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〔熟す。o学1城 X岳虫l骨8斗コ

自然発症高脂家兎の性状と系統開発に関する研究

渡 辺 嘉 雄

神戸大学医学部動物実験施設

STUDIES ON CHARACTERISTICS OF SPONTANEOUSLYHYPERLIPEMIC RABBITS AND DEVELOPMENTOF THE STRAINS WITH SUCH PROPERTY

Yoshio WATANABE

EI夕 2ri初 夕れ″αどムれ″初a′ とこうθraナθヮ ,【θう2」れわ夕rs″り,SC力θθ′?/2И夕どガCガれタ

【″s″ %θ 力″‐cれθ, r力 ″′α_ヵ ″, Kθう夕‐sん″び5θ,s苺α秘

Abstract: A large number of hereditary diseases of various animals species similar to

those of man or of spontaneous disease models in iaboratory animals ana10gous to human

diseases have been discovered. Yet, no model strai■ of spontaneously hyperlipideEliCanimals has been introduced. Therefore, anll■als with hyperlipidemic induced experi_

mentally by adHlinistration of lipid or drugs are usually used in experimental studies.

The problems are inherent in the use of such animals with experiinental hyperlipemia

as they present clinical pictures which are not applicable to studies on the human

counterpart; hence a strong demand for model laboratory aniinals with spontaneously

developed hyperlipideHlia.

In a course of fo1low_up study of serous cholesterol(S‐ Ch)levels in Japanese whiterabbits(OryCt01agus cuniculus var. domesticus)a spOntaneously hyperlipeHlic rabbit

(HLR_P)waS fOund at our laboratory, and a foundation was established for a strain ofdisease mOdel anil■ als by inbreeding of the HLR_P. Thl breeding process of the HLRstrain, the clinical and pathologic features of these anil■ als and the siinilarity of their

condition to hyperlipide■ lia in man are as follows:

1) Inbreeding was carried out in two lines, viz. sister‐ brother mating and parent‐

。rspring mating. As a result, the second lllial generation showed an accurrence of

HLR of 15.0% (3/20),the third lllial generation 50,0% (26/52)and the fOurth genera‐

tion 80,0%す (16/20)respectively, whereas no HLR appeared in the irst rllial generation,suggesting the condition being a recessive trait.

In the fouFth IIlial generation, the coettcients of inbreeding and relationship were

respectively as high as 50% and 76.3%. Four cases of splay_leg and one case of infer_

tility were encOuntered as the only unfavorable factors in the course of successiヤ e in・

breeding. However)no slgniflcant depression of delivery rate, and 、veanling rate were

observed in any of the consecutive inbred generations.

It was practicable to diagnose the HLR phenotype in an early Stage by reference

to S‐ ch leveis deterHlined at weanling. That is, in anil■ als exhibiting s_ch levels not

higher than 300 1ng/1001n″ at the tiine of weanling, the S_ch value declined progressively

私rith advancing age to fall virtually within the normal llinits of thisrspecies. Id coni

trast,those showing more than 3001ng/100 inJ at weanling continued to■ display marked_ly high levels of S_ch even after sexual maturation.Piasma β‐lipoprttein ぐ律韓 )andtotal lipid concentration were also abnormally elevated in these aniinals. Thё se, there_

fore, are inferred to have become homozygous for the gene by 、vhich thetd● vdlopment

1977年 2月 25日 受付

100

of hyperliperlia is cOntrolled.

2) A prominent clinical feature characteristic of HLR is conspicuous elevation of

total lipid concentration which is the sum of various serunl lipid components including

S_ch and β_LP. The S_ch ievel was determined to be 400± 70 mg/100 nl′ , the serum浄 ,

LP leve1 9.1± 1.5 units/1001■′ and the total lipid concentration l146± 270 1ng/100 in′ inthe HLR. These values are approxtinately 9, 10 and 4 til■ es as high as those in normalrabbits respectively. Prominent in the electrophOretic pattern of the serunl lipoprotein

fractiOn from the HLR were hyperchromatic β lipoprotein bands and an increased preβ‐lipOprOtein content.

wrhile there was no evidence of hyperuricacidemia, abnormalities in carbohydratemetabolism Or any chromOsOmal morpho10gical abnormality, lipid calcinosis like degen_

eratio五 of the auricular artery and lipemic bulbus oculi 、vere grossly apparent.3) After sacriIIce, atheroscierotic lesions were evident extensively in the aorta and

renal arteries and also clearly demonstrable in the ventricles and valves of the heart.

Nodular Or plane xanthOmas 、vere conspicuous over the articuli digitorums.Thus the HLR was understood to shOw recessive inheritance of this trait with

clinical evidence of abnOrmally high S_ch, β_LP and total l,pid levels of serunl andserum lipoprOtein electrophoretic pattern was characterized by hyperchromatic

β_LPbands and increased pre β_lipOprOtein content.

Besides these the mode of development and types of atheromatous iesions andxanthomas were typical in these rabbits exhibiting no evidence of hyperuricacideHlia

Or abnormalities in carbOhydrate metabolism.

Hyperlipenlia in man was classilled into 5 types by Fredrickson or WHO. TheFredricksOn types were therefore compared with the properties of HLR strain.

i) Properties Of the serum: In HLR strain, no creamtlike overlaying zone due tochy10HlicrOn characterizing Fredrickson type l or V was found in the quietly kept serum.

In the electrOphoretic indings, no thick stain due to chylomicron was noted at the or_

igina1 line Of the electrophoretogram. Consequently, no resemblance to Fredrickson

type l or V was fOund in the serum properties of HLR strain.

In Fredrickson type IV, a marked increase of neutral fat is said to be found with

norma1 0r Hlildly elevated S‐ ch value. In HLR strain, however, a marked rise of S_chvalue was noted, unlike the type IV.

The FredricksOn type II or III is said to be characterized by abnormally high values

of S_ch, β_lipoprotein and total lipids. In the electrophoretogram of lipoproteins, stain‐

ing of β Or pre β area iS Said to be found, with a marked resemblance to HLR strain.HLR strain therefore cOrrespOnds to Fredrickson type II or III in regard to serumproperties.

il) Comparison of the mode of inheritance.

HLR strain is trans■ litted by a recessive mode of inheritance, 、vhile Fredricksontype II or IV is inherited by a doHlinant mode. HLR strain is thus difFerent from

these type and reSembled type I, III and V inherited by a recessive mode of inheritance.

iii) COmparisbn of the mode of appearance of xanthoma

XanthOmas were seen in about 60%Of the cases of Fredrickson type I. These aregenerally exantttё hatOus, occurring at any places including the mucous membrane. Intype II, nodurar・ 。r aat xanthomas frequently appear on the Achilles tendon, tendon ofIIngers,and etttensOr side of the eibow joint. In type III, nodular, IIat or exanthematous

xanth6ma aplear in the upper and lower extremities and buttocks,with characteristic

n6d立 lar lesion around the eibOw and yellowish strial over the palin and soles. In types

IVra,d Vj appさ aranc1 0f xanthOma is said to be rather rare.

In HLR slrain especially HLR‐ P, characteristic nodular or nat xanthomas appeararound the digital joint and soles of the fore and hind legs, and involving the elbowjoint. The mOde of appearance of xanthoma in HLR strain therefore resembles that

101

in Fredrickson type I1 0r III.

i) COmparison of the mode of appearance of atheromaln FredricksOn types II, III and V, atheroma appears in the artery, Especially in

II, atheroma is said to appear in the aorta, cOronary artery and cerebral basal artery

in about 50% of caSes. In type III, the frequency Of such change is said tO be as high

as 60ラィ.

The autopsy performed in 8 animals of HLR strain revealed marked atheroma in

the aorta of all the anil■ als. In HLR_P, distinct atheroma are noted in the cOrOnary,

renal and cerebral arteries. In view Of such mode Of appearance of atherOma, HLRstrain resembles Fredrickson type II or III.

V)COmparison of hyperuricemiaSerum uric acid levels were lower in HLR strain than in normal rabbits. Hyper_

uriceHlia most frequently appears in type II of FredricksOn, Only occaslonally detected

in type III, IV and 、ヾand is never seen in type I. HLR strain therefOre appears tO

be different from type II, according to the mode of appearance of hyperuriceHlia.

Vi) COmparison of the abnormalities in sugar metabOlism

ln each type except in type l and II Of FredricksOn, sOme abnormalities Of sugar

metabolism are found. Especially in type IV, abnormal sugar metab01isHl is found in

90)イ・ In HLR strain,no abnormalities of sugar metabolism was noted,unlike type IV.Based on these flndings,IILR strain resembles type III in the classincation Of hyper_

lipeHlia in man, according to the prOperties of serum lipid component, electrOphoretic

picture of lipoproteins, mode of inheritance, and mode of appearance of atherOma and

xanthoma, and may serve as the experiinental model fOr these cOnditiOns.

While the scientinc interest is directed to the advance of c10sely related genera‐

tions, plans are being made in our laboratOry fOr the eniargement Of F2 and F3 C010nies

under consideration Of the coeFlcients'Of a close interbreeding, b100d relatiOn and rate

of appearance of HLR with the ailn Of eventual supply Of the strain animals fOr the

need in hyperlipemia research.

医学分野と獣医学分野における情報交換は古 瘍がクローズァップされているが,それに伴っ来より密接であるが,近年とくにその重要性が て,それらの疾患のモデルとなり得る実験動物強調されている。すなわち近年原因不明あるい の開発が多くの研究者によって進め られ て いは対策不明とされているヒトの疾患,症候群が る。それらのなかでとくに著明なものとして自増大する傾向にあることから,それらのいわゆ 然発症高血圧ラット(SHR)〔54-56,73〕 ,自然発る難病を究明する対策として,それらに類似し 症糖尿病マウス (KK)〔 32,48,50,51,53,64,75〕

,

た疾患の発現を特性としてもつ動物の発見と, あるいは免疫,がんの研究に重要な役割を果たさらに進んでそれらの特性を継代し,遺伝的に しつつある nude mouse〔 18〕 の発見等があり,

固定し, ヒトの疾患モデルとなり得る動物を作 それらはそれぞれ遺伝的な純化がなされてヒト出することが極めて重要な意味をもってきた。 の疾患研究上貴重な実験動物となっている。したがってこれらの疾患モデル動物の作出,維 このようにヒトの成人病のうち高血圧,糖尿持は医学,獣医学,畜産学のそれぞれの分野の 病については,それぞれの研究に好適な疾患モ共同研究によって遂行されるものであり,それ デル動物が開発され多くの研究の進展に寄与しらの各々の立場での情報の交換は極めて重要な ている。しかしながら成人病のうち高脂血症あ課題となっている。 るいは高コレステロール血症,さ らに動脈の粥

ヒトと各種動物にみられる類似遺伝疾患,あ 状硬化症については,動物における自然発症例るいはヒトの種々の疾患に対する動物の自然発 の報告は数多くあるがぃずれも遺伝的純化によ症モデルは近年になって数多く発見されている って系統として確立されたものは見 当 らな い〔70〕。とくに最近ではヒトにおいて成人病,腫 〔4,8,14,16,29,37,46,50,58,62〕 。 したがって

102

高脂血症あるいは高 コレステロール血症,動脈

の粥状硬化症の研究にはウサギ等を用いて,1)

飼料に油脂,薬物等を添加する方法,2)体内主

として肝の脂質合成を高める方法,3)脂肪の異

化を減弱させる方法等の人為的な方法によって

まず ウサギ等に高脂血症を発症せしめそののち

それらの研究にかかるとい うのが現状である。

しかしながらこのように正常ウサギに高脂血症

を発生せしめるための数々の努力が行なわれて

いるにもかかわらず,こ れらの実験的に作出さ

れた高脂血症のモデル動物は,その基礎的な疾

患の病像が必ずしも臨床に適応できるとは限ら

ないとい う問題があ り,自然発生的に生じた動

物を継代育成したものがヒトの臨床に最も適当

として要望されている〔72〕。

著者は異なる給釘法によるウサギの血清総 コ

レステロール値の経時的変化を観察中〔77〕に,

正常ウサギに比較して血清エレステロールとβ

リポ蛋白が約10倍 ,総脂質が約 5倍の異常な高

値を示した 1羽の日本白色種雄ウサギを発見し

た〔78〕。このウサギは上言己の血清脂質成分とと

もに リポ蛋自の電気泳動所見においてもさらに

動脈の粥状硬化,黄色腫の発現状況等において

もヒトの高脂血症の所見と著しく類似するもの

であった。したがって本研究はこの自然発症高

脂血ゥサギを基礎種雄畜 として,近親交配を行

ない高脂血発症遺伝子の継代を行なって, ヒト

の高脂血症のモデル動物 としての系統の基礎を

確立したもので,こ の系統すなわち HLR strain

(Hyper Lipidemic Rabbit strain)の 育種成績

と,臨床所見上の,あ るいは病理組織所見上の

特性,さ らにヒトの高脂血症との類似性等につ

いて報告するものである。

研究材料および方法

1.研究材料

供試動物は す べ て 日本白色種 ウサギ (0ヮ‐

cサθJ兜″s caれ

'cttJs var.冴

θ初夕s′を″s)を用いた。

自然発症高脂血雄ウサギ 1羽 と,交配に用いた

正常雌ウサギ10羽ならびにそれらの産仔92羽 ,

さらに対照とした正常雄20羽 ,正常雌10羽 の合

計 133羽 を用いた。

2.研究方法

1)採血方法

飼料はすべて固型飼料を用いた関係で産仔の

離乳は生後約 1ケ月目に行ない,ま た生後 4～

5ケ月で 2.0～2.5 kgの 体重となったのでこの

時期を成熟期とした。採血は 1ゲ月令から5ケ

月令まで毎月 1回定時に行ない,成熟後は不定

期に行なった。採血量は 0。 5～ 0。 6mど で血清 コ

レステロールと血糖の測定に用いた。また不定

期に 6,0～8,O mJを 採血し,24項 目の血清化学

成分 (Table 2)の 測定に用いた。さらに不定期

に約 10.Omど を採血し,電気泳動あるいは染色

体の核型検査に用いは。

血液は耳翼周縁静脈ならびに耳介動脈から採

血した。採血時間は毎 日定量給釘のものは給餌

前の空腹時である午前 9時から10時 の間に行な

った。 ad.libitumに給釘しているものは午前

中に行った。

血清は凝血後直ちに 3,000 rpmで 15分間遠

心沈澱後採取し,直ちに各種測定に使用した。

2)血清分析方法

血清コレステロTル な らび に血糖の測定は

RabatSystem Unkit(Rapid blood analyzer:

京都第一科学)でそれぞれ Unikit試薬を用い

て Zurukowski変 法, オル トトルイジン刷酸

法で測定した。

24項 目の血清化学成分の測定は血清採取当日

に 日本医学研究所 (JML,茨木市)に送 りAuto

chemist(AGA・ AB・ Sweeden)で次のような

方法で分析した。

クレアチエン:Jare法〔19〕 ,総蛋白:Biuret

法〔43〕, アルプミン:BrOm cresyl法 〔61〕 ,

チモール混濁反応 (TTT):肝臓機能研究班標

準法〔63〕, 乳酸脱水酵素 (LDH):Nitro―tetra

zollum法 〔2〕,グルタミン酸オキサル酢酸トラ

ンスアミナーゼ (GOT), グルタミン酸ピルビ

ン酸トランスアミナーゼ (GPT):Reitman・Frankel法 〔59〕, アルカリホスフアターゼ

(ALP):Kind&King法〔76〕, ロイシンアミ

ノペプチターゼ(LAP):竹中!高橋法〔71〕, コ

リンエステラーゼ (Ch―Ease):5.5 DithioDiS

(外nitro)法〔17〕 ,総 ビリルビン,直接ビリノィビ

ン:Ganbino法〔15〕 ,血糖:Glucose oxidase

法〔74〕,総脂質:Kunkel法〔36〕,β リポ蛋白 :

Dextran法〔5〕,コ レステロール (S―ch):ZurぃkOwSki法 ,尿 素 窒素 (BUN):UreaSe一ind_

phen01法〔6〕,尿酸 Uricase,cu・ Neocuproine

法〔45〕,Na,K,Ca:Flame photo metery法〔24〕 , Cl:「Fe(CNS)3」 phOtO metry法 〔80〕 ,

P:Molybden blue法 〔60〕 アミラーゼ i Cara_

way変法〔28〕。

3)血清蛋白ならびに リポ蛋自の電気泳動法

電気泳動を行なった血清は20時間絶食せしめ

た早期空腹時の血液から採取した。 '血清 リポ蛋自の電気泳動は次のような方法で

行なった。

(1)支持体としてセルロゲル (ChemetrOn―

20129,Mllano,Italy)を 用いた。

(2)セルロゲルを Na Veronal―EDTA緩衡

液 (Diethylbarbiturate Sodium Salt 5。 15g十EDTA tetra Sodium Salt 2.6g/D.W.10000

mr)に 30分浸けて緩衡化したのちアプリケータ

ーで新鮮血清を塗布し 200V,40分間の泳動を

行なった。

(3)泳 動終了後 2.5%Amidoschwarz液(Methan01 45 mJttD.W,十 Acetic Acid 10 m′

+0。 5 Amidoschwarz)で 5分間染色を行ない,

Methanol:DoW.:Acetic Acid(475:50)で 脱

色した。

リポ蛋自の脂肪染色は次のような方法で行な

った。

(1)セ ルロゲルを Vernal― EDTA緩衡液に

30分浸漬した後,血清をアプリケーターで塗布

した。高脂血発症ウサギ (HLR)は血清を 1回

塗布したが,高脂血非発症ウサギ (NON―HLR)と正常ウサギは 1回の血清塗布では泳動図が染

色しないので,塗布した血清が半ば乾燥した時にさらにもう一度塗布し, 3回 塗布した。すな

わち HLRの 3倍量の血清を塗布した。

(2)泳動は 200Vで40分間行なった。

(3)泳動後 2.5%CH3C00Hで 5分間処理

し, つヽヽで Ciba 7B T192 100 mJttEtOH 60

mJ+4%NaOH 40 mど に浸けて 2時間脂肪染色

し,染色後流水中で 2分間洗い,水分除去後 7

%glyCerolに 2分間浸したも

4)染色体核型検査法

(1)ヘパ リン処理静脈血 10mサ (ヘパ リン 0。 1

103

mJ)に phythohemagglutinin― M (ア メ リカ

Difco社, イギリス Wellcome社製)を 0.2mど

加えて静かに攪幹した後,密栓して氷槽 (0～4°C)に入れて約 1時間放置したと

(2)自血球を含む血装と赤血球の 2層に分離

した血液のうち lmど の血漿を採取し,こ れに

2中どの培養液 TC-199(ペ ニシリン 100μ /mど

とス トレプ トマイシン 100 mCg/m′ を合む)を加えて培養瓶 (TD-15)に入れ,密栓して 37°Cの恒温器に静置して 3日 間培養した。

(3)培養後 3～6時間コルヒチン処理を行ない (コ ルヒチン濃度 0。 5～ 1.0× 10~6M), ガラス壁に附着した白血球を遊離させ,800 rpmで5分間遠″いし,上澄除去後,Hanks液を加えて

静かに撹拌後さらに遠″いし,上清除去後 1%クエン酸ソーダーで 37° C,5～ 20分問処理した。

(4)1%ク ェン酸ソーダーで処理したものを600 rpmで 5分間遠,い し,上清除去後,固定液

(メ タノール 3:麟酸 1)を 3m′ 加え 30分間

放置した。この操作を数回繰返した後,固定液0。 3～ 0.5mど を加えて攪幹し細胞浮遊液を作 り

冷却した スライ ドグラスにこの浮遊液を 2ん3

滴落とし直ちにガスバーナーの小さい燈の上で

乾燥させ白血球をスライ ドグラスに張 りつけて

ギムザ染色を行ないビオライトで封じた。染色

体分析方法は巻末の文献を参考した〔27,41,57〕 。5)最高血圧測定法

最高血圧は耳介中″ふ動脈で測定した。測定方

法は Fig.1に示した。すなわち耳殻内部に円

筒状の adapterを そ う入し,耳根部にマンシエ

ットを,耳介中心動脈に脈波検出器をセットし

た。加圧後徐々に減圧して最初に出現した脈波が脈波増幅記録計に記録された時にマノメータ

Fig. 1. Method Of measurementsblood pressure.

of highest

104

-の 目盛 りを読んで最高血圧とした。また測定

法を簡易にするため脈波増幅記録計を脈波同期

ランプに置き換えて,減圧によって最初に脈波

が出現した瞬間にランプが点灯する装置にした

方法 も用いた。両者 とも理論的に同一であ り測

定値に差はなかった。

血圧は恒温室で (21± 2° C)ウ サギを採血箱に

入れて安静にした後測定した。 1羽 のウサギに

つぃて 3～5回測定し,その平均値を測定値と

した。3～5回測定した 最高血圧の バラツキは

0～ 10 mmHgであった。 それ以上の バラツキ

のあったものは数時間後あるいは数 日後再測定

した。

6)病 理解剖,組織検査法

とくにヒトならびにウサギの高脂血圧の剖検

上の主要所見〔4,8,26,29,37,39,42,44,68〕 と比

較するべく次のような点を中心に観察した。

(1)皮下,前後肢の関節,腱,各種臓器の脂

肪沈着の状況。

(2)大動脈起始部,大動脈弓,動脈分岐部2

腎動脈,冠状動脈,脳底動脈,耳介動脈におけ

る粥腫 (Atheromつ な らびに粥状硬化変性

(atherosclerosis)の 発生状況。

(3)眼験,肘関節,ア キレス腱,前後肢の伸

側,手根部,足根部,胸部,腎部,指関節の掌

側,背側部等における発疹性,扁平性あるいは

結節性の黄色腫 (XanthOma)の 発生状況。

(4)肝臓,心臓,牌臓,腎臓の脂肪変性の状

況 。

以上についてほぼ同月令の同じ飼育条件にあ

った対照ウサギと比較しなが ら剖検を行なっ

メニ 。

病理組織検査は動脈ならびに諸臓器を中性ホ

ルマリンで固定した後,圧縮炭酸ガスによる凍

結切片を作 り,Sudan IH,あ るいはパラフィン

包埋切片を作り Elastic Van giesson,Azan

Ma1loryあ るいは KoSsaの 銭銀法等の染色を

行なって鏡検した。

7)飼育管理方法

供試ウサギはすべて温度 22± 2° C,湿度 60

±10%の恒温E湿の飼育室で飼育し,照明は

day light方 式による照明すなわち日没と同時

に消灯し, 日照と同時に点灯し,太陽リズムに

合せて明暗時間のなかで季節変化を与える構造

の飼育室で飼育した〔34〕。

飼料は固型飼料 ORC-5(ォ リエンタル酵母

KK製)を 用い, 日量 100gを 給与し, 水は

α冴′筋物初に給与した (自 動給水器)。 ただし分

娩ウサギについては分娩前約20日 間,分娩後約

50日 間,ま た未成熟ウサギは離乳後成熟までの

約 120日 間は飼料,水 ともに α冴'所

r″初 に給

与し,さ らに不定期に野菜を給与した (主 とし

て`キャベツ)。

飼育ケー ジは 45× 40× 40cmの修酸加エア

ル ミニウム製のものを使用し,自動給水, 自動

水洗装置を施した個別のケージで飼育した。た

だし分娩 ウサギは分娩前後約40日 間は別室恒温

室で 136× 49× 34 cmの プラスチック格子網目

のケージ (セ キスイコンテナ BK-80)を 2室に

仕切った分娩用ケージで飼育した。床敷はすべ

て木綿を使用した。

8)系統繁殖方法

自然発症高脂血ウサギと正常ウサギの雌10羽

(01,02,03,04,05,06,07,08,09,10)を 交配し,

それらの産仔のうち 04と 02の産仔を選抜して

(Fl),04止 ne,02 1ineと し, それぞれの line

で兄妹交配あるいは親仔交配,さ らに兄妹交配

と親仔交配を混用した方法,ま た兄妹交配,親仔交配に由来したものと原種畜 との交配,すな

わち戻し交配等の近親交配を行なった。

交配は監視下で行なわしめ,交配直後睦粘液

を採取し,顕微鏡下で精虫の有無を確認した。

基礎種畜の選抜は離乳時の血清 コレステロー

ルの測定値で行ない,さ らに 2～ 5ケ月令の間

に βリポ蛋白,総脂質の測定あるいは血清蛋白

の電気泳動を行ない,血清脂質成分の異常高値

を示し,電気泳動で Br6ad pre‐βを示したものを選抜した。

研 究 成 績

1. 臨床所見

1)血清脂質成分の所見

(1)自 然発症高脂血ウサギ (SpOntaneously

Hyper Lipemic Rabbit:以下 HLRと い う)の

原種雄ウサギ (以下 HLR― Pと い う)の成熟前

(生後約 3ケ月令)か ら,ほぼ繁殖可能限界 とい

Estil■ ation Month ofday age

Body weight S‐ ch level

(kg) (1■ g/d′)

われている約32ケ 月令〔66〕までの血清総コレス

テロール (以下 S―chと いう)の測定値を Table

lに示した。正常ウサギの S―ch値は,われわ

れが 21羽のウサギで16回線返し測定した結果

43± 13 mg/drで ぁった〔78〕。HLR―Pの S―ch

値は測定日によって若干の変動はあったが約30

ケ月の間 215～ 477 mg/dど の異常な高値を持続

した。

Table l. Serous cholesterol levels of HLR‐ PⅢ

105

サギは 自然発症の高脂血 ウサギであ ることは間

違 いない と判断 して系統開発のための基礎畜 と

した。

(2)HLR― Pと lo羽 の正常 ウサ ギ と交配 し

たが,その産仔すなわち Flには高脂血発症 ウ

サギは出現せず,HLRttPと Flあるいは Flと

Flの交配によってできた産仔すなわち F2に初

めて高脂血発症ウサギが出現した。F2以降の産

仔の中で 高脂血の発症がみられた産仔を HLRとし,非高脂血産仔を NON一HLRと して区分

した。この HLRと NON一HLRな らびに正常

ウサギの月令別の S―chの測定値を Fig.2に

示した。

Fig,2に みられるように,HLRは S―chの異常な高値を示した。また NON―HLRも 正常

ウサギに比較して離乳時では著明な高値を示し

た。 しかしながら NON―HLRは加令とともに

S―ch値の低下がみられ, 成熟時には正常ウサ

ギとほぼ同じ値,すなわち正常範囲に低下した。

このように離乳時から成熟に至るまでの間に加

令とともに S―ch値の低下する現象は,正常ウ

サギにも若干その傾向 は み られ たが NON―

HLRの場合の低下はとくに顕著であった。こ

れに対して HLRでも若干の変動はみ られ た

が,各月令時において正常ウサギの約10倍の高

値を持続し NON―HLRな らびに正常ウサギと

は明らかに異なったものであった。

HLRと NON一HLRの S―ch値のこのよう

な異なる加令影響について両群の離乳時の S―

ch値を個体別に 調べた結果, HLRの離乳時

(離乳後約 1ケ月目)の S―ch値はすべて 300

mg/dど 以上であった。また NON一HLRの S―

ch値はすべて 300 mg/d′ 以下であった。この

ようなことから著者は離乳時における S―ch値300 mg/dど を基準として,それ以上のものを高

脂血発症遺伝子が homo接合体 となっている

もの,すなわち HLRと し,300 mg/dr以下の

ものを Hetero接合体となっているものと判断

して NON一HLRと して区分した。

つぎに HLR― Pの産仔の 24項 目の血清化学

成分をみると (Table 2b), 離乳時に S―ch値が 300 mg/d′ 以上を示した HLRではすべての個体でHLR― Pと 同様に S―ch,β リポ蛋白,

1973 4. 3

4. 8

5。 10

5,20

6。 10

6.20

7. 1

7,10

8.20

9, 2

1974 7.29

1950 6。 24

7.25

9.10

3

3

4

4

5

5

6

6

7

8

18

29

30

32

1.8

1.8

2.2

2.2

3.0

3.0

3.2

3.2

3.5

3.5

3.8

3.1

3.0

2.9

278

319

286

232

259

281

245

215

273

447

408

216

450

385

Normal male adult rabbits: mean tt S.D. 43

±13 mg/d′ (74-17 mg/dり (N=21r=16 Total386)ホ キUpper critical limit;87:mg/d′

キMale rabbit(Original stock of Hyper Lipe‐

mic Rabbit).中ネNormal rabbit(Body Weight l.9-2.O kg,100

day old, Estilnation period: Nov.― Dec.,

1973).

また HLR―Pの 9ケ月令と14ケ月令におけ

24項 目の血清化学成分の測定値を Table 2・ a,b

に示した。対照とした正常ウサギと比 較 して

S―ch値のみならず βリポ蛋白,総脂質の脂質

成分が顕著な高値を示したことが特徴的であっ

た。すなわち HLR―Pは正常ウサギに比較して

S―ch値ではほぼ 10倍,β リポ賓白ではほぼ 8

倍,総脂質はほぼ 5倍の高値を示した。他の21

項目の血清化学成分では,正常ウサギとの間に

著明な差はみられなかった。したがってこのウ

106

Table 2a. Blochemical IIndings in sera of foundation stock of HLR strain

HLR―P9 1non.

HLR―P30 mon.

041412 mon.

021412 mon.

Total protein

Alubumin

Total lipids

Cholesterol

β‐lipO prOtein

Clucose

BUN

Uric 2cid

Creatinine

TTT

Total bilirubin

Chole bilirubin

AL一P

Ch― Ease

COT

CPT

LAP

LDH

Amylase

Na

K

Ca

Cl

P

g/d′

g/d′

mg/d′

mg/d′

unit

mg/d′

mg/d′

mg/d′

mg/d′

unit

ng/d″

mg/d′

units

μmol

unit

unit

unit

unit

unit

mEq/′

mEq/d′

mg/d′

mEq/′

mg/d′

6.5

2.6

3011

447

10.6

141

24

0。 2

0.8

0,4

0。 2

0

5.7

3.5

26

67

232

306

185

142

4.8

14,3

100

4.5

7.6

2.5

1102

450

9。 4

109

27

0.5

1.6

0.1

0.2

0。 1

2.7

3,6

36

45

183

1012

197

142

5,2

14.4

103

5.6

7.2

2.5

830

307

9.6

91

23

0,1

1.2

0。 1

0.2

0。 1

2,4

5.7

32

55

198

362

198

141

3.6

12.9

104

3.9

6.7

2.5

1459

316

8.8

111

28

0。 1

1.2

0.4

0。 3

0,1

4.0

2.9

37

44

218

382

208

137

3.9

13,6

102

3.6

mon.: Inonth age.

総脂質の脂質成分で異常高値がみられ,NON―HLR,正常ウサギに比較して,それぞれ約 8倍 ,

約 6倍,約 3.5倍 の高値を示した。また他の21

項 目については 3群の間に若明な差は認められ

なかった。このことは原種雄畜である HLR―Pの成績と完全に一致し,明 らかに道伝性の高脂

血症ウサギであることが証明された もの で あ

る。

HLR,NON―HLRに ついて S―chと β リポ

蛋白ならびに S―chと総脂質との相関関係を調

べたが,S―ch値が正常のもので βリポ蛋白,

総脂質の両者あるいはいずれか一方が高値を示

した個体は認められなかった。また S―Ch値が

高値でβリポ蛋白,総脂質の両者あるいはいず

れか一方が低値を示した個体もみられなかっ

た 。 す な わ ち HLR一 strainの 場 合 ,S―Chと β

リポ蛋白, S―Ch値 と総脂質には相関関係があ

ることが示された (Figs.3,4)。

つぎに20時間絶食せしめた空腹時に採取した

血清を一晩冷蔵庫に静置して,血清の透明度を

調べた。Fig.11にみられるように HLRで あ

る 2145,4315ャ まcreamy layerの 浮上ヤま認め

られなかったが,NON― HLRである 4312,正

常ウサギの血清に比較して白濁が明らかに観察

された。

2)糖代謝に関する所見

107

Table 2b. BlocheHlical IIndings in sera of the HLR, MON― HLR and normal rabbits

No. of antinalmonth of age

HLR8(M5,F3)

4-12

NON―HLR8(M5,F3)

4-12

Normal8(M5,F3)

4-12

Total protein

Alubumin

Total lipid

Cholesterol

β‐lipO prOtein

Glucose

BUN

Uric acid

Creatinine

TTTTotal bilirubin

Chole bilirubin

AL―P

Ch―Ease

CぴE

CPT

LAPLDHAmylase

Na

KCa

Cl

P

g/d′

g/d′

mg/d′

mg/dど

unit

mg/d′

mg/d′

mg/d′

mg/d′

unit

mg/d′

me/d′

unit 、

F2mol

unit

unit

unit

unit

unit

mEq/′

mEq/d′

mg/d′

mEq/′

mg/d′

6.5± 0。 7

2.5± 0。 1

1146± 270

400± 70

9.1± 1.5

111± 15

25± 6

0。 1こと0.05

1.2± 0。 6

0.3± 0,1

0。 3± 0

0.1± 0

6.1± 3.4

4.1± 0。 9

33± 8

52± 9

238」=48

391± 277

190± 13

140=上 1.9

4.4± 0.5

13.9± 0,5

102± 2.0

4.8± 1.0

6.4± 0。 7

2.8± 0.2

364± 60

46± 14

1.2± 0.7

122EL 18

25± 5

0.4± 0。 2

1.2± 0。 2

0.2± 0。 1

0.4± 0。 2

0.1± 0

8.5± 2.9

3.3± 0.6

31± 13

48どL10

233± 25

277」些46

283=L55

142± 191

4.6± 0。 3

14.4± 0.4

104± 2.9

4.9± 1.0

6.8± 0。 6

2.7± 0。 2

270Eヒ 62

49± 20

0.8± 0.4

146± 31

26± 7

0,4± 0.8

1.7± 0。 2

0。 1± 0

0.2± 0

0。 1± 0

4.8± 2.9

3.7± 0.7

38± 14

45± 13

226± 66

322± 87

226± 29

144± 2.3

4.5± 0。 8

14.1± 0.7

101± 3.2

4.7± 0。 9

HLR:Hyper Limemic Rabbit.

ヒトの高脂血症のうち Fredrickson type IV

(高プレβ リポプロテイン血症)〔 12,13〕 では

90%の患者に糖代謝異常が 存在し, 糖尿病型

の高血糖を示すといわれ て ヽヽ るの で,HLR,NON―HLRな らびに 正常ウサギについて血糖

値を調べた。 Fig.5,Table 2bに みられるよ

うに未成熟時あるいは 成熟時においても HLRと正常ウサギとの間には著明な差はなく,HLRに糖代謝の異常はないものと判断された。

3)尿酸の所見

高尿酸血症はヒトの高脂血症 の場 合 Fred―

rickson type H(高 βリポプロテイン血症)に多発するので HLR,NON一HLR,正常 ウサギに

ついて調べた結果 Table 2bにみられるように

HLRャま 0。 1± 0.05 mg/dJ,NON一 HLRャま0.4

±0。 2 mg/dr,正常ウサギは 0.4± 0.3 mg/dど で

あり,HLRは むしろ正常ウサギよりも低値を

示した。したがって HLRは高尿酸血症を伴わ

ないものであった。

4)血清蛋白ならびに リポ貫白の電気泳動所

見

HLRである 0414と 正常ウサギの血清蜜白

の電気泳動像を Fig。 10aに示した。また HLRである 2145,4315(Figs.10-b,2-1,1-2)と

NON―HLRである4312な らびに正常ウサギの

泳動像を Fig.10・ bに示した。さらに リポ賓白

108

Fig. 2. Serous cholesterol levels of HLR,NON_HLR and normal rabbits.

u吊Ji轟rdまざ請る・

2 88Ю .4

Fig。 3. Relationship between serous cholesterol

and β‐lipoprotein valves at the HLRstrain.

の脂肪染色を行なった像を Fig.10。 cのに示し

た。Fig,10.bに みられるように HLR,NON―HLR,正常ウサギとも泳動図原点の濃染はなく

カイロマイクロンセま認められ な からた。HLRである 0414,2145,4315で は pre一β域での増

加が認められ α2域 との境界が不鮮明 とな る

broad pre βの像を示し (Fig.10・つ,NON一HLR,正常ウサギとは明らかに異なった泳動像

を示した。 また脂肪染色した泳動像でも HLRではpre―β域の赤染が明瞭であった(Fig。 10・ c)。

Fig. 4. Relationship between serOus cholesterol

and totallipid values at the HLR strain.

1-3『nontth 5-7 month age

M去5DHLR

nttLR nom. non nOrn.は

””‥．８．ｒ”一す””・〓・

HLR 153■ 27

R群欄11協と礼 1を予iを2146と 24

of HLR,non HLR andFig. 5, Glucose levels

normal rabbit.

5)染 色体の所見

Fig.12・ らbに HLR― Pと 正常ウサギの染色

体を示した。この両者とも染色体における形態

異常は認め られ な かった。また正常ウサギの

S― Chl叫ン31)

08 24 4.0 5.6n_lipOprOtein lunits)

雌,Flの雌ならびに HLRの雄 (0414,F2)のそれぞれの染色体についても調べたが,何れも

染色体の形態レベルでの異常は認められなかっ

た。

6)最高血圧の所見

Fig.1に 示した方法で耳介中,い 動脈での最高血圧 (収縮期圧)を測定した。その結果を Fig.

6に示した。

4-12 rnonth[埴β

HLRM±5D io2.10 9oJ8 85t15

Fig. 6. Distribution Of highest b100d pressure

of HLR,non HLR and normal rabbits.

HLRの最高血圧 102± 10 mmHgは正常ウサ

ギの最高血圧 85± 15 mmHgに比較して若千高い血圧を示した。

7)その他の臨床所見ヒトにおける高脂血症の外見上の所見として

眼瞼黄色腫,網膜脂血症,眼球の脂質沈着等が

あげられている。 HLRの F3では生後 5ケ月より Fig.14にみられるように眼球の脂質沈着症が観察された。また HLR―Pでは約 30ケ月令より左右耳介動脈の肥厚硬化が観 察 され た

(Figs. 14,15)。

109

2.病理解剖所見

1)剖検所見

(1)動脈の所見

HLR―P(32ケ 月令)な らびに F2の 0214(19

ケ月令), F3の 4315(9ヶ月令),2141W(8ケ月令),4102(7ヶ月令),411lS(6ケ月令),

2145W(5ヶ 月)の 7羽の自然発症高脂血ウサ

ギを解割した結果を Fig.16の a,b,c,dに示した。図にみられるように大動脈に粥腫 (athe‐

rOma)が 7例全例に観察され,動脈管産の狭窄が認められた。HLR―Pでは大動脈はもとより

腎動脈,冠状動脈の起始部に も顕 著 な athe_

rOmaが認められた (Fig。 18)。

(2)四肢の黄色腫の所見

HLR―Pでは Fig.17の a,bに みられるように前肢の手根部背側,掌側ならびに各指関節部の背側,掌側に,あ るいは肘関節に,ま た後肢においても足根部の背側,掌側,指関節の背側,

掌側にそれぞれ扁平性あるいは結節性の黄色腫

(xanthoma)の 多発しているのが観察された。また 0214(F2,19ケ月令)においても前肢の

指関節背側に散在して, 結節性の xanthomaが観察された。

(3)諸臓器の所見

HLR―Pにおいて,心臓では左房室弁に米粒

大の atheromaが斑点状にみられ,硬化板の形

成,大動脈弁の硬化肥厚もみられた。また冠状

動脈は起始部で atheromaに ょる狭窄がみられ

た (Fig.18)。 その他の所見として,い筋の煮肉様

変性,心内膜下とくに乳頭筋周囲の点状出血が

みられた。

腎臓は腫大し, とくに左腎の腫大が顕著で孟

腎は拡張して,割面では中に栗粒大から米粒大の結石が多数認められた。また尿管の勝脱開口

部には小豆大の結石 が あ り尿管を閉基してい

た。これらの結石は中性ホルマリン中で全 く溶

解しないので尿酸結石と性状を異にするもので

あり, コレステロール結石ではないかと推定さ

れた。

陣臓では割面に多数のリンパ小節 を 認 め た

が,腫大は認められなかった。

肝臓には著変が認められなかったが,副腎は

若子の腫大が認められた。

●

　

　

●

．●

●

●

●●

●

●

●

　

●●

●

●

・“”・“・”““・・

●

●　・・““””“

110

2)組織学的所見

(1)動脈の所見

大動脈 に は 典型的な粥状硬化症 (atherOSC―

lerosis)が 認められた。すなわち内膜の結合組

織が肥厚し Sudan IIIで 赤～種色に染まる脂肪

が多量に沈着し,内膜深層から中央部にかけて

は担脂細胞が多 く認められ一部石灰沈着ならび

に裂隙状のコレステリン結晶跡も認められた。

中膜ならびに外膜には認められるべき変化はな

かった。

Fig.19に 胸大動脈の 典 型 的 な atherosc‐

lerosisの 組織像を 示した。 内膜の結合組織の

増殖による高度の肥厚 が み られ,内膜深層に

atheromaがみられる。また Sudan HIで 赤 く

染まった類粒状の リポイ ド, コレステリンの沈

着もみられる。

Fig.20に大動脈の起始部の組織像を示した。

内膜の高度の線維肥厚があ り,内膜の表層には

泡沫細胞 (fOam Cell)の 集積しているのがみら

れる。

Fig.21に冠状動脈の組織像を示した。内膜

の線維性肥厚 と管座狭窄がみられ,内弾性板の

断裂もみられる。

Fig.25に脳の末端の細動脈の組織像を示し

た。脂肪栓塞の状況が明らかである。

Fig。 22に左耳介動脈の組織像を示した。内

膜の中度の肥厚,内弾性板の断裂,石灰変性 ,

中膜の平滑筋の変性および線維化の状況がみら

れる。

(2)諸臓器の所見

心臓では,ぷ筋線維がやや萎縮し,微細な脂肪

滴が多 く認められて脂肪変性が明らか で あ っ

た。

腎臓では糸球体に重度の変化はなかったが,

主部細尿管は高度に萎縮し,一部上皮細胞の膨

化,硝子滴変性,脂防変性が認められ核消失,

核濃縮した細胞も認められた (Fig.24)。 その

他弓形動脈,小葉間動脈,輸出入管の内膜の脂

肪沈着,脂肪栓基,糸球体毛細血管の内皮細胞

の脂肪変性も認められた。

牌臓では中″ぷ動脈の内皮細胞が肥厚し,脂肪

滴が認められた。

脳では細動脈の内膜に脂肪沈着,脂肪栓基が

認められた (Fig.25)。

つぎに指関節部に 発現した XanthOmaの 細

織像を Fig,23に示した。図にみられるように

腫瘍細胞は豊富な結合組織に介在し,その細胞

所見は atheroma内の 泡沫細胞に 類似してい

るものであった。胞体内には多量の脂肪を合有

している。

3.育種成績

1)近親交配成績

HLR― Pと 10羽 の正常 ウサギとの交配によっ

て得た産仔の うちから 04と 02の産仔を選抜し

て系統繁殖に着手した。

Fig. 7-a ヤこ 04 1ine ιつ, Fig.7-b″こ 02 1ine

の離乳したウサギの系図を示した。図にみられ

るように Flにおける 04,02の 産仔 12羽には

HLRは 出現しなかった。 また 01,03,05,06,

07,08,09,10の 産仔 (離乳したもの)21羽に

も HLRは 出現しなかった。したがって Flで

ある 33羽 の中からは HLRが 出現しなかった

ので劣性ホモの遺伝様式を示すものであった。

近親交配方法としてはウサギにおける兄妹交

配の困難なこと〔7,62〕を考慮して親仔交配,兄

妹交配, 戻し交配をそれぞれの lineに 繰込ん

だ近親交配を行なった。以下それぞれの交配方

法における成績を述べる。

(1)親仔交配

04 1ineでは HLR― Pと 04の産仔である 041

ｒ‥一中］一ヤ【一”「「い”中”「「‐‐口］‐‐一‐‐，‐‐‐‐，‐‐‐‐‐‐１１１１１１１１． 中中‐‐「‐‐Ｌ】

駅　０４．０４２”０４４い

＝

担

仰

　　

　　

Ｃ

Ｒ．　

　

　

　

　

４

ＨＬ

　

　

　

　

　

　

０

F‐ う

くM) = Hale (F) : コCIna■ e ・ : HyPer ■ipeDlC ra｀bit

Fig. 7-a. Pedigree of 04 1ine.

ｍいωいωいい

岨０４．２的０４．４的０４．６的

(H) = Wale (コ ) 1 3「 e■ 14a■ e ネ : Hyper llpemic rabbit

Fig. 7-b. Pedigree Of 02 1ine.

(Fl)と ,その父である HLR―Pと親仔交配して0414(F2,雄 )を得た。つぎにこの 0414と ,その母である 041の 親仔交配を 行 な って 4101

(F3,雌)を得た。さらにこの 4101と その父で

{群

LR―P

111

ある 0414の親仔交配によって 41011～ 41017,

4101lW～ 41013Wの 10羽の F4を得た (2腹の産仔である)。 したがってこれは 親仔交配を

3代継続して行なった もので Fig.8に示した

ように Wrightの 方式〔31,47〕 によって,遺伝

子の同型接合体の度合を知るための近交係数あ

るいは遺伝子組成の相似度を知るための血縁係

数を算出した。 その結果近交係数は 50%, 血

縁係数は 76.26%に達していた。この親仔交配による HLRの 出現率は F2で

28.6%(2/7), F3で 42,9%(3/7), F4で 60%(6/10)であった (Tableめ 。

(2)兄妹交配

04 1ineでは 044× 021(雌 ),044xo43(雌 ),

また 02止neでは 024× 021,025× 022(以下い

ずれも後者が雌ウサギ), の交配を行なった。この Fl× Flの 兄妹交配におけるHLRと NON―HLRの 出現比は 1:13と なった。Mendelの

分離の法則では 1:3に分離するが,こ の HLR―

い林呼

命海いいい

Ｘュ　ーｗ２ｗ卯れ卯

じ巧　じじじじ■ぅ

能翻可

ＰＲＨＬ

　

　

０４．

ｒ

く

に

０４‐

　

　

　

　

　

　

４． ０

‐‥；―

陶

４‐

　

４．

　

　

　

　

ｅｄＰ

如・<盟 X04∠静降P

(arrow diagram)

Rxy=rGxGy=号科甘!言告;t:告言;:逆lCoeFficient Of relationship

commonancestor Fa0414

041

HLR― P

0.2500 0 ユ

ユ

２

×(1+0.25t10)・７・丁・丁

0.6250

0.2500

0,125tl

ｎｎＬｏｍ ｍ。ｎ

ｎｃｅｓｔ。ｒ Σ〔は)nll十F刺 =■oo00

四４‐０

0。25∞HLR―P o l l

(1+Fx)=1.28Xl(号 )3=0.125

041 o 0 (■ )2=02脚_ ` (1+Fy)=13750

Rxy=」12mO× 1.3750=0'7626

Fig. 8. Coettcient Of inbreeding and coettcient Of relatiOnship in HLR strain

cttnd耽 ば

辞

確eding・ Fx=Σ〔0耐

… 位十Fa〕

4ncestor Fa n n' Fx

解 静∞|!罰ΨΨ‐艦_

Table 3. Incidence of HLR at the different mating systems

TctalF4F3FlFl

Parent‐ orspring mating

Sister.brother mating

Back crossing

matixed mating

28.6%(2/7)

7,7%(1/13)

42.9フぢ(3/7)

13.0%(3/23)

90.9%(20/22)

60,0% 奄.8%(6/10) (11/24)

- 11.1%(4/36)

100.0フぢ- 97.7ヲ

ぢ(2/2) (22/24)

100.0ヲど 100.0フぢ(8/8) (8/8)

HLR× HLR

HLR× NON―HLRor NON―HLR× HLRNON― HLR× NON―HLR

28,6%(2/7)

7.7%(1/13)

100フぢ(12/12)

46.2%(12/26)

14.3%(2/14)

100ヲど 100ヲぢ(6/6) (18/18)71.4% 51.1%(10/14) (24/47)

- 11.1%(3/27)

Total 15.0% 50.0%(3/20) (26/52)

48.9夕ぢ(45/92)

Mixed mating: Aniinals derived from back crossing× Aniinals derived from parent‐

ofFspring mating or sister‐ brother mating.

％

の

０

６

８

１

strainの 場合は Mendelの 法則に従わなかっ

た。したがって HLR― strainの 場合単純な 1対の遺伝子によって高脂血症の発症が支配されて

いるのではな く polv geneに よるものではな

いかと推定された。

また 04 1ine でャま 0432〉く0431, 0414-041lS

(half Sib),02 1ineで は 0211× 0212,0211×

0214,0213× 0222の それぞれ F2× F2の 交配を

行なった。これらの兄妹交配での HLRの 出現

率は F2で 7.7%(1/13),F3で 13.0%(3/23)

であった (Table 3)。

(3)戻し交配

04 1ineでは兄妹交配由来の雌 041lSと 0431

を HLR―Pに戻し交配し,02 1ineで は同じく

兄妹交配由来の雌 0213,0214,2122のそれぞれ

を HLR―Pに戻し交配した。 戻し交配による

HLRの 出現率は F3で 91%(20/20),F4で100%(2/2)であった (Table 3)。

(4)各交配法の混用

04 1ineで は兄妹交配由来の 041lSと 親仔交

配由来の0414を交配し,その産仔 4111と 0414

を親仔交配したもの,また戻し交配由来のもの

を兄妹交配したもの,すなわち 4113S× 411lS,

4318× 4317等の交配を行なった。

各交配法の混用における HLRの 出現率は ,

F4で 100%(8/8)であった (Table 3)。

上記の各交配方法における HLRの 出現率を

まとめて Table 3に示した。Tableにみられ

るように兄妹交配における HLRの 出現率は最

も低率であり,戻 し交配,各交配法 の混 用 で

HLRの出現率は高率であった。

つぎに S―ch値を高脂血発症遺伝子の表現型

として, 高脂血発症遺伝子が Homo接合体と

なっている個体と推定されたもの同志の交配,

すなわち HLR× HLRではその産仔に 100%

(18/18)HLRが 出現した。また HeterO接合

体と推定された個体 NON―HLRと Homoの個体との交配,すなわち NON―HLR× HLRあるいは HLR× NON一HLRでは,その産仔に約

51%(24/47)の HLRが 出現 した。 さらに

Hetero接合体と推定されたもの同志の交配,

すなわち NON― HLR× NON―HLRでの HLRの出現率は 11.1%(3/27)で あった (Table 3)。

世代別の HLR出現率は F2で 15%(3/20),

F3で 50%(26/52),F4で 80%(16/2の で近

交世代を重ねる毎に出現率は向上した (Fig.7-

a,b)。

HLRの 性比は雄 21羽 ,雌 24羽 でほぼ同数で

あ り伴性遺伝はしなかった。

2)育成成績

ｔｅ

(1)出産率

分娩した母畜の数を交配した雌畜の数で除したものである。交配は監視下で行ない,交配後直ちに産前庭に綿棒をそ う入して精液を採取し

顕微鏡下で精虫を確認した もの を交配数とした。Table 4に みられるように出産率は全般的に低率であり,偽妊娠 (pseudo pregnancy)す

なわち腹部膨満,分娩予定日前の脱毛等の徴侯を示したものが,不妊ウサギ例中 5例 (約17%)にみられたさ各世代での出産率には著明な差はみられなかった。

Table 4. Inbreeding record Of HLR strain

Genera. Birthtion rate

Lifter Weanling GrOwthsize rate rate

50夕ぢ 6.6(5/10) (35/5)63フィ 7.6(5/8) (38/5)67ヲ″ 5.9

(14/12) (82/14)48ヲぢ 3.6(8/17)｀ (29/8)

36ラぢ(12/33)

奄%(17/38)

56%(46/82)

59%(17ノ 29)

■ Six ahimals were immature at the til■ e ofrecording.

Birth ratei No.of parturitiOn/No.of mating,

Weanling rate:No.of weanling/No,of newborn.

Growth rate:No.of l■ aturition/No.of wean‐

ling.

(2)離乳率

離乳した産仔を出産 した産仔数で除したもの

で出産率 と同様に低率であった。 この低い離乳

率は,母畜による産仔の喰殺に起因するもので,

出産後離乳までの間に喰殺以外の原因不明死は

3羽で約 3%(3/90)に すぎなかった。世代別で F9,F4の 離乳率が若干高率 となったのは ,

ウサギの習性 として産仔を覗きみた り,母畜に

不安を与えると産仔を喰殺するので,産仔の開

眼時期である生後13日 まで産室を暗室にしたこ

と,別室で出産せしめたこと等の環境改善によ

るものであると考えられる。

(3)成熟率

成熟体重 (約 2.5 kg,約 5ケ月令)に達した

ものを離乳した産仔数で除したもので;成熟率

113

は全般に高率であ り,各世代での差も大きなか

った。

Fig.9に HLR,NON―ILR,正常ウサギに

おける離乳時から成熟に至るまでの成長曲線を

体重で示した。 Fig.9に みられるように高脂

血自然発症ウサギであるために正常ウサギと比

較して成長が遅延することはなかった。

鞄駅ゅ

１

　

　

２

　

　

３

　

　

４

Ｆ

Ｆ

Ｆ

Ｆ

％‐２

％‐７

％４６

％‐１

９

‐１

８

‐５

９

４３

８

●

HLR

3

一 い

Non HLR

5

晰 malFig.9, Growth lurve of HLR,

normal rabbits,non HLR and

4)一腹の産仔数 (Litter size)

Litter sizeャ ょFlか ら F3ま では, 一一般にヽヽ

われているウサギの産仔数である 6～7羽〔21,35,65〕 と大差はなかったが, F4において低下を来たした。

育成成績はまとめて Table 4に 示した。

考 察

血清脂質成分は生活環境,食事影響ならびに

個体によって著しく変動するものであることは

一般によく知られていることであるが, とくに

ウサギは脂質代謝作用が弱いために食釘影響が

顕著な動物である。したがって食餌の脂質負荷によく反応し,血中レベルがよく上昇するとい

われている〔9〕。 このようなことから高ヨレス

114

テロール血症,高脂血症,動脈の開状硬化症の

実験に好適な動物として利用され,実験的高脂

血症,実験的動脈粥状硬化症,実験的高コレス

テロール血症等が多く作出され て い る〔1,20,

22,23,25,38,44,49,67〕 。 しかしながらこのよ

うな脂質負荷によって作出された実験モデル動

物は基礎的に脂質代謝の異常が存在するのでは

なく,脂質代謝の調節作用が最大限に作用する

という状況になっている。したがって臨床的な

高脂血症が何んらかの脂質代謝異常があって,

その表現として高血症が認められているのとは

基本的に大きな差異があることが指摘されてい

る〔72〕。

このようなことから脂質負荷によって実験的

に作出された高脂血モデル動物はそれなりに価

値はあるであろうが,基礎的に代謝異常が存在

する自然発症モデル動物が渇望されている七自

然発症高脂血動物あるいは atherosclerosisは

ZUCKER〔 81〕 ャまラ ッ トで ,BAUMら 〔3〕,DAVID

ら〔8〕 ャま /」ヽ犬 で , BRACDON〔 4〕,KESTENら

〔26〕,OPHULS〔 58〕 は ゥサ ギ で そ れ ぞ れ 観 察 し

ているが,いずれも系統としては確立されてい

ない。著者は給餌法と S―chと の関係を観察中

〔77〕 1羽の自然発症高脂血ウサギを発見したの

で,疾患モデル動物として育種することを試み

近交世代を重ねた結果,F8,F4の 産仔における

高脂血発症ウサギの出現率は約 70%に達し,

また F4での近交係数,血縁係数はそれぞれ 50

%,76.3%に達し,系統としての基礎もほぼ確

立することができた。

この自然発症高脂血ウサギの系統 す な わ ち

HLR strainの 性状については, ヒトの高脂血

症が種々の複雑な因子により成立した症候の表

われであることから,その病像と対比させるた

めには今後とも詳細な観察が継続されなければ

ならないが, この HLR strainで 観察された主

要な性状として,

1.臨床的には S・ch,β リポ蛋白,総脂質の

血清脂質成分が異常な高値を示し,ま た血清蛋

白, リポ賓白の電気泳動所見でもβ域の濃染,

broad pr←βの像を示し,静置血清に自濁が認

められたこと等である。HLR strainの 場合 S―

chと βリポ蛋白ならびに総脂質の間には相関

関係があり(Fig。 3,4),S―chの高値のものは

βリポ蚤白,総脂質のいずれも高値を示し,S―

chの低値のものでは βリポ蛋白,総脂質の両

者あるいはいずれか一方が高値を示すことはな

かった。また電気泳動像においても S―Chの高

値のものは broad pre―βを示し,脂肪染色で

良く赤染されるpre―β域がみられ,S―Ch値の

ほいものとの像の差異は明瞭であった。さらに

静置血清の性状 も S―Chの高値のものと低値の

ものの差は明らかであった。このようなことか

ら S―Chの測定値はβリポ蛋白,総脂質,血清

蛋白, リポ蛋自の電気泳動像等をそのまま表現

するものとしてこの場合受取って支障のないも

のであり,S―Ch値は HLR strainの 指標とな

った。

S―ch値は離乳時の値 300 mg/d′ を境界とし

て,それ以上の値を示したものは若干加令によ

る測定値の変動はみられたが異常高値を持続す

る。しかしながら離乳時の S―ch値が 300 mg/

d′ 以下のものでは加令による急速な低下がみら

れ成熟時には正常範囲に低下する (Fig.2)。 し

たがって離乳時といク早朝に高脂血発症遺伝子

の表現型を S―Ch値によって極めて明確に判断

することが可能であった。

この S―ch値が離乳後急速に低下し,成熟時

には正常範囲に落着 くという現象は BRACDON

〔4〕 も脂質成分で観察しており,哺乳中の蓄積脂

質成分が離乳後の急速な体の発育によって消費

されるためであると述べている。また FEIGEN‐

BAUMら 〔11〕 は自然発症 atheromaウ サギで

遺伝子の作用以外に母乳の影響すなわち milk

factorに よることを,atheromaの 発症母畜の

産仔と,非発症母畜の産仔交換によって示して

いる。HLRの場合は離乳後若千 S―ch値の低

下がみられたが,その後は異常高値を持続して

ぃるので,哺乳中の蓄積脂肪の消費の影響も考

えられるが,遺伝子作用が最も大きく作用して

いるものと考えられる。 NON一HLRでは遺伝

子作用よりも母乳の影響がより大きく作用し,

また対照とした正常ウサギの場合は蓄積脂質の

消費による S―Ch値の離乳後の低下であると推

測される。

2.剖検所見では, HLR 8羽を 剖検したが

(3サ月令から32ケ月令),肉 眼的には大動脈の

各動脈の分岐部を中″いとして拡大した硬化板の

形成がみられ,組織学的には内膜の肥厚と脂肪

染色で赤～種に染まる脂肪沈着が著明にみられ

た。またその他の動脈すなわち冠状動脈,腎動

脈,脳の細動脈,障臓の中″心動脈あ る い は ″心

筋,房室弁,尿細管等にも脂肪変性が認められ

ヒ トの高脂血症における動脈粥状硬化変性の像

と類似した。

つぎに xanthomaの 発生についてはウサギ

あるいは他の動物における自然発症高脂血の報

告〔3,4,8,26,58,81,〕 にも, あるいは実験的に

作出された動物の高脂血症の報告〔1,20,22,23,

25,38,44,49,67コ にも動脈の粥状硬化変性につ

いて報告されているが,xanthomaの発生につ

いての報告は見当らない。HLR strainでは 2

例の xanthoma自 然発生例がみられたことが

特徴的であったざヒトにおいてはアキレス腱,

肘関節,時に眼険等に xanthomaが発生する

といわれるが,HLRの場合指関節部に好発し,

発生場所においてはヒトと若干異なっていた。

3.Fig.7-a,bに みられ る よ うに HLRstrainは 明らかに遺伝を示す本態性の高脂血症

の系統であった。HLR strainの遺伝様式は Fl

で HLRが出現しなかったこと, HLR× HLRの交配では HLRが 100%出 現 したことから

劣性ホモが推定された。また Fl× Flの分離比

ヤまMendelの 法則に従わないことから単純な 1

対の遺伝子の支配によるものでなく,poly gene

によるものではないかと推定された。

以上 HLR strainの 特性について述べたが,

つぎにこのような HLR strainの特性とヒトの

高脂血症との類似性について検討を加える。

現在ヒトの高脂血症は家族性,遺伝性のもの

が多く,FREDRICKSON〔 12,13〕 あるいは WH0〔79〕 によって 5つの型に分類されているもしか

しその後,後天性の高脂血症もこの分類のなか

に含まれることがわかり,広 く高脂血症の分類

法として利用されている。したがってこの分類

によるヒトの高脂血庁の性状と HLR strainの

性状とを比較検討する。

1,血清性状の比較

空腹時に採取した血清を一晩冷蔵庫に静置し

115

た場合,FREDRICKSONの分類に よる各 type

で異なった性状を示す といわれている。すなわ

ち type Iでは静置血清の下層は透明であるが,

乳濁層 (Creamy layer)の 浮上すなわち乳濁脂

質 (Chylomicron)の 著増が認められ,type Vでは creamy layerの 浮上 とともに血清の白濁

があ り, type Hでは血清の混濁はな く透明で

あ り,type IVで は透明なものから白濁するも

のまで各種存在するが放置しても Creamy lay‐

erの浮上は認められない。また type IIIで は

ときに血清の白濁があ りcreamy iayerの 浮上

は認められないとヽヽわれている。 HLR strain

では Fig.11にみられるように creamy layer

は認められないが,血清の全般的な白濁が認め

られた。した が っ て静置血清の性状は Fred―

rickson type IHあ るいは IVに類似するもの

であった。

血清 コレステロールの 濃 度 は Fredrickson

type(以下 F typeま たは単に typeと い う)

I,IV,Vで は正常か,ま たは軽度の増加がみら

れる程度であ り,type Hで は S―ch値は増加

する。また type IIIでは異常な高値 となるとい

われている。HLR strainで は S―ch値が異常

な高値を示すことから S―Chの濃度 では HLRstrainャま type IHに 良 く類似した。

血清蛋自の電気泳動所見では type I,Vでは

泳動図原点に chylomicronに よる濃染が認め

られ,type IVでは pre一β域のみ濃染され,

type IIではβ域の濃染と, ときにpre一β域が染色 され るといわれ て ヽヽ る。type HIでは

pre―β域とβ域の分離が明瞭でなくいわゆるbroad―βを示すといわれている。HLR strain

ではFig.10-a,cに示したように Broad pre―

βの像を示し, 血清の電気泳動所見でもtype

IIIに類似した。以上の血清性状す な わ ち 静置血清の白濁状

態,S―chの異常高値を示す状態,血清の電気

泳動における Bro4d pre― βの像を示すことな

どから血清性状では HLR strainは, ヒトの高

脂血症の III型に良ぐ類似した。 '2.遺伝様式の比較 Ⅲ Ⅲ・ 1 ,

F type II,Vは優性遺伝を示し,type!I,IH,

IVは劣性遺伝を示すといわ れ て ヽヽ る。!HLR

116

strainは劣性遺伝を示 したので,F type H,V

とは異なったものであった。

3,Xanthomaの 発現状況の比較

F type Iで は約 60%に xanthomaが 認め

られ,一般に発疹性のもので粘膜を合むいずこ

にも発生し,type Hでは結節性あるいは扁平

性の Xanthomaが アキレス腱,手指の腱,肘

関節仲展側に好発する。 また type IIIで は結

節性,扁平性,発疹性のものが上,下肢,腎部

に発現し,特徴的に肘関節に結節性のものが,

また手,足掌の黄色調線条が認められている。

type IVでは XanthOmaの発現は比較的少な

いといわれている。 また type Vでは膝関節,

肩,背等に xanthomaが点在するといわれて

いる。

HLR strainで は Fig.17に 示した ように

HLR― Pの xanthomaは結節性,痛平性のもの

で,前後肢の指関節に特徴的にみられた。した

がって HLR strainの xanthomaの発現状態

は F type IIあ るいは IIIに 類似した。

4.Atheromaの発現状況の比較

F type H,IIIで は atheromaの 発現が認め

られ, とくに type IIでは大動脈はもとより冠

状動脈,脳底動脈等に約 50%発現するといわ

れている。type IIIではさらに発現頻度は高 く

約 60%に発現するといわれている。また type

II,IIIと もに年令の増加とともに発現率も急速

に増加するといわれている。

HLR strainで は Fig.16-a～ d,21,25に示

したように大動脈,冠状動脈,脳の細動脈ある

いは腎動脈にもatheromeが発現し,し かも剖

検 8例全例に認められ,かつ 3ケ月令, 5ケ月

令, 6ケ月令の若令のものでも発現した。この

ような atheromeの 発現状況は F typeの II

あるいは IHに類似した。

5.高尿酸血症の比較

HLR strainで は Tablё 2bに 示したように

血清尿酸値は正常ウサギに比較してむしろ低値

を示し高尿酸血症は認められなかった。F type

で高尿酸血症の発生が最も多いのは type IIで

あり,type III,IV,Vで はときに発現する程

度であるb type Iでは発生は 認められないよ

うである。 したがって HLR strainは 高尿酸

血症の発生状況から type llと は異なったもの

であった。

6.糖 代謝異常の比較

F type I,Hを除いた各 typeでは糖の代謝

異常が多少な りとも認められているが, とくに

type IVで は 90%の ものに糖代謝異常が認め

られている。HLR strainは Fig.6,Table 2b

にみられるように正常 ウサギと比較して血糖値

の異常は認められなかった。 したがって HLR

strainは糖代謝の異常の有無からみて type V

とは異なったものであった。

7。 その他の所見の比較

F type I,Vでは網膜脂血症が発現し,type

IIでは眼球の脂質沈着がみられるといわれてい

る。HLR strainで は Fig.14に示したような

眼球の脂質沈着例がみられ, type IIと の類似

が考えられた。

以 上 FREDRICKSONの 分 類 に よ る ヒ トの 高 脂

血症の 5つの typeと HLR―strainの性状 とを

比較検討した。その結果をまとめて Table 5に

示した。Table 5に みられるようにヒ トの高脂

血症における各 typeの症状 と HLRistrainの

症状 と完全に一致するものはなかった。 ヒ トの

場合でも各 typeの 鑑別は必ずしも容易でな く,

type Hにおいては II a,II bの 亜系に分類さ

れ, また type IV と V,type IV と II b,IV

と IIIの鑑別等しばしば問題になるといわれて

いる〔52〕。HLR― strainの 場合,血清脂質成分

の性状,血清蛋自の電気泳動の所見,遺伝様式 ,

atheroma,xanthomaの 発現の状況等から比

較的 type IIIに 類似した ものであるとい うこ

とがいえる。

つぎに HLR一 strainの 育種にあたっては,一

般にウサギにおける近交系の作出は種々の繁殖

障害が発生し,あ るいは litter sizeが減少し,

また疾病,感染病に対する感受性が高 くなるこ

と等から虚弱産仔の増加,死亡率の増加のため

その作出は極めて困難であ り, とくに兄妹交配

しはばしば不可能 とな り,兄妹交配 と親仔交配

の混用等をしなければならな くなるといわれて

いる〔7,66〕。したがって著者は HLR― strainの

系統開発に着手するにあたって兄妹交配を行な

ぅ 02 1ineと 親仔交配を行な う 04 1ineの 2つ

Table 5. Comparison of the condition of hyperlipidemia betweeh

human and HLR strain

Fredrickson type IV HLR strain

ChyloHlicron

Hypercholesteremia

Hyperuricacldemla

Abnormalities in carbo・hydrate metabolism

Atherosclerosis

Xanthoma eruptive typetuberous type

planar type

Electrophoretic patternof lipoprotein

lnheritance mode

orig。 キ

stain

rece. ホ doml. 中中 raCec

++

β preβ orig. broad

stぉn 8温ギ :温fdoml. racee race.

＋

　

一　

一　　一　　一　

＋

一　＋　一　

＋　十

一　

十　十

　

一　

＋

＋

＋

＋

ｏａｄ

β

ｔａｉｎ

ｂ

βドｎ

キ

＋

β

ｒｅｔａｉ

ｐ

Ｓ

一　

＋

　

一　　一　

＋

十　一　　一　

十

　

一

一　

一　

一　

＋　十

Ⅲ: original line

の lineを設定した。しか し母畜の産仔の喰殺

に起因する離乳率の低下 の た め 予期した数の

HLRを F2で得られなかったこと,ま た兄妹

交配では HLRの 出現率が低率であった こ と

(Table 3)等から F3,F4の生産にあたっては

親仔交配,兄妹交配,戻 し交配あるtヽ はそれら

を混用する交配法を用いた。その結果 F4にお

ける近交係数は 50%に, 血縁係数は 76.3%

に達し,ま た HLRの 出現率も50%以上とな

って系統 としての基礎はほぼ確立された。

一般に mouse,ratでは 20代以上の兄妹交

配を行なって近交係数が 99.6%に達したもの

を近交系と称することが国際的に規定されてい

るが,他の動物についてはそのような規定はな

く,ア メリカの畜産学会の委員会では,ニ フ ト

リで 37.5%の近交係数をもつものを系統 と称

することにしている〔47〕。またわが国では近藤

〔30〕ャま mouse,rat以 外の実験動物の場合,実験動物の本質から近交係数よりも血縁係数の方

が重要で,系統内の血縁係数が 80%以上とな

った系統を近交系と規定すべきであると主張し

ている。このことは mouse,rat以 外の動物で

の近交系の作出が極めて困難であることを示唆

しているものである。

近年ウサギにおいて CHAI〔 7〕 は 20代の近交

系を報告している。またわが国においても日本

生物科学研究所において1965年からNW―NIBSの近交系の開発が進められている〔69〕。しかし

ながらそれらはいずれも疾患遺伝子の固定を目

的としているものではない。HLR―strainは高

脂血症, atherosclerosisの 疾患遺伝子の固定

を目的とするものである。したがって近交世代

の進行には相当の困難が予測される。すなわち

F5を生産しつつある現在では,系統開発,維持

上 とくに重大な障害はないが Fig.13にみられ

るような奇型 (Splay leg)が F3,F4において

4羽 出現し,ま た 1例の不妊ウサギ (7回交尾

せしめ精虫を確認したが分娩しない)がみられ

たこと,さ らに飼育場所を変更したことによる

急死例 (剖検上肺炎 と診断)が 7例みられ,環境順応性あるいは抗病性が懸念された。したが

って今後近交世代の進行には抗病性を懸念して

barrier systemで 飼育することが必要である

と考えられた。しかしながら HLR一strainの 近

交世代の進行には当然奇型の増加,繁殖障害の

増加あるいは出産率,litter sizeの 低下が予想

される。

このようなことから学問的興味の上での近交

世代の進行は価値があるが,F4を生産 した現在

の血縁係数 (80%)あ る もヽ は HLRの 出現率

(F4で 80%)さ らに現在系統維持の上で重大な

障害がないこと等を考慮して,今後は実用的な

118

観点か ら C010nyの拡大を計 って ヒ トの高脂血

症の研究への供給態勢を整えることを優先 させ

るべ きであ ると考えている。

結 論

ウサギの給釘法と血清コレステロールとの関

係を観察中に 1羽 の自然発症高脂血ウサギを発

見した。各種動物において自然発症高脂血動物

は多く発見されているが,いずれの動物におい

ても遺伝子を由定し,系統として確立されたも

のはない。したがって著者は人医界から渇望さ

れている本態性の高脂血症の疾患モデル動物の

系統を開発すべく遺伝子の継代固定を行ない,

疾患モデル動物として有用な系統の基礎を確立

し, この系統の特性を究明した。この系統すな

ゎち HLR一 strainの 特性ならびにヒトの高脂血

症との類似性はつぎのようであった。

1.HLR strainの 特性

1)血清性状

HLR strainの 血清性状については 24項 目

の血清成分について分析したが,血清コレステ

ロール,β リポ蛋白,総脂質の脂質成分が異常

な高値を示し,それぞれ400± 70 mg/dど ,9。 1土

1,5 unit,1146± 270 mg/dど であった。 この値

は正常ウサギに比較してそれぞれ約9倍,約 10

倍,約 4倍の高値であった。

HLR strainの 空腹時採取の静置血清は白濁

し,血清蛋自の電気泳動所見ではβ域の濃染と

ともに pre一β域の増加が認められα2域 との境

界が不鮮明となる所謂 broad prぃβの像を示

し,正常ウサギとは明瞭に異なる所見を示し

メニ。

HLR strainの場合,血清ヨレステロールと

βリポ蛋白,総脂質は相関関係を示し,血清コ

レステロールの高値のものはβリポ蛋白,総脂

質 も高値を示てた。また血清コレステロールの

高値のものは,空腹時採取の静置血清に自濁が

生じ,電気泳動では broad pre一βの像を示し,

さらに atheroma,xanthomaが 発現する。し

たがって HLR― strainの 表現型は測定の容易な

血清 ヨレステロール値によって判定することが

できる。しかも離乳時 (約 1ケ月令)と い う早

期に判定することができた。

HLR straihの 血清脂質成分以外の 21項 目

の血清化学成分値は正常 ウサギと著明な差はな

かった。したがってヒ トの高脂血症の一部にみ

られる高尿酸血症,糖代謝異常は HLR strain

には存在しなかった。

2)動脈粥状硬化と黄色匿の発現状態

HLR一 strainでは剖検例全pllに大動脈のathe―

loscrerosisが 著明であった。 また,冠状動脈,

腎動脈,脳の細動脈にもatheromaの 認められ

たものもあった。 また四肢の指関節部に Xan―

thomaの 多発例 もあ り,atheroma,xanthomaの発生は HLR― strainの 特徴的な点であ り, ヒ

トの高脂血症のそれと著しく類似した。

3)`遺伝様式と染色体所見

HLR―strainは劣性 hOmoの遺伝様式も示

し,単純な 1対の遺伝子に支配されるものでな

く p01y geneに よって高脂血症が 発症するも

のと推定された。また染色体は形態 レベルでは

異常は認められなかった。 r4)高 脂血発症ウサギの出現率

HLR―strainにおける高脂血発症ウサギの出

現率は,世代別では F2で 15%,F3で 50%,

F4で 80%で近交世代の 進行 とともに 上昇し

た。交配方法別では,兄妹交配で 11.1%,親仔

交配で 45.8%,戻 し交配で 91.7%。 上記の交

配法の混用で 100%の 出現率であった。また F4

における近交係数は 50%,血縁係数は 76.3%

に達した。

2.ヒ トの高脂血症との類似性

HLR―strainは血清コレステロール,β リポ

蛋白,総脂質が異常な高値を示したこと,静置

血清が白濁すること,血清蛋白の電気泳動にお

ぃて broad prttβ の像を示すこと,動脈の粥

状硬化変性が発現すること,扁平性あるいは結

節性の黄色腫が発現すること,劣性遺伝を示す

こと等の点は,FREDRICKSONあ るいは,WHOによるヒ トの高脂血症の分類の III型 に著しく

類似した。

HLR一strainは以上のような特性を具備し,

なおかつ高脂血ウサギの出現率あるいは血縁係

数からみて遺伝子の固定化がすすみ系統 として

の基礎は確立されたものと考える。したがつて

HLR―strainは ヒ トの高脂血症あるいは高 コレ

ステロール血症,動脈硬化等の疾患モデル動物

としてそれらの破究に貢献 し得 る有用な系統で

あると考える。 .

謝 辞 '

稿を終るにあたり御指導を頂いた神戸大学医学部附

属動物実験施設長松本博教授ならびに本研究に御協力

頂いた神戸大学医学部放射線基礎医学教室近藤光雄助

教授また助言を頂いた神戸大学理学部川辺昌太助教授

に謝意を表します。また論文の御校開をいただいた麻

布獣医科大学中村経紀教授に深く感謝の意 を表 しま

す。

また手の研究の一部は文部省科学研究費 (特定研究

「実験動物の純化と開発」課題番号 022201)の援助に

よるものである。

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打4.9‐8

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