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TÉCNICAS

INMUNOLÓGICAS

CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

PARASITOLOGIA

FOUBA

TECNICAS INMUNOLÓGICAS

CELULAR HUMORAL

CÉLULAS SENSIBILIZADAS ANTICUERPOS CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

PARASITOLOGIA

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Pruebas Cutáneas o

Intradermorreacciones


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Prueba de tuberculina de Mantoux ó Reacción de PPD

Charles Mantoux (1877-1947) médico francés 1910


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AFINIDAD

ESPECIFICIDAD

SENSIBILIDAD

TECNICAS INMUNOLÓGICAS Propiedades:


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AFINIDAD

Es la fuerza de unión entre el Ag y el Ac.

Específicamente entre el Fab

del Ac y el epítope del Ag. CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

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ESPECIFICIDAD

Es la capacidad de una técnica para determinar entre

2 Ag diferentes.


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SENSIBILIDAD Es una medida que indica

cuan eficaz es una técnica para poner de manifiesto

pequeñas cantidades de la incógnita

(ya sea un Ag o un Ac) CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

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DETECCIÓN DE

REACCIONES Ag - Ac

ANTÍGENOS ANTICUERPOS

• Proteínas

• Glicoproteínas

• LPS

• Inmunoglobulinas


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ANTÍGENOS

Tienen 2 características básicas:

1º Inmunogenicidad: capacidad de generar Ac.

2º Especificidad :

capacidad de unirse a ellos.


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INMUNOGLOBULINAS (ANTICUERPOS) ESQUEMA

ANTÍGENOS

EN EL SUERO HAY GLOBULINAS ALFA, BETA Y GAMMA.

“GAMMAGLOBULINA”


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TIPOS DE INMUNOGLOBULINAS

IgM:

• ES LA PRIMERA EN SINTETIZARSE CONTRA EL ANTÍGENO.

• ES PENTAMÉRICA Y MUY GRANDE.

• FIJA EL COMPLEMENTO.

IgG:

• ES LA SEGUNDA EN SINTETIZARSE, LA MÁS ABUNDANTE Y

LA MÁS ESPECÍFICA.

• PUEDE ATRAVESAR LA PLACENTA.

• ES NEUTRALIZANTE Y FIJA EL COMPLEMENTO.


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ANTICUERPOS • POLICLONALES

Pabs • MONOCLONALES

Mabs 1975 Dres. Neils Jerne, G Koehler,

Cesar Milstein

ESPECIFICIDAD

CLONALIDAD


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SISTEMAS DE DETECCIÓN

AGLUTINACIÓN

PRECIPITACIÓN


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HEMAGLUTINACIÓN



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DETECCIÓN DE GRUPO ABO


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En otros ensayos la visualización

del complejo se hace marcando

uno de los reactivos

(Ag. o Ac.),

con alguna sustancia detectable.


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• INMUNOFLUORESCENCIA

• ELISA (Enzime Linked ImmunoadSorbent

Assay) o Ensayo inmunosorbente ligado a

enzimas.

• RIA o RADIOINMUNOANÁLISIS CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

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INMUNOFLUORESCENCIA

La marcación se realiza con una sustancia fluorescente.

Para la observación se usa un microscopio de fluorescencia.


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Fluorocromos

• Isotiocianato de Fluoresceína

• Rodamina

• Auramina O

• Naranja de acridina

• Blanco de calcofluor CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

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INMUNOFLUORESCENCIA SISTEMAS DE DETECCIÓN

DIRECTA INDIRECTA


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ELISA (Enzime Linked ImmunoadSorbent Assay)

Ensayo inmunosorbente ligado a enzimas

La marcación se realiza con una enzima,

de manera que al agregar un cromógeno y el

sustrato de dicha enzima, se puede

calcular la cantidad de complejos formados

midiendo la intensidad del color producido.


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COLORIMÉTRICO

SISTEMAS DE DETECCIÓN ELISA

Simple: Ac Sandwich: Ag CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

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ELISA


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COLORIMÉTRICO: ELISA


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SISTEMAS DE DETECCIÓN COLORIMÉTRICO ELISA


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RIA

(Radioimmunoassay)

Radioinmunoensayo

La marcación es por un isótopo radiactivo,

de manera que en este caso medimos

radiación asociada al complejo.


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FOUBA

RIA (Radioimmunoassay)

Radioinmunoensayo


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CONVERSIÓN SEROLÓGICA ó

SEROCONVERSIÓN

• SE TOMAN 2 MUESTRAS DE SUERO DEL MISMO

PACIENTE, UNA EN EL MOMENTO DE LA CONSULTA

Y LA SEGUNDA A LOS 15 DÍAS.

• LAS DOS MUESTRAS SE PROCESAN JUNTAS Y

POR EL MISMO MÉTODO.


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TITULACIÓN SUERO

PURO 1 : 2 1 : 4 1 : 8 1 : 16

TÍTULO: 1:4


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RESPUESTA “PRIMARIA” DE ANTICUERPOS

14 DÍAS ENTRA EL ANTÍGENO

MESES

IgM

IgG


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RESPUESTA “SECUNDARIA” DE ANTICUERPOS

2 DÍAS

ENTRA EL ANTÍGENO MESES

IgM

IgG

ESTO SE DEBE A LA MEMORIA INMUNOLÓGICA Y SIRVE PARA LA

VACUNACIÓN Y PARA EL DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO DE UNA

ENFERMEDAD INFECCIOSA (ej: DOSAJE DE IgM PARA UNA INFECCIÓN

AGUDA Y DE IgG PARA UNA INFECCIÓN PASADA)


PARASITOLOGIA

FOUBA

Esta presentación fue realizada por Laura Gliosca y María Inés González

2011 CATEDRA DE MICROBIOLOGIA Y

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