resistenssituasjonen i norge - universitetet i bergen

Resistenssituasjonen i Norge

SLRC frokostseminar AquaNor

Tor E. Horsberg

NMBU Veterinærhøgskolen


Statistikk


http://www.fhi.no/

Avlusning versus lakseproduksjon


Folkehelseinstituttet,

Statistisk sentralbyrå

Medikamentklasse % av fisk behandlet 2014

Azametifos

(Salmosan)

32

Pyretroider

(AlphaMax, Betamax)

44

Emamektin

(Slice)

7

Kitinsyntesehemmere

(Releeze, Ektobann)

2

Hydrogenperoksid

(Paramove)

15

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

7000

8000

1000 t

on

nes

Salmonids treated for sea lice Production of salmonids

Mattilsynets overvåkingsprogram


Protokoll

NMBU School of Veterinary Science

em

am

ektin

H2O

2

azam

etifo

s

24

timer

deltam

etr

in

høy dose lav dose lav dose høy dose

Enkel prediksjon av behandlingseffekt


Azametifos (Salmosan / Azasure)


2013 2014

Pyretroider (AlphaMax, Betamax)


2013 2014

Emamektin (Slice)


2013 2014

H2O2 – last man standing?


Helgesen et al. 2015

H2O2


Forventet behandlingseffekt (%)


År Middel >90 % 90-50 % <50 %

2013 Azametifos 15 21 64

2014 2 30 68

2013 Pyretroider 23 30 47

2014 8 32 60

2013* Emamektin 0 46 54

2014 8 52 40

2014 H2O2 50 41 9

* ekstrapolert

Forsvinner resistensproblemene etter en

pause i bruk av et middel?

• 1991: Ett anlegg i midt-Norge badebehandlet med diklorvos

(Nuvan) 15 ganger i løpet av en sesong – med stadig

dårligere effekt

• 1997: Dårlig effekt av badebehandlinger med azametifos

(Salmosan) langs store deler av kysten

• 1999: Azametifos gikk ut av bruk som avlusningsmiddel

• ......... 9 år ...........

• 2008: Azametifos ble reintrodusert med god effekt

• 2009: Nye rapporter om behandlingssvikt med azametifos

• 2012: Omfattende resistensproblemer langs store deler av

kysten


Acetylcholinesterase (AChE) – virkestedet for

organofosfater (OP)


OP OP

Mutasjoner i ace –

gener som er satt i

sammenheng med

OP-resistens i andre

artropoder


OP-resistens-

mutasjoner

beskrevet i

43 codon

Screening av lakselusstammer med ulik

sensitivitet for azametifos

Sea lice strain 60-min bioassay 24-h bioassay Small scale treatment Classification

Ls A 2.1 (1.3-3.5) 0.12 (0.11-0.14) 100 (90-100) Sensitive

Ls G 1.8 (1.4-2.5) 0.16 (0.10-0.27) 98 (82-100) Sensitive

Ls B 4.5 (1.9-10.7) - - Reduced sensitivity

Ls H 60 (17-216) 23 (7-82) 50 (39-61) Resistant

Ls V >50 - - Resistant

Ls F - 3.3 (1.9-5.6) - Reduced sensitivity


ace1a: 2 SNPer som ikke ga aminosyreendring

1 SNP som ga aminosyreendring

ace1b: 1 SNP som ga aminosyreendring

Helt tilfeldig fordeling mellom stammer (polymorfisme)

Mutasjon i ace1a

• Konservert område av genet

• Forekomst i heterozygot og homozygot form

• genotyper: SS (homozygot villtype)

RS (heterozygote)

RR (homozygot mutert)


Strain Sensitivity Homozygot villtype

(SS)

Ls A Sensitive 100 %

Ls G Sensitive 96 %

Ls B Reduced sensitivity 72 %

Ls H Resistant 44 %

Ls H-s Resistant 0 %

Ls V Resistant 5 %

Når oppstod mutasjonen?

• Bioassay med azametifos i 1998

• Prøvene frosset ved -80 grader og glemt

• Gjenoppdaget i 2013

• Overlevende lus fra høyeste konsentrasjon undersøkt

• Denne mutasjonen ble funnet i flere prøver

• Ingen andre mutasjoner ble oppdaget

• Konklusjon: Mutasjonen oppstod FØR 1998 på ETT sted


Hvem dør når?

• Behandlingsforsøk med Ls F-stammen


Strukturell endring i AChE-enzymet


Konklusjon

• En mutasjon i ace1a-genet gir aminosyreendring i en

svært viktig del av proteinet

• Ingen andre betydningsfulle mutasjoner er funnet

– > Resistensen har sannsynligvis kun èn opprinnelse

• Mutasjonen oppstod før 1998

• Mutasjonen har overlevd i lav frekvens i

lakseluspopulasjoner i de 9 årene azametifos ikke ble

brukt

• Reintroduksjon av azametifos ga re-seleksjon etter 1 år


Dynamikk i resistensutvikling


Langsom



Rask



Reversering ved opphørt bruk



H2O2 (Paramove)

Pyretroider (AlphaMax, Betamax) Azametifos (Azasure, Salmosan)

Emamektin (Slice)

Kitinhemmere (Ektobann, Releeze)

Hva er status i dag?

Sikreste og raskeste måte å få full resistens:


• Å drepe alle følsomme

lakselus (SS)

x

Følsomme lakselus

skulle i stedet vært

fredet!

Men hvor er de?


?

? ?

Er det noe håp?


Er det noe håp?


IKKE FOR LAKSELUSKONTROLL UTELUKKENDE BASERT PÅ

BEHANDLING MED KJEMISKE MIDLER!

Er det noe håp?

• Ikke-kjemiske kontrollmetoder - IPM




Er det noe håp?

• Ikke-kjemiske kontrollmetoder - IPM

• Nye behandlingsmidler




Er det noe håp?

• Ikke-kjemiske kontrollmetoder

• Nye behandlingsmidler

• Bedre forståelse av problemene




Kommer det noe nytt?

• Ja.

• Men ikke i 2015.



http://www.ah.novartis.com/

resistenssituasjonen i norge - universitetet i bergen

Documents