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SIFILIS GESTACIONAL Y CONGENITA
Diagnostico por Laboratorio
MAYO
2017
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“Es muy sencillo el diagnóstico de la sífilis, lo difícil es tenerlo en
mente”. Alfred Fournier
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Pruebas serológicas
No treponémicas
Sustancias reagínicas
(producidas por destrucción de
células)
Cardiolipinas
Treponémicas
Anticuerpos contra T. pallidum
T. palidum
Grupo de Microbiología
Detectan
Ag utilizado
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PRUEBAS SEROLÓGICAS
PRUEBAS NO TREPONÉMICAS:
VDRL, RPR.
PRUEBAS TREPONÉMICAS:
TPPA, TP-HA, Elisa.IgM IgG, pruebas rápidas.
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Ag. Ac. PRUEBA UTILIDAD
NO
TREPONÉMICA
Heterólogos
VDRL
RPR USR
Diagnóstico
Control de Tto.
Seguimiento
TREPONÉMICAS
Específicos
TPHA
TPPA
PRUEBA
RAPIDA
Confirmación
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CUALIDADES
SENSIBILIDAD
ESPECIFICIDAD
Capacidad de detectar muestras
positivas.
Capacidad de reaccionar exclusivamente frente
a casos de Sífilis.
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REACTIVO CON CONTROLES TEMPERATURA: 23 - 29 O CFORMATO TEMPERATURA
PLACAS / LÁMINAS AGITADOR CRONÓMETRO. AGUJAS CALIBRADAS
MICROSCOPIO
EQUIPOS CON MANTENIMIENTO
REQUERIMIENTOS ESENCIALES
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FLOCULACÍÓN MICROSCÓPICA
Fundamento
La prueba de VDRL es una prueba de
microfloculación la cual detecta
anticuerpos heterólogos (anticuerpos
inespecíficos) y utiliza un antígeno de
origen no treponémico. El antígeno al
unirse a los anticuerpos en el suero o
líquido cefalorraquídeo de pacientes con
sífilis, produce el fenómeno de floculación
VDRL
(Venereal Disease Research Laboratory)
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Interpretación VDRL cualitativa
Lectura Reporte
Grumos medianos y
grandes Reactivo (R)
Grumos pequeños
pero definidos Reactivo 1 dils
Antes 0 dils
Ausencia de grumos
o
rugosidades mínimas
No Reactivo
(NR)
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Interpretación VDRL cuantitativa
Dilución de suero Reporte Suero no
diluido 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
R W N N N N Reactivo dilución 1:1 o 1 dils.
R R W N N N Reactivo dilución 1:2 o 2 dils.
R R R W N N Reactivo dilución 1:4 o 4 dils.
W W R R W N Reactivo dilución 1:8 o 8 dils.
N (rugoso) W R R R N Reactivo dilución 1:16 o 16 dils.
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No informar
Reactivo 0 dils
Reactivo 3 dils
Reactivo 10 dils
Reactivo 12 dils
R ½
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Fundamento
Es igual al VDRL pero el antígeno contiene clorhidrato de colina para eliminar la inactivación del suero por calor, EDTA que favorece la estabilidad de la suspensión y partículas de carbón como agente visualizante.
RPR (Rapid Plasma Reagent)
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Interpretación RPR cualitativa
Lectura Reporte Grumos característicos y claros dentro del
anillo de prueba (intensamente reactivo) a
grumos delicados pero definidos
(mínimamente o moderadamente
reactivos).
Reactivo (R)
Rugosidades mínimas pero ausencia de
grumos. No Reactivo (NR)
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R= reactivo Rm= mínima reactividad N= no reactivo
Interpretación RPR cuantitativa
Dilución de suero Reporte Suero no
diluido 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16
Rm N N N N Reactivo dilución 1:1 o 1 dils.
R R N N N Reactivo dilución 1:2 o 2 dils.
R R R N N Reactivo dilución 1:4 o 4 dils.
R R R Rm N Reactivo dilución 1:8 o 8 dils.
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Factores que alteran el resultado de las pruebas no treponémicas
Temperatura (óptima 23-29 ºC)
Fenómeno de prozona
Diámetro del área de reacción
No guardar la proporción antígeno-muestra
No seguir las indicaciones del fabricante
Inadecuado almacenamiento de los reactivos
Mezclar la reacción
Error técnico
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Pruebas no treponémicas
Falsos Positivos Falsos negativos
•Lupus •Drogadicción •Artritis reumatoidea •Mononucleosis •Hepatitis •Muestras hemolizadas o lipémicas
•Efecto prozona (alta
reactividad)
•Fases muy tempranas del período primario •Temperatura de la prueba
Rev Cubana Med Trop 2006;58(1):
Grupo de Microbiología
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Pruebas Treponémicas
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TPHA (T. pallidum haemagglutination assay)
Fundamento
Los anticuerpos dirigidos contra T. pallidum presentes en suero humano
provocan la aglutinación de los hematíes de ave en suspensión, sensibilizados con
antígenos de T.pallidum
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TPPA (T. pallidum passive
aglutination)
Fundamento
Se utilizan partículas de gelatina como soporte, sensibilizadas con T. pallidum antígeno purificado (cepa Nichols). Esta prueba se basa en que en presencia de anticuerpos de T. palidum en suero o plasma humano se presenta aglutinación de las partículas sensibilizadas.
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Pruebas treponémicas ELISA
Es una ELISA usada como prueba
confirmatoria en el diagnostico de sífilis.
Detecta IgG e IgM.
Consiste en micropozos sensibilizados
con T. pallidum, que al adicionar suero
del paciente con anticuerpos específicos
reaccionan revelando un color detectable
por absorbancia.
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Negative
Positive
Put 20ul of WB(10ul of S,P)
into the sample hole
Add 3~4 drops of assay diluent
into the sample hole
5'~20'
Interpret test result at
5~20minutes.
Standard Diagnostic, Inc.
Prueba rápida para sífilis Fundamento:
Las pruebas rápidas para la determinación de sífilis son un ensayo inmunocromatográfico en fase sólida para detección cualitativa de
anticuerpos tipo IgG, IgM e IgA contra Treponema pallidum.
www.themegallery.com
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Prueba rápida para sífilis
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Utilidad prueba rápida para sífilis
• Tamizaje:
-Lugares donde no se dispone de otras pruebas
-Dificultades de acceso para el retorno de pacientes por los resultados
• Confirmación:
-Diagnóstico y tratamiento oportunos
-Cuando resultan negativas se evitan tratamientos innecesarios.
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Estudio de evaluación diagnóstica OMS
UNDP/ World Bank / WHO Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases (TDR) The Sexually Transmitted Diseases Diagnostics Initiative (SDI).
Diagnostics Evaluation Series; Laboratory-based evaluation of rapid syphilis diagnostics Results from 8 SDI Sites. Disponible en:
http://www.who.int/std_diagnostics/publications/meetings/SDI_Report.pdf
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Falsos positivos • Son transitorios y de causa desconocida
• FTA-ABS: LES, discoide e inducido por medicamentos
• Edad avanzada
• Uso de sorbentes utilizados
• Drogadictos
• Lepra
• Enfermedades del colágeno
2008 European Guideline on the Management of Syphilis
Pruebas Treponemicas
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ALGORITMO SUGERIDO
No se cuente con la prueba de RPR ó VDRL
Según la OMS
Sangre
Prueba Rápida
Positiva
Tratamiento
Negativa
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UTILIZACION DE PRUEBA RÁPIDA COMO COMPLEMENTARIA
Sangre o Suero
VDRL o RPR
Reactiva
Prueba Rápida
Positiva
Tratamiento
Negativa
Realizar otra prueba en 6
semanas
Positiva
Tratamiento
Negativa
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Formato EEID
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ERRORES MAS FRECUENTES
• Formato.
• Viales.
• Lectura-Reporte
• Tipo de pruebas.
• Muestras escasas.
• Muestras hemolizados.
• Instrucciones del fabricante.
• Condiciones ambientales.
• Instrumentos con calibración
• Errores humanos
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10
47
7 6 5
29
3
14
VOLUMEN DILIGENCIAMIENTO AG REPORTE
ERRORES FRECUENTES 2016 2017
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CONCORDACIA DE SIFILIS GESTACIONAL Y
CONGENITA 2014-2016
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150
155
160
165
170
175
Laboratorios participantes
160
175
160
LABORATORIOS PARTICIPANTES PRUEBAS NO TREPONEMICAS EN LA EEID PARA SIFILIS
2014 2015 2016
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92
93
94
95
96
97
98
99
Concordancia de la Red
97,48
98,65
94,73
CONCORDANCIA PRUEBAS NO TREPONEMICAS
2014 2015 2016
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ELEMENTOS PARA LA CALIFICACION DE LA CONCORDANCIA
• Diligenciamiento del formato.
• Reporte del resultado (Reporte, título), siglas, fracciones y lecturas.
• Envió de muestras ( viales plásticos de polipropileno de 2ml ).
%
Concordancia
Sifilis
INTERPRETACIÓN
100 Excelente
99 -90 Bueno
89-80 Moderado
79-60 Bajo
≤ 59 Inadecuado
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0,0% 10,0% 20,0% 30,0% 40,0% 50,0% 60,0% 70,0%
Excelente
Bueno
Moderado
Bajo
Inadecuado
65,6%
14,4%
12,5%
5,0%
2,5%
ESTADO DE LOS LABORATORIOS 2016 PRUEBA NO TREPONEMICAS EEID
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0
10
20
30
40
50
60
Laboratorios participantes
12
18
26
PARTICIPACION EEID PRUEBAS TREPONEMICAS
2014 2015 2016
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90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
Concordancia de la Red
96,49
100
93,53
CONCORDANCIA EEID PRUEBA TREPONEMICA
2014
2015
2016
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Excelente
Bueno
Moderado
Bajo
Inadecuado
65,4%
7,7%
19,2%
3,8%
3,8%
ESTADO DE LOS LABORATORIOS PARTICIPANTES EEID 2016 PRUEBA TREPONEMICAS
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1.PASO
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2. PASO
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3. PASO
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4. PASO
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5. PASO
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6.PASO
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7. PASO
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Gracias