secuenciación de adn detención de Ácidos nucleicos amplificación de adn con reacción de cadena...
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7/25/2019 Secuenciacin de ADN Detencin de cidos Nucleicos Amplificacin de ADN Con Reaccin de Cadena de La Polimerasa
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Secuenciacin de ADNDetencin de cidos nucleicos
Amplifcacin de ADN con reaccinde cadena de la polimerasa
Inte!rante
0:
Gr1'o n2
3
R1$# Ce(e4o L1$0a Marc$&&o Mo&$na M$c"ae& Me#a Bareran Ge5a Carran#a Ce(e4o
A0(r1a& Mero More$ra An(rea
Mora&e0 Pac"ay Me&any V$&&a%$cenc$o Ga"6n7e8er0on
9a5rano More$raPe(ro
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CEBADOR SINTTICODIDEO;INUCLESER
CLONACI
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DIDEO;INUCLE
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SECUENCIACI
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LA DETERMINACION DE LAS
SECUENCIAS NUCLEOTIDICAS DE UN
GRAN NUMERO DE GENES
PERMITE ESTUIAR LAS PROPIEDADES
DE LAS SECUENCIAS DEL ADN
QUE REGULAN LA EXPRESION
GENETICA.
LA DETERMINACION DE LAS
SECUENCIAS NUCLEOTIDICAS DE UN
GRAN NUMERO DE GENES
PERMITE ESTUIAR LAS PROPIEDADES
DE LAS SECUENCIAS DEL ADN
QUE REGULAN LA EXPRESION
GENETICA.
LA DETERMINACION DE LAS
SECUENCIAS NUCLEOTIDICAS DE UNGRAN NUMERO DE GENES NO SOLO
PERMITE ESTUDIAR LA LECTURA DE
SUS PRODUCTOS PROTEINICOS
SINO QUE PERMITE ESTUIDAR LAS
PROPIEDADES
DE LAS SECUENCIAS DEL ADN
QUE REGULAN LA EXPRESION
GENETICA.
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La 0?nte0$0 (e& ADN 0e $n$c$a en 1n '1nto @n$co(e& ADN c&ona(o a 'art$r (e UN CEBADOR
SINTTICO.
La reacc$6n (e &a 0?nte0$0 (e ADN $nc&1ye &o0 DIDEO;INUCLE
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E0to0 Jra!5ento0 (e ADN 0onentonce0 0e'ara(o0 en J1nc$6n (e
01 ta5a4o 5e($anteELECTROFORESIS EN GEL.
A 5e($(a K1e 0e re01e&%en &a0an(a0 (e ADN rec$n 0$ntet$#a(a0a tra%0 (e& !e& 'a0an a tra%0 (e
1n =A9 DE L>SER K1e ec$ta &o05arca(ore0 1ore0cente0.
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La &1# e5$t$(a re01&tante e0 (etecta(a 'or 1nJoto51&t$'&$ca(or y 1n or(ena(or reco&ecta y ana&$#a &o0(ato0.
E& ta5a4o (e ca(a Jra!5ento 0e (eter5$na 'or 01($(eo$n1c&eot$(o ter5$na& 5arca(o 'or 1n co&or e0'ec$co(e 1ore0cenc$a. De 5o(o K1e &a 0ec1enc$a (e ADN '1e(e0er &e?(a 'or e& or(en (e &o0 Jra!5ento0 5arca(o0.
Con 1ore0cenc$a K1e 5$!ran a tra%0 (e& !e& 'a0an atra%0 (e 1n "a# (e &a0er K1e ec$ta &o0 5arca(ore01ore0cente0.
La 0ec1enc$ac$6n (e ADN a1to5t$ca (e
a&to ren($5$ento K1e e5'&ea($(eo$n1c&eot$(o "a 'er5$t$(o e& an&$0$0a !ran e0ca&a nece0ar$o 'ara (eter5$nar&a0 0ec1enc$a0 (e !eno5a0 co5'&eto0
$nc&1$(o e& "15ano.
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E;PRESI
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E;PRESI
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Expresin en bacteriasde genes clonados
Los vectores de expresin contienen lassecuencias promotoras (pro) que dirigenla transcripcin del ADN insertado enbacterias y las secuencias necesariaspara la unin del ARNm a los ribosomas(SD).s posible expresar de !orma e!icienteun ADNc eucaritico insertado "unto aestas secuencias# obteni$ndoseprote%nas eucariticas a partir debacterias trans!ormadas.
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AMPLIFICACI N DE ADN CON LAREACCI
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D-"-1189N D- 18DOS
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E& 'roce0o (e a5'&$cac$6n (eADN 'or PCR-l material de partida puede serien un *ragmento de ADN donado
o una me!cla de mol(culas deADN-l ADN de dole cadena inicial secalienta para separar las heras %despu(s se en*r$a para permitirque los ceadores se unan a cadahera de ADN.A partir de esta me!cla es posile
amplifcar una regin espec$fcade ADN.4a ADN polimerasa de "hermusaquaticusse usa para sinteti!ar nue+asheras de ADN empe!ando en losceadores) produci(ndose la
*ormacin de dos nue+asmol(culas de ADN.
-l proceso se puede repetirm>ltiples +eces) consigui(ndoseen codo ciclo una amplifcacindel dole de ADN.
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