descomposicin de la materia orgnica realizada por acciones bacterianas en condiciones anaerbicas para mejorar la fertilidad y productividad del suelo que ha sido degradado por el cultivo de coca.1.1. Objetivos

1.1.1. Objetivo general

Construir un biodigestor para obtener residuos slidos a partir de biomasa orgnica.

1.1.2. Objetivo especifico

Mejorar la fertilidad del suelo aplicando residuos slidos generados por el biodigestor. Cuantificacin y reconocimiento de los microorganismos presentes en el suelo.

II. REVISION DE LITERATURA

2.1. Biodigestores

Los biodigestores conocidos tambin como plantas (productoras o de produccin) de biogs, son recintos o tanques cerrados donde la materia orgnica y el agua residual permanecen un periodo de tiempo para lograr su descomposicin produciendo biogs y biocarbono. (OLAYA 2006).

Segn (HOHLFELD Y SASSE 1986), la utilizacin de los biodigestores adems de permitir la produccin de biogs ofrece enormes ventajas para la transformacin de desechos:

Mejora la capacidad fertilizante del estircol. Todos los nutrientes tales como nitrgeno, fsforo, potasio, magnesio as como los elementos menores son conservados en el efluente. En el caso del nitrgeno, buena parte del mismo, presente en el estircol en forma de macromolculas es convertido a formas ms simples como amonio (NH4+), las cuales pueden ser aprovechadas directamente por la planta. Debe notarse que en los casos en que el estircol es secado al medio ambiente, se pierde alrededor de un 50% del nitrgeno. El efluente es mucho menos oloroso que el afluente. Control de patgenos. Aunque el nivel de destruccin de patgenos variar de acuerdo a factores como temperatura y

tiempo de retencin, se ha demostrado experimentalmente que alrededor del 85% de los patgenos no sobreviven el proceso de biodigestin. En condiciones de laboratorio, con temperaturas de 35 oC los coliformes fecales fueron reducidos en 50 70% y los hongos en 95% en 24 horas.

2.2 Factores que influyen en el funcionamiento de un biodigestor.Segn (ALCAYAGA ET AL. 1999) 2.2.1 Temperatura y tiempo de retencin: el rango de temperatura y el periodo de retencin dentro del biodigestor, clasifican la fermentacin de la siguiente manera: Fermentacin psicroflica, para un rango de temperatura entre 10 y 20C y ms de 100 das de retencin. Fermentacin mesoflica, para un rango de temperatura entre 20 y 35C y aproximadamente 30 a 40 das de rentencin. Fermentacin termoflica, para un rango de temperatura entre 50 y 60C y ms de 8 das de retencin. Este tipo de fermentacin no es apropiada para plantas sencillas. 2.2.2. Relacin C/N: Los materiales de fermentacin estn compuestos en su mayor parte por carbono (C) y tambin contienen nitrgeno (N), entonces se establece la relacin entre ellos (C/N), la cual influye sobre la produccin de gas. Una relacin de 20:1 hasta 30:1 es aceptable, aunque el valor ideal es de 16 mezclas de materiales de fermentacin con alto contenido de nitrgeno (como por ejemplo, el estircol de gallina) con material de fermentacin con alto contenido de carbono (como el tamo de arroz) generan una elevada produccin de gas.

2.2.3. Niveles de amoniaco: Este parmetro es importante cuando se utilizan determinados materiales que contienen un alto porcentaje, como es el caso de los estircoles de aves. Se recomienda que los niveles dentro de los digestores se mantengan por debajo de los 2000 mg/l, para lo cual se aumentan las diluciones de entrada del material.

2.2.4. PH: Est en funcin de la concentracin de CO2 en el gas, de la concentracin de cidos voltiles y de la propia alcalinidad de la materia prima Las bacterias responsables del mecanismo de produccin de biogs son altamente sensibles a cambios en el pH, oscilando entre 6 y 8 (es deseable un valor entre 7 y 7.2)

2.2.5. Contenido de agua de la mezcla: Las bacterias y otros microorganismos no pueden funcionar efectivamente cuando el contenido de agua de la mezcla es demasiado bajo, y la cantidad de biogs producido ser pequea. Cuando la mezcla es demasiado diluida, se puede digerir relativamente poca materia orgnica y la produccin del biogs es limitada. El uso primordialmente de excreta humana y orines, estircol, y desechos de agricultura, como alimento para el digestor, deber conllevar a una razn de biomasa a agua entre 1:1 y 1:2; y por cada 100 Kg de heces y orina, se requerirn entre 100 y 200 litros de agua. Cuando el material de alimento consta principalmente de residuos vegetales, se requiere ms agua, en una razn de 1:3 o 1: 4. La actividad de mezclar, debe realizarse en forma adecuada y uniforme en el tanque del digestor para promover una digestin efectiva, especialmente si se utiliza biomasa cruda con alto contenido leoso.

2.2.6. Materiales orgnicos: Las actividades pecuarias y agrcolas, producen materiales orgnicos que pueden ser tratados mediante el proceso anaerbico. Otros materiales orgnicos de origen animal tambin pueden emplearse como sustrato para la obtencin de biogs y bioabono. Los residuos vegetales, como paja, pasto y desechos de verdura, pueden fermentarse anaerbicamente debiendo previamente triturarse para evitar la formacin de capa flotante y dar un tratamiento especial en plantas donde se hace una sola carga hasta que el material se descompone.

2.3. La digestin anaerbica

El tratamiento anaerobio es un proceso microbiolgico en ausencia de oxgeno, en el que la materia orgnica se transforma por accin de microorganismos en biogs y bioabono; en l se implica la realizacin de una serie de reacciones bioqumicas donde participan microorganismos, de los cuales una parte son oxidados completamente por el carbono formando anhdrido carbnico, mientras otra es reducida en alto grado para formar 9 metano. El proceso anaerbico ocurre en cuatro etapas, las cuales son descritas a continuacin: (Ramn 2006).

2.3.1. Hidrlisis: En esta etapa, los substratos complejos (celulosa, protena, lpidos) son hidrolizados en compuestos solubles (azcares, aminocidos y grasas) por la accin de enzimas extracelulares de las bacterias. 2.3.2. Acidognesis: En esta etapa, los compuestos solubles son fermentados a cidos grasos voltiles (actico, propinico, butrico), alcoholes hidrogeno y CO2. Esta etapa se conoce tambin como fermentativa. Es decir, es un periodo de produccin intensiva de cidos, que se inicia con los alimentos y compuestos de ms fcil descomposicin, como las grasas, donde hay una alta produccin de dixido de carbono (CO2), cido sulfhdrico (H2S), cidos orgnicos y bicarbonatos; su pH se encuentra en la zona cida, con valores entre 5.1 y 6.8. (Guevara 1996) 2.3.3. Acetanognesis: Esta etapa ocurre cuando las bacterias acetognicas oxidan el cido propinico y el butrico hasta actico e hidrgeno, que son los verdaderos substratos metanognicos. Es decir, es un periodo donde se producen ataques a los cidos orgnicos y compuestos nitrosos, en pequeas cantidades hay produccin de dixido de carbono (CO2), nitrgeno e hidrgeno, bicarbonatos y de compuestos amoniacales; se caracteriza por presentar mal olor debido a la presencia de cido sulfhdrico (H2S), flotacin de gran parte de sus slidos, y un pH an en la zona cida con valores entre 6.6 y 6.8. (Guevara 1996)

2.3.4. Metanognesis: En esta etapa, los ltimos compuestos son tomados dentro de las clulas bacteriales metanognicas convirtindolos en metano y excretndolo fuera de la clula. Este es un periodo de digestin intensiva, de carcter de fermentacin alcalina, en el cual hay una digestin de las materias resistentes, de las protenas, de los aminocidos, y de la celulosa; se caracteriza por la produccin de sales de cidos orgnicos y volmenes de gas, en una mezcla donde hay un alto porcentaje de metano, y el resto corresponde a dixido de carbono (CO2) y nitrgeno. Como caractersticas del material digerido, estn el olor a alquitrn, hay pequeas cantidades de slidos flotantes, y el pH se ubica en la zona alcalina, con valores entre 6.9 y 7.4. Las bacterias metanognicos slo pueden usar un nmero limitado de de sustratos para la formacin de metano, stos son CO2, H2, acetato, metanol, metilamina, y monxido de carbono. (Guevara 1996)

2.4. Productos obtenidos en los biodigestores: el biogs y el bioabono El biogs se puede definir como una mezcla de gases combustibles y su composicin depende del tipo de material orgnico utilizado para su produccin, como se presenta en la tabla 7 [Botero & Preston 1986]. El biogs como cualquier otro combustible gaseoso, puede ser usado para fines domsticos e industriales. Diversos dispositivos son utilizados para aprovechar el biogs como estufas, lmparas, calentadores radiantes y como combustible para motores disel o a gasolina. (Vargas 1992) El efluente tratado que sale de las plantas es un gran fertilizante orgnico, puesto que la mayora de sus nutrientes principales como nitrgeno, fsforo y potasio se conservan, y es conocido como bioabono; su composicin por lo general incluye un 8.5% de materia orgnica, 2.6% de fsforo, y 1% de potasio, con un pH de 7.5 .El uso adecuado de los nutrientes reciclados proporciona mejoramiento en la calidad del suelo y en las siembras representando un beneficio para el agricultor; se ha comprobado que un metro cbico de bioabono producido y aplicado diariamente, pude fertilizar ms de dos hectreas de suelo. El bioabono o efluente lquido puede ser aplicado en forma normal mediante la utilizacin de recipientes, por gravedad o por bombeo. (Vargas 1992)

2.5 Biomasa

La biomasa, sustancia orgnica renovable de origen animal o vegetal, era la fuente energtica ms importante para la humanidad y en ella se basaba la actividad manufacturera hasta el inicio de la revolucin industrial. Con el uso masivo de combustibles fsiles el aprovechamiento energtico de la biomasa fue disminuyendo progresivamente y en la actualidad presenta en el mundo un reparto muy desigual como fuente de energa primaria. Mientras que en los pases desarrollados, es la energa renovable ms extendida y que ms se est potenciando, en multitud de pases en vas de desarrollo es la principal fuente de energa primaria lo que provoca, en muchos casos, problemas medioambientales como la deforestacin, desertizacin, reduccin de la biodiversidad, etc. (Vargas 1992)

2.5.1. Tipos de biomasaSegn (Manual de Biomasa 2002):

Biomasa natural: es la que se produce espontneamente en la naturaleza sin ningn tipo de intervencin humana. Los recursos generados en las podas naturales de un bosque constituyen un ejemplo de este tipo de biomasa. La utilizacin de estos recursos requiere de la gestin de su adquisicin y transporte hasta la empresa lo que puede provocar que su uso sea inviable econmicamente.

Biomasa residual seca: se incluyen en este grupo los subproductos slidos no utilizados en las actividades agrcolas, en las forestales y en los procesos de las industrias agroalimentarias y de transformacin de la madera y que, por tanto, son considerados residuos. Este es el grupo que en la actualidad presenta un mayor inters desde el punto de vista del aprovechamiento industrial. Algunos ejemplos de este tipo de biomasa son la cscara de almendra, el orujillo, las podas de frutales, el serrn, etc.

Biomasa residual hmeda: son los vertidos denominados biodegradables: las aguas residuales urbanas e industriales y los residuos ganaderos (principalmente purines).

Cultivos energticos: son cultivos realizados con la nica finalidad de producir biomasa transformable en combustible. Algunos ejemplos son el cardo (cynara, cardunculus), el girasol cuando se destina a la produccin de biocarburantes, el miscanto, etc.

Biocarburantes: aunque su origen se encuentra en la transformacin tanto de la biomasa residual hmeda (por ejemplo reciclado de aceites) como de la biomasa residual seca rica en azcares (trigo, maz, etc.) o en los cultivos energticos (colza, girasol, pataca, etc.), por sus especiales caractersticas y usos finales este tipo de biomasa exige una clasificacin distinta de las anteriores.

2.6. Bioabono

El bioabono es una fuente importante de nitrgeno fcilmente asimilable para las plantas, el proceso de fermentacin anaerbica enriquece el contenido de nitrgeno del bioabono de 0,5% que tiene al comienzo del proceso, a 2,5%, despus de 16 das de fermentacin anaerbica.

El bioabono producido anaerbicamente est libre de patgenos (bacterias y hongos) que pueden representar un riesgo para la salud, debido a que durante el proceso de fermentacin anaerbica de los insumos se alcanzan temperaturas elevadas hasta de 70C, con este calor se logra prcticamente una pasteurizacin natural, que mata a los patgenos.

En los procesos de digestin anaerbica es imprescindible la medicin y evaluacin de ciertos parmetros que sirven para el monitoreo de los procesos. En la presente investigacin los parmetros han sido la temperatura, el pH y la presin.

En cuanto a la temperatura se determin que al ser elevada por encima de los 30C acelera el proceso catablico del sustrato; sin embargo la oscilacin de temperatura merma considerablemente el proceso. Fue realmente muy dificil mantenerla en 40C (primera prueba) por lo que se opt por trabajar a tempe-ratura ambiente, lo que en parte ha disminuido los resultados esperados.

Referente al pH, al inicio del proceso se registra un valor ligeramente alcalino lo cual fue ajustado a un valor ligeramente cido por ser el recomendado para la mineralizacin. Adems se pudo comprobar que la adicin de cal incrementa el porcentaje de nitrgeno encontrado, pero existe el problema de que incrementa el pH y puede inmovilizar el nitrgeno. Por consiguiente, el valor de pH recomendado para este proceso se ha calculado en 6,5, con un monitoreo permanente para tratar de mantener constante este valor en el transcurso del irocesamiento; en condiciones no controladas el valor de pH tiende a incrementarse paulatinamente, lo que conlleva a la disminucin considerable de la mineralizacin.

La generacin de metano ocurre de manera evidente a partir del cuarto da, incrementndose de manera progresiva, llegando a colmar la capacidad de nuestro digestor en el doceavo da (25 cm de agua) a partir del cual se ha tenido que combustionar, por no haber ms capacidad de almacenamiento. El efecto de este factor se ha dado bsicamente en relacin a la viabilidad de los microorganismos patgenos presentes en el sustrato.

En relacin a la viabilidad de los microorganismos y parsitos, se a demostrado que estos pierden viabilidad en distintos perodos del proceso; de mane-ra general, todos los patgenos pierden viabilidad a los 14 das de procesado el sustrato. La razn de la prdida de viabilidad de los patgenos, probablemente sea las condiciones que se generan al interior del digestor, como la condicin anaerbica que priva de oxgeno a los microorganismos patgenos, en su mayora aerbicos. Por consiguiente, la eliminacin de oxgeno y la generacin de otros compuestos txicos para los microorganismos aerbicos conducen a la inevitable muerte de los mismos. La generacin de presiones considerables por el metano, hace an ms crtica las condiciones para los patgenos.

Finalmente, la produccin de bioabono por digestin anaerbica garantiza una buena mineralizacin del nitrgeno, presente en el sustrato e indispensable para una buena calidad de abono en comparacin al abono no tratado. Adems, garantiza la eliminacin de organismos patgenos presentes en el sustrato inicial, en un lapso de 16-1 8 das, constituyndose as en una buena altenativa rural para el tratamiento adecuado de excretas animales, en beneficio de sus tierras bajo riesgo de contaminacin. (GUEVARA 1996).

2.7. Diversidad microbiana en el suelo y la interaccin planta-microorganismo La diversidad de los microorganismos presentes en el suelo depende de diversos factores como la composicin qumica, textura, disponibilidad de agua, entre otras caractersticas que intervienen en la disponibilidad de nutrientes, as como la tensin de oxgeno en las diferentes partculas que conforman el suelo (Mahmood, 2006). Actualmente la diversidad microbiana se puede estudiar mediante dos estrategias: 1) Aislamiento y caracterizacin de las cepas en medios de cultivo, lo cual permite conocer la diversidad as como inferir algunas funciones de estos microorganismos (Li et al., 2007), pero solo menos de 10% de los microorganismos de suelo podran crecer en los medios de cultivo, entonces este mtodo no puede evaluar la diversidad de toda la comunidad microbiana en suelo. 2) Mtodos moleculares independientes de cultivo, que incluyen aislamiento de DNA metagenmico del suelo y clonacin de algunos genes previamente amplificados por PCR (Zani et al., 2000), permitiendo conocer a los microorganismos cultivables y no cultivables presentes en el suelo (Izquierdo y Nusslein, 2006), pero no se puede evaluar las caractersticas fenotpicas de los microorganismos. Con los mtodos anteriores se ha encontrado cientos de especies por gramo de suelo en suelos agrcolas mientras que suelos de bosques o pastizales (suelos sin labranza) se ha detectado que albergan comunidades con mayor complejidad, encontrando miles de especies por gramo de suelo (Widmer et al., 1999). En estudios de diversidad y taxonoma de los aislados microbianos, los mtodos usados ms comunes incluyen anlisis de DNA, rRNA, protenas (enzimas), composicin celular (cidos grasos, polisacridos extracelulares etc.), y caracterizacin fenotpica (actividad de las enzimas, variedad de fuente de carbono y de nitrgeno, produccin de algunos compuestos especficos, resistencia a antibiticos y agentes qumicos, etc.). Cada uno de estos anlisis se puede usar para evaluar la diversidad en una cierta nivel y un resumen de ellos se presentan en la tabla.2.8. Bacterias fijadoras de nitrgeno como bacterias promotoras del crecimiento vegetal Por su capacidad de fijar nitrgeno, las bacterias fijadoras de nitrgeno se consideran como candidatos de biofertilizante, que se producen en varios pases del mundo. Estos biofertilizantes se producen con diferentes bacterias, incluyendo: 1) Las simbiticas como inoculas para las leguminosas, por ejemplo: Rhizobium leguminosarum bv. trifolii para trbol (Trifolium spp.), Bradyrhizobium japonicum para soya (Glycine max), Sinorhizobium meliloti para alfalfa (Medicago sativa), Mesorhizobium loti para Lotus spp.2) Las bacterias fijadoras de vida libre, como rhizobacterias aisladas de suelo rizosferico (Azospirillum, Klebsiella pneumoniae etc.), o como endfitos aislados dentro tejido de las plantas (Azoarcus, Gluconacetobacter, Phytobacter).

Por otro lado, tambin se usan las bacterias que producen fitohormonas o solubilizan fosfatos y potasio como biofertilizante (Koh Y Song, 2007; Vyas y Gulati, 2009). Ya se sabe que bacterias fijadoras de nitrgeno de vida libre adems de aportar ste elemento al ecosistema pueden participar en otros procesos contribuyendo as a la productividad del ecosistema, en general el beneficio de las bacterias de vida libre en el suelo esta usualmente referido como rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal, que pueden tener un efecto directo o indirecto sobre la planta (Leaungvutiviroj et al., 2010). Un mecanismo indirecto de PGPR es prevenir o disminuir el efecto de uno o ms organismos fitopatgenos (Glick, 1995). Los efectos directos pueden ser la fijacin biolgica de nitrgeno, movilizacin de nutrientes, produccin de fitohormonas dentro de la que destaca el acido indol actico (AIA), movilizacin de nutrientes, produccin de sideroforos, reduccin de niveles de etileno el cual es sintetizado por la planta en respuesta a estrs ambiental. El mecanismo se basa en la capacidad de algunas bacterias para hidrolizar al 1-aminociclopropano-1-carboxilato (ACC, precursor del etileno) y utilizarlo como fuente de nitrgeno, por accin de la enzima ACC- desaminasa (Burd et al., 1998).

III. MATERIALES Y METODOS

3.1. Ubicacin

El presente proyecto se realizara en la ciudad de Tingo mara, la construccin del biogestor ser en el predio de un integrante del grupo, jr Simon Boliva # 247 Tupac Amaru. Cuyo predio dispone un ambiente adecuado y condiciones necesarias para desarrollar sin ningn problema el proyecto y la aplicacin del bioabono obtenido de este ser:

- Lugar : Supte San Jorge- Sector : Buenos Aires- Distrito : Rupa Rupa- Provincia : Leoncio Prado- Departamento : Hunuco3.2. Caractersticas generales de la zona

3.2.1. Caractersticas meteorolgicas

Temperatura media anual: 24.3 C Temperatura mxima: 31.83 C Temperatura mnima: 17.80 C Humedad relativa: 84.24 %3.2.2. Clasificacin ecolgicaDe acuerdo a la clasificacin de zonas de vida o formaciones vegetales del mundo y el diagrama bioclimtico de HOLDRIGE (1987), la zona de estudio se encuentra dentro de la zona ecolgica: Bosque muy Hmedo Premontano Sub Tropical (bmh. PT).3.3. Materiales

3.3.1. Elaboracin del biogestor

Balde de 20 Lt. Estircol de cuy pre composteado. Rastrojo (seco) Agua Vlvula de seguridad Manguera

3.3.2. Laboratorio Pipetas de 1 ml y de 0.2 ml, estriles. Vrtex. Balanza. Esptulas. Campana de flujo laminar o rea estril. Cajas de Petri con medio de cultivo-agar. Varilla de vidrio. Muestra de suelo o agua. Incubadora. Papel aluminio estril. Tubos de vidrio de 15 ml para cultivo con 9 ml de solucin salina 0.85% estril. Matraz Erlenmeyer con tapa con 99 ml de solucin salina 0.85% estril.Soluciones y reactivos

1) Solucin salina 0.85% estril. Adicionar 8.5 g de cloruro de sodio(NaCl) en 1 L de agua destilada.2) Cajas de Petri con medio de cultivo adecuado para el crecimiento.3) Etanol (CH3-CH2-OH).

3.4. Metodologa

3.4.1. Construccin del biogestor y elaboracin de la mescla

Se recoge el estircol de cuy y se compostea por 5 das junto con el rastrojo cultivado. En una bandeja se mescla el estircol de cuy con rastrojo agregando agua y se deja reposar por 5 das. Luego de 5 das se observa si se consigui una mescla homognea de lo contrario se agrega agua y se lo deja reposar por 5 das ms. Una vez pasado los 5 das se deposita en el balde bien cerrado; y se deja reposar por 3 semanas ms.

3.4.2. Aplicacin del bioabono en campo Se realizara un primer anlisis de suelo Se har 1 sola aplicacin en todo el terreno de forma uniforme Despus de 2 meses se tomara un segundo anlisis de suelo para comparar los resultados.

3.4.3. Recoleccin de muestra de suelo Se tom una muestra de 30 cm de suelo de la parte ms significativa del terreno. Se sec el suelo por 3 das a temperatura ambiente. Se moli el suelo. Se tamizo el suelo.

3.4.4. Anlisis de microorganismios

3.4.4.1. Cuenta de microorganismos viables por dilucin en placa

IV. RESULTADOS

Se recolecto el estircol de cuy con biomasa, se lo hizo secar por 5 das, y se lo mesclo en un balde con agua de manera homognea.

Se elabor el biogestor, y se introdujo la mescla de estircol y agua.

Se dej reposar por 2 semanas bajo temperatura ambiente

V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICA

ALCAYAGA, S. (1999). Regulaciones de temperatura y potencial de hidrogeno en un biodigestor anaerbico de lecho de lodo granular expandida. Universidad Tcnica Federico Santa Maria, Valparaiso, Marzo.11p. Disponible en internet: http://PROFESORES.ELO.CL/JGB/alcayagaLC.pdf.RAMON, J.A. (2006). Diseo de un biogestor de canecas en serie para obtener gas metano y fertilizantes a partir de la fermentacin. Revista Ambiental: aire, agua y suelo. Vol. 1, 15 23.GUEVARA, V. A. (1996). Fundamentos bsicos para el diseo de biodigestores anaerbicos rurales. Produccin de gas y saneamiento de efluentes. Centro panamericano de Ingeniera Sanitaria y Ciencias del Ambiente Organizacin Panamericana de la Salud. Lima, 80p.VARGAS P., M. (1992). Los biogestores, alternativa de tratamiento de residuos. Tesis ( Ingeniero Sanitario). Universidad del Valle, Santiago de Cali.Manual de Biomasa 1a edicin San Jos, Costa Rica Copyright 2002, BUN-CA, Setiembre del 2002 HOHLFELD Y SASSE 1986., Potencial de Biogas , Santiago de Chile, septiembre 2007, http://www.inapiproyecta.cl/605/articles-1660_recurso_1.pdf

CNE, Comisin Nacional de Energa. 2006. Manual de Biogas (Eds). 69 p, Santiago. Editado por:Proyecto CHI/00/G32 , Chile: Remocin de Barreras para la Electrificacin Rural con Energas Renovables.

VI. ANEXOS

Figura 1. Ubicacin de la zona de estudio