sem etiquetado implementando el etiquetado en montevideo

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http://slowfoodcanelones.blogspot.mx/2014/08/4-seminario-de-etiquetado-de-alimentos.html y http://slowfoodcanelones.blogspot.mx/p/4to-serminario.html Transmisión en vivo y presentaciones del 4to Seminario de Etiquetado de alimentos Transgenicos Democratizando la informacion de nuestro alimentos

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  • 1. 1 Claudio Martnez Debat / Mailn Arleo LaTraMA ::: Laboratorio de Trazabilidad Molecular Alimentaria Seccion Bioqumica. Facultad de Ciencias. Comisin Directiva Espacio Interdisciplinario. Universidad de la Repblica. Montevideo. Uruguay. clamim@gmail.com https://www.facebook.com/claudio.martinez.debat Transgenicidad en alimentos de consumo masivo. ImplementaNdo el etiquetado en Montevideo

2. 2 Deteccin, Identificacin y Cuantificacin de OGMs F Alfonso, M Arleo, J Correa, R Fernndez, M Fernndez, F San Martn, F Ruibal, J Pereyra, C Martnez 3. Alimento transgnico El trmino alimento transgnico hace referencia a aquel que contiene, est compuesto, o ha sido producido a partir de OGMs. Un alimento puede ser transgnico porque: est formado por materiales derivados de un OGM (harina de maz GM), en su fabricacin se emplearon microorganismos GM (yogurt) contiene ingredientes que provienen de OGM (aceites, aminocidos, cidos orgnicos, enzimas) 4. Fuente: http://www.mgap.gub.uy/portal/hgxpp001.aspx?7,1,144,O,S,0,MNU;E;2;2;12;5;MNU 5. Situacin legal de los OGMs en Uruguay: Coexistencia Regulada Decreto 353/008: el etiquetado de los alimentos que contienen OGMs es voluntario "GM" o "no GM", aplicable a aquellos alimentos en los que se pueda comprobar mediante anlisis del producto final la presencia de ADN o protenas genticamente modificados 6. Nuevo marco regulatorio referente a OGMs los alimentos que han sido manipulados genticamente o que contienen uno o ms ingredientes provenientes de stos que superen el 1% de los componentes individualmente considerados, debern ser etiquetados Alcance: Alimentos conformados por materiales derivados de OGMs x Excluidos: Alimentos producidos a partir de microorganismos GM, o que contienen aditivos producidos por OGM. Umbral 1%: presencia accidental o tcnicamente inevitable de transgnicos (contaminacin en la produccin, transporte o almacenamiento). Decreto Departamental N 34.901 (Montevideo) 7. TRAZABILIDAD MOLECULAR ALIMENTARIA Donde hubo Vida ADNS QUEDAN LaTraMa ::: Laboratorio de Trazabilidad Molecular Alimentaria P Abete, M Amilibia, M Arleo, J Correa, R Fernndez, M Fernndez, A Miller, E Miquel, F San Martn, F Ruibal, J Pereyra, Florencia Afonso, Luis Jurado, C Martnez Debat Seccin Bioqumica, Instituto de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad de la Repblica. Montevideo. Uruguay. 8. Anlisis de componentes animales en alimentos MeDeA ::: Mtodo de Determinacin de Especies Animales 9. Ejemplo: Deteccin de contaminaciones/adulteraciones de quesos de cabra con leche de vaca, mediante tcnicas moleculares MeDeA A Miller/ M Amilibia / J Correa 10. Descripcin del problema Adulteracin con Manzana (Malus domestica) en matrices alimentarias altamente procesadas. Ejemplo: Dulce de Membrillo (Cydonia oblonga). Lic. Mailn Arleo/Jos Pereyra DeVas Determinacin de Especies Vegetales en Alimentos 11. Anlisis de Transgenicidad en Alimentos de Consumo Masivo LaTraMa ::: Laboratorio de Trazabilidad Molecular Alimentaria M Arleo, J Correa, R Fernndez, M Fernndez, E Miquel, F San Martn, F Ruibal, J Pereyra, C Martnez Seccin Bioqumica, Instituto de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad de la Repblica. En colaboracin con el Labo de Bromatologa, Intendencia de Montevideo el Labo de Gentica Molecular, Desarrollo y Evolucin de Plantas del Instituto de Ecologa de la UNAM, Mxico DF. 12. Resultado de deteccin e identificacin de eventos transgnicos para 20 muestras de harina de maz (cdigo M1 M20) que se encuentran en el mercado nacional. De las 20 muestras 18 arrojaron resultados positivos en cuanto a la presencia del promotor 35S indicando presencia de maz GM. Estas 18 muestras son variables en cuanto al contenido de eventos particulares encontrndose todas las combinaciones posibles (solo Bt11, solo Mon810 o mezcla de ambas). Cabe destacar que las muestras que dieron resultado negativo para 35S se mantuvieron coherentes para el 13. PRODUCTO ORIGEN DECLARA PRESENCIA DE MAZ PRESENCIA DE TRANSGENICOS EVENTO Endgeno de maz (HMGA) 35S t-NOS MON810 BT11 GA21 TC1507 Cheetos Torciditos Mxico Maz + + - + - - - Topitos queso Mxico Maz + - - - - - - Tortillas naturales (tlayudas) Mxico Maz + - - - - - - Tortillas naturales (tlayudas) Mxico Maz + - - - - - - Doritos recargados Mxico Maz 100% natural + + + + + + + Crujitos queso y chile Mxico Maz + + - + - - - Rancheritos Mxico Maz 100% natural + + + + + + + Fritos chile y limn Mxico Maz 100% natural + + + + + + + Doritos pizzerolas Mxico Maz 100% natural + + + + + + + Doritos Francia Maz + - - - - - - Tortillas chili Francia Maz + - - - - - - 3D Francia Maz + - - - - - - Tortillas de Maz Francia Maz + - - - - - - Nachitas USA Maz + + - + - - + 3D barbacoa Argentina Maz + + - + - - - Fritos Espaa Maz + - - - - - - Mix Bugles 3Ds Espaa Maz + - - - - - - Mix Cheetos Espaa Maz + - - - - - - Mix Doritos Espaa Maz + - - - - - - Mix cheetos 2 Espaa Maz + - - - - - - Resultado del rastreo del promotor 35S y t-Nos y de la identificacin de los eventos Mon810, BT11, GA21, TC1507 para las 20 muestras de alimentos a base de maz (snacks). El resultado se representa de la siguiente manera: - resultado negativo, + resultado positivo. De las 20 muestras analizadas, ocho resultaron positivas para la presencia de transgnicos, con distinto perfil en el contenido de eventos. 14. Resultado del rastreo del promotor 35S y t-Nos y de la identificacin del evento MON40-3-2 para las hamburguesas de carne (con presencia de soja), hamburguesas y milanesas de soja. El resultado se representa de la siguiente manera: - resultado negativo, + resultado positivo. PRODUCTO ORIGEN DECLARA PRESENCIA DE SOJA PRESENCIA DE TRANSGNICOS EVENTO ENDOGENO DE SOJA 35S t-NOS MON40-3-2 Hamburguesa de carne (1) Uruguay protena vegetal + + + + Hamburguesa de carne (3) s/declaracin sin declaracin + + + + Hamburguesa de carne (5) Uruguay protena de soja + + + + Hamburguesa de carne (6) Uruguay protena de soja + - - - Hamburguesa de carne (7) Uruguay protena de soja + + + + Hamburguesa de soja (1) Uruguay soja certificada no transgnica + + + + Hamburguesa de soja (2) s/declaracin sin declaracin + + + + Milanesa de soja (3) Uruguay soja certificada no transgnica + - - - Milanesa de soja (4) Argentina soja + + + + Milanesa de soja (5) s/declaracin sin declaracin + + + + Tofu (6) s/declaracin sin declaracin + + + + Panchos de soja (7) Uruguay protena de soja + - - - 15. Flujo Gnico 16. 2011-2013: Flujo de Transgenes entre Cultivos Comerciales de Maz en Uruguay. 17. En 3 de 6 situaciones se detect presencia del transgen en la progenie de cultivos no OGM. El evento detectado corresponde al del presunto origen de contaminacin Se detect interpolinizacin a distancias de 20, 100 y 330m 18. Construcciones gnicas de distintos eventos de maz aprobados en Uruguay p-35S Intrn hsp70 cry 1 A (b) t-Noscry 1 A (b) patp-35S p-35S intrn 1 adh t-Nosintrn 6 adh p-1 ract intrn 1 ract CP4 EPSPS t-Nos OTP MazMON810 MazNK603 MazGA21 MazTC1507 p-ubiq mz intrn 1 ubq cry 1 F t-ORF 25 p-35S pat t-35Sexn 1 ubq p-ract1 intrn 1 ract CTP2 CP4 EPSPS t-Nos intrn hsp70 CP4 EPSPS t-Nosp-35S CTP2 MazBt11 MazMon89034 p-e35S intrn 1 ractL-Cab Cry 1A.105 t-HSP17 intrn hsp70 Cry 2Ab2 t-Nosp-FMV TS-SSU MazMir162 p-ubiq mz T-35S p-ubiq mz pmi t-Nosvip3Aa20 intrn 9 PEPC 19. Sistema de deteccin de OGMs Detectar el DNA transgnico insertado. Detectar la nueva protena expresada. Detectar el producto de una reaccin enzimtica. Fin: Garantizar la trazabilidad de los productos GM y el cumplimiento de las normas de etiquetado. Estrategia: Explotar las diferencias entre el organismo transgnico y la variedad no modificada. 20. Mtodos cualitativos Determinan la presencia o ausencia de material transgnico en materias primas o alimentos procesados. Deteccin de protenas (Elisa, Strips) Deteccin de ADN (PCR, microarreglos) 21. Tcnicas Inmunolgicas Tiras reactivas (Strip)ELISA Rpidos, sencillos. Requieren poco equipamiento. Sirven nicamente como rastreo primario de OGMs, no son especficos de evento. No son apropiados para utilizar en alimentos con alto gradode procesamiento. 22. Microarreglos Se basa en la hibridacin del ADN de la muestra, sobre un gran nmero de sondas fluorescentes adheridas en una matriz slida. Permite el rastreo simultneo de un gran nmero de fragmentos de ADN diferentes en una mezcla. Incrementa la facilidad y velocidad del anlisis. Actualmente en desarrollo. 23. PCR La PCR es una tcnica de amplificacin enzimtica in vitro que permite amplificar un fragmento especfico de ADN, situado entre dos regiones de secuencia conocida. Usa ciclos sucesivos de calentamiento y enfriamiento de las muestras para producir copias de la molcula de ADN blanco. 24. reaccin de PCR 1era etapa Desnaturalizacin del ADN molde Temperatura = 92- 97 C Temperatura = De acuerdo a la composicin de las bases del par de cebadores (55-65C) 2da etapa Apareamiento de los cebador 5 53 3 OH OH ADN pol ADN pol dNTPs dNTPs Temperatura = 68 - 72 C (depende de la enzima) 3era etapa Extensin 25. Ciclado Muy sensible, permite la deteccin de secuencias transgnicas a nivel de trazas. Especfica, capaz de detectar la secuencia blanco de ADN dentro de una mezcla compleja. Apropiados para detectar e identificar eventos de transformacin. CICLADO genera una amplificacin exponencial del fragmento de ADN deseado 26. PlantaPlanta PromotorPromotor PotenciadorPotenciador Gen de intersGen de inters TerminadorTerminador PlantaPlanta RastreoRastreo Especfica de genEspecfica de gen RastreoRastreo Especfica de construccinEspecfica de construccin Estrategias de Deteccin e Identificacin de transgenes por PCR Existen cuatro niveles de especificidad para los anlisis de transgnesis por PCR, dependiendo del blanco al cual estn dirigidos los cebadores. (De arriba hacia abajo va aumentando el nivel de especificidad). Especfica de eventoEspecfica de evento Especfica de eventoEspecfica de evento 27. Normas Internacionales y protocolos vali