taxonomía fungal la clasificación fungal es nueva y ha cambiado clasificación, según bar (1988):...
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Taxonomía Fungal
La clasificación fungal es nueva y ha cambiado
Clasificación, según Bar (1988):División EumycotaSubdivisión MastigomycotaClase ChytridiomycetesOrden SpizellomycetalesFamilia Neocallimasticaceae
Género
El género es distinguido por la morfología Thallus: Monocéntrico y policéntrico. Rizoide: Filamentos y bulbos. Zoosporas: Uni- o Multiflageladas
Todos los géneros rizoides tiene filamentos, excepto las especies caecomyces.
(Trinci et al. 1994)
Especies
Son separadas por sus características morfológicas y estructurales.
Las Piromonas y Sphaeromonas se asumía que eran protozoarios por lo que fueron cambiados a:
Piromyces y Caecomyces
(Trinci et al. 1994)
Fungis Policéntricos
Neocallimastix joyonii (Breton et al. 1989) Orpinomyces joyonii (Trinci et al.
1994) debido asu patrón de crecimiento policéntrico
Ruminomyces y Anaeromyces tienen características similares al monocéntrico
Aislamiento y Enumeración Han sido aislados de: bovinos, ovinos, caballos, canguros y elefantes
En heces y tractos gastrointestinales y fluido ruminal
Orpinomyces fue aislado en charcos y pasturas de las vacas
La dieta animal tiene efectos sobre las poblaciones fungales
(Trinci et al. 1994)
La biomasa fungal es difícil determinarLa estimación:método gravimétrico con
digestión enzimática con quitinaEl conteo (103 – 107 ml) no provee una
adecuada estimación fungal Para el tamaño de las poblaciones
fungales se han utilizado diluciones en agar y otra soluciones
Condiciones para aislamiento Anaerobiosis pH de 6.5 a 6.7 T° de 39°
Materiales para aislamiento Bufer: Carbonato/Fosfato Fluido ruminal Resazurina (indicador redox) Carbohidratos Antibióticos
Almacenamiento
T° de 39° CFibra en agarNitrógeno líquido DimetilsulfóxidoEnfriamiento a 1.5°C Glicerol
Cultivos y Almacenamiento Mantenidos por transferencia frecuente ( 2 a 7 días). Algunas especies 24 a 48 horas. Otros Intervalos semanales. Isolados monocéntricos – 2 a 3 días. Isolados policéntricos – semanalmente. Mantenimiento largo en tiempo – 39 oC en fibra Sisal
embebida en agar. En nitrógeno líquido con dimetilsulfoxido como
crioprotector para “fungi” anaeróbico sirve también para largo tiempo.
Preservación 1.5 oC por minuto hasta -70 oC con glicerol como crioprotector.
Resucitados a 39 oC.Restos de esporas “fungi” ruminales, Esporas anaeróbicas de heces.Inducidas in vitro, no germinadas in
vitro (Wubah et al., 1991b).
proceso de manipulación de formación y germinación de esporas – método de conservación.
“Fungi” anaeróbicos no son listados en la ATCC (American Type Culture Collection) como “Fungi” filamentosos o Protistas.
6. Protozoarios Ruminales6.1 Introducción
Basados en el tamaño relativo Primeros microorganismos ser descubiertos Muy móviles y viables en el rúmen y retículo Inmóviles y aparentemente desintegrados en
el omaso y abomaso. Los Protozoarios celulares no identificados en
intestino delgado. Utilizados como alimento.
Explicación de SobrevivenciaEspecificidad del hábitat, esencialidad
para el huésped.Defaunación.Alta especialización al rúmen o hábitat.Actividades metabólicas (relación
bacterias y “fungi”).
Protozoas Flagelados. Baja población Zoosporas Fúngicas (decrecimiento) Limitados Esquema de Clasificación ha cambiado
algunas veces en 30 años. Terminología difícil Referencia a “Holotrichs” y “Entodiniomorphs”
Papeles en el rumen:
Clasificación de efectos
a) Medio ambiente del rumen
b) Componentes de la sangre
c) Metabolismo y digestión en el rumen
d) Sobre el animal
Fermentación de carbohidratos solubles
Holoctrichs como principal degradador
Entodinromorphs
Procurar incrementar la población de Holotrichs
Digestión de almidónEntodiniomorphs como principales
degradadoresIsotrichaUso como fuente de energía o
síntesis intracelular de polisacáridos Principales productos
Digestión de Carbohidratos Estructurales
Actividad celulolítica (orden entodiniomorfos) Epidinium caudatum, Eudiplodium maggii,
Ostrocadinium dilobum y varias Spp Entodinium
Holotricha Enzimas que degradan hemicelulosa (10
géneros, entodiniomorfos, subfamilias Diplodiniinae y Ophryoscoliceneae.
Baja actividad Orden holotricha
Monosacáridos, disacáridos y oligosacáridos
Spp de protozoarios poseen la hidrolasa glicosidica
Pectina es depolimerizada por los protozoarios (metanol, ac. Galacturónico o poligalactoranidos)
Digestión de la Proteína
Los entodiniomorfos digieren la caseína insoluble
Son importante en la degradación de proteínas insolubles
Sp isotricha (caseína soluble e insoluble)
Mayor actividad proteolítica en el citoplasma
Absorción y digestión de bacterias
-Gutierrez 1955. Isotricha. No se desarrolla sin bacterias.
-Probablemente bacterias proveen mayoría de N para crecimiento.
-Inhabilidad para biosintetizar o interconvertir aminoácidos (E. caudatum.
-Pérdida gradual de enzimas. -Compuestos preformados por crecimiento de
bacterias -Protozoarios pueden “absorber” < 1% de total
bacterial / minuto concentrados.
Productos de digestión de bacterias:Aminoácidos , 50% retenido
VFA Amonia
Amoniácidos bacterianos en el animal, digestibilidad de proteina protozoaria.
Limitado pasaje ruminal. Relacionado con normal después de
alimentación.
Cambios en población de protozoarios
Establecimiento de poblaciones:
Contacto directo en etapas jóvenes.
Presencia en la boca de la madre
Saliva en las plantas
Aerosoles entre animales
Variación en el horario
Diferencias entre entodiniomorfos y holotricosAlimentación 1 / día, entodiniomorfos 5-6
horas / gradual 20 a 22 hrs.Holotrichs, pico momentos antes o después
de alimentación / Entodiniomorfos Diluciones asociadas a
alimentación. Y cambios en crecimiento celular.
Migraciones celulares:Paredes rumen, retículo y porción
ventral.
OTROS FACTORES QUE AFECTAN LA CONCENTRACION DE PROTOZOARIOS
DIETA forraje : concentrado 20 – 40 % de concentrado maximiza la Ι
protozoariosΙ 60 % entodinium
El efecto del concentrado se puede disminuir controlando el consumo
FRECUENCIA DE ALIMENTACION
GEOGRAFICAS i.e. Polyplastron multivesiculatum
VARIACION ANIMAL i.e. Ophryoscolecidae y Caloscolex
DEFAUNACIÓN
Se han usado varios tipos de procedimientos paraobtener ruminantes libre de protozoarios ciliados.La manera más eficaz y simple de obteneranimales libres-protozoario es aislarlosinmediatamente de todos y de otros rumiantesdespués del nacimiento u obtenidos porhisterectomía normal.
Defaunacion se han establecido e intentado por medios
físicos y dietéticos:
Físicos: Involucra el vaciando y lavado del rumen, mata
los protozoarios en los volúmenes y los devuelve al
“protozoario-libre” del rumen.
Dietéticos: Han ido de inanición y han alimentado con
pura leche, alimentando hidratos de carbono altos para
inducir acidosis apacible y los compuestos del antiprotozoal
alimentando como sulfato cobrizo, ácidos, o surfactantes.
El aislamiento al nacimiento ha sido criticado en basea las mezclas de las poblaciones bacterianas yfungicas no desarrollan en el animal protozoario-libre. La efectividad de otras técnicas deldefaunación es inconstante, y los compuestosdiferentes mataban a los protozoarios pueden tenerefectos adversos en el animal, en losmicroorganismos de otros, o de ambos
ANTIBIÓTICOS
Se han usado los antibióticos ionofosforados, principalmente la
monensin y lasalocid, ampliamente como promotores del
crecimiento para el ganado de carne y corderos. Dos de estos
compuestos tienen un efecto tóxico en los ciliados del rumen y han
disminuido su concentración notablemente en volúmenes del rumen
. Sus niveles de efectividad han reducción en números de
protozoarios. La mayoría de los antibióticos comúnes, a este
niveles son bactericida, no son tóxico a los protozoarios del rumen.
Clasificación de los ProtozoariosRuminales
Identificación de Protozoos ruminales
Como nombrar las partes de un protozoo.
Parte bucal hacia delante se le marca a las 12 hrs.
La parte mas cercana al observador se le denomina superficie superior y la contraria se le denomina superficie inferior.