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SARCOSPORIDIOSE BOVINE ET PORCINE AU SÉNÉGAL:
PRÉVALENCE ET IDENTIFICATION MOLÉCULAIRE SUR LES
CARCASSE D’ANIMAUX ABATTUS AUX ABATTOIRS DE DAKAR
O. B. GBATI1, P. S. KONE1, M. KOFFI2, A.R. KAMGA WALADJO1, B. MUSABYERMARIYA1, D.L. DAHOUROU1, C.D. EKOU1, C. DIATTA1, J.-B. ASSAMOI2, B.N. KESSE2, S.N. BAKOU1,
B. BONFOH2, L.J. PANGUI1
1 Ecole Inter-Etats des Sciences et Médecine Vétérinaires (EISMV) - Dakar
2 Centre Suisse de Recherches Scientifiques (CSRS) - Abidjan
9ème Congrès International Francophone de la Société de Pathologie Exotique
En Partenariat avec le Société Médicale d’Afrique Noire de Langue Française
12, 13 & 14 novembre 2013 - UCAD 2 Dakar (Sénégal)
• INTRODUCTION
Généralités
Objectifs
• MATERIELS ET METHODES
• RESULTATS ET DISCUSSION
• CONCLUSION
PLAN
Hôtes
intermédiaires
Espèces parasites
Hôtes
définitifs
Bovins
S. bovicanis ou S. cruzi
S. bovifelis ou S. hirsuta
S. bovihominis
Chien
Chat
homme
Porc
S. porcicanis ou S. miescheriana
S. porcifelis
S. porcihominis ou S. suihominis
Chien
Chat
Homme
Protozoose due à un protozoaire kystogène du genre Sarcocystis
Espèces affectées : vertébrés domestiques et sauvages; Homme
INTRODUCTION
Espèces de Sarcocystis impliquées chez les bovins et les porcs
Animaux de boucherie s’infestent en ingérant des ookystes sporulés
par phytophagie, géophagie, ou hydropinie
Caractérisée chez les animaux de boucherie par la présence de kystes
dans les tissus musculaires ;
Rend impropre la viande à la consommation humaine (présence
d’espèces zoonosiques de Sarcocystis)
Importance :
- Médicale: possibilité d’avortements
- Économique: pertes estimées à plusieurs de milliards
- Sanitaire : Zoonose négligée (Sarcocystis hominis, S. suihominis)
INTRODUCTION
INTRODUCTION
Leur détection requiert l’histologie et la biologie moléculaire
La plupart des études ont été réalisées en Europe, Asie, Amérique
Très peu d’études réalisées en Afrique:
• Petits Ruminants: Sénégal (Vercruysse et Van Marck, 1981),
Nigéria (Kudi et al, 1991), Egypte (Morsy et al, 2011)
• Bovins: Shaba-RDC (Mathieu et Mboyo, 1986);
Sénégal (Gbati et al, 2004); Nigéria (Obijiaku et al. 2013)
• Aucune donnée sur les porcs
Objectifs
Objectif général
Contribuer à la sécurité sanitaire des denrées alimentaires d’origine animale au
Sénégal
Objectifs spécifiques
• Rechercher, grâce à l’histologie, les kystes de Sarcocystis dans les muscles
des carcasses de bovins et porcins abattus aux abattoirs de Dakar;
• Déterminer la prévalence de la maladie;
• Identifier les espèces de Sarcocystis en cause par les techniques de
biologie moléculaire (RFLP-PCR);
MATÉRIELS ET METHODE
Lieu de l’étude
Prélèvements de muscles: Abattoirs de Dakar
Analyses histologiques: EISMV de Dakar
• Laboratoire d’Histologie et d’Histopathologie Vétérinaires
• Laboratoire d’ Imagerie Microscopique
• Laboratoire de Parasitologie et Mycologie
Analyses moléculaires au Laboratoire de Biologie Moléculaire du
Centre Suisse de Recherches Scientifiques (CSRS) d’Abidjan - RCI
Matériel animal
Pour l’histologie
400 carcasses de bovins et de 300 carcasses de porcs abattus dans aux
abattoirs de Dakar
Muscles prélevés: Masséter, Diaphragme, Œsophage, Myocarde,
Fessier
Pour la biologie moléculaire
Echantillons de myocarde positifs à l’histologie
MATÉRIELS ET METHODE
Méthode
Réalisation de coupes histologiques et coloration des lames à
l’Hémalun -Eosine
Observation des lames histologique au microscope photonique
• Recherche et dénombrement des kystes au microscope
MATÉRIELS ET METHODE
Porc
sarco F 5’ : CCATATTTTATGGTGGTGGTGA-3’
sarco R 5’ :AGTCTGTGGCAATGCTTTC-3’
• Sarcocystis miescheriana
Electrophorèse sur gel d’agarose
1,5% pendant 2 h30 min à 60 volts.
Taille attendue = 800pb
Kia et al, 2011 ; Yang et al. 2013
Bovin
sarco F 5’ : CGCAAATTACCCAATCCTGA-3’
sarco R 5’ : ATTTCTCATAAGGTGCAGGAG-3’
• Sarcocystis sp
Electrophorèse sur gel d’agarose 1,5% pendant 2 h30 min à 60 volts. Taille attendue = 700pb • Espèces de Sarcocystis Digestion enzymatique: BCl1 et Rsa1 S. cruzi: 300pb, 400pb et 700pb
Yang et al. , 2002 ; Moré et al., 2011 Kalantari et al. , 2013
MATÉRIELS ET METHODE
Kyste de Sarcocystis sp. (Myocarde du bovin)
(X400)
Kyste de Sarcocystis sp. (Fessier du Porc)
(X1000)
RESULTATS ET DISCUSSION
Dubey et al., 2006 ; Jehle et al. 2009 ; Moré et al., 2011; Yan et al. 2013
91,0%
9,0 % Positifs
Négatifs
Chez les Porcs (273/300)
82,00%
18,00% Positifs
Négatifs
Chez les Bovins (328/400)
Prévalence de la Sarcosporidiose
RESULTATS ET DISCUSSION
42,5 % à Zaria au Nigéria (Obijiaku et al. 2013) 78,1 % au Zaire (RDC) –(Mathieu et Mboyo, 1986)
18,2% Perreira et Bermejo, 1988 (Espagne) 73,6 %Avapal et al., 2003 (Inde) 99,5 %Yan et al, 2013 (Chine)
800 pb
1 pm
Sarcocystis miescheriana
2 3 4 5 7 6 8 9 10 NC 11 12
RESULTATS ET DISCUSSION
Electrophorèse de la PCR de Sarcocystis miescheriana isolé chez porc
Yang et al., 2002 (Chine) ; Kia et al. (Iran) , 2011; Yan et al, 2013 (Chine)
pm 1 2 3 4 5 6 7 8 10 9 11 12 13 14 16 15 NC
700 pb 500 pb
300 pb
100 pb
Sarcocystis sp. Sarcocystis sp.
RESULTATS ET DISCUSSION
Electrophorèse du produit PCR de Sarcocystis isolé chez le bovin Avant l’action de l’enzyme de restriction Rsa 1 et Bcl1
Yang et al. (Chine), 2002 ; Moré et al., 2011 (Argentine) ; Kalantari et al. , 2013 (Iran)
pm
Sarcocystis cruzi
pm
1
2
3
4
5
6
7
8
9
S. cruzi
700 pb
400 pb
300 pb
Sarcocystis cruzi
10
RESULTATS ET DISCUSSION
Electrophorèse du produit PCR de Sarcocystis isolé chez le bovin après l’action des enzymes de restriction Rsa 1 et Bcl1
Yang et al. (Chine), 2002 ; Moré et al. 2011 (Argentine) ; Kalantari et al. 2013 (Iran)
La sarcosporidiose existe au Sénégal chez les porcs et les bovins. Sarcocystis cruzi (Bovin) et Sarcocystis miescheriana (Porc) ont été identifiés. Néanmoins, la suspicion de la présence éventuelle d’espèces zoonosiques, S. bovihominis et S. suihominis, nous interpelle. La mise au point de techniques de détection rapide lors l’inspection des viandes doit être envisagé en vue de permettre aux population d’avoir accès à des viandes plus saines.
CONCLUSION
• Consortium AfriqueOne (WELCOME THRUST - Glasgow)
• Centre Suisse de Recherches Scientifiques (Abidjan – RCI)
• Agence Universitaire de la Francophonie (AUF)
• Union Economique et Monétaire Ouest-Africaine (UEMOA)
REMERCIEMENTS
JE VOUS
REMERCIE