tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti
DESCRIPTION
Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti. Bologna, 11/3/2006. Franco Verlicchi - Centro Trasfusionale Faenza/Lugo – AUSL Ravenna. Definizioni. prodotti del sangue gli emocomponenti e gli emoderivati emocomponenti - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
![Page 1: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/1.jpg)
Tecniche di preparazione e Tecniche di preparazione e conservazione degli conservazione degli
emocomponentiemocomponenti
Bologna, 11/3/2006Bologna, 11/3/2006Bologna, 11/3/2006Bologna, 11/3/2006
Franco Verlicchi - Centro Trasfusionale Faenza/Lugo – AUSL RavennaFranco Verlicchi - Centro Trasfusionale Faenza/Lugo – AUSL Ravenna
![Page 2: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/2.jpg)
DefinizioniDefinizioni prodotti del sangueprodotti del sangue
gli emocomponenti e gli emoderivatigli emocomponenti e gli emoderivati emocomponentiemocomponenti
i prodotti ricavati dal frazionamento del i prodotti ricavati dal frazionamento del sangue con mezzi fisici semplici o con aferesisangue con mezzi fisici semplici o con aferesi
emoderivati emoderivati i farmaci plasmaderivati ovvero le specialità i farmaci plasmaderivati ovvero le specialità medicinali estratte dall’emocomponente medicinali estratte dall’emocomponente
plasma mediante processo di lavorazione plasma mediante processo di lavorazione industriale industriale
Legge 21/10/2005, n° 219: Nuova disciplina delle attività trasfusionali e della produzione nazionale degli emoderivati
![Page 3: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/3.jpg)
emocomponenti emocomponenti i prodotti ricavati dal frazionamento del sangue con mezzi i prodotti ricavati dal frazionamento del sangue con mezzi fisici semplici o con aferesifisici semplici o con aferesi
Eritrociti LeucocitiLeucociti PiastrinePiastrine Plasma Plasma
Emocomponenti di 2° livello
Sangue intero
•Terapia trasfusionale mirataTerapia trasfusionale mirata•Conservazione idonea di ciascun Conservazione idonea di ciascun componentecomponente
![Page 4: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/4.jpg)
![Page 5: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/5.jpg)
Eritrociti
LeucocitiLeucociti
PiastrinePiastrine
Plasma Plasma
Centrifugazione + filtrazione
•Quantità raccolta•Emocomponenti non ottenibili da unità di sangue intero
![Page 6: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/6.jpg)
![Page 7: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/7.jpg)
![Page 8: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/8.jpg)
![Page 9: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/9.jpg)
Eritrociti LeucocitiLeucociti
PiastrinePiastrinePlasma Plasma
Eritrociti LeucocitiLeucociti
PiastrinePiastrinePlasma Plasma
Centrifugazione
2000 rpm 5-8 min
3500 rpm 15-20 min
Centrifugazione
Centrifugazione
Plasma Plasma
PiastrinePiastrine
LeucocitiLeucociti
PiastrinePiastrine
![Page 10: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/10.jpg)
•Emazie concentrate•Emazie concentrate private del buffy coat•Emazie concentrate con aggiunta di soluzioni additive•Emazie concentrate private del buffy-coat e risospese in soluzioni additive•Emazie lavate•Emazie leucodeplete•Emazie irradiate•Emazie congelate•Concentrato di emazie da aferesi
Eritrociti
![Page 11: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/11.jpg)
Emazie concentrate
Emazie concentrate private del buffy-coat
2-6 °C 35 gg
![Page 12: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/12.jpg)
Emazie concentrate con aggiunta di soluzioni
additive
Emazie concentrate private del buffy-coat e risospese in soluzioni additive
2-6 °C 42 gg
![Page 13: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/13.jpg)
Emazie lavate
2-6 °C
Conservare il minor tempo possibile (<24 h se apertura del
sistema)
•Lavaggi con soluzione isotonica a 4 °C•Proteine < 0.3 g/unità
PNH – deficit IgA
![Page 14: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/14.jpg)
Emazie leucodeplete
2-6 °C
•Filtrazione - Leucociti < 1x106
Emazie irradiate•25-50 Gy
Stessa durata del prodotto corrispondente (<24 h se apertura del sistema)
Irradiazione entro 14 gg dal prelievoTrasfusione entro 28 gg dal prelievo
Trasfusione entro 48 ore dall’irradiazione in
neonati o iperpotassemia
![Page 15: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/15.jpg)
Emazie leucodeplete
•Riduzione alloimmunizzazione•Riduzione infezioni post-operatorie•Riduzione reazioni trasfusionali non-emolitiche•Riduzione GVHD•Riduzione trasmissione patogeni (CMV, CJD)•Riduzione mortalità post-operatoria (cardio-chirurgia)•Riduzione ospedalizzazione
![Page 16: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/16.jpg)
Emazie congelate
Glicerolo 40% Glicerolo 15-20%
Entro 7 gg dalla raccolta
-60 -80 °C Azoto liquido (-150 °C)
Fino a 10 anni
Scongelamento
Deglicerolizzazione
Utilizzare nel più breve tempo possibile
![Page 17: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/17.jpg)
•Concentrato granulocitario da aferesiConcentrato granulocitario da aferesi•Cellule staminali emopoietiche perifericheCellule staminali emopoietiche periferiche
LeucocitiLeucociti
![Page 18: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/18.jpg)
Concentrato granulocitario da aferesi
Authors’ conclusions: ‘Currently there is inconclusive evidence from RCTs to support or refute the generalized use of granulocyte transfusion therapy in the most common neutropenic patient population’
![Page 19: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/19.jpg)
Concentrato granulocitario da aferesi
•Mobilizzazione leucocitaria nel donatore (Steroidi o G-CSF)
Conservazione a 20-24°C per 24 hUtilizzare nel più breve tempo possibile
Granulociti da sangue intero (buffy-coat):•Utilizzati, prevalentemente in OE pediatrica, negli anni ‘80 •Abbandonati per inefficacia
![Page 20: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/20.jpg)
Cellule staminali emopoietiche periferiche
Da aferesi•Uso autologo o omologo•Preparazione del paziente/donatore (mobilizzazione CD34)
• Ciclofosfamide 4 g /m2 (autologo)• G-CSF s.c. per 4-5 gg
•1-2 procedure (2-3 ore) in giorni successivi
Conservazione a -80°C
Congelamento in azoto liquido con crioprotettori
Scongelamento a 37°C e impiego immediato
![Page 21: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/21.jpg)
Cellule staminali emopoietiche periferiche
Da cordone ombelicale•Facilità di prelievo•Necessità meno stringente di HLA-matching•Ridotta GVHD•Minore rischio di rigetto (blando condizionamento)
Conservazione a -80°C
Congelamento in azoto liquido con crioprotettori
Scongelamento a 37°C e impiego immediato
•Ridotto numero di cellule CD34 (pazienti pediatrici)•Espansione in vitro
![Page 22: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/22.jpg)
•Concentrato piastrinico da aferesi•Concentrato piastrinico da plasma-piastrinoaferesi•Concentrato piastrinico da singola unità di sangue intero•Concentrato piastrinico da pool di buffy-coat•Concentrato piastrinico lavato•Concentrato piastrinico irradiato•Piastrine crioconservate (da aferesi)•Gel piastrinico
Piastrine
![Page 23: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/23.jpg)
PiastrinePiastrinePlasma Plasma
LeucocitiLeucocitiLeucocitiLeucociti
PiastrinePiastrinePiastrinePiastrine
Centrifugazione
2000 rpm 5-8 min
3500 rpm 15-20 min
Centrifugazione
Centrifugazione
Plasma Plasma
Concentrato piastrinico da singola unità di sangue interoConcentrato piastrinico da singola unità di sangue intero
LeucocitiLeucocitiLeucocitiLeucociti
Concentrato piastrinico da pool di buffy-coatConcentrato piastrinico da pool di buffy-coat
Sangue intero(20-24 °C)
![Page 24: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/24.jpg)
![Page 25: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/26.jpg)
•Fino a 5 gg dal prelievo•20-24 °C•Agitazione continua
![Page 27: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/27.jpg)
![Page 28: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/28.jpg)
Eritrociti Leucociti PiastrinePiastrine Plasma
•Concentrato piastrinico lavato•Concentrato piastrinico irradiato
•Congelamento entro 24 ore dal prelievo•Crioprotettore (DMSO)•Conservazione 1 anno a -80°C, 10 anni a -150°C•Utilizzo immediato dopo scongelamento
•Piastrine crioconservate (da aferesi)
•Come concentrati piastrinici
•Gel piastrinico
![Page 29: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/29.jpg)
PiastrinePiastrinePlasma Plasma
LeucocitiLeucocitiLeucocitiLeucociti
PiastrinePiastrinePiastrinePiastrine
Centrifugazione
2000 rpm 5-8 min
3500 rpm 15-20 min
Centrifugazione
Centrifugazione
Plasma Plasma
Concentrato piastrinico da singola unità di sangue interoConcentrato piastrinico da singola unità di sangue intero
LeucocitiLeucociti
Concentrato piastrinico da pool di buffy-coatConcentrato piastrinico da pool di buffy-coat
Sangue intero(20-24 °C)
![Page 30: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/30.jpg)
Gel piastrinicoConcentrato piastrinico da singola unità di sangue intero•Autologo•Quantità di sangue intero variabile (30-50 cc)
Aggiunta di calcio e trombina
•Elevato contenuto di fattori di crescita degli α-granuli•Favorisce i processi di riparazione tessutale•Utilizzato in chirurgia maxillo-faciale, ortopedia, trattamento ulcere cutanee
Utilizzare nel più breve tempo possibile
![Page 31: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/31.jpg)
•Plasma fresco congelato•Crioprecipitato•Plasma privo di crioprecipitato•Colla di fibrina
PLASMADERIVATI•Albumina e soluzioni di proteine plasmatiche•Immunoglobuline•Uso ev•Specifiche anti-HBV•Specifiche anti-tetano•Fattori della coagulazione
Plasma
![Page 32: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/32.jpg)
Plasma fresco congelato
•Separato entro 6 ore (non oltre 18) dal prelievo•Congelamento a -30° completato entro 1 ora
•Congelato entro 6 ore dal prelievo•Tipo A (aferesi)•Tipo B (scomposizione)
•Congelato tra 6 e 72 ore dal prelievo
•Tipo C (scomposizione)•Albumina•Immunoglobuline•ATIII•FVIII•FIX•Complesso protrombinico
![Page 33: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/33.jpg)
Plasma fresco congelato
Utilizzo per uso clinico entro•24 mesi se conservato ad almeno -25°C•3 mesi se conservato tra -18°C e -25°C
•Scongelato a 30-37°C con idonea strumentazione
•Utilizzato nel più breve tempo possibile•Entro 24 ore se conservato a 0-4°C
![Page 34: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/34.jpg)
Plasma fresco congelato •Scongelamento a 1-6°C
CrioprecipitatoFVIII, FXIII, vWF, fibrinogeno, fibronectina
Plasma privo di crioprecipitato (cryosupernatant)vWF metalloproteasi (ADAMTS13)
Utilizzato nel più breve tempo possibileEntro 24 ore se conservato a 0-4°C
Ricongelamento entro 1 ora24 mesi se conservato ad almeno -25°C3 mesi se conservato tra -18°C e -25°C
![Page 35: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/35.jpg)
![Page 36: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/36.jpg)
Colla di fibrina
•Crioprecipitato (autologo)•Calcio + trombina
Utilizzato nel più breve tempo possibile
Congelamento24 mesi se conservato ad almeno -25°C3 mesi se conservato tra -18°C e -25°C
•Facilitazione della cicatrizzazione delle ferite chirurgiche•Azione favorevole sull’emostasi
Gel criopiastrinico•Crioprecipitato•Piastrine congelate •Calcio + trombina
![Page 37: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/37.jpg)
Emoderivati (Plasmaderivati)
•Albumina e soluzioni di proteine plasmatiche•Immunoglobuline
•Uso ev•Specifiche anti-HBV•Specifiche anti-tetano
•Fattori della coagulazione
•Metodiche di precipitazione/purificazione•Metodi fisici (crioprecipitazione)•Metodi fisico-chimici (etanolo - Cohn)
•Metodiche cromatografiche•Gel-filtrazione•Cromatografia a scambio ionico e interazione idrofobica•Cromatografia ad affinità
![Page 38: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/38.jpg)
Emoderivati (Plasmaderivati) – Riduzione rischio infettivo
•Pathogen inactivation technology
•Quarantena
donazione esami
Fase finestra
![Page 39: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/39.jpg)
Pathogen inactivation
•Trattamenti al calore•Pastorizzazione•Trattamento al vapore•Dry heat
•Trattamenti sovente-detergente•TriNButylPhosphate – Tryton X100•Trattamento al vapore•Dry heat
•Nanofiltrazione•Trattamento al blu di metilene•Amatosalene - UV
![Page 40: Tecniche di preparazione e conservazione degli emocomponenti](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061502/56815202550346895dc0450f/html5/thumbnails/40.jpg)
•Perdita di proteine•Costo•Tossicità sul ricevente•Danno alle cellule
Pathogen inactivation
•Alchilanti (S-303, PEN110)•Riboflavina
Eritrociti
Piastrine •Psoralene - UV•Riboflavina - UV