termÉszetes eredetŰ kivonatok alkalmazÁsa a …

PROF. DR. MARÓTI MIHÁLY (1917-2009) EMLÉKÜLÉS

SZENT ISTVÁN EGYETEM BUDAI CAMPUS

2017. ÁPRILIS 21., BUDAPEST

TERMÉSZETES EREDETŰ KIVONATOK

ALKALMAZÁSA A NÖVÉNYI

SZÖVETTENYÉSZETEK TÁPTALAJAIBAN

DR. MOLNÁR ZOLTÁN

Az előadás áttekintése

Bevezetés

Növényi sejt- és szövettenyésztés

Növényi szövettenyészet tápközegek

Természetes kiegészítők: mikroalga

biomassza

3

Bevezetés

Gottlieb Haberlandt

Előadó: Dr. Molnár Zoltán

4

Bevezetés

2015. július 10.


• „Culturversuche mit isolierten

Pflanzenzellen” Wien, 1902

• in: Sitzungsberichte der mathematisch

naturwissenschaftlichen Classe der

Kaiserlichen Akademie der

Wissenschaften. 111, Abth. 1. S. 69-91.

5

Bevezetés

Gottlieb Haberlandt


• „elemi organizmus”

• „Elementarorganizmus”

6

Bevezetés

Gottlieb Haberlandt


• növényi sejtek és szövetek kiemelése természetes környezetükből

• a növényanyag fenntartása steril (aszeptikus) körülményeken

• növényi sejt- és szövettenyészetek in vitro fenntartása ellenőrzött fizikai és kémiai feltételeken

• (növény regeneráció, gyökereztetés és kiültetés talajba)

7



• Kallusztenyészet

• Sejtszuszpenzió

• Protoplaszttenyészet

• Portok vagy mikrospóra tenyészet

• Merisztéma tenyészet

8



9

Kallusztenyészet


10

Protoplaszttenyészet


11

Portoktenyészet


12

Merisztéma tenyészet


13

Merisztéma tenyészet


• megfelelő izolátum

(explantum)

• táptalaj összetevők

• tenyésztési feltételek

14

Sikeres sejt- és szövettenyésztés


• megfelelő izolátum

(explantum)

• táptalaj összetevők

• tenyésztési feltételek

15

Sikeres sejt- és szövettenyésztés


• ásványi tápelemek ← víz,

talaj

• szénforrás ← légköri CO2

• fiatal szervek ← fixált szén

és ásványi anyagok

16

Növényi tápanyagforrások

a természetben


Esszenciális:

• szervetlen sók

• szén- és energia-

forrás

• vitaminok

• növényi növekedés

szabályozók (PGRs)

Kiegészítők:

• szerves nitrogén-

források

• szerves savak

• komplex természe-tes

vegyületek

17

Növényi szövettenyészet táptalajok


Kiegészítők:

• szerves nitrogén-

források

• szerves savak

• komplex természe-

tes vegyületek

18

Növényi szövettenyészet táptalajok


19

Murashige-Skoog (1962) táptalaj

összetétele


Vegyület mg/l

NH4NO3 1650

KNO3 1900

CaCl2•2H2O 440

MgSO4•7H2O 370

KH2PO4 170

H3BO3 6,2

MnSO4•H2O 16,9

ZnSO4•H2O 8,6

KI 0,83

NaMoO4•2 H2O 0,25

(folyt.)

20

Murashige-Skoog (1962) táptalaj

összetétele


Vegyület mg/l

CuSO4•5H2O 0,025

CoCl2•6H2O 0,025

FeSO4•7H2O 27,8

Na2EDTA•2H2O 37,3

mio-inozit 100,0

nikotinsav 0,5

tiamin•HCl 0,1

piridoxin•HCl 0,5

glicin 2,0

szacharóz 30000

agar 8000

• kókusztej (CW)

• egyéb folyékony

táplálószövet

• kazein hidrolizátum

• élesztő kivonat

• maláta kivonat

• paradicsomlé

• narancslé

• banán

homogenizátum

• burgonya kivonat

• kitozán

• aktív szén (AC)

• alga kivonat

(biomassza)

21

Növényi szövettenyészet táptalajok:

komplex természetes kivonatok


• kókusztej (CW)

• egyéb folyékony

táplálószövet

• kazein hidrolizátum

• élesztő kivonat

• maláta kivonat

• paradicsomlé

• narancslé

• banán

homogenizátum

• burgonya kivonat

• kitozán

• aktív szén (AC)

• alga kivonat

(biomassza)

22

Növényi szövettenyészet táptalajok:

komplex természetes kivonatok


23

Mosonmagyaróvári Mikroalga

Gyűjtemény (MACC)


24

Laboratóriumi algatenyésztés


Felülúszó:

extracelluláris

vegyületek

Centrifugálás

Biomassza:

intracelluláris

vegyületek

Liofilezés

Szövettenyészetekben vizsgált tápközegek:

• B5 törzsoldat + felülúszó

• B5 törzsoldat + felülúszó + 4,5 mg/l BAP + 0,02 mg/l NES

• B5 táptalaj + 2 g/l liofilezett biomassza

• B5 táptalaj + 0,2 – 0,6 – 1 – 2 g/l liofilezett biomassza

• B5NB (B5 + 2 mg/l BAP + 1 mg/l NES)

• hormonmentes B5 táptalaj

25

Kezelések


26

Mikroalgák


Microalga törzs Tápközeg Faj

MACC-33 Bristol Chlorococcum ellipsoideum Archib. et Bold

MACC-44 Bristol Scotiellopsis terrestris (Reisigl) Punc. et Kal.

MACC-67 Bristol Selenastrum rinoi Kom. et Comas

MACC-101 BG+N Synechococcus sp.

MACC-114 Tamiya Scenedesmus obliquus (Turp.) Kütz.

MACC-137 Tamiya Scotiella nivalis (Schuttl.) Fritsch

MACC-330 Tamiya Chlorococcum humicolum

MACC-438 Tamiya Chlorella sp.

MACC-696 Tamiya Chlorococcum sp.

27

Borsó hajtások fejlődése a csak mikroalga

felülúszóval kiegészített B5 tápközegen


28

Borsó hajtások fejlődése a mikroalga

felülúszóval és fitohormonokkal kiegészített

B5 tápközegen


29

Dohány szárszegmentek fejlődése a

mikroalga felülúszóval és fitohormonokkal

kiegészített B5 tápközegen


30

Dohány szárszegmentek fejlődése a

mikroalga felülúszóval és fitohormonokkal

kiegészített B5 tápközegen


31

Cianobaktériumok


Cianobaktérium Tápközeg Faj

MACC-203 IPPAS Pseudochlorococcum typicum

MACC-304 Bristol Anabaena sphaerica

MACC-533 IPPAS Coenochloris sp.

MACC-612 Z-8+N Nostoc entophytum

32

Eredmények – borsótenyészetek


B50 biomassza B5NB

B50 biomassza B5NB

MACC-304, 0,2 g/l

MACC-612, 1 g/l

33

Eredmények – dohánytenyészetek


MACC-304

B50 biomassza B5NB

34



MACC-612

B50 biomassza B5NB

35



B50 biomassza B5NB

B50 biomassza B5NB

MACC-304, 0,2 g/l

MACC-612, 1 g/l

Hajtástenyészetek:

• 2 g/l liofilezett biomassza kiegészítés jobb, mint a B50, de: nem helyettesíti a szintetikus fitohormonokat

• 0,2-0,6 g/l MACC-304 liofilezett biomassza

• 1 g/l MACC-612 liofilezett biomassza

Mezokotil tenyészetek:

• nincs hajtás multiplikáció, de: a főhajtás intenzíven fejlődik

36

Következtetések – borsótenyészetek


Hajtástenyészetek:

• 2 g/l liofilezett biomassza az MACC-304, MACC-612 törzsekből: - mindkét kontrollhoz képest nagyobb friss tömeg - a levelek fejlődésének serkentése

• 0,2 g/l MACC-304 liofilezett biomassza

• 1 g/l MACC-612 liofilezett biomassza

• a gyökérfejlődés serkentése

37

Következtetések – dohánytenyészetek


Összefoglalás

Bevezetés – Gottlieb Haberlandt

Növényi sejt- és szövettenyészet

típusok

Tápközegek természetes kiegészítői:

mikroalga biomassza hatása

Köszönöm a megtisztelő figyelmet!

termÉszetes eredetŰ kivonatok alkalmazÁsa a …

Documents