rotavirus presentacion final
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FAMILIA ARN REOVIRIDAE
Una de las mas complejas, agrupa 9 géneros de virus
Tienen en común un genoma de ARN bc segmentado, morfología y tamaño de viriones similares.
Reovirus: Respiratory Enteric Orphan Viruses.
Primeros virus aislados de muestras de origen respiratorio y digestivo sin asociación con enfermedad, en la década de los 50’s (huérfanos)
GENERALIDADES
9 GÉNEROS:
* Orthoreovirus* Orbivirus Principales patógenos en medicina
* Rotavirus veterinaria y humana
*Coltivirus* Aquaerovirus * Phytoreovirus* Fijivirus Virus de peces, insectos y plantas * Cypovirus* Oryzavirus
TAXONOMIA Y CLASIFICACION
1.- Orthoreovirus, Aquareovirus, Cypovirus, Fijivirus y Oryzavirus. Se caracterizan por ser viriones icosaédricos cuyos 12 vértices proyectan espículas de considerable longitud. 2.- Orbivirus, Rotavirus, Coltivirus y Phytovirus son viriones de superficie lisa o casi esféricos sin espículas
CLASIFICACION MORFOLOGICA
ARN bicatenario segmentado, se agrupan en 3 categorias por su tamaño: L, M, S
Cápside icosaédrica
Sin envoltura
50 a 60 nm
Rodeada por una capa doble que le da el aspecto de rueda, de allí el nombre ROTAVIRUS
Grupo III clasificación de Baltimore
Replicación exclusiva en el citoplasma
Reservorio probablemente los humanos
GENERALIDADES
Lleva a cabo la transcripción de los segmentos de ARN bc, dentro de la cápside.
Puede ser visualizado mediante microscopio electrónico
Compuesto de 11 segmentos de RNA de doble-hebra, codifican 6 proteínas estructurales y 5 no estructurales.
La enfermedad es causada por 3 grupos: A, B y CGrupo A incluye 14 serotipos
El grupo B no es frecuente pero ha causado epidemias en adultos en china
El grupo C rara vez se observa en humanos
GENERALIDADES
ROTAVIRUS: (ROTA: Rueda)
Causantes de DIARREAS y ENTERITIS en animales jóvenes
*Rotavirus Bovino*Rotavirus Ovino*Rotavirus Porcino*Rotavirus Equino*Rotavirus Canino*Rotavirus Felino*Rotavirus Humano
Un 50 – 60% de niños hospitalizados con GEA inf. c/RTV
Responsables de alrededor de 600,000 muertes al año
El virus infecta las células de las vellosidades del ID e interrumpen el transporte de glucosa y Na+
La presencia de RTV en agua de consumo constituye un riesgo para la salud pública
Es más resistentes a la desinfeccion que otros virus entéricos
Periodo de incubacion: 24 a 72 horas
El grupo C rara vez se observa en humanos
EFECTOS EN LA SALUD
Infecta prácticamente a todos los niños en sus primeros años de vida.
Provoca vómito seguido de diarrea. Si no se trata causa deshidratación con resultado de muerte.
Es la principal causa de diarrea severa en niños, afecta al menos una vez a todos los niños menores de cinco años y ocasiona 610.000 muertes anuales, lo cual representa el 5% de muertes.
EL ROTAVIRUS
En enero de 2006 se anunció que 2
vacunas contra los rotavirus habían
superado con éxito ensayos clínicos a
gran escala.
Ahora la OMS y la Alianza Global para
las Vacunas y la Inmunización han
considerado prioridad la vacuna contra el rotavirus.
“Conseguir la inmunización en la población infantil.”
IDENTIFICACIÓN DEL FACTOR CONTAGIOSO
En 1973 Ruth Bishop identifico al rotavirus como patógeno humano.El grupo de Bishop observó al microscopio electrónico una biopsia del tejido extraído del intestino delgado de niños gravemente enfermos y encontró que la células epiteliales estaban infestadas con virus en forma de rueda.
Anteriormente se creía
El rotavirus era el responsable de entre un 25 y un 40% de diarrea en niños.
Una de las causas principales de mortalidad en regiones pobres.
1985
ROTAVIRUS
Su origen de la diarrea erabacteriana
encabezo la lista de enfermedades que necesitaban con urgencia vacunas.
desconocimiento de incidencia y distribución en
E.U.
No era posible
evaluar la repercusión
de la enfermedad
raramente se diagnosticaba
pasaba inadvertida por la mayoría de los pediatras. La
infestación manifestó
la mayoría de los casos no diagnosticados
ROTAVIRUS
Se descubrieron 3 factores
1.- La infestación seguía un patrón estacional : alcanzando un pico entre diciembre y marzo.
2.- La mayoría de los niños hospitalizados no habían cumplido 5 años.
3.- El rotavirus provoca la mayoría de los casos de diarrea severa entre la población infantil.
Es la principal causa de diarrea infantil en todo el
mundo.
En un niño bastan 10 partículas de virus para causar problemas.
Con una sola gota de virus que se encuentre en sus juguetes y este se lleve a la mano o a la boca, el virus sigue su curso hacía las células epiteliales que recubren el intestino delgado, donde se replica a una velocidad asombrosa en 24 hrs.
ROTAVIRUS
10 virus pueden convertirse en millones, invadiendo y matando a las células con sus proteínas, toxinas y partículas de nueva creación.
En poco tiempo el epitelio se desprende y el cuerpo pierde una gran cantidad de fluidos y electrolitos en los ataques de diarrea, un niño pierde hasta un 10% de su peso corporal y entra en un estado de shock en aproximadamente dos días.
-Los niños que sobreviven a su primera infección no sufren secuelas a largo plazo.-Muy pocos vuelven a sufrir de diarrea por rotavirus.-Su sistema inmunitario se prepara para reconocer con prontitud al rotavirus y evitar su replicación la próxima vez que trate de invadirlo.-Una vacuna capaz de mimetizar la inmunidad natural constituye la mejor esperanza para salvar vidas.
inmunidad
En busca de una vacuna
Las vacunas son fabricadas a partir de microorganismos (vivos o muertos) o a partir de sus proteínas básicas, las vacunas engañan al sistema inmunitario del receptor haciéndole creer que están atacando.
Hace 20 años varias compañías farmacéuticas estudiaron la creación de las vacunas contra los rotavirus, que se incluirían en el Programa Universal para la Inmunización Infantil apoyado por la OMS y la UNICEF, distribuyen el 80% de las vacunas entre la población infantil.Las vacunas orales serian más efectivas porque actuaran directamente en el tracto intestinal. A base de cepas vivas debilitadas que se puedan administrar por vía oral.
En 1983 La primera vacuna estaba lista para ensayos clínicos
Francis André, de Smith Kline-RIT y Timo Vesikari: ensayaron una vacuna derivada del la cepa de rotavirus hallada en vacas.El primer ensayo se llevo a cabo en Finlandia; redujo en un 88% la probabilidad de infección por rotavirus.Una vacuna viva podía inducir la inmunidad. No tenia efectos secundarios preocupantes.Con el éxito los laboratorios Smith Klein RIT pusieron en marcha ensayos clínicos en otros países.A finales de los ochenta el rotavirus parecía haber llegado a su fin pero los ensayos realizados en África y Perú dieron resultados contradictorios y se pospuso el Programa contra el rotavirus.
•Investigadores del instituto Nacional de la Salud y del Instituto Wistar de Filadelfia buscaron una explicación del fracaso de la vacuna de RIT.
•Albert Kapikian, del Instituto Nacional de la Salud, identifico una cepa vírica del mono de Rhesus; Fred Clark y Stanley Plotkin, de Wistar identificaron otra cepa bovina que se podría replicar de forma mas vigorosa.
•Se volvió a repetir la historia de éxitos y fracasos.
De las 42 cepas de rotavirus identificadas hasta la fecha según las combinaciones de sus variantes de PV7 y de PV4, solo cuatro o cinco son las responsables del 90% de los casos de enfermedad en el mundo.
Kapikian y Harry Greenberg fabricaron un virus reordenado en el que combinaron 10 genes procedentes del rotavirus del mono, con un gen que codifica a la proteína PV7, procedente de una cepa humana.
Kapikian y Greenberg fabricaron una vacuna tetravalente a la que denominaron RotaShield.
En 1991, la Agencia Federal de Fármacos y Alimentos (FDA) concedió un permiso a los laboratorios Wyeth Ayerst para fabricar y ensayar esta vacuna.
En 1998, RotaShield obtuvo la licencia de la FDA y fue recomendada por el Comité Asesor sobre Practicas de la Inmunización de CDC, así como por la Academia Americana de Pediatría , para que formara parte de la Inmunización rutinaria de la población infantil.
En 1999 varios niños sufrieron una complicación grave en el intestino delgado en las 2 semanas posteriores a la vacunación a la q denominaron intususcepción.
o Lone Simonsen estableció una correlación entre el riesgo y la edad , los niños menores de tres meses corrían menos peligro que los mayores.
o Mas tarde se fabricaron dos vacunas
ROTARIX ROTATEQ
GlaxoSmithKline. Vacuna monovalente. Solo a niños con edades
comprendidas entre seis y trece semanas.
Muestra de 60000 participantes.
Se ensayo en Iberoamérica. Desde el 2004 se ha aprobado en 20 países; en fecha reciente, en la Unión Europea; en los EE.UU. Se esta revisando.
Laboratorios Merck. Vacuna pentavalente. Solo a bebes de entre
seis y doce semanas. Muestra de 60000
participantes Se concentro en el
mercado estadounidense Ha obtenido aprobación
en México y en EE.UU. Y espera conseguirla en Europa
Ambas ofrecen entre un 85 y un 98 por ciento de protección frente a la diarrea grave causada por el rotavirus
Etiopia: 28.905Nigeria:47.525Congo: 28.905Tanzania: 11.440India: 146.04Afganistán: 17.830
Pakistán : 36.450China: 41.076Indonesia: 14.604Bangladesh: 18.9440
¿Cómo ataca el rotavirus?
DAÑO INTESTINAL
Las partículas son llevadas al ID donde infectan células de revestimiento del intestino provocando diarrea
La replicación ocurre en el epitelio del intestino
Dentro de las 24 hrs da infección las formas de las vellosidades del epitelio cambian de columnar a cuboidal y las vellosidades se atrofian
Puede dar lugar al incremento de absorción de Na+, glucosa y H20 y la de los niveles de lactosa intestinal, ALP y puede conducir a diarrea isotonica
La recuperación de la 1ª infección por RTV por lo gral., no conduce a la inmunidad permanente pero infecciones posteriores son menos graves
MECANISMO DE LA ENFERMEDAD
Penetración directa y endocitosis son las 2 posibles vías
La interacción del RTV con estos receptores induce cambios que permiten la entrada del virus a la célula
La primera involucra penetración directa resultado de la liberación de DLP (partícula de doble capa) dentro del citoplasma
La otra involucra la endocitosis donde las TLP entra en una vesicula endocitica
Una vez en la vesícula las proteínas VP8 se disocian desde la partícula viral exponiendo un dominio hidrofobico sobre las VP5s el cual perfora a través de las vesículas de membrana hasta llegar a la célula creando poros dejando partículas del virus libres dentro.
POSIBLE MECANISMO DE ENTRADA
POSIBLE MODOS DE ENTRADA
ESTRUCTURA VIRAL DEL ROTAVIRUS
Diagrama de la partícula viral madura (TLP) con sus tres capas
CICLO REPLICATIVO DEL ROTAVIRUS
Ciclo replicativo de rotavirus. El virus interacciona con sus receptores en la superficie de la célula y penetra por un mecanismo aun desconocido. En el interior de la célula se activa la transcriptasa viral y los mRNAs dirigen la síntesis de proteínas virales.Las proteínas se acumulan en estructuras llamadas viroplasmas donde se replica el RNA viral y se ensamblan las partículas de dos capas (DLPs) para proseguir la morfogénesis en el retículo endoplásmico.
MORFOGENESIS
Morfogénesis de rotavirus. 1) Replicación del RNA viral en el core dentro del viroplasma; 2) Adición de VP6 al core; 3) Interacción DLP-NSP4 y gemación hacia el lumen del RE; 4) Partícula viral inmadura con membrana lipídica y NSP4; 5) Partícula viral madura o TLP.
Mas tarde otros investigadores estudiaron la estructura del rotavirus .
La presencia de rotavirus en muestras de heces se pone de manifiesto al identificar el patrón electroforético característico del RNA del virus (rotaforesis).
Los rotavirus se clasifican en grupos (A a G) y serotipos (1-4, 8, 9, 12) por ELISA y PCR con oligonucleótidos específicos, respectivamente.
ROTAFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
DETERMINACION DE GRUPO Y SEROTIPO DE ROTAVIRUS POR PCR
INTERFERENCIA DE RNA
PRUEBAS DE LABORATORIO
CULTIVO DE ROTAVIRUS
INMUNOFLUORESCENCIA
INMUNOCROMATOGRAFIA
AGLUTINACION EN LATEX
PRUEBAS DE LABORATORIO
Célula infectada con rotavirus. En verde se tiñeron las fibras de actina, en azul los núcleos y en rojo los viroplasmas utilizando un anticuerpo contra la proteína NSP2.
Electroforesis del genoma viral
