Prosedur Pengoperasian Standar Agilent 8453 Spectrophotometer

Cara Memasukkan Cell:

1. Naikkan pengunci cell

3. Kunci cell dengan cara mengarahkan tuas pengunci ke bawah.

2. Masukkan cell, pastikan menghadap ke arah yang benar. Sisi yang buram tidak boleh pada jalur cahaya.

Memulai Sesi Pengukuran:

1. Nyalakan PC, monitor & printer. 2. Log on ke Operating system dari PC.

Periksa apakah Bootp server dijalankan pada system taskbar.

3. Nyalakan Spectro Agilent 8453

BootP server yang sedang berjalan akan memberi IP address ke Spectro. 4. Jalankan sesi pengukuran dengan memilih Instrument 1 online

(Instrument 1 offline digunakan untuk optimasi method dan evaluasi data)

Al-Jabbar Page 1 +6281911306098 1

Mengukur Penyerapan Caffeine pada 273nm: Bagian ini menjelaskan bagaimana mengukur penyerapan, dalam hal ini sample caffeine. Pengukuran caffeine sample juga digunakan untuk IQ (Installation Qualification) pada Spectro Agilent 8453.

1. Pastikan software pada mode Standard. Mode ini diindikasikan pada toolbar Agilent chemstation

2. Pilih Fixed Wavelength task dalam kotak panel analisis 3. Klik Setup dalam panel analysis untuk membuka bagian parameter

4. Ketik panjang gelombang yang diinginkan , dalam bagian wavelength.

Atur tampilan spectral pada jangkauan panjang gelombang dari 190 nm hingga 400 nm pada bagian Display spectrum. Klik OK untuk set parameter.

Al-Jabbar Page 2 +6281911306098 2

5. Isi cell dengan aqua des. Masukkan cell dan pastikan bagian transparan

menghadap bagian depan dan belakang dari Spectro. 6. Klik tombol Blank pada bagian depan Spectro atau klik Blank pada panel

instrumen untuk memulai pengukuran

7. Ingat orientasi dari kuvet pada holder kuvet. Angkat pengunci untuk mengambil kuvet, ambil kuvet dan bilas tiga kali dengan sekitar 1ml dari sample kafein. Lalu isi kuvet dengan sekitar 3ml sampel kafein. Yakinkan jendela kuvet bersih dan posisikan kembali kuvet pada orientasi yang sama untuk pengukuran reference. Kunci holder kuvet.

8. Tekan tombol Sampledi depan Spectro atau klik Sample pada panel

instrument untuk memulai pengukuran.

9. Tampilan selanjutnya menunjukkan spectrum sampel kafein dengan garis vertical menunjukkan panjang gelombang yang diinginkan. Di bawah

Al-Jabbar Page 3 +6281911306098 3

spektrum adalah table Sample/Result yang menunjukkan pembacaan penyerapan pada 273nm

Menyimpan parameter sebagai method: Sesi ini menunjukkan bagaimana menyimpan setting untuk pengukuran selanjutnya.

1. Pilih Save Method As dari menu File atau klik ikon

2. Hal ini akan menampilkan kotak Save Method As. Ketik nama method

dalam bagian File name, contohnya, Caffeine.m. klik OK untuk menyimpan method.

Al-Jabbar Page 4 +6281911306098 4

Memanggil dan Mencetak Method: 1. Pilih Load Method dari menu File aau klik icon pada toolbar

Catatan: Jika method yang sedang aktif terdapat modifikasi, maka akan muncul pertanyaan apakah perubahannya disimpan atau diabaikan

Al-Jabbar Page 5 +6281911306098 5

2. Load Method ditampilkan, method information ditampilkan pada sesi

File Information.

Al-Jabbar Page 6 +6281911306098 6

3. Jika ingin memanggil method ini, klik OK

Catatan: Jika ada perubahan parameter pada method yang aktif, terdapat indikasi pada bagian toolbar

4. Untuk mencetak method, pilih Print, Method dari menu File

Al-Jabbar Page 7 +6281911306098 7

Menyimpan dan Memanggil Data: 1. Pilih Save, Sample As dari menu File atau klik ikon pada toolbar

2. Pilih file data yang sudahada dalam kotak File name selection dari Save

Spectra As atau ketik nama file ke dalam kotak File name edit.

3. Klik OK untuk memulai operasi

Al-Jabbar Page 8 +6281911306098 8

Menyimpan Spektrum yang dipilih

1. Pilih spectrum yang diinginkan dalam window grafik

Atau dalam bentuk tabular di window Sample/Results Table

2. Pilih Save, Selected Spectra As dari menu File.

3. Pilih data yang telah ada dalam kotak File name dari bagian Save Spectra

As atau maukkan nama yang valid ke dalam kotak File name edit.

Al-Jabbar Page 9 +6281911306098 9

4. Tekan OK untuk memulai operasi. Memanggil Spektrum: 1. Pilih Load, Samplesdari menu File

2. Pilih file data dalam kotak File name selector dari Load Spectra untuk

masuk ke bagian SAMPLES

Al-Jabbar Page 10 +6281911306098 10

3. Klik OK untuk memulai operasi. Spektrum yang terdapat pada file data

ditambahkan ke file penyimpanan Chemstation. Menghapus Spektrum: 1. Pilih Clear, Samples dari menu Edit atau klik ikonpada toolbar

Al-Jabbar Page 11 +6281911306098 11

Print Preview Report: 1. Pilih PrintPreview, Results dari menu File.

2. Report yang dihasilkan akan tampil pada window preview

Al-Jabbar Page 12 +6281911306098 12

Analisa kuantitatif menggunakan Kalibrasi dengan Standar: Setup 1. Yakinkan software beradapada mode Standard. Mode ini diindikasikan

pada toolbar Agilent Chemstation.

2. Pilih Quantification dalam kotak panel analysis.

Al-Jabbar Page 13 +6281911306098 13

3. Panel baru akan ditampilkan dan Quantification Parameter dibuka secara

otomatis.

4. Set panjang gelombang analisis pada 273nm, ketikkan Caffeine untuk

Analyte name, set Calibration curve type ke Linear, pilih Concentration entry dan gunakan mg/l sebagai satuannya. Aktifkan Prompt for Standard information dan Prompt for sample information. Pilih Absorbance sebagai Data type dan set Display spectrum dari 190nm hingga 340nm.

Al-Jabbar Page 14 +6281911306098 14

5. Klik OK untuk set parameter.

Kalibrasi:

1. Isi kuvet dengan air yang telah didestilasi. Masukkan kuvet. 2. Tekan tombol Blank di depan Spectro atau klik Blank pada panel

Instrumen untuk memulai pengukuran.

Al-Jabbar Page 15 +6281911306098 15

3. Ingat orientasi dari kuvet pada holder kuvet. Angkat pengunci untuk

mengambil kuvet, ambil kuvet dan bilas tiga kali dengan sekitar 1ml dari sample kafein. Lalu isi kuvet dengan sekitar 3ml sampel kafein. Yakinkan jendela kuvet bersih dan posisikan kembali kuvet pada orientasi yang sama untuk pengukuran reference. Kunci holder kuvet.

4. Tekan tombol Standard di depan Spectro atau klik Standard pada panel

instrument untuk memulai pengukuran.

Al-Jabbar Page 16 +6281911306098 16

5. Masukkan informasi standar ke dalam bagian Standard Information dan klik OK.

6. Agilent chemstation otomatis mengkalibrasi dan menampilkan hasil kalibrasi. Setelah kalibrasi berhasil, kurva kalibrasi menunjukkan warna hijau. Ini mengindikasikan bahwa method siap untuk analisa.

Analisis: 1. Ingat orientasi dari kuvet pada holder kuvet. Angkat pengunci untuk

mengambil kuvet, ambil kuvet dan bilas tiga kali dengan sekitar 1ml dari sample kafein. Lalu isi kuvet dengan sekitar 3ml sampel kafein. Yakinkan jendela kuvet bersih dan posisikan kembali kuvet pada orientasi yang sama untuk pengukuran reference. Kunci holder kuvet.

2. Tekan tombol Sample di depan Spectro atau klik Sample pada panel

instrument untuk memulai pengukuran.

Al-Jabbar Page 17 +6281911306098 17

3. Masukkan sample information dalam kotak Sample Information dan klik

OK.

Al-Jabbar Page 18 +6281911306098 18

Agilent 8453 Self Test: 1. Pastikan Chemstation berada pada mode Verification and Diagnostic.

Mode ini diindikasikan pada toolbar Chemstatio.

2. Pilih Self-Test pada kotak panel analisa

3. Pilih Self-Test, mulai dari menu task atau klik Start untuk memulai self-

test.

Al-Jabbar Page 19 +6281911306098 19

4. Hasil Self-Test akan ditampilkan dengan criteria Pass/Fail

5.

Al-Jabbar Page 20 +6281911306098 20

Mengganti Lampu Deuterium atau Tungsten: 1. Matikan Spectro dan lepas kabel listrik. 2. Buka plastic pintu lampu di sisi kanan instrument

3. untuk membuka pintu logam di belakang pintu plastic, geser mekanisme

pengunci dan secara bersamaan tarik pintu keluar.

4. Geser pintu logam keluar agar dapat mengakses lampu

5. untuk melepas kabel lampu, tekan plug yang menghubungkan lampu

tungsten atau deuterium pada PCB secara bersamaan dan mengengkatnya.

Al-Jabbar Page 21 +6281911306098 21

6. Gunakan obeng Pozidriv untu membuka kedua baut tiap lampudan

keluarkan dengan memegang ring lampu. 7. Letakkan lampu pada tissue optic atau tempat lain yang tidak menampung

debu. 8. masukkan lampu baru dengan memegang pada bagian ring-nya ke dalam

rumah lampu. Lampu Tungsten memiliki bagian yang rata yang menunjuk pada lokasi lampu Deuterium. Lampu Deuterium memiliki lekukan untuk pin pada rumah lampu.

9. pasang baut pada masing-masing lampu dan kerasi. 10. hubungkan kabel lampu ke PCB. 11. Geser pintu logam dan tutup hingga terkunci. Tutup pintu plastic.

12. Hubungkan kabel listrik & nyalakan Spectro.

Al-Jabbar Page 22 +6281911306098 22

Membersihkan Lensa: Membersihkan lensa yang dapa diakses dari tempat sampel direkomendasikan setahun sekali, atau lebih sering jika mengoperasikan Spectro pada lingkungan yang kotor. Indikasi lensa yang kotor yaitu setelah mengganti lampu- tes intensitas menunjukkan di bawah level spesifikasi. Membersihkan Lensa Source dari sisi tempat Sample:

1. matikan Spectro & lepas kabel listrik. 2. Ambil tempat kuvet dari tempat sample. 3. untuk akses yang lebih baik, penutup plastk dan logamdapat dilepas. 4. Basahi sedikit cotton bud dengan isopropanol dan sapukan secara

perlahan pada permukaan lensa Source. Ulang beberapa kali dengan cotton bud kering dan alcohol beberapa kali.

5. gunakan canister udara bertekanan yang bebas oli (seperti yang

digunakan untuk membersihkan lensa fotografi) untuk lensa source yang lebih bersih.

6. Pasang kembali penutup jika sebelumnya dibuka. 7. pasang kembali tempat kuvet. Hubungkan sumber listrik. Periksa bahwa

spectro dapat melalui self-test.

Al-Jabbar Page 23 +6281911306098 23