Erwin R. Schmidt

Institut für MolekulargenetikVorlesung #3

04. 05. 2015

Thema Gentechnologie

Plasmide als Vektoren

Blau-weiß-Selektion mit pUC-Vektoren

Vektor zur Klonierung von PCR-Produkten

Eigenschaften einiger PCR-Polymerasen

Table 1. Comparison of PCR Product Properties for Some Thermostable DNA Polymerases.

Taq/ VentR®/ Deep Characteristic AmpliTaq® Tfl Tth (Tli) VentR® Pfu Pwo

>95% >95% Resulting DNA ends 3´ A 3´ A 3´ A Blunt Blunt Blunt

5´®3´ exonuclease Activity Yes Yes Yes No No No No

3´®5´ exonucleaseactivity No No No Yes Yes Yes Yes

N.A.: not available

Für die Expression fremder Gene gibt es spezielle Expressionsvektoren mit

Signalsequenzen für die korrekte Transkription und Translation in Bakterien

Plasmidvektoren, zur Expression von Fremdgenen

Expression von Fusionsproteinen mit sog. „His-tag“

„Gateway“-Klonierungssystem

„Gateway“-Klonierungssystem

„Gateway“-Klonierungssystem

„Gateway“-Klonierungssystem

Replikation M13-Bakteriophage

United States Patent 6803230 Inventors:

Bowdish, Katherine S. (Del Mar, CA) Fredrickson, Shana (Solana Beach, CA)

Wild, Martha (Solana Beach, CA)

Substitutionsvektoren

Linker Arm „Stuffer“ Rechter Arm

Integrat

Ligation