teljeskÖrŰvÉdelem 3 betegsÉg ellen egyetlen … · innovax nd-ibd –vakcinÁzÁsi elŐirat 17...

TELJESKÖRŰ VÉDELEM 3 BETEGSÉG ELLEN

EGYETLEN KELTETŐI OLTÁSSAL

DR CSERÉP TIBOR

DVM MRCVS

ÁTTEKINTÉS

A rekombináns vakcinák bemutatása

rHVT-ND IBD

Üzemi körülmények során szerzett tapasztalatok

Szerológia

REKOMBINÁNS VEKTORVAKCINÁK BAROMFI VÉDELMÉRE

3

• A vakcinák új generációja géntechnológián alapszik

• Elsődleges célok : biztonságosság és kényelem

DEVELOPMENT OF RECOMBINANTS VACCINES

Biztonságosság

• A hagyományos vakcinák használatakor jelentkező oltási reakciók kiküszöbölése

• ND, ILT

• Elkerülhető a lappangás, horizontális terjedés , virulencia visszatérésének lehetősége ILT

Kényelem

• Több keltetői vakcinázás végezhető, és nem szükséges ismétlő vakcinázása telepeken

• Elkerülhető a maternális immunitás zavaró hatása, Deventer formula

• Könnyű alkalmazhatóság – tojásba oltás, bőr alá, automatizálás

REKOMBINÁNS VAKCINÁK: ELŐNYÖK


• rHVT- ND

• rHVT- ILT

• rHVT- IBD

• rHVT- AI

1° generációs rHVT egyszeres génbeültetéssel


• rHVT- ND-IBD

• rHVT- ND-ILT

2° generációs rHVT kettős génbeültetéssel

PULYKAHERPESZ VÍRUS

• Nagyon nagy vírus • A DNS felelős a vírus replikációjáért

és glikoproteinjeinek kódolásáért• A glikoproteinek felelősek a

gazdasejtekhez való tapadásért és behatolásért

• Az immunrendszer felismeri azantigéneket és immunválaszt ad

PULYKAHERPESZ VÍRUS

• Nagyon nagy DNS – ideális gén

eltávolított mutánsok létrehozására,

a virus reprodukciós képességének

elveszítése nélkül

• Genomjának vannak olyan szakaszai

amelyeknek nincs lényeges

funkciójuk, ahova gének helyezhetők

be

REKOMBINÁNS VEKTOR VAKCINÁK BAROMFI RÉSZÉRE

9

• Kizárólag a kulcs –protektív - donor

gén(ek) kerülnek behelyezésre a

vakcina vírus vektorba

• A donor vírus nem kívánt

mellékhatásai elkerülhetők

REKOMBINÁNS VEKTOR VAKCINÁK BAROMFI RÉSZÉRE

10

• Amikor a vektor vírus replikálódik, kifejezi

saját védő antigénjeit és a donor gének által

kódolt – protektív- antigén(ek)t.

• Elértük a célt :

protektív immunválasz

mind a donor mind a vektor

vírusokra

11

REKOMBINÁNS VAKCINÁK HÁTRÁNYAI

• Az immunitás kialakulása függ a vektor vírus replikációjától HVT replikáció

• Változások a szerológiai ellenőrzésben inzert által kiváltott immunválasz

• A korai védettség kialakulása érdekében , segíthet az élő, attenualt vakcinák használata ND

• A hagyományos élő vakcinákhoz képest drága

rHVT VEKTOR VAKCINÁK BAROMFI RÉSZÉRE

12

• Fagyasztott Marek vakcinák folyékony nitrogénben

tárolás, szállítás , beoltás

• Tojásba vagy napos korban oltás

nem terjed horizontálisan !

Innovax ND IBD

A legelső kettős génbeépítésű HVT vakcina

A legelső kettős génbeépítésű HVT vakcina

15

B ,T lymphocytes~ 20 nap replikálódás

fehérje expresszálódás

Ellenanyagok

és sejthez kötött

(celluláris)

immunválasz

A HVT REKOMBINÁNS VAKCINÁK MŰKÖDÉSI MODELLJE

HVT

IBD VP2

ND F

rHVT

1 vektor – 3 betegség elleni védelem

16

rHVT - ND-IBD

Marek betegség Baromfi pestis Gumboró betegség

INNOVAX ND-IBD – VAKCINÁZÁSI ELŐIRAT

17

17

• Sejthez kötött élő rekombináns pulykaherpeszvírus (HVP360 törzs), ami a sejtekkel a

baromfipestis vírus fúziós fehérjéjét és a fertőző burzitisz (Gumboro) VP2 fehérjéjét

termelteti.

• Cél állatfaj: Házityúk

• A védettség kezdete: Baromfipestis: 4. hét, Gumboro: 3. hét, Marek: 9. nap

• A védettség tartama: Baromfipestis: 8 hét !, Gumboro: 8 hét !, Marek: a kockázatos

időszak teljes tartama alatt

• Uj adatok – Rispens

• Naposcsibék (tojásba oltás) aktív immunizálására

• Adható ugyanazon a napon, de nem keverhető a Nobilis ND Clone 30 vagy Nobilis ND

C2, Nobilis IB Ma5 vagy Nobilis IB 4-91 vakcinákkal.

MAREK BETEGSÉG

18

18

ND (NCD): BAROMFIPESTIS

19

19

képek: N Lameda

20

20

IBD: FERTŐZŐ BURZITISZ (GUMBORO)

E. Leffer

L. Newman

EREDMÉNY …

21

21

22

22

REGISZTRÁLÁST MEGELŐZŐ VIZSGÁLATOK

EU. PHARMACOPOEIA ( Ph.Eur.)

23

23

rHVT ND-IBD BIZTONSÁGOSSÁGA

• A vakcina túladagolva is biztonságos (bőr alá (105.6 PFU)

tojásba oltva (105.1 PFU) ) dózisokban

– Nincs hatással a keltethetőségre

– Nem veszélyes a csirkére (120 nap ellenőrzési időszak)

• Nem nő a virulencia5. passzázs után sem veszélyes a csirkére (120 nap ellenőrzési időszak)

5. passzázs után is genetikailag stabil (genotípusosan és fenotípusosan)

• A rekombináns HVT állatról állatra terjedése nagyon hasonló az

eredeti HVT törzshöz

24

24

REGISZTRÁLÁST MEGELŐZŐ HATÉKONYSÁGI VIZSGÁLATOK

Baromfipestis elleni védelem• NDV Genotípus GII – GIV – GVII

• Klinikai védelem és a vírus ürítésének csökkenése

Gumboró elleni védelem• STC (Aphis USA), vvIBD CS89(EU), Variant E (USA)

• Klinikai védelem és a Bursa lymphoid sejtjeinek kiürülése elleni védelem (immunszuppresszió)

Marek-féle betegség elleni védelem• vvMDV RB1B, vMDV Ga5

• Klinikai védelem

Hatékonysági vizsgálatok ráfertőzéssel

26

26

VÉDELEM BAROMFIPESTIS ELLEN

27

27

BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM TESZTELÉSE

Ráfertőzés

izomba oltott, 105

EID50/dózisú

NDV challenge törzs Herts

33/56

A baromfipestisre jellemző tünetek klinikai

ellenőrzése

(megbetegedések és elhullás)

Vakcinázás bőr

alá (vagy

tojásba oltva)

1. nap x. nap x. nap +14 nap

-------------->ellenőrzés

BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM – DO sc.

source: A new double construct HVT-vaccine (rHVT-F-VP2) containing inserts for ND and IBD, Rik Koopmam, presentation 2017 AAAP congres Indianapolis

Vé

det

tsé

g, %

Életkor ráfertőzéskor (hetek )

* A védelmet a ráfertőzést követő 14 napon át vizsgálták és a madarakat pozitívnak minősítették, ha a Baromfipestisre jellemző klinikai tüneteket mutattak úgymint, mozgáskoordináció hiánya, bénulás és/vagy elhullás

29

29

TOJÁSBA OLTÁS - VÉDELEM BAROMFIPESTIS ELLEN

• Amerikai tanulmány Texas GB (genotype II)

Teszt dozis 104 ELD50/madár

•EU tanulmány

Herts 33/56 (genotype IV)

Teszt dózis 105 EID50

Vé

det

tség

, %

Baromfipestis ráfertőzés 4 élethetesen (Texas GB)

Vé

det

tség

, %

Baromfipestis ráfertőzés 4 élethetesen

Vé

det

tség

, %

Baromfipestis ráfertőzés 8 élethetesen

30

30

BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM - EGYIPTOMI VELOGÉN NDV, GENOTÍPUS VIIKLINIKAI VÉDELEM ÉS VÍRUSÜRÍTÉS CSÖKKENÉSE

Csoportszám

Izol.SPF

madarakdb

Életkor: 1 nap Ráfertőzés : 12 naposan 15. nap 20 . nap 22. nap 28. nap

VakcinázásNDV genotípus VII

Ráfertőzés

Kloáka tampon - madarak száma

Ráfertőzést követő

0. nap 3. nap 7. nap 10. nap 14. nap

1 A06 5 Nincs Nincs 5 5 5 5 5

2 A07 20 rHVT ND-IBD (sc) AG-1502 (im) 20 20 20 20 all

3 A08 20rHVT ND-IBD (sc) + ND C2

(oc)AG-1502 (im) 20 20 20 20 all

4 A09 20rHVT ND-IBD (sc) +ND

Clone30 (oc)AG-1502 (im) 20 20 20 20 all

5 A10 20 rHVT-ND + IC 2512 IBD (sc) AG-1502 (im) 20 20 20 20 all

6 A12 10 Nincs AG-1502 (im) all all all all all

Adatok: MSD Animal Health.

Hasonló vizsgálati terv a 20 és 28 napos ráfertőzésre

Ráfertőzés dózisa: 105 ELD50

BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM – NDV, GENOTÍPUS VII

source: A new double construct HVT-vaccine (rHVT-F-VP2) containing inserts for ND and IBD, Rik Koopmam, presentation 2017 WVPA congres Edinburgh

rHVT-ND-IBDday 1

Vé

det

tsé

g, %

A ráfertőzést követő 15. napon megfigyelt Baromfispestisre utaló klinikai tünetek

Ráfertőzött

kontrol

csoport

Negatív

kontrol

Ráfertőzés 12 naposan20 naposan28 naposan

32

32

Klinikai védelem NDV virus, Genotípus VII rHVT ND-IBD, C2 vagy Cl 30 vakcinákkal

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Innovax ND IBD Innovax ND IBD +Nobilis ND C2

Innovax ND IBD +Nobilis ND Clone30

rHVT-ND + IC IBDV Challenged controls

Pe

rce

nt

Pro

tect

ion

(Su

rviv

al)

12 day-old

20 day-old

28 day-old

Data on file. MSD Animal Health.

Nem fertőzött

kontrol csoport

12 napos20 napos28 napos

Vé

det

tség

, % (

túlé

lés)

GUMBORO BETEGSÉG ELLENI

VÉDELEM

33

rHVT ND-IBD HATÉKONYSÁGA ERŐSEN VIRULENS IBD (CS89) ELLEN

Klinikai védelem & Lymphoid depléció (kórszövettan)10 dpc megfigyelt időszak post mortem 10 dpc

Csoport Isolator SPFcsibékszáma

Vakcinázás1.napon

SC

Very virulent IBDCS89 100 CID50/dose,ocular

D21 D28

1 A30 10 Neg control none none

2 A31 10 Pos control CS89 CS89

3 A32 20 rHVT-ND-IBD CS89 CS89

4 A33 20 rHVT-ND + IC 2512 IBD CS89 CS89

5 A35 20 rHVT-IBD CS89 CS89

Data on file. MSD Animal Health.

rHVT ND-IBD - vvIBDV elleni klinikai védelem:

OOI és DOI - SPF állomány, Ráfertőző törzs: CS-89

9095 100 100 100

0 0 0 0 00

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

2 weeks 3 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeks

% V

éd

etts

ég

Challenge Age

Innovax ND-IBD HVT only

Data on file. MSD Animal Health. Report 2015; GNI/0067/15.

ÁTLAGOS KLINIKAI VÉDELEM IBD CS89 RÁFERTŐZÉS UTÁN: D21 & D28

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

D21 D28

neg control

pos control

Innovax ND-IBD

rHVT-ND + IC 2512 IBD

rHVT-IBD

IBD pontozásos módszer (napi pontozás):0:Nincs IBDV-re utaló tünet1:IBDV-re utaló elváltozások2:IBDV ráfertőzés miatti elhullás2#:Euthanasia erős IBDV fertőzés miatt

BURZAKÁROSÍTÓ HATÁS - LYMPHOID DEPLÉCIÓ IBD CS89 RÁFERTŐZÉS

UTÁN D21 &D28

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

D21 D28

neg control

pos control

Innovax ND-IBD

rHVT-ND + IC 2512 IBD

rHVT-IBD

LD

Score

Lymphoid depletion

LD score: 0= normal bursa; 1= 1-25% LD; 2= 26-50% LD; 3= 51-75% LD; 4=76-100% LD; 5= 100% LD*LD Lymphoid Depletion** LD score <31) LD score at 3 days post challenge

38

• US vizsgálat: STC (klasszikus

törzs) IBDV ráfertőzés/US

Pharmacopeia szerint

GUMBORO ELLENI VÉDETTSÉG IN OVO OLTÁS ESETÉN

EU vizsgálat CS89 vvIBDV

ráfertőzés: 3 és 8 héttel vakcinázás után (EU. Ph.)

CS89 100 CID50/doseocular

39

MAREK-FÉLE BETEGSÉG ELLENI

KLINIKAI VÉDELEM

rHVT ND-IBD DO sc. -vvRB1B ráfertőzés 9 napos korban

87,8

00

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Innovax ND-IBD Unvaccinated controls

Véd

etts

ég%

Data on file. MSD Animal Health. Report 2015; GNI/0039/15

A védettségnek min.80%-nak kell lennie…

rHVT ND-IBD DO sc, in ovo - ráfertőzés vGA5 TÖRZS (US)

8395

10

85

30

20

40

60

80

100

In ovo In ovo In ovo SC SC

Ráfertőzés: 5 napos korban

placebo placebo

Védettség %

2019 március 21. CVMP pozitiv vélemény

42

MAREK-FÉLE BETEGSÉG ELLENI VÉDELEMRISPENS + rHVT ND-IBD

Marek védelem - Rispens + rHVT ND-IBD

SPF állomány –vvMDV RB1B-vel ráfertőzve és megfigyelve 77 napig

csoport Vakcina 1 Vakcina 2 Alkalmazás módja

RáfertőzésIM

kor védelem

vakcina adag vakcina adag

1 rHVT-ND-IBD 103.3

PFU/ dose

Rispens 103.0 PFU/ dose

SubcutanD1

RB1B 5 nap 93%(28/30)

2 rHVT-ND-IBD 103.3

PFU/ dose

Rispens 103.0 PFU/ dose

SubcutanD1

RB1B 5nap 100%(30/30)

3 nem vac/fertőzöttcontrol

NA nem vac/fertőzöttcontrol

NA - RB1B 5 nap 0(0/30)

4 Nem vac/nem fertőzött

NA Non vac/nem fertőzött

NA - - - egészséges(6/6)

Monitoring : Klinikai megfigyelés 77 napig + Post mortem vizsgálat minden elhullott egyedből

ND védelem – Rispens + rHVT ND-IBDráfertőzés: ND Herts

Group Vakcina 1 Vakcina 2

Alkalmazás módjaRáfertőzés

IMkor

Védettség (%)Name Dose Name Dose

1 rHVT-ND-IBD103.3 PFU/

doseRispens

103.0 PFU/ dose

SubcutaneousD1 ND Herts

10 5.3

Log10 ELD50

28nap

90(19/21)

2nem vac/

fertőzött controlNA

nem vac/fertőzött control NA -

0(0/12)

3nem vac/nem


nem vac/nemfertőzött control

NA - non - 100

Monitoring: Klinikai megfigyelés 14 napig (naponta 2x, a 2. és 3. nappal a ráfertőzés után: baromfipestisre utaló tünetek, elhullás, kórboncolás

Gumboro védettség: Rispens + rHVT ND-IBD IBD ráfertőzés: vvIBD CS89

csoport Vakcina 1 Vakcina 2

Alkalmazás módjaRáfertőzésszemcsepp

korVédettség

(%)Neve Adag Neve Adag

1 rHVT-ND-IBD103.3 PFU/

doseRispens

103.0 PFU/ dose

SubcutaneousD1

IBD CS8930 CID50

21nap

100(22/22)

2nem vac/


nem vac/fertőzött control NA -

0(0/11)

3nem vac/nem


nem vac/nemfertőzött control

NA - nem - 100

Monitoring: klinikai monitoring a ráfertőzés után 10 napig: IBDV-re utaló tünetek vagyelhullás, kórboncolás10 nappal a ráfertőzés után: az életben maradt egyedek kiirtása, Bursa makroszkóposvizsgálata és kórszövettani vizsgálat.

• A Rismavac nem befolyasolja hátrányosan az Innovax ND IBD hatékonyságát

• A kombináció életre szóló védettséget biztosít Marek-féle betegség, Baromfipestis és Gumboro ellen a hosszú élettartamú madaraknak is (tenyész és tojó)

3 in 1

rHVT –ND- IBD ÜZEMI TAPASZTALATOK

PERU

48

ND

•velogenic

• lentogenic

IBDV

•Variant,

•Classical

•Very virulent

Lima

Arequipa rHVT-ND-IBD Control

InnovaxND-IBD +NDC2, DO

InnovaxND+NDC2 –IC 2512, DO

rHVT-ND +2512 IC

kakasjérce

A BURSÁK KÓRBONCTANI ÉRTÉKELÉSE A 38. NAPON

Normális Enyhe atrophia Súlyosfokú atrophia

10/14 3/14 1/14

0/14 2/14 12/14rHVT-ND + 2512 IC

rHVT-ND-IBD

rHVT-ND-IBD

TERMELÉSI EREDMÉNYEK ÖSSZEGZÉSE 5 TELEPRŐL:

50

(Innovax ND + C2) + 2512 IC Innovax-ND-IBD + C2

#1 #2 #3 #4 #5 Average #1 #2 #3 #4 #5 Average

Mean end weights per bird (kg)* 2.915 2.943 2.855 3.160 2.910 2.956 2.914 2.882 3.028 3.15 3 2.994

Age 42.25 42.21 42.6 41.89 41.38 42.06 41.68 41.18 41.7 41.13 41.02 41.34

ADWG (g/day)* 69.01 69.73 67 75.59 70.32 70.33 69.93 69.99 72 76.58 73.14 72.32

Mortality (%) 2.61 2.86 3.82 2.21 2.91 2.88 2.5 3.09 4.95 1.66 3.5 3.14

Feed conversion** 1.68 1.65 1.66 1.67 1.74 1.68 1.65 1.56 1.66 1.66 1.71 1.64

EPI 399 404 388 433 383 401 410 431 415 443.48 401.88 420

BW

+38g

$3,800

FCR

4pt (40g)

$2,790

Cost Vaccination

$20 - $15

$500

Difference

$6,090 / cycle

~ $36,500 / year

ROI1:12

Difference in 100,000 birds

Meat 1 $/kg $ 232.50/ton

• rHVT- ND IBD

• rHVT-IBD

• IC 2512 IBD

FCR TOTAL MORTALITY(%) FINAL WEIGHT (KG) AVERAGE DAYS

TREATMENT COSTPER CHICKEN (€)

A 1,82 5,45 2,86 43,2 0,0275



B 1,91 5,95 2,645 42,53 0,036



Γ 1,85 5,16 2,30 42,46 0,037

ÜZEMI EREDMÉNYEK - Görögország és Cyprus

1,821,85

1,91

1,75

1,80

1,85

1,90

1,95

INNOVAX TRANSMUNE VAXXITEK

Average Values Test 2 & Test 3

FCR

INNOVAX

ND-IBD

IC 2512 IBD HVT-IBD

66,20

54,1762,20

0,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00



ADG(g)

INNOVAX IC 2512 IBD HVT-IBD


5,45 5,165,95

4,505,005,506,006,50



TOTAL MORTALITY(%)

INNOVAX IC 2512

IBD

HVT-IBD

2,862,30

2,65

0,00

1,00

2,00

3,00

4,00



FINAL WEIGHT (KG)

INNOVAX IC 2512 IBD HVT-IBD


ROI rHVT-ND-IBD vs

rHVT-IBD: 8.36:1

ROI rHVT-ND-IBD vs

IC 2512 IBD: 2.97:1


rHVT-ND-IBD

SZEROLÓGIAI MONITORING NL

Monitoring• 3 tojó előnevelő cég, 12 nevelő telep

• 2018 február-március

Vakcinázás:

- D0: rHVT-ND-IBD, sc

- D42: ND élő, spray

- W12: APV-IB-ND-EDS inaktivált vakcina

Mintázás:

- 4, 6, 9, 12 és 15 hetes korban

- 30 vérminta/ól/mintavételenként

Vizsgálatok (GD, Deventer):

- ND HAG

- IBD ELISA Idexx (standard)

- IBD VP2 ELISA (vektor vakcina specifikus )

ND HAG titer

0,0

1,0

2,0

3,0

4,0

5,0

6,0

7,0

8,0

4 6 9 12 16

átla

gtit

er

kor (hét)

Baromfipestis: átlagos HAG titerek 12 telepről

average

GUMBORO: ELISA titer

0,0

2,0

4,0

6,0

8,0

10,0

12,0

4 6 9 12 16

átla

gtit

er

Kor/hét

IBD ELISA VP2: átlagtiter 12 telep

0,0

2,0

4,0

6,0

8,0

10,0

12,0

4 6 9 12 16át

lagt

ite

r

Kor/hét

IBD ELISA ( Idexx): átlagtiter 12 telep

Összegzés: szerologiai monitoring

0

1

2

3

4

5

6

7

8

NCD (HAR)

Tite

r cs

op

ort

Átlagos ND titerek- 12 telep

Week 4

Week 6

Week 9

Week 12

Week 15

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

HVT-VP2 (ELISA)Ti

ter

cso

po

rt

Átlagos VP2 titerek- 12telep

Week 4

Week 6

Week 9

Week 12

Week 15

Következtetés:

• ND HI teszt: jól mérhető áthangolódás

• Gumboro ellenanyagok: a VP2 ellenanyagok gyors emelkedése a maternális ellenanyagok ellenére -> nincs rés a védettségen

2019

• Uj diagnosztika - NGS

• Szerológiai vizsgálatok rHVT ND-IBD utódállományokban

• További üzemi kipróbálások broiler, tenyészés tojó állományokban is

62

HTTP://WWW.INNOVAX-VACCINES.COM/

teljeskÖrŰvÉdelem 3 betegsÉg ellen egyetlen … · innovax nd-ibd –vakcinÁzÁsi elŐirat 17...

Documents