EFECTO BIOQUMICO DE EMBUTIDOS SOBRE LA PRODUCCIN DE METAHEMOGLOBINA.

lvarez1, S; Bautista1,L. D.; Hernndez1, O. y. Ramrez1, C.

1UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO; FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN C-1

Laboratorio de Toxicologa e Higiene Pblica Q.F.B. Equipo 2 Grupo: 2852

Resumen: El objetivo de este desarrollo experimental fue conocer la tcnica de determinacin de hemoglobina producida por nitritos, adems de comprobar el efecto protector del azul de metileno sobre la hemoglobina y como antdoto; Metahemoglobinemia es una enfermedadprovocada por el exceso de nitratos esta enfermedad clnica que surge de la excesiva conversin de hemoglobina a metahemoglobina, que es incapaz de enlazar y transportar oxgeno. La metahemoglobina se forma cuando la molcula de hemoglobina se oxida de Fe2+a Fe3+.Los productos crnicos aportan menos del 10 por ciento del nitrato en la dieta, pero aportan del 60 al 90 por ciento del nitrito consumido. Esto es bsicamente porque a las comidas tales como perritos calientes, bacn o jamn se les aade nitrito de sodio (como conservador). Frutas, granos y productos lcteos no aportan prcticamente nada de nitratos o nitritos a la dieta.Palabras clave: Nitritos, metahemoglobina, azul de metileno.

Abstract:The aim ofthisexperimentwas todevelopthe techniqueofdeterminationof hemoglobinproducedbynitrite,in addition to checkingthe protective effectofmethylene blueonhemoglobinand asan antidote;Methemoglobinemia isa diseasecausedbyexcessnitratesclinicaldiseasearising fromtheexcessive conversion ofhemoglobintomethemoglobin, whichisunableto bindandcarry oxygen.Methemoglobinisformed whenthe hemoglobin moleculeis oxidizedfromFe2+toFe3+.

Meat productscontributeless than10 percent ofthenitratein the diet,butprovide60 to90 percentof thenitriteconsumed.Thisis basically becausefoodssuchas hot dogs, baconorhamis addedsodiumnitrite(andpreservative).Fruits,grains anddairyproductsprovidevirtuallynonitratesornitritesin thediet.

Keywords:Nitrite,methemoglobin,methylene blue.

Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno

16INTRODUCCION

El nitrato es un compuesto inorgnico compuesto por un tomo denitrgeno(N) y tres tomos de oxgeno (O); el smbolo qumico del nitrato es NO3. El nitrato no es normalmente peligroso para la salud a menos que sea reducido a nitrito (NO2)Un grupo importante de intoxicaciones se expresa a travs de metahemoglobinemia. Se produce metahemoglobinemia cuando la concentracin de metahemoglobina dentro de los eritrocitos circulantes aumenta por encima de su valor normal. Estas intoxicaciones pueden ser causadas fundamentalmente por 3 situaciones:1. Presencia de una hemoglobina con estructura anormal que la hace susceptible a la oxidacin o poco adecuada para la reduccin, o ambos procesos.2. Deficiencia de los mecanismos reductores de hemoglobina.3. Exposicin a drogas o productos qumicos que aumentan el ritmo de oxidacin ms all de la capacidad protectora y reductora de la clula. Los 2 primeros grupos son las metahemoglobinemias congnitas, poco frecuentes.De acuerdo al grado de la metahemoglobina ser el grado de hipoxia anmica, desde una fcil fatigabilidad y disnea de esfuerzo hasta el grado mximo de coma, estupor y muerte.En la metahemoglobina txica el cuadro es ms complicado y muy difcil establecer relaciones entre determinados porcentajes de metahemoglobina y la gravedad de la enfermedad clnica resultante. Una de las razones para ello es el hecho de que los niveles de metahemoglobina de la sangre extrada de los individuos afectados contina cambiando in vitro (siguen actuando los mecanismos reductores enzimticos), de manera que, para cuando se analizan las muestras se obtienen valores que pueden ser inferiores a los valores reales del momento de la toma de la muestra.Pero an siguiendo las indicaciones que nos dan los bioqumicos toxiclogos intervienen otros elementos para complicarnos las cosas. Uno es que la mayor parte de los agentes metahemoglobizantes tienen efectos txicos adicionales agudos y/o txicos que son independientes de su accin metahemoglobinizante y generalmente ms serios.El clorato daa mucho ms por sus efectos corrosivos, hemolticos y nefrotxicos que por metahemoglobinemia.Los nitritos son vasodilatadores y pueden producir hipotensin ortosttica, taquicardia refleja y colapso cardiovascular que pueden ser mucho ms importante que la anemia anxica de la metahemoglobinemia.Otros compuestos como la nitroanilina son depresores del SNC y causan toxicidad hepatorenal adems de su accin productora de metahemoglobina y as deberamos continuar enumerando con cada agente metahemoglobinizante.Algunos factores que favorecen la aparicin de metahemoglobinemia son: Lactantes: como ya se mencion, la hemoglobina fetal forma metahemoglobina ms fcilmente que la hemoglobina del adulto y los recin nacidos tienen 60 a 80 % y los prematuros hasta el 90% de la hemoglobina fetal. A los 5 o 6 meses de edad ya toda la hemoglobina es reemplazada por la forma adulta. Tambin hay una deficiencia relativa de metahemoglobina-diaforasa en este perodo neonatal. El alcohol agrava la metahemoglobina debido quizs a que el NAD necesario para que acte la metahemoglobina-diaforasa est disminuido por la utilizacin en el metabolismo del alcohol. Insuficiencia heptica y otras alteraciones digestivas. Gentica: deficiencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa. Factores que agravan la anoxia como anemia previa, cortocircuito arteriovenoso, hemlisis, shock secundario, edema cerebral u otras causas que aumentan el grado de instauracin del oxgeno.

0-3%Nivel normal

3-10%Sin sntomas clnicos

10-15%Nada o ligera coloracin cutnea griscea.Coloracin chocolate marrn de la sangre

15-20%Cianosis azul-griscea generalizada, usualmente asintomtica

20-45%Cefalea, fatiga, mareos, intolerancia a los ejercicios, sncope.

45-55%Aumento en la depresin del SNC

55-65Coma, convulsiones, falla cardaca, arritmias, acidosis metablica.

>65%Alta incidencia de mortalidad

Tabla 1.Relacion de porcentaje de metahemoglobina y los sntomas causados (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001)

RESULTADOS

Tabla 2. Resultados de las absorbancias en cada uno de los lotes en muestra sangunea de rata wistar (Fuente: FES-C1, laboratorio de toxicologa; 5/05/2011)Equipos Lote Dieta A1A2(630nm)A3 (540nm)

1IAgua y nutricubos -0.114 0.0360.280

2IIJamos y salchicha 0.037 0.0740.380

3IAgua y nutricubos -0.160 0.0230.306

4IIRica en embutidos 0.020 0.0360.300

5IIIRica en embutidos 0.128 0.0710.228

6IIIRica en embutidos 0.062 0.0570.206

7IIIRica en embutidos 0.016-0.0160.008

CLCULOS

Tabla 3.Resultados de Hbt de cada equipo y lote (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001)

Equipo Lote Resultado

1I10.472

2II14.243

3I11.44

4II11.22

5III8.5272

6III7.7044

7III.2992

Tabla 4.Resultados de MHbt de cada equipo y lote (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001)

Equipo Lote Resultado

1I-0.8

2II-0.9

3I-4.3

4II-0.4

5III1.3

6III0.1

7III0.7

Tabla 3.Resultados de % de metaHb en sangre de cada equipo y lote (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001)

Equipo Lote Resultado

1I8.0

2II6.1

3I37.4

4II3.3

5III15.6

6III1.5

7III250

Tabla 3. Resultados de la prctica de determinacin de metahemoglobina en muestra sangunea de rata wistar (Fuente: FES-C1, laboratorio de toxicologa; 5/05/2011)EquiposLoteHb t (g/dL)mHb t (g/dL)% de mHb sang.

1I10.5-0.88.0

2II14.2-0.96.1

3I11.4-4.337.4

4II11.2-0.43.3

5III8.51.315.6

6III7.70.11.5

7III0.30.7250.3

Grafico 1 : Muestra los resultados en % en sangre de Mhb en los tres tratamientos hechos en las ratas

DISCUSIN

La metahemoglobina es una hemoglobina en la cual el hierro ferroso (Fe2+) de la porcin hem est en estado frrico (Fe3+). A causa de esta carga positiva adicional, la sexta posicin de coordinacin del hierro ya no queda disponible para fijar el oxgeno molecular en forma reversible sino que es ocupado por agua u otros aniones.Es decir: las metahemoglobinemias se caracterizan por el aumento de la metahemoglobina intraeritrocitaria, pigmento que es incapaz de transportar oxgeno.Normalmente, a travs del ciclo fisiolgico de oxigenacin y desoxigenacin el hierro del hem de la hemoglobina permanece en estado ferroso esto sucede gracias a que la estructura intrnseca de la hemoglobina protege al hierro de la oxidacin y a los mecanismos protectores y reductores de que dispone el eritrocito.

La reduccin de la hemoglobina en los eritrocitos del hombre depende sobre todo de la actividad de un sistema de la metahemoglobinemia diaforasa dependiente de NADH. El NADH que utiliza este sistema es generado por la gliceraldehido 3-P- deshidrogenasa de la va de Embdem- Meyerhof de la gluclisis, el azul de metileno el cual es cloruro de tetrametiltianina acta como un cofactor de la metahemoglobina reductasa NADPH dependiente o diaforasa 2. En presencia de NADPH y diaforasa 2, el azul de metileno es reducido a azul de leucometileno, el cual reduce directamente la metahemoglobina. Esto resulta en la induccin de dicha enzima, acelerando la conversin de metahemoglobina en hemoglobina (convierte el hierro frrico a ferroso) de ah radica su efecto como antdoto.Estas afirmaciones son sustentadas cientficamente en varios estudios sobre este tema, lo que sin duda sugiere un error al momento de la cuantificacin ya que la tabla de comparacin de metahemoglobina arroja resultados muy diferentes a los hechos en la literatura : las ratas control con un dieta normal presentan un alto porcentaje de metahemoglobina(22.7) mientras la ratas del lote 2 que fueron administradas con nitratos en su dieta y 30 min antes con un solucin de nitrito de sodio muestran una baja concentracin de metahemoglobina (4.7) , y las ratas administradas con el protector azul de metileno tienen una concentracin de 8.5 lo que no concuerda con los resultados experimentales. El azul de metileno es el tratamiento de eleccin para las metahemoglobinemias txicas cuya etiologa incluye numerosos oxidantes directos e indirectos: anilinas, acetofenetidina, nitritos, nitratos, cloratos, nitrobenceno, benzocana, lidocana, nitroglicerina, nitroprusiato, fenazopiridona, sulfonamidas, clorobenceno, naftaleno, nitrofenol, nitrato de plata y trinitrotolueno; aunque excepcional, el mismo azul de metileno en dosis elevadas produce metahemoglobinemias

CONCLUSIONESNo se determino correctamente la cantidad de metahemoglobina en la sangre de estos roedores ni el efecto protector del azul de metileno mas all de la literatura, se sugiere la repeticin del mtodo ya que por algn posible error haya afectado los resultados y estos hayan sido alterados

REFERENCIAS 1. Hernndez, Mauricio y Palazuelos, Eduardo. (1995) Intoxicacin por plomo en Mxico: prevencin y control Fernndez editores. Mxico. 15, 71, 258.2. Mart, J. A. y Desoille, H. (1993) Medicina del trabajo 2. Edicin. Masson. Barcelona. 289-299.3. Harris, Daniel C. (2007) Anlisis qumico cuantitativo 3. Edicin. Revert. Barcelona. 717.