schneller, einfacher, besser - bio-rad · time pcr geräte von bio-rad liefern ein einzigartiges...
TRANSCRIPT
Schneller, Einfacher, Besser
Real-Time PCR Methoden • Lebensmittelanalytik
1
1
1
1
1
1
1
1
1
iQ-Check, Ihre Lösung in der Lebensmittelsicherheit
Zuverlässig schnelle ErgebnisseBeschleunigen Sie die Freigabe von Endprodukten und Chargen im Produktionsprozess. Aufgrund der hohen Sensitivität und Spezifität der Real-Time PCR genügt eine einzige Übernachtanreicherung um Ergebnisse zu erzielen, die gleichwertig oder besser als der ISO Standard oder andere Referenzmethoden sind. Es wurden Protokolle entwickelt, mit denen Ergebnisse in weniger als 12 Stunden vorliegen.
Bewährte TechnologieAuf Grundlage der Genamplifikation durch die Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) und dem Nachweis in Echtzeit (Real-Time) werden in den iQ-Check Kits DNA-Primer und Fluoreszenzsonden verwendet, die für den Zielorganismus spezifisch sind. Der Nachweis (Detektion) eines Fluoreszenzsignals für die vervielfältigten Zielsequenzen (Amplifikation) weist auf das Vorhandensein des Erregers in der getesteten Probe hin.
Um eine höchstmögliche Genauigkeit zu erzielen, wurde der Test als Multiplex-Assay entwickelt: Die Sonden und Primer für die Ziel-DNA und die interne Kontrolle sind im gleichen Reaktionsmix enthalten und mit unterschiedlichen fluoreszierenden Farbstoffen markiert. Bei der internen Kontrolle wird die Effizienz der einzelnen Amplifikationsreaktion durch Bestimmung der Anwesenheit von Inhibitoren beurteilt, wodurch die Zuverlässigkeit von negativen Ergebnissen gewährleistet ist.
iQ-Check: Eine einzige Anreicherung von 8 Stunden bis 24 Stunden
iQ-CheckReal-Time PCR
Standard Referenzmethoden
Selektivagar
PCR Ergebnisse
Ergebnisse
Anreicherung
Biochemische Tests
AnreicherungAnreicherung
Das iQ-Check® System macht sich alle Vorteile der Real-Time PCR zu Nutzen, um schnellere und zuverlässige Lösungen für die Untersuchung von Lebensmitteln auf Krankheitserreger zu ermöglichen. Speziell für die Anforderung in der Qualitätskontrolle und in den Servicelaboren entwickelt, trägt das iQ-Check System zu einer optimalen mikrobiologischen Kontrolle von Lebensmitteln und Proben aus der industriellen Produktionsumgebung teil. Das iQ-Check System umfasst eine Vielzahl von Tests und Geräten für die unterschiedlichsten Anforderungen. Somit ermöglicht es als flexible und offene Lösung den industriellen mikrobiologischen Laboren eine schnelle Kontrolle und Reaktion im Rahmen ihres HACCP Konzepts.
Tag 1 Tag 2 Tag 3 Tag 4–7
Eine Komplettlösungn Standardisierte Reagenzien:
- Anreicherungsmedien- Real-Time PCR iQ-Check Kits- Chromogene Agar
n Biochemische Bestätigungstestsn Validierte Geräte und Software: - Integrierte Lösung zur Automatisierung der Probenaufarbeitung - Real-Time PCR Detektionssysteme von Bio-Rad - Automatisierte Auswertung der Daten und Rückverfolgbarkeit - Flexibler Einsatz der Geräte und Reagenzien
Schnellere Ergebnissen Testergebnisse innerhalb von Stunden nach der Anreicherungn Ergebnisse für Salmonella und E. coli O157:H7 in weniger als
12 Stunden in rohem Fleischn Bestätigung der Kolonien durch validierte chromogene Agar
Einfache Handhabungn Gebrauchsfertige Reagenzienn Einfache DNA Extraktionsprotokolle für einen hohen
Probendurchsatz: automatisiert oder manuell durchführbarn Barcode Reader für die Plattenbelegungn Automatisierte Amplifikation, Detektion und Interpretation
Minimales Kontaminationsrisikon Positivkontrolle, Negativkontrolle und interne PCR
Inhibitionskontrolle für genaue und zuverlässige Ergebnissen Keine post-PCR Arbeitsschritte, daher minimales
Kontaminationsrisiko
Ergebnisse von hoher Qualitätn Zertifizierung durch NF VALIDATION gemäß ISO 16140 Protokolln Validiert durch AOAC-RI, Health Canada und NordVal
Vollständige Flexibilitätn Bis zu 94 Proben können in einem Lauf untersucht werdenn Alle Testkits für Pathogene können parallel auf derselben
Platte getestet werdenn Geräte für hohen und niedrigen Probendurchsatz verfügbarn Offene Software
Rückverfolgbarkeitn Automatisierung, LIMS Anbindung und/oder Barcode Reader
verfügbarn Unterschiedliche Zugangsrechte für den Anwendern Vollständiger Datenbericht enthält alle Informationen
zur Untersuchung
Campylobacter spp.
Cronobacter spp.
E. coli O157:H7
Listeria monocytogenes
Listeria spp.
Salmonella spp.
Salmonella Enteritidis
STEC Virulenzgene*
STEC Top 7 Gruppen*
Die CFX Manager Software steuert und kontrolliert alle Arbeitsschritte im CFX96 und im MiniOpticon Real-Time PCR Detektionssystem und integriert zusätzlich das Betriebssetup des iQ-Check Prep Systems.
n Einfache Bedienungn Integration der automatisierten Probenaufarbeitung,
automatisierte Auswertung und vollständige Interpretation aller iQ-Check Ergebnisse; zusätzlich vollständiger Zugriff auf Amplifikationskurven und –daten
n Datenimport/Datenexport aus/in ein LIMS
n Ergebnisberichte können archiviert werden
n Von 1 Computer aus können maximal vier CFX96 Systeme oder 1 MiniOpticon angesteuert werden.
V21G0713
Food Science
© 2013 Bio-Rad Laboratories, Inc.All rights reserved.
CFX Manager™ SoftwareIndustrial Diagnostic Edition
359-3893
Version 2.1
CFX Manager Software - Industrial Diagnostic Edition
Thermocycler Basis MJ Mini™ C1000 Touch™
Probenkapazität 48 Wells 96 Wells
Lichtquelle 48 blau-grüne LEDs 6 gefilterte LEDs im optischen Shuttle
Optische Detektion 2 Photodioden 6 Photodioden im optischen Shuttle
Anregungsbereich 470–500 nm 450–684 nm
Detektionsbereich 523–700 nm 510–730 nm
Funktion Multiplex Bis zu 2 Targets Bis zu 5 Targets
Serielle Verbindungs- 1 Einheit Bis zu 4 Einheiten möglichkeiten von 1 PC
Maximale Ramp-Rate 2.5°C/sec. 2.5°C/sec.
Gradientenfunktion Ja Ja
Gradientenbereich 35–99°C 30–100°C
Temperaturdifferenz- 16°C 1–24°Cbereich
Abmessungen (B x T x H) 18 x 32 x 33 cm 33 x 46 x 36 cm
Gewicht 6.8 kg 21.4 kg
MiniOpticonCFX96 TouchDeep Well
AOAC NF VALIDATION Health Canada NordVal iQ-Check Methode
1
1
1
1
1
1
1
1 1
1
1 1
1
1
1
1 1
✔
✔ ✔
✔ ✔
✔
✔
✔ ✔
✔ ✔ ✔
✔ ✔ ✔
✔
✔
* Die USDA hat keinen sog. Einwand-Brief gesendet
Manuelle Lösung Vier-Schritt Protokoll
Probenanreicherung
DNA Extraktion – Überführen der angereicherten Probe und Zelllyse
Vorbereitung der PCR Reaktion + Amplifikation – Zugabe der extrahierten DNA in die PCR Wells
Automatisierte Analyse, Auswertung und Reporterstellung
Anreicherung
oder
Extraktion und PCR Setup Nachweis Ergebnisse
1
2
3
4
Eine Komplettlösung Aufgrund der Entwicklung als flexible und offene Lösung, kann das iQ-Check System manuell oder automatisiert durchgeführt werden. Dabei ist ein Probendurchsatz von einer einzelnen Probe bis hin zu 94 Proben möglich, die entweder auf dem kleineren (48 Wells) oder auf dem größeren Gerät (96 Wells) untersucht werden. Alle Real-Time PCR Geräte von Bio-Rad liefern ein einzigartiges modulares Design, das mit einer hochauflösenden Optik verbunden ist, die den Nachweis der Zielsequenz mit Hilfe von fluoreszierenden Sonden ermöglicht.
Durch die Verwendung der bewährten Real-Time PCR Geräte sowie der intuitiven Software in Kombination mit den leistungsstarken Kits und Medien von Bio-Rad wird sichergestellt, dass die Real-Time PCR Daten und Ergebnisse für alle Anwendungen in der Lebensmittel- und Umweltanalytik von gleich bleibend hoher Qualität sind. Zusätzlich gewährleistet die Automatisierung eine hohe Rückverfolgbarkeit und zuverlässige Ergebnisse.
Automatisierte LösungiQ-Check® Prep Arbeitsablauf
Überführen der angereicherten Proben in eine Deepwell-Platte gemäß Plattenbelegung
Befüllen des iQ-Check Prep Systems mit Verbrauchsmaterialien, Reagenzien und Proben; das Gerät starten
Real-Time PCR Lauf starten und Ergebnisse ablesen
Anreicherung Probenaufarbeitung Nachweis Ergebnisse
1
2
3
5 μl
iQ-Check Prep LösungiQ-Check Prep ist eine sog. ‘‘Liquid Handling’’ Arbeitsplattform, mit der die DNA Extraktion und die PCR Plattenbelegung durchgeführt werden kann. Diese wurde für die Verwendung der vollständigen iQ-Check Kit Produktpalette sowie für das CFX96 Touch™ Deep Well Real-Time PCR System entwickelt und ermöglicht so eine vollständig integrierte, automatisierte Lösung für den Nachweis von Pathogenen in Lebensmitteln.
Eine optimale einfache Handhabung sowie eine maximale Rückverfolgbarkeit wird zusätzlich durch die Verwendung der CFX Manager™ Software IDE erzielt.
Die iQ-Check Prep Lösung liefert den Routinelaboren ein robustes System für zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse. Es passt nahtlos in den Arbeitsablauf des Labors und ist eine ideale Lösung für Labore mit mittlerem bis hohem Probendurchsatz.
Ihr Labor untersucht bis zu 250 Tests in einer 8-Stunden Schicht
Ihr Labor untersucht mehr als 500 Tests in einer
8-Stunden Schicht
Durchsatz
n Inklusive der Probenvorbereitung und der Beladungszeit: ein iQ-Check Prep Instrument und ein CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR System werden benötigt
n Einfach ein weiteres CFX96 Real-Time PCR Gerät hinzufügen
iQ-Check Prep, CFX96 Touch Deep Well und iQ-Check Kits
MiniOpticon™ Real-Time PCR Detection System
CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System
Das MiniOpticon System gehört zu den kleinsten tragbaren Systemen, die es auf dem Markt für Real-Time PCR Anwendungen gibt.
Das CFX96 Touch Deep Well System ist ein sensitives 5-Farben Multiplexsystem in einem 96-Well Block.
n Die 2-Farben Multiplexfähigkeit ermöglicht die Detektion einer Vielzahl von Fluorophoren
n Das MiniOpticon System enthält in der optischen Einheit einen festen Array von 48 LEDs ohne bewegliche Teile
n Bis zu 48 Tests pro Lauf möglich
n Alle Komponenten für die Anregung und die Detektion der Fluorophore werden durch das hochentwickelte optische Design des sog. “photonic shuttle” direkt in jedes einzelne Well gebracht
n Bis zu 96 Tests pro Lauf möglich
CFX96 Deep Well SystemMiniOpticon System
© Bio-Rad 14-1293 16540 Rev B 0814 1213
Bio
-Rad
, S.N
.C. a
u ca
pita
l de
50 0
00 0
00 €
, Loc
atai
re-G
éran
t, 4
49 9
90 7
12 R
CS
Nan
terr
e •
N°
Intr
acom
mun
auta
ire F
R 6
2 44
9 99
0 71
2 •
Sire
t 44
9 99
0 71
2 00
019
Web site www.bio-rad.com USA 800 424 6723 Australia 61 2 9914 2800 Austria 01 877 89 01 Belgium 09 385 55 11 Brazil 55 31 3689 6600Canada 905 364 3435 China 86 21 6169 8500 Czech Republic 420 241 430 532 Denmark 44 52 10 00 Finland 09 804 22 00 France 01 47 95 69 65 Germany 089 31 884 0 Greece 30 210 777 4396 Hong Kong 852 2789 3300 Hungary 36 1 459 6100 India 91 124 4029300Israel 03 963 6050 Italy 39 02 216091 Japan 03 6361 7000 Korea 82 2 3473 4460 Malaysia 60 3 2117 5260 Mexico 52 555 488 7670The Netherlands 0318 540666 New Zealand 64 9 415 2280 Norway 23 38 41 30 Poland 48 22 331 99 99 Portugal 351 21 472 7700Russia 7 495 721 14 04 Singapore 65 6415 3170 South Africa 27 861 246 723 Spain 34 91 590 5200 Sweden 08 555 12700Switzerland 061 717 95 55 Taiwan 886 2 2578 7189 Thailand 66 2 6518311 United Kingdom 020 8328 2000
Life Science Group
Bio-RadLaboratories, Inc.
BestellinformationenKatalognummer Beschreibung
ReagenzieniQ-Check Kits357-8135 iQ-Check Campylobacter Kit, 96 Reaktionen 357-8137 iQ-Check Cronobacter spp. Kit, 96 Reaktionen 357-8114 iQ-Check E.coli O157:H7 Kit, 96 Reaktionen357-8124 iQ-Check Listeria monocytogenes II Kit, 96 Reaktionen357-8113 iQ-Check Listeria spp. Kit, 96 Reaktionen357-8123 iQ-Check Salmonella II Kit, 96 Reaktionen357-8142 iQ-Check S. Enteritidis Kit, 96 Reaktionen357-8139 iQ-Check STEC VirX Kit, 96 Reaktionen357-8140 iQ-Check STEC SerO Kit, 32 Reaktionen
Medien für die Probenanreicherung355-4179 Gepuffertes Peptonwasser, 225 ml x 6 Flaschen355-5795 Gepuffertes Peptonwasser, 3 L x 4 Beutel355-5790 Gepuffertes Peptonwasser, 5 L x 2 Beutel356-4684 Gepuffertes Peptonwasser, dehydriert, 500 g355-5797 Fraser ½ Bouillon, 225 ml x 6 Flaschen355-5794 Fraser ½ Bouillon, 3 L x 4 Beutel355-5792 Fraser ½ Bouillon, 5 L x 2 Beutel356-4604 Fraser ½ Bouillon, Basismedium, dehydriert, 500 g356-4616 Fraser ½ Supplement, 10 Fläschen355-3454 TCS (Trypton-Casein-Soja), 10 ml x 25 Röhrchen355-5703 LSB (Listeria Special Broth), 225 ml x 6 Flaschen355-5793 LSB (Listeria Special Broth), 5 L x 2 Beutel356-4703 LSB (Listeria Special Broth), dehydriert, 500 g356-4753 LSB (Listeria Special Broth), dehydriert, 5 kg356-4001 SEB (STEC Enrichment Broth), dehydriert, 500 g356-4002 SEB (STEC Enrichment Broth), dehydriert, 5 kg
Chromogene Medien für die Bestätigung356-4748 RAPID’E.coli O157:H7 Agar, 100 g356-4610 Novobiocin Supplement für RAPID’E.coli O157:H7, 1 g Flasche356-4744 RAPID’Listeria spp. Agar, 500 g356-4745 RAPID’Listeria spp. Agar, Supplement 1, 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml)356-4746 RAPID’Listeria spp. Agar, Supplement 2, 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml)356-3694 RAPID’L.mono Agar, 90 mm x 20 Petrischalen356-3964 RAPID’L.mono Agar, 90 mm x 120 Petrischalen356-4293 RAPID’L.mono Agar, Basismedium, 500 g356-4294 RAPID’L.mono Agar, Supplement 1, 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml)356-4746 RAPID’L.mono Agar, Supplement 2, 10 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml) 355-5294 RAPID’L.mono Agar, Kit: 190 ml Agar + 2 Supplemente356-3971 RAPID’Sakazakii Agar, 90 mm x 20 Petrischalen356-3963 RAPID’Salmonella Agar, 90 mm x 120 Petrischalen356-4705 RAPID’Salmonella Agar, 500 g356-4709 RAPID’Salmonella Supplement in Kapseln, 10x konz.,100356-4710 RAPID’Salmonella Supplement in Kapseln, 1x konz., 100356-4712 RAPID’Salmonella Supplement, 1 Box ausreichend für 100 Analysen
Katalognummer Beschreibung
Geräte und Verbrauchsmaterialien Instrumente 359-4990 Industrial Diagnostic CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR
Detection System, 96 Wells (360-0037 für Nordamerika) 359-3995 Industrial Diagnostic MiniOpticon Real-Time PCR Detection
System, 48 Wells359-3893 CFX Manager Software Industrial Diagnostic Edition 359-4910 iQ-Check Prep System (Konfiguration)
Verbrauchsmaterialien für das CFX96 Touch Deep Well und MiniOpticon SystemHSP-96551, 2 Hard-Shell® 96-Well (skirted) PCR Platten, niedriges Profil, weiße
Schale, weiße Wells, x 50MLL-48511, 2 48-Well PCR Platten (unskirted), niedriges Profil, weiß, x 50 MSB-1001 Microseal® 'B' Film, optisch klare, adhäsive Abdeckfolien, x 100TLS-08511, 2 0.2 ml 8-er PCR Gefäßstreifen, niedriges Profil, ohne Deckel,
dünnwandig, weiß, x 120TCS-08031, 2 8-er Streifen mit optischen Flachdeckeln für 0.2 ml Gefäße und
Platten, ultraklar, x 120
Verbrauchsmaterialien für die DNA Extraktion224-01101, 2 Konische Reaktionsgefäße, 1.5 ml, Schraubdeckel mit
integriertem O-Ring, steril, x 500359-4900 1 ml Deepwell Platten, 96 Wells, x 50360-00401 X-Pierce Films, x 100359-39772 X-Pierce Films, x 100
Verbrauchsmaterialien für das iQ-Check Prep System359-4900 1 ml Deepwell Platten, x 50359-4901 5 ml Röhrchen für den PCR Mix, x 50359-4902 Pipettenspitzen 50 µl, x 5760359-4903 Pipettenspitzen 1000 µl, x 3840359-4904 Vorratsbehälter 60 ml, x 28HSP-99551, 2 Hard-Shell PCR Platten mit Barcode
X-Pierce is a trademark of Excel Scientific, Inc.
Notice regarding Bio-Rad thermal cyclers and real-time systems: These products are covered by one or more of the following U.S. patents or their foreign counterparts owned by Eppendorf AG: U.S. Patent Numbers 6,767,512 and 7,074,367.
Hard-Shell plates are covered by one or more of the following U.S. patents or their foreign counterparts owned by Eppendorf AG: U.S. Patent Numbers 7,347,977; 6,340,589; and 6,528,302.
(1) Für die in Nordamerika bestellten Artikel gelten die folgenden Artikelnummern: MLL-4851XTU, TLS-0851XTU, TCS-0803XTU, 224-0110XTU, HSP-9655XTU
(2) Für die in Europa bestellten Artikel gelten die folgenden Artikelnummern: 35MLL4851, 35TLS0851, 35TCS0803, 352240110, 35HSP-9655
Zusammensetzung der KitsDie iQ-Check Kits sind vollständige und gebrauchsfertige Reagenzienkits, inklusive der Reagenzien für die Probenaufarbeitung:
n Lysisreagenz für die DNA Extraktion
n Fluoreszierende Sonden
n PCR Amplifikationsmix mit interner Inhibitionskontrolle
n Positiv- und Negativkontrolle