trabajo de investigaciÓn
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
UNIVERSIDAD NACIONAL
PEDRO RUIZ GALLO
Facultad de Ingeniería Química e Industrias Alimentarias
“OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL SORGO DULCE POR
FERMENTACION POR AGITACIÓN, BATCH Y POR LOTES”
Autores: Fernández Paredes Aldo
Curso: TRABAJO DE INVESTIGACIÓN
Profesor: Ing. Ind. Rubén Darío Sachun García
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
TRABAJO DE INVESTIGACIÓN
I. GENERALIDADES
1.1. Titulo
OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL SORGO DULCE POR
FERMENTACION POR AGITACION, BATCH Y POR LOTES
1.2. Personal investigador
Autores: Fernández Paredes Aldo
Asesor: Ingº Sachún García Rubén Darío
1.3. Tipo de investigación
1.3.1 De acuerdo al fin de que se persigue
Aplicada
1.3.2 De acuerdo al diseño de la investigación
Experimental
1.4. Área de investigación
Biotecnología
1.5. Línea de investigación
Operaciones y procesos unitarios
1.6. Localidad e institución de ejecución
Localidad : Valle Lambayeque, distrito de Chongoyape
Institución : Laboratorio de Operaciones y Procesos Unitarios de
la Facultad de Ingeniería Química e Industrias
Alimentarias de la UNPRG.
1.7. Duración Del Proyecto: 4 Meses.
Fernández Paredes Aldo
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II.- ASPECTOS DE LA INFORMACION
2.1. Realidad problemática
La contaminación ambiental hoy en día se ha incrementado considerablemente
debido al excesivo incremento de los parques automotrices y equipos
motorizados que hacen uso de combustibles que unidos a su mala calidad
emanan gases tóxicos que contaminan el medio ambiente. Estudios realizados
certifican que gracias al etanol mesclado con la gasolina se puede mejorar el
rendimiento la calidad de los combustible, por tal motivo evitaremos la
contaminación además de alargar la vida del vehículo y ahorro de dinero.
Además que el cultivo de sorgo dulce para la elaboración de etanol resulta
menos costoso que el cultivo de caña de azúcar o explotación de petróleo;
siendo así que en una superficie cultivada, el sorgo consume dos veces menos
de agua que el maíz, con un valor nutritivo comparable y ocho veces menos
que la caña de azúcar.
En consecuencia, el sorgo necesita poca o ninguna irrigación, sistema que
requiere costosas bombas de agua que con frecuencia funcionan en base a
combustibles fósiles que emiten dióxido de carbono (CO2), principal gas que
produce el “efecto invernadero”, subraya Mark Winslow (revista agrimaq 2010).
En India, un galón (3,78 litros) de etanol producido a partir de sorgo cuesta 1,74
dólares, contra 2,19 dólares el fabricado de caña de azúcar y 2,12 dólares con
maíz, precisa el informe.
Proyectos desarrollados sobre el modelo de asociación están en marcha en
Filipinas, México, Mozambique y Kenia, precisa el documento del ICRISAT
cuya sede está en India y recibe fondos de varios Gobiernos.
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Estados Unidos y la Unión Europea (UE) están también interesados en producir
biocombustibles a partir del sorgo, indicó Winslow.
El etanol, actualmente, en la mayoría de los países consumidores no es usado
como fuente principal de combustible, sino es mezclado en porcentajes que
varían entre 5% y 10%, reemplazando generalmente a los aditivos oxigenantes
como MTBE (metil terciario butil Ester) o ETBE (etil terciario butil Ester).
Únicamente en Brasil existe un parque vehicular que funciona con 100% de
etanol, lo que se conoce como E100. Desde el punto de vista de contaminación
ambiental, se ha reportado en Australia que adicionar 10% de etanol a la
gasolina significó una reducción de 32% de emisión de monóxido de carbono
(CO) en la atmósfera, de 12% de hidrocarburos totales (THC) y de 7% de
dióxido de carbono (co2). Por lo tanto, mejoraría la calidad del aire en zonas
urbanas, especialmente aquellas de alta tendencia a la contaminación, como lo
es Santiago de Chile. (India tierra adentro. 2007)
La Contaminación Ambiental de la ciudad de Lima, producido por el parque
automotor, se ha convertido en un problema para los residentes limeños dado
que el aire que respiran está bastante contaminado con partículas de plomo
producido por los combustibles usados por las unidades del parque automotor.
Este mismo problema presenta la ciudad de Chiclayo debido al uso masivo de
petróleo y sus derivados que unido a la antigüedad de parque automotriz se ha
visto incrementado la contaminación de nuestra región. Haciendo uso de este
nuevo combustible se evitara en parte la contaminación de nuestro medio
ambiente además de mejorar la economía de los agricultores de la región
debido al bajo costo en el cultivo del producto.
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2.2. Planeamiento del Problema
En el Perú la producción de petróleo es baja debido a la poca existencia de
yacimientos petroleros, por tal motivo este producto se debe de importar de
países extranjeros debido a la gran demanda.
Para la elaboración del etanol la materia es la melaza de caña de azúcar y los
cereales (sorgo, maíz, cebada) siendo estos cada vez más escasos y debido a
que no se le ha dado la debida importancia como producto industrial
simplemente son considerados como desperdicios agrícolas, industriales o
alimento de ganado.
2.3. Formulación del problema
Ante la problemática presentada el problema queda planteado de la siguiente
manera:
¿Cuál es el Rendimiento de Bioetanol a partir del Sorgo Dulce por
Fermentación por Agitación, Batch y por Lotes?
2.4.-Objeto
El objeto de estudio del presente trabajo es el rendimiento del etanol a partir de
sorgo dulce el cual al ser utilizado como combustible permitirá un mejor
funcionamiento en los vehículos que los utilicen, lográndose evitar la
producción de gases contaminantes, los cuales dañan nuestra salud y el medio
ambiente.
2.5 Justificación e importancia de la investigación
En la actualidad, el resurgimiento de alcohol como combustible, ayuda en la
reducción de la contaminación del medio ambiente ya que el alcohol produce
menos residuos tóxicos, siendo económico; facilitando el desarrollo sostenible,
en países cien por ciento consumidores de petróleo.
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El alcohol como combustible es un recurso renovable, no como los
hidrocarburos que representan una riqueza única y agotable a comparación de
la materia celulósica (sorgo dulce). Asimismo permitirá un ahorro sustancial de
dinero en el usuario consumidor.
2.6. Objetivos
Objetivo General
Determinar el rendimiento de alcohol etílico en cada uno de los procesos
fermentativo por Agitación, Batch y por Lotes.
Objetivo Específico
Determinar el porcentaje de humedad, proteínas, cenizas, grasa, fibra, almidón
y azucares presentes en el sorgo dulce con el objetivo de saber con que
cantidad de azucares reductores contamos y por ello mismo saber con cuanto
alcohol etílico y dióxido de carbono podremos obtener como máximo en el
proceso fermentativo.
2.7. Campo de Acción
El etanol combinado con otros combustibles permite el mejor rendimiento de
los equipos motorizados que hacen uso de petróleo y sus derivados. Es aquí
en donde se verifica la importancia de este producto derivado del sorgo dulce.
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III.- MARCO TEORICO
3.1. Antecedentes del Problema
Gay Lussac (1815)
Este investigador dijo que los responsables de la fermentación alcohólica son
las levaduras que pueden sufrir diversas subdivisiones de acuerdo con criterios
morfológicos, tecnológicos y bioquímicos.
Berzelius (18369
Supuso que la fermentación alcohólica era debida a la acción catalítica de
determinadas sustancias.
Pasteur (1815)
Anuncio la teoría vitalista de la fermentación, según la cual aquella se realiza
en el interior de las células de las levaduras vivas.
Buchner (1897)
Descubrió que un prensado de levaduras libre de células era capaz de producir
la fermentación, demostró que se trataba tanto de “mecanista” como “vitalista”.
Harden y Young (1905)
Hicieron el descubrimiento referente al quimismo de las fermentaciones, de que
parecían esteres de lo azucares con el acido fosfórico como paso intermedio.
Neuberg (1912)
Encontró que el desdoblamiento del acido Piruvico en acetaldehído y dióxido
de carbono era una reacción parcial de la fermentación.
Lohman (1929)
Descubrió el Adenosintrifosfato que se manifestó como un almacén de energía
química.
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Warbur (1942)
Aisló las enzimas de la fermentación Aldosa Gliceralhidofosfato-
Deshidrogenasa y Enolasa y realizo in vitro las reacciones catalizadas por
ellas.
3.2. Base Teórica
3.2.1. Origen e historia del Sorgo
Existen varias teorías con respecto al origen y diseminación del sorgo. Algunos
primeros informes muestran que el sorgo existió en la india en el siglo I d.c.
Esculturas que lo describen se hallaron en ruinas Asirias de 700 años a.c. Sin
embargo, según Doggett ,los sorgos cultivados hoy en día se originaron del
silvestre Sorghum Bicolor y la mayor variación en el Género Sorghum se
encuentra en el cuadrante noreste de África ,abajo del Sahara ,en la región de
Etiopia –Sudan.La apreciación ocurrió a través del aislamiento, Doggett
describió el movimiento del Sorgo cultivado junto con su pariente silvestre
Sorghum Arundinaceum lo cual el crecimiento hacia el Sur fue restringido por
los bosques lluviosos del Congo y los sorgos cultivados siguieron cruzándose
con las especies silvestres generando nuevas formulas de ambos tipos.
La evidencia existente sugiere que el Sorgo llego a Etiopia de África Oriental
alrededor del año 200 a.c. y de allí, la tribu Bantú lo llevo a los países de la
Sabana del Este y Sur de África, usando el grano principalmente para elaborar
cerveza. Los Sorgos actualmente cultivados en África Central y África del Sur,
se asemejan más a los tipos de África Oriental que a los de África Occidental.
El movimiento del Sorgo (Guinea y Durra) de África a la India, fue
probablemente vía naves de vela a lo largo de la ruta oceánica de los Sabeos
de Arabia del Sur, aproximadamente en el año 1500 a.c. desde la india, el
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cereal llego a China por la ruta de la Seda en el siglo III y dio lugar a las
características distintivas del grupo Caoling cultivado en China Oriental y
Central.
Para el año 700 a.c. El sorgo se había movido de la india hasta los países del
Mediterráneo (notablemente Italia) vía Arabia.
La llegada del cereal a varias partes del Hemisferio Occidental fue a través del
comercio de esclavos. Al principio ,los tipos Guinea Criollos, sensibles al
Fotoperiodo (Maicillos criollos) fueron llevados a América Central provenientes
de África Occidental, Central y Sur, como alimento para los esclavos durante el
siglo XVI.Otras introducciones a Estados Unidos incluyeron los Durras Cafés y
Blancos de Egipto en 1874,los Kafirs de Sudáfrica en 1876,Milo de África
noreste alrededor de 1880.
3.2.2. Características y descripción taxonómica del Sorgo
El sorgo pertenece a la amplia familia de las Gramíneas actualmente
denominada Poaceae y su clasificación es la siguiente:
Cuadro # 01: Distribución taxonómica del Sorgo Dulce
FAMILIA POACEAE
SUBFAMILIA PANICOPDEAE
GENERO SORGHUM SPP L
ESPECIE SORGHUM BICOLOR
NOMBRE COMUN SORGO O MIJO
Fuente: El Autor
Fernández Paredes Aldo
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El sorgo se conoce con vario nombres: Mijo Grande y maíz de Guinea en África
Occidental, Kafir en África Austral. Duro en el Sudan, Matama en África
Oriental, Jowar en la India y Kaoliang en China. El género Sorghum se
caracteriza por espiguillas que nacen en pares.
Clasificación
En 1753, Linneus descubrió en “Sub Especies Plantarium” tres especies de
sorgo cultivado: HOLCUS Sorghum. Saccaratus y H. Bicolor .En 1794 Moench
distinguió el género Sorghum del genero Holcus; En 1805 Persoon creó el
nombre Sorghum Bicolor Moench, como el nombre científico de los sorgos
cultivados y como tal ha sido aceptado desde entonces .Posteriormente varios
Taxónomos has clasificado el Sorgo a través de los años, donde no solo las
Panícula son importantes, también se observan los tallos, las hojas, etc. Y
3.2.3. Distribución Geográfica Del Sorgo Dulce
En el país tiene poca influencia la siembre del Sorgo Dulce (Sorghum Bicolor),
existe algunas ciudades como la ciudad de Piura, Tumbes, Ferreñafe, Ica tiene
una incidencia muy baja.
3.2.4. Fermentación Alcohólica
Un proceso de fermentación típico es esencialmente un proceso que se lleva a
cabo en un recipiente llamado fermentador o en general; Bioreactor.
Mediante el cual determinamos sustratos que componen el medio de cultivo;
son transformados por acción microbiana por metabolitos y biomasa. El
microorganismo va aumentando su concentración en el transcurso del proceso,
al mismo tiempo que el medio se va modificando y se forman productos nuevos
como consecuencia de las actividades Cataboliticas y Anaboliticas.Los dos
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fenómenos de crecimiento y formación de producto, tienen lugar durante el
desarrollo del proceso.
3.2.4.1. Efectos Internos Y Externos
El comportamiento de un microorganismo en crecimiento es el resultado de la
iteración que se produce entre el microorganismo y el medio ambiente en el
reactor y que en rigor es el resultado de los llamados efectores intra y extra
celulares.
Los factores internos están representados por la dotación genética intrínseca
del organismo generado y por sus mecanismos de regulación metabólica.
Estos últimos pueden ser modificados por alteraciones del medio ambiente o
más precisamente por los factores externos, mientras que la existencia de un
gen depende de la especie de un microorganismo considerado. Con el fin de
mejorar la productividad de un proceso de fermentación, las cepas empleadas
pueden someterse a tratamiento físico o químico de mutación que al alterar
algún sector del genoma logran aumentar la producción de un metabolito
aunque también pueden disminuirla , incluso suprimirla.
3.2.4.2. Agentes De Fermentación Alcohólica
Para que una fermentación tenga una condición satisfactoria, es imprescindible
que se adicione al mosto una cantidad de microorganismo capas de desdoblar
los azucares en alcohol y gas carbónico, dentro de determinadas condiciones
de operación.
Este conjunto de microorganismos es conocido como “Pie de Cuba”, “Levadura
Alcohólica”,”Pie de Fermentación” o simplemente “Fermento”.
Las levaduras o Fermento son hongos microscópicos, Unicelulares de
constitución muy sencilla; las levaduras alcohólicas industriales son clasificadas
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como Ascomicetos las especies más importantes perteneces al género
Saccharomyces siendo las de mayor interés a la Saccharomyces Cerevisiae y
Saccharomyces Carisbergensis.
Industrialmente las levaduras han sido clasificadas en grupos de acuerdo con
su comportamiento en los procesos fermentativos, así la designación de:
Levadura baja está dada por las levaduras que producen poco gas durante
el proceso fermentativo y tienden a depositarse en el fondo de las cubas.
Levadura alta tiene comportamiento universo, produciendo mucho gas y
siendo elevada a la superficie de la cuba, produciendo estas mayores
cantidades de alcohol.
En general las levaduras alcohólicas son más grandes que las bacterias, cerca
de cinco veces en tamaño.
Una vez inoculado el mosto se inicia el proceso fermentativo, pudiendo ser
dividido este en tres fases distintas según su mayor o menor productividad de
alcohol, dióxido de carbono y calor, estas fases son:
PRELIMINAR.-Se caracteriza por una multiplicación y desarrollo de la levadura
limitándose el desprendimiento del dióxido de carbono.
PRINCIPAL.-En esta fase el desprendimiento de dióxido de carbono aumenta
notablemente, las levaduras terminan su periodo vegetativo y comienzan su
acción fermentadora transformando los carbohidratos reductores y dióxido de
carbono y alcohol.
COMPLEMENTARIA.-Durante esta fase se hace más lento el desprendimiento
de dióxido de carbono, es la fase en que ocurren las contaminaciones, además
de la producción de componentes secundarios.
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Cuadro # 02: Composición química de una levadura común.
COMPONENTE % PESO
Agua(Evaporada a 1020C)
Celulosa
Proteínas(Albumina)
Proteínas(Combinaciones
Fosfatadas)
Grasas
Materias extrañas
Peptonas
Cenizas(Materias minerales)
70.00
12.10
11.40
2.70
1.00
0.80
0.80
1.40
TOTALES 100.20
Fuente: El Autor
3.2.5. Bioquímica De La Fermentación Alcohólica
En el paso del azúcar hasta los productos de Fermentación Etanol y Anhídrido
Carbónico tiene lugar 12 reacciones intermedias que pueden simplificarse
resumidas de la siguiente forma:
En presencia de iones magnesio ,por acción de la Enzima Hexoquinasa y
por la colaboración de la Coenzima ATP(Adenosintrifosfato),que contiene
Fosfato ligado, la Glucosa se transforma en el Ester –Acido Fosfórico
(Fosforilación).A partir de ATP se genera ADP(Adenosindifosfato).La
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Fructosa se Fosforiliza en Fructosa-6-Fosfato siguiendo el mismo
mecanismo de reacción.
La Enzima Glucosa –Fosfato-Isomerasa transforma la Glucosa -6-Fosfato
en Fructosa-6-Fosfato (Isomerización)
La Fructosa -6-Fosfato, bajo la acción del Enzima Fosfofructoquinosa y de
una segunda molécula de ATP como Coenzima, en presencia de iones
Magnesio, se Fosforiliza en el átomo C1 para convertirse en Fructosa -1,6-
Difosfato.
La Fructosa -1,6-Difosfato se desdobla bajo la acción del Enzima Aldolasa
y, sin la participación de ninguna Coenzima, en dos Triosafosfatos:
Gliceraldehido-3-Fosfato (GAP) y Dihidroxiacetona Fosfato. Se forma GAP
solo en un 4%.
Por la acción de la Enzima Triosafosfato –Isomerasa se genera a partir del
Hidroxiacetonafosfato Gliceraldehido -3-Fosfato (GAP), hasta que se
insatura un equilibrio entre ambos Triosafosfatos. En esta etapa no
participan ningún Coenzima.
En presencia de Levadura –Coenzima NAD al GAD se oxida hasta Acido
1,3 Difosfoglicerico bajo la acción del Enzima Gliceraldehido- Fosfato-
Deshidrogenasa y mediante captación de Fosforo Inorgánico.
El Enzima Acido Fosfoglicerico-Fosfoquinasa traslada el resto Fosfatado
del Acido 1,3-Difosfoglicerico al Coenzima ADP. Se origina Acido-3-
Fosfoglicerico. Aquí se forma por mol de Hexosa 2 mol de ATP y 2 mol
de Acido Fosfoglicerico.Se recuperan así las moléculas de de ATP
utilizadas en la etapas 1 y 3.El balance energético se ve igualado.
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Por la acción del Enzima Acido Fosfoglicerico.Se –Mutasa se transforma
en Acido 3- Fosfoglicerico.Se en Acido 2-Fosfoglicerico.
En presencia de Iones Magnesio, el Enzima Enolasa desprende agua del
Acido 2-Fosfopiruvico.Se origina así el Enol del Acido Fosfopiruvico. Esta
reacción es marcadamente Exotérmica.
Por efecto del Enzima Piruvato-Quinasa se traslada el resto del Fosfato al
ADP. La energía liberada resultante es aprovechada por la levadura para
otros procesos Bioquímicos. Como producto del desdoblamiento se forma
el Acido Piruvico.
El Acido Piruvico se desdobla en Acetaldehído y Dióxido de carbono por la
acción del Enzima Piruvato –Decarboxilasa.
El Enzima Alcohol-Deshidrogenasa ocasiona la reducción del
Acetaldehído a Alcohol Etílico. Como Coenzima vuelve a actuar el NAD. El
hidrogeno transferido procede de la etapa 6.
3.2.6. Factores que afectan la Fermentación Alcohólica
Como todos los seres vivos, las Levaduras tienen necesidades precisas en lo
que se refieren a su nutrición y al medio en que viven .Son muy sensibles a la
temperatura, necesitan oxigeno, una alimentación apropiada en azucares, en
elementos minerales, en sustancias nitrogenadas, en factores de crecimiento.
Cuanto mayor sea el grado que se desea obtener el vino, más necesario es
que las levaduras se multipliquen en condiciones óptimas.
Los factores que influyen en la fermentación son:
A.- Temperatura:
La temperatura es un factor preponderante para la vida de las Levaduras.
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Estas no se desarrollan bien más que en una escala de temperatura
relativamente cortas, hasta 20℃ como máximo.
Por debajo de 13℃ o 14℃ el inicio de la fermentación es prácticamente
imposible o es tan lento que ocurre el riesgo de una activación espontanea.
En la fermentación alcohólica nunca se debe sobrepasar temperaturas de 32℃
a 33℃ durante el periodo fermentativo, ya que corren varios riesgos:
Inactivación de la levaduras responsables de la fermentación de los
Azucares en Alcohol y CO2.
Perdida de Alcohol por evaporación con la consiguiente pérdida del
grado alcohólico.
Iniciación de fermentaciones indeseables tales como las Lácticas y las
Butílicas.
Temperaturas entre 22℃ y 28℃ son las más adecuadas para que la
fermentación transcurra convenientemente a fin de obtener un vino de calidad.
La rapidez de la transformación de azucares aumenta con la temperatura (por
lo menos hasta cierto límite).Es esta la primera Ley que hay que recordar. La
fermentación es mucho más rápida a 30℃ que a 25℃ y a 25℃ que a 20℃.Su
actividad se duplica con una diferencia de 10℃.Por cada grado suplementario
de azucares en el mismo espacio de tiempo.
B.- Presión:
La fermentación es un proceso Biotecnológico que se realiza a presión
atmosférica .Acciones semejantes a las logradas fermentando a bajas
temperaturas se pueden conseguir también ejerciendo presión sobre la
fermentación.
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C.-Aireación:
Las levaduras necesitan oxigeno para multiplicarse, en ausencia completa de
aire, en un mosto, se producen solo algunas generaciones y su reproducción
se detiene. Basta entonces proporcionarles un poco de aire para que su
gemación se reeprenda.
Si el estado de asfixia se prolonga la mayoría de las células mueren.
Pasteur definió la fermentación como “La vida sin aire” porque una célula de
levadura privada de oxigeno encuentra la energía que le es necesaria en la
transformación del Azúcar. Pero para conseguir una fermentación prolongada y
obtener productos fermentados que cifren 100GL e incluso mas, deben
formarse constantemente nuevas generaciones de levaduras, y por lo tanto, le
es indispensable el oxigeno.
D.-Acidez:
Las levaduras no necesitan de la acidez para multiplicarse, incluso hacen
fermentar mejor los azucares en un medio neutro o poco acido. Trabajan mejor
con un Ph 4,0 que con un Ph 3,0.
Cuando una fermentación se detiene no se debe a una falta de acidez, sino a
un exceso de temperatura que asfixia las levaduras. Sin embargo, una débil
acidez puede convertir en muy graves las consecuencias de esa detención,
pues las bacterias de enfermedades se desarrollan más fácilmente cuando más
débil es el medio acido.
El papel de la acidez se puede interpretar del siguiente modo: No favorece el
desarrollo de las levaduras, pero perjudica a las bacterias peligrosas en caso
que cese la fermentación.
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E.-Nutrientes
A las levaduras le es necesario encontrar ciertos alimentos en el mosto donde
se desarrollan .Sus necesidades de azúcar, de materias minerales, son
fácilmente satisfechas, pero los mostos están peor provistos de sustancias
nitrogenadas asimilables.
Las levaduras para la producción de alcohol están constituidas por un 25% a
60% de materias nitrogenadas, por lo tanto para poder reproducirse necesitan
encontrar en el medio en que viven, suficiente nitrógeno asimilable.
El nitrógeno Amoniacal (Catión Amonio) es el primer alimento Nitrogenado
consumido por las levaduras y le siguen cierto Aminoácidos Libres como el
Acido Glutamico.En 36 horas de fermentación las levaduras agotan literalmente
el nitrógeno asimilado del mosto, así como también otros factores nutritivos.
Añadiendo de 10 a 20 gramos de Sales de Amonio por Hectolitro, casi siempre
aumentaban las colonias de levaduras y se acelera la fermentación.
3.3. Variables
3.3.1. Variable Dependiente:
Porcentaje de alcohol o grado alcohólico obtenido en el vino.
3.3.2. Variable independiente:
Cantidades de azúcares fermentescibles presentes en el mosto.
Dilución del jugo de Sorgo Dulce en el agua empleada en la
fermentación alcohólica.
3.4. Hipótesis
“¿Se lograra un alto rendimiento alcohólico en la obtención de Bioetanol por
sistemas de Agitación, Batch y por Lotes a partir del Sorgo Dulce?”
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3.5. Definición de términos
El Sorgo es un cereal mayor, con características típicas de las plantas
Gramíneas. Las raíces son fibrosas y pueden extenderse hasta tres pies en el
suelo .El diámetro basal esta aproximadamente en una pulgada haciéndose
más delgada a la altura de la inflorescencia. La inflorescencia es una panícula
ramificada, que contiene racimos con o sin pedúnculos .Es una planta que
florea desde arriba hacia abajo.
El Sorgo es uno de los cereales más recientes a periodos largos sin agua; en
condiciones de sequedad y calor extremos, la planta entra en fase de letargo
o latencia, y cuando la situación mejora, recupera la actividad.
El Sorgo es una planta originalmente de día corto, sin embargo los híbridos
que actualmente se manejan son de día largo, por lo que se cultivan en el
ciclo de primavera-verano.
Tallo
El sorgo es generalmente una planta con un solo tallo, pero varía mucho en
su capacidad de ahijamiento dependiendo de la variedad, la población de
plantas y el ambiente. Muchos tipos son perennes. La altura varía de 45 cm a
más de 4 m y depende del número de nudos que es igual al número de hojas
producidas y es una función del periodo de madurez de la planta. La altura
depende también del entrenudo, el pedúnculo y la panícula y todos estos
factores están bajo control genéticos separados.
Los tallos tienen 7 a 24 nudos y son erectos, sólidos con una corteza dura y
una medula suave. El diámetro del tallo varia de 5 a 30 mm en la base .Las
haces vasculares son más numerosos, duros y pequeños hacia la periferia del
tallo donde forman casi un anillo solido. Las del parénquima entre los haces
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interiores, tienen paredes delgadas; pero aquellos entre las periferias son, con
paredes gruesas y lignificadas.
Esta acumulación difusa de almidón puede ser extensa especialmente entre
los sorgos dulces. La medula es jugosa y seca, dulce o insípida. Se forma una
yema en cada nudo excepto en el nudo terminal. Las yemas son alternas y las
inferiores pueden formar hijos axilares después del desarrollo de las raíces
coronarias; mientras que las superiores pueden desarrollarse como ramas
laterales especialmente si se daña el ápice del crecimiento.
Pedúnculo
Es el entrenudo más alto que lleva inflorescencia y es siempre el más largo.
Una buena exercion permite que los granos queden fuera de la vaina de la
hoja bandera y entonces se reduce el daño por plagas y enfermedades en la
parte inferior de la panícula .La longitud del pedúnculo o exercion está
controlada genéticamente, pero los factores ambientales como deficiencia de
agua pueden ejercer efectos pronunciados.
Hojas
El número de hojas varía entre 7 a 24 según la variedad y longitud del periodo
de crecimiento. Las hojas son erectas casi horizontales y se encorvan con la
edad. Las hojas maduras son de 30 a 135 cm de largo y 1.5 a 15 cm de
ancho. Son alternas y lanceoladas o linear-lanceoladas con una superficie
superior lisa y cerosa. Los márgenes de las hojas son ásperos o lisas y
pueden ser peludos hasta la punta. Las estomas están en fila sencilla o doble
en ambas superficies de las láminas.
La última hoja producida es la hoja bandera y su vaina protege la
inflorescencia.
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Raíz
La radícula sencilla, es responsable del establecimiento de la plántula y es
temporal. El sistema radical adventicio fibroso se desarrolla de los nudos más
bajos del tallo. La profundidad del enraizado es de 1 a 1.3 m con el 80% de
las raíces en los primeros 30cm.Los depósitos de sílice en la endodermis de
la raíz probablemente la fortalecen y la hacen soportar presiones altas
durante las épocas de sequia.
Inflorescencia
Es una panícula con racimos con un raquis central completamente escondido
por la densidad de las ramas de la panícula o totalmente expuesto. La
exercion de la panícula es importante para la cosecha mecanizada y para la
tolerancia a las pestes y enfermedades. La panícula es corta o larga, suelta y
abierta, compacta o semi compacta; puede tener de 4 a 25 dm de largo, de 2
a 20 cm de ancho y llevar de 400 a 8000 granos.
Destilación
La destilación es un proceso que se vale de la diferencia de el punto de
ebullición para separar uno o más componentes de una mezcla, es utilizado
para separar el Alcohol Etílico de una mezcla Hidroalcoholica libre de
sustancias fijas y de una parte de sustancias volátiles que acompañan el vino,
las sustancias volátiles de un vino poseen diferentes grados de volatilidades y
es posible separarlos después de su identificación.
Las mezclas hidroalcoholicas,a presión normal(760mmhg) tiene una
temperatura de ebullición entre 78,35℃ y 100℃,respectivamente a las
temperaturas de ebullición de alcohol etílico y del agua que será tanto más
próximo a 78,35℃ cuanto más alto sea el contenido de alcohol etílico.
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La destilación ordinaria en los aportes de columnas de trabajo periódico o
continuo produce a lo sumo un alcohol de 960GL, el alcohol de esta
composición constituye una mezcla azeotropica de etanol –agua con un punto
de ebullición mínimo en el cual el liquido y el vapor que se desprenden tienen
la misma composición. El punto de ebullición de esta mezcla es de 78,174℃.
IV.- MARCO METODOLOGICO
4.1. Diseño de contrastación de hipótesis
El diseño aplicado es Con Estimulo Creciente o con Prueba, Post Prueba y
varios grupos, se usan varios grupos experimentales a los que se les aplica el
estimulo progresivamente en magnitudes diferentes y las conclusiones se
establecerán por comparación, pero dicha comparación serán con su homologo
en este caso aguardiente o guarapo proveniente del jugo de caña; pues no
existe un licor establecido proveniente del Sorgo Dulce para comparar.
4.2. Población y Muestra
La población lo constituye media hectárea de Sorgo dulce del distrito de
Chongoyape, departamento Lambayeque,
Se toman 29 Kg representativos de Sorgo Dulce en forma selectiva para
proceder a proceso de fermentación.
4.3. Materiales, Técnicas e instrumentos de recolección de datos
4.3.1. Técnica e instrumentos de recolección de datos
Para la recolección de información o datos importantes para el desarrollo del
presente proyecto se recurrió primeramente a la técnica documental o
bibliográfica, que consiste en revisar, analizar y seleccionar aquellas
publicaciones, obras o artículos relacionados con el tema de investigación; y
luego se utilizara la técnica de campo (Observación) que consiste en recoger
los resultados obtenidos directamente de la experimentación.
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
4.3.2. Material de laboratorio y campo.
4.3.2.1. Materiales de laboratorio.
Vaso de precipitación 100-
500ml
Matraces Erlenmeyer de
250ml
Pipetas
Goteros
Desecador
Termómetro de 0℃-100℃
Papel filtro
Probetas de 100 y 500ml
Embudo de vidrio
Buretas de 25 y 50 ml
Fiola de 100ml
Luna de reloj
Placa Petri
Crisol
Capsula de porcelana
Brixometro
Alcoholímetro
4.3.2.2. Reactivos
Subacetato básico de plomo
seco
Acido clorhídrico
concentrado
Acido sulfúrico concentrado
Acido cítrico
Agua destilada
Fenolftaleína
Solución de Fehling “A” y
Fehling “B”
Hidróxido de sodio 0.1N
Sulfato de potasio
Sulfato de cobre
pentahidratado
Acido clorhídrico 0.1N
Rojo de metilo
Azul de metilo 0.1%
Sulfato de sodio
Hidróxido de sodio 40%
Solución de Yodo
Anaranjado de metilo
Papel rojo de tornasol
Hexano
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Mezcla catalítica
(NO2,SO4,CuSO4.SeCO2)
Sulfato amónico ferroso
0.34N
Dicromato de potasio
Ferrocianuro de potasio
Agua desmineralizada
4.3.2.3. Equipos
Desecador
Balanza analítica
Estufa
Cocina de digestión
Aparato de destilación de
Kjeldhl
Extractor Soxhlet
Bomba de vacio
Erlenmeyer con refrigerante
Aparato de destilación
alcohólica
V.-DESARROLLO DEL TEMA
Agua
Se utilizo agua potable para las extracciones correspondientes relación 21 Jugo
de Sorgo y Agua.
Agentes Fermentativos
Para los procesos fermentativos se utilizo la Levadura Saccharomyces
Cerevisiae, identificada en el laboratorio para su respectiva activación y luego
agregarlos al mosto.
Procedimiento de Selección de Muestra
Las muestras fueron obtenidas en forma selectiva de acuerdo a grado Brix que
presentaban.
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
5.1. Determinación de las Operaciones y Parámetros de Procesamiento
El Presente trabajo de investigación se realizo siguiendo la secuencia de
diagrama de flujo mostrado en la figura siguiente:
Diagrama de Flujo para la Obtención de Alcohol Etílico a partir del Sorgo
Dulce
5.1.1. Materia Prima
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MATERIA PRIMA
LIMPIEZA Y SELECCION
PESADO
PRENSADO
ACONDICIONAMIENTO DEL MOSTO
FERMENTACION ALCOHOLICA
DESTILACION
ALCOHOL ETILICO
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
El Sorgo Dulce que se utilizo para la obtención de Etanol procede del Valle
Lambayeque, distrito de Chongoyape, recolectado en el mes de mayo del
presente año.
5.1.2. Seleccion y Limpieza
El Sorgo Dulce se sometió a una selección con el Refractómetro en el que tenia
mayor índice era el elegido, para luego sacar las hojas y materia extraña que
se encontraba en el tallo y quedando finalmente con el tallo.
5.1.3. Pesado
Se realiza pesando tres muestras con igual peso en una balanza plataforma.
5.1.4. Prensado
Se utilizo un Trapiche eléctrico que consistía en tres rodillos que realizaba el
prensado. Es el que utilizan los ambulantes para extraer jugo de Caña.
5.1.5. Acondicionamiento de Mosto
El jugo de Sorgo fue diluido con agua hasta llegar a 200 Brix y tener un pH
óptimo para la fermentación de 4.5 con Bicarbonato de Sodio.
Luego se separaron en tres Bioreactores de 2.3 litros cada uno para su
posterior fermentación.
5.1.6. Preparacion de la Levadura Alcohólica
A cada Bioreactor se le agrego 5 gramos de levadura respectivamente
activándolo a una temperatura de 30℃
5.1.7. Fermentacion Alcohólica
La fermentación se inicia desde el momento que se agrega la levadura activada
al mosto. Para la fermentación se designaron Bioreactores de la siguiente
manera:
A.-Sistema de Fermentación por Agitación
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Para este proceso se utilizo como cuba de fermentación, un depósito de
plástico de 4 litros de capacidad con una capa hermética a la cual se le hicieron
3 orificios: uno en el cual se le instalo la manguera para el escape del gas
carbónico sumergido en un recipiente con agua. La otra manquera de menor
diámetro para los análisis que se realiza cada hora.
En la tapa se instalo un agitador de 100 rpm la agitación se realizo de forma
continua por espacio de 15 minutos después de cada hora de fermentación.
B.- Sistema de Fermentación Batch
Este Bioreactor al igual que el primero consiste en un recipiente de plástico,
con tres orificios a los cuales se instalaron mangueras: uno para escape de
gases, otro para el termómetro y el último para el análisis del mosto por hora.
C.- Sistema de Fermentación con Alimentación por Lotes
El Bioreactor tiene las mismas características que los anteriores pero además
contiene un recipiente auxiliar graduado conteniendo 1725 ml de mosto sin
levadura el cual se va agregando aproximadamente a los 575 ml iniciales en
cuatro etapas, cada una de 575 ml cada dos horas.
5.1.8. Destilacion
Una vez obtenido el mosto fermentado de cada Bioreactor es llevado al Equipo
de Destilación Batch del Laboratorio de Química Orgánica.
La finalidad de esta operación es separar o extraer la mayor cantidad de
alcohol que se encuentra en el vino.
5.2. Analisis del Mosto Inicial y Final de la Fermentación
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
5.2.1. Analisis de Brix
Es el método por el Brixometro, el objetivo es determinar la cantidad de sólidos
disueltos en mosto en la fermentación de los tres Procesos.
Se determino el grado Brix aparente introduciendo en Brixometro en una
muestra de solución de mosto en una probeta, dejando que se estabilice, se
realiza la lectura correspondiente.
5.2.2. Analisis de pH
El objetivo es determinar la acidez de la solución. Se determino colocando la
muestra problema en un vaso de 50 ml de mosto. Se introducen los electrodos
del Potenciómetro previamente calibrado con soluciones estándar para 4 y 10
pH respectivamente y por último se lee el valor en la pantalla del instrumento.
5.3. Determinacion del Contenido Alcohólico en el Mosto Fermentado
Método Oxidación de Dicromato de Potasio
El objetivo es determinar el contenido alcohólico en el mosto fermentado.
El método consiste en tomar 25 ml del mosto fermentado, el que se afora en un
balón de 100 ml. En un Matraz de 250 ml se prepara un blanco al que se le
agrega 5ml de Dicromato de Potasio 0.69N gota a gota 1ml de agua
desmineralizada y 1ml de Ferrocianuro de Potasio al 2%(indicador), se utiliza
con Sulfato Ferroso Amoniaco 0.34N hasta llegar a un color azul gota a gota,
se reporta el gasto.
Al mosto fermentado se le añade 1ml de Dicromato de Potasio y se deja en
reposo por un lapso de media hora, luego se titula con Sulfato Ferroso
Amoniaco hasta la obtención de una coloración azul, el gasto también se
reporta.
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Los datos reportados de la titulaciones son reemplazados en la siguiente
formula obteniéndose de esta manera el grado alcohólico de la muestra.
0GL= A∗(1−Gm)Vm∗Gb
A= 5ml de Dicromato de Potasio
Vm= ml de muestra
Gm= Gasto de Sulfato Ferroso Amoniaco 0.34N en el blanco (ml)
VI.-RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Cuadro # 03: controles Físicos y Químicos del mosto acondicionado sin
fermentar.
Determinaciones Resultados
pH 4.5000Brix 14.00
Densidad(g/ml) 1.0549
Temperatura(0C) 21.00
Volumen del Mosto(Lts) 6.90
Azucares Reductores (%) 3.12
Sacarosa(g) 4.28
Fuente: El Autor
Cuadro # 04: Controles Físicos y Químicos del mosto fermentado.
Sistema pH Brix Temperatura(0C)
Por Agitación 4.80 8.50 20
Batch 4.80 8.00 21
Por Lotes 4.80 9.00 21
Fuente: El Autor
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Cuadro # 05 : Controles y registros en el proceso de fermentación alcohólica
en el sistema con agitación.
Tiempo(Horas) Temperatura(0C)
0Brix
0 21 14.0
1 25 14.0
2 28 14.0
3 25 13.8
4 25 13.7
5 23 13.6
6 24 13.5
7 22 13.4
8 22 13.1
9 23 13.0
10 24 12.8
11 22 12.0
12 22 11.0
13 21 10.8
14 23 10.8
15 24 10.5
16 23 9.7
17 22 9.2
18 22 9.0
19 21 9.0
20 22 8.5 Fuente: El Autor
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Grafico # 01 : Relación entre tiempo de Fermentación y 0Brix en el proceso de
Fermentación Alcohólica para el Sistema con Agitación.
0 5 10 15 20 250
2
4
6
8
10
12
14
16
Tiempo(horas)
Brix
Fuente: Cuadro # 05
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Cuadro # 06 : Controles y registros en el proceso de fermentación alcohólica
en el sistema a condiciones constantes.
Tiempo(Horas) Temperatura(0C)
0Brix
0 21 14.0
1 25 13.8
2 28 13.8
3 25 13.7
4 25 13.7
5 23 13.6
6 24 13.5
7 22 13.5
8 22 13.3
9 23 13.2
10 24 13.1
11 22 13.0
12 22 12.8
13 21 12.0
14 23 11.8
15 24 11.8
16 23 11.5
17 22 11.0
18 22 10.0
19 21 9.0
20 22 8.0 Fuente: El Autor
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Grafico # 02 : Relación entre Tiempo de Fermentación y 0Brix en el proceso de
Fermentación Alcohólica para el Sistema a Condiciones Constantes.
0 5 10 15 20 250
2
4
6
8
10
12
14
16
Tiempo(horas)
Brix
Fuente: Cuadro # 06
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Cuadro # 07 : Controles y registros en el proceso de fermentación alcohólica
en el sistema de alimentación por lotes.
Tiempo(Horas) Temperatura(0C)
0Brix
0 21 14.0
1 23 13.8
2 23 13.8
3 21 13.3
4 22 13.3
5 23 13.2
6 23 13.0
7 22 12.8
8 23 12.5
9 21 12.3
10 22 12.2
11 21 12.0
12 21 11.5
13 23 11.1
14 22 10.0
15 23 9.5
16 21 9.4
17 23 9.2
18 22 9.0
19 22 9.0
20 21 9.0
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Grafico # 03 : Relación entre Tiempo de Fermentación y 0Brix en el proceso de
Fermentación Alcohólica para el Sistema de Alimentación Por Lotes.
0 5 10 15 20 250
2
4
6
8
10
12
14
16
Tiempo(horas)
Brix
Fuente: Cuadro # 07
Rendimiento en la Operación de Destilación
La mayor producción de alcohol corresponde a la fermentación realizada en
el Sistema Batch por el lapso de 20 horas ,seguido del Sistema de
Fermentación Con Agitación y luego el del Sistema de Alimentación Por
Lotes.
El Sistema Por Agitación alcanzo un grado alcohólico de 500GL.
El Sistema Batch alcanzo un grado alcohólico de 600GL y el Sistema de
alimentación Por Lotes alcanzo un grado alcohólico de 500GL, eso nos
indica que el Sistema de mayor obtención de Alcohol Etílico es el Sistema
Batch.
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
VII.-CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Conclusiones
Los parámetros de la fermentación discurren con la desaparición de los
azucares, debido a esto el Brix disminuye con respecto a los valores
iniciales en el Sistema con Agitación se inicio la fermentación con
140Brix y termino con un valor de 8.50Brix; en el Sistema a Condiciones
Constantes se inicio la fermentación con 140Brix termino con un valor de
8.00Brix y por último, el Sistema Por Lotes se inicio con 140Brix y
termino con un valor de 9.00Brix.
La fermentación duro aproximadamente 20 horas, luego del cual los
parámetros analizar se mantuvieron constantes.
El vino con más alto grado alcohólico fue el del Sistema Batch,
determinándose con esto que es el mejor Sistema para la fermentación
del Sorgo.
La eficiencia que se obtuvo en la obtención de Alcohol Etílico en el
Proceso por Agitación, Batch y Por Lotes fueron de 59,69% y 49%
respectivamente.
Recomendaciones
Para lograr una buena separación de la sustancia azucarada se diluyo
con agua potable caliente (50℃-60℃), para extraer la mayor cantidad
de azucares; para luego realizar la etapa de maceración, ya que en el
procedimiento de Extracción queda la miel en el Bagazo del Sorgo
Dulce.
Para realizar una buena Hidrólisis de los azucares se utiliza Acido Cítrico
para adecuar el pH de 4.6; elevar la temperatura a 35℃.
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
El afrecho obtenido después de la fermentación puede utilizarse para la
industria de papel por el contenido de fibras y combustible para los
calderos con una humedad mínima del 50% porque von mas humedad
los calderos no quemarían el bagazo por el alto porcentaje de agua.
Manteniendo el mosto a un pH acido (4.6) se evita reacciones
secundarias entre las cuales tenemos reacciones Acéticas, Aldolicas,
Aldehidas contaminantes, Bacteriológicas.
El mosto obtenido es acondicionado con Bicarbonato de Sodio para
lograr un pH adecuado a 4.6.
Cuando se agrega la levadura al sustrato, darle un previo calentamiento
a una temperatura aproximada a 35℃, para lograr una buena activación
de las levaduras y por otro lado el inicio de la fermentación.
Se recomienda para posteriores estudios en la fermentación del Sorgo
Dulce, se debe llegar a un Brix final de fermentación de cero.
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VIII.-ASPECTO ADMINISTRATIVO
8.1. Cronograma De Actividades
Actividades
2011
FEBRERO MARZO ABRIL MAYO
I. Etapa de planificación
Revisión bibliográfica X
Contacto con la realidad X
Elaboración de proyecto X
Presentación del proyecto X
II. Etapa de ejecución
Implementación material X
Recolección de muestras X
Registro de datos X X
Identificación taxonómica X
Procesamiento de datos X
III. Etapa comunicación
Elaboración de informe X
presentación informe X
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
8.2. Presupuesto:
Fecha:
Bienes ………………………………………… S/.1021
Servicios ………………………………………… S/.80
Otros ………………….………………………S/.40
Total ………………………………………. S/.1141
2.1. BIENES:………………………………..………………………….…… S/. 1021
Material de escritorio: …………………………...s/. 41
2 Cientos de papel bond.
3 Lapiceros.
1 Resaltadores.
Material de laboratorio: ………………….…….s/. 880
Bioreactor.
Sorgo Dulce.
Levadura.
Acido sulfúrico.
Acido ascórbico.
1Caja de fosforo.
Termómetro.
Brixometro.
pH metro.
Cuchara
Balón de gas.
Ollas.
Depósitos para el alcohol
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Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
Material para procesamiento de datos:………..s/. 100
1 memoria USB
1 cartucho para impresora hp 2460
Internet
2.2. SERVICIOS: …………………………...………….……………..…… S/. 80
Pasajes y subvenciones: …………………………..……….…… S/. 70
Viajes a distrito de Chongoyape
Viajes Laboratorio de Operaciones y Procesos Unitarios de la Facultad
de Ingeniería Química e Industrias Alimentarias de la UNPRG.
Publicaciones: ………………………………………………..…..…S/. 10
Publicación del informe final ,1 ejemplar.
2.3. OTROS: …………………………………………… S/.40
TOTAL: S/.1141
3. FINANCIAMIENTO:
El presente proyecto de investigación será autofinanciado.
IX.-REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Fernández Paredes Aldo
Obtención De Bioetanol a Partir Del Sorgo Dulce
A.O.A.C.,Official Methods of analysis of the Association of Official
Analytical Chemistry,EE.UU.1980
De. José Silva Vera “Bromatología Analítica”Departamento de
Bioquímica –Universidad Nacional de Trujillo, 1998.
Emile Peynaud, “Enología Practica: Conocimiento y Elaboración del
vino”España,1984
Ernest-Bruchmann E., “Bioquímica Técnica”, Editorial Acribia,
Zaragoza-España, 1980.
Ernst Vogt,”El Vino:”Obtención, Elaboración y Analisis”,90 Edición,
Editorial Acribia S.A; Zaragoza-España, 1986.
Formoso, A., “Procedimientos industriales al alcance de todos” Editorial
Limusa, Noriega Editores, España.1997.
Francisco Vallejos;”Alcoholes, su Fabricación y Usos”,1998.
Galvez Peres Jhon;”Familia de Gramineas”Primera Edición, 1998.
Internet:WWW.SorgoDulce.com,(china)
Harma,K., “Levaduras y Alcoholes”, Editorial Reverte S.A,Zaragoza-
España,1961.
Leandro Ibar Albiña “Sorgo Cultivo y aprovechamiento”, Edición
Mexicana.S.A, Editorial Aedos Barcelona, 1985.
Pearson,D., “Técnicas de Laboratorio para análisis de
alimentos” ,Editorial Acribia S.A.,Zaragoza-España,1986.
Spencer,E.Meade,G.”Manual de Fabricantes de Azúcar de Caña y
Químicos Azucareros”, Editorial Wiley,New Cork,1932.
Fernández Paredes Aldo