siero autologo - protocollo sperimentale
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A ‘modified’ protocol for autologous serum skin test.
In vivo and in vitro studies in a cohort of 30 patients with chronic urticaria.
F. Fassio, O. Rossi, M.G. Giudizi, R. Biagiotti, F. Palandri, S. Castiglione, A. Vultaggio, A. Matucci, E. Maggi
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia (Direttore Prof. E. Maggi)
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Razionale per lo studio (1)
“The ASST is an in vivo test which assess autoreactivity...”EAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
“What mediators result in autoreactivity?”EAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
“...the need for standardization of ASST”EAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
“...avoiding the skin know to have spontaneous wheals in the previous 48 h”EAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
“skin testing should be done off antihistamines for at least 2-3 days”EAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Razionale per lo studio (2)
Le variabili fisiche condizionano il risultato dell’ASST?
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Pazienti e Metodi
ASST secondo le linee guida (cASST)EAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
• Risultato positivo se diametro del pomfo > 2 mm (invece di 1,5 mm)• Test effettuato in duplice prova, su entrambi gli avambracci• APST, come in Asero et al., JACI 2006
30 pazienti con orticaria cronicasecondo la definizione EAACI/GA2LEN/WAO
25 donneEtà media 49 anni (range 22-73)
20interruzione delle terapie
10non è stato possibile
interrompere le terapie
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Protocollo modificato: mASST
ProceduraEAACI/GA2LEN Consensus Report on ASST in Urticaria, Allergy 2009
• Prelievo con materiale idoneo• Attesa di 30’ a temperatura ambiente• Separazione mediante centrifugazione a 450g• Iniezione intradermica sulla superficie volare dell’avambraccio
Differisce dal protocollo cASST per l’incubazione di 30 minuti a 37°C
invece che a temperatura ambiente
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Risultati (1): positività ASST
40%
60%
Siero autologo: solo cASST
ASST
neg
40%
33%
27%
Siero autologo: cASST + mASST
ASSTnegmASST
I risultati positivi aumentano dal 40% al 67%
p < 0.05
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Risultati (2): Triptasi
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 210
1
2
3
4
5
6
7
8
Confronto dei dosaggi della Triptasi sierica
Triptasi TA Triptasi 37°C
Pazienti
Trip
tasi
No degranulazione aspecifica!
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Risultati (3): positività APST
19%
81%
Test con plasma autologo
ASST
neg
?
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Risultati (3): sottogruppo No Terapie
45%
40%
15%cASST e mASST: no terapie
ASST
neg
mASST
p = ns
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Risultati (4): sottogruppo In Terapia
30%
20%
50%
cASST e mASST: pazienti in terapia
ASSTnegmASST
p < 0.05
Le positività passano dal 30% all’80%
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Conclusioni
Abbiamo condotto uno studio preliminare con un protocollo ASST modificato, che differisce dal test ‘classico’ per un’incubazione a 37°C di 30 minuti
Con il protocollo modificato, il numero di risultati positivi aumenta, sopratutto nel sottogruppo di pazienti che non hanno interrotto le terapie
Questo suggerisce che il meccanismo patogenetico potrebbe essere differente nei soggetti con orticaria di grado più severo, che non possono sospendere le terapie
Necessari altri studi!
IFIACI Trieste, 3 Ottobre 2009
Grazie!
1° Winter School di Allergologia – Febbraio 2010SIAIC sez. Toscana – Emilia Romagna – S.Marino
http://www.siaictoscana.it