PIROGEN PIROGEN : SUATU PRODUK MIKROORGANISME, TERUTAMA BAKTERI GRAM NEGATIF DAN DAPAT BERUPA ENDOTOKSIN DARI BAKTERI INI. ENDOTOKSIN INI TERDIRI ATAS SENYAWA KOMPLEKS YANG MERUPAKAN SUATU SENYAWA LIPOPOLISAKARIDA PYROGEN BERASAL DARI KATA PYRO = KEADAAN ATAU BENTUK YANG BERHUBUNGAN DENGAN PANAS, GEN = MENGHASILKAN

SUBSTAN DAN PREPARAT YANG HARUS BEBAS PIROGEN :

AIR UNTUK INJEKSI LARUTAN INFUS ANTIBIOTIKAGARAM ASAM ORGANIKPRODUK-PRODUK HEWANI : CHORIONIC GONADOTROPIN, GELATIN DAN HEPARINOBAT TETES DAN SUBSTAN LAIN, YANG DIBERIKAN I.V UNTUK MAKSUD DIAGNOSTIK, INULIN, INDIGOCARMINPRODUK-PRODUK DARAH ; HUMAN ALBUMIN

1923 SEIBERT MEMBEUKTIKAN BAHWA PIROGEN ADALAH SUBSTANCE YANG BERSIFAT :

TIDAK TERSARINGTHERSTABILNON VOLATILE

SUMBER PIROGEN :PELARUT OBAT SUNTIKOBAT ITU SENDIRIPERALATAN CARA PENYIMPANAN

ADANYA PIROGEN DALAM LARUTAN INJEKSI BISA MENJADI HAL SERIUS JIKA OBAT SUNTIK DALAM JUMLAH BESAR (MISAL INFUS), INI DISEBABKAN KARENA :

INJEKSI VOLUME BESAR AKAN MENGANDUNG PIROGEN YANG BANYAK PULA INJEKSI VOLUME BESAR , BIASANYA DIBERIKAN INTRAVENA, AKIBATNYA PIROGEN AKAN MEMBERIKAN EFEK YANG CEPAT PASIEN YANG MENERIMA CAIRAN INFUS INI BIASANYA PASIEN GAWAT, BILA TERJADIKENAIKAN TEMPERATUS TUBUH BISA BERAKIBAT FATAL.OLEH KARENA ITU, LARUTAN INFUS (INJEKSI VOLUME BESAR) HARUS BEBAS PIROGEN, BPC MENSYARATKAN VOLUME OBAT SUNTIK YANG LEBIH BESAR DARI 10 ML HARUS BEBAS PIROGEN

SIFAR SIFAT PIROGEN :

THERMOSTABIL, UNTUK MENGHANCURKAN PIROGEN DIBUTUHKAN TEMPERATUR YANG LEBIH TINGGI DARI TEMPERATUR BIASA, YANG DIGUNKAKAN UNTUK PROSES STERILISASI (> 200 O C)LARUT DALAM AIR, TIDAK DAPAT DIHILANGKAN DENGAN PENYARING BAKTERI TIDAK DIPENGARUHI OLEH BAKTERISIDA YANG BIASA TIDAK MENGUAPBERAT MOLEKUL ANTARA 15.000 4.000.000 DA UKURAN UMUMNYA 1 -50 MIKRON, YANG DAPAT DITENTUKAN SECARA DIALISA

PENENTUAN PIROGEN PENENTUAN KWANTITATIF PIROGEN SECARA FISIKO KIMIA :

DENGAN FOTOKOLORIMETRIPOLAROGRAFIELEKTROFORESA SPEKTROFOTOMETRI

PENENTUAN SECARA KWALITATIF SECARA BIOLOGIS :PENGUKURAN TEMPERATUR BADDAN HEWAN PERCOBAAN :HEWAN PERCOBAAN YANG DIGUNAKAN : KELINCI , KARENA KELINCI ADALAH HEWAN YANG SANGAT PEKA TERHADAP PIROGEN PRINSIP : MENGUKUR KENAIKAN TEMPERATUR TUBUH KELINCI, BILA DIINJEKSIKAN DENGAN LARUTAN OBAT SUNTIK YANG MENGANDUNG PIROGEN SECARA INTRAVENA DITELINGA KELINCI , PENGUKURAN TEMPERATUS TUBUH DILAKUKAN PADA DAERAH DUBUR.KELINCI YANG DIGUNAKAN, HARUSLAH SELAMA SEMINGGU SEBELUM PENGUJIAN TIDAK MENUNJUKKAN PENURUNAN BERAT BADAN. ALAT : TERMOMETER DENGAN KETELITIAN 0,1 DERAJAT DAN DAPAT DIMASUKKAN KE DALAM DUBUR SEDALAM LEBIH KURANG 5 CM.

SEDIAAN UJI : ZAT UJI DILARUTKAN ATAU DIENCERKAN DENGAN LARUTAN NATRIUM KLORIDA P. STERIL BEBES PIROGEN

PERHITUNGAN SEL DARAH PUTIHINJEKSI LARUTAN OBAT SUNTIK YANG MENGANDUNG PIROGEN PADA PEMBULUH DARAH BALIK KELINCI AKAN MENYEBABKAN TERJADINYA PERUBAHAN SEL-SEL DARAH PUTIH. EX. PENURUNAN LIMFOSIT DAN MENAIKAN NETROFIL.TEST LIMULUS PRINSIP : LYMULUS AMOBOCYTES LYSATE YANG BERUPA EKSTRAK CAIR SEL-SEL DARAH KEPITING LADAM KUDA (LIMULUS POLYPHEMUS) AKAN MENGGUMPAL (MEMBENTUK GEL) DENGAN ADANYA PIROGEN

CAIRAAN LIMFA DAN DARAH KEPITING INI MENGANDUNG AMOEBOCYTEN (MENGANDUNG PROTEIN YANG DAPAT MENGGUMPAL /PROCOAGULANTIN) = LAL ( LIMULUS AMOBOCYTES LYSATE)BAKTERI GRAM NEGATIF BEREAKSI DENGAN EKSTRAK SEL DARAH KEPITING LIMULUS POLYPHEMUS. METODE LAL SANGAT SENSITIF DAN AKURAT UNTUK PENGUJIAN PIROGEN SECARA KWALITATIF ; BAGIAN LIPID A DARI MOLEKUL ENDOTOKSIN DAPAT BEREKSI MENJADI PENGGUMPALAN (GEL)DENGAN LIMULUS LYSATE .

Penghilangan Pirogen Ada beberapa metode untuk menghilangkan pirogen :

Cara Penyulingan :biasanya digunakan untuk membebaskan pirogen dari air. Dilakukan penyulingan bertingkat, dengan alat destilasi tertutup. Pada saat penyulingan dapat ditambahkan bahan kimia dan absorbensia ex. 0,5 % KMnO4, atau dengan bubuk pemutih . Cara pemanasan larutan : waktu dibutuhkan 6-8 jam, suhu 120 derajat, 30 menit 1 jam suhu 140 derajat. (autoclave)dalam keadaan kering : untuk alat dan bahan yang tahan pemanasan : selama 30 menit 250 derajat, 2 jam 200 derajat.

3. Cara Penyerapan pirogen dapat dihilangkan dg cara adsorpsi dengan menggunakan f ilter asbes aktif atau karbon aktif. Pirogen dapat diserap secara kimia dan fisika. Bentuk saringan : asbes aktif dan norit aktif (0,1 0,3 %)

Bentuk bubuk : carbo adsorben, asbes aktif (1 %)