uji efek analgetik dan antiinflamasi ekstrak · pdf fileuji efek analgetik dan antiinflamasi...
TRANSCRIPT
UJI EFEK ANALGETIK DAN ANTIINFLAMASI
EKSTRAK KERING AIR GAMBIR SECARA IN VIVO
Skripsi
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi
Disusun oleh :
GITA PERMATA SARI
106102003380
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
2010
LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI
NAMA : GITA PERMATA SARI
NIM : 106102003380
JUDUL : UJI EFEK ANALGETIK DAN ANTIINFLAMASI EKSTRAK KERING AIR GAMBIR SECARA IN VIVO
Disetujui Oleh:
Pembimbing I Pembimbing II
Drs. Ahmad Musir, M.Sc, Apt Azrifitria, M.Si, Apt
NIP: NIP: 197211272005012004
Mengetahui
Kepala Program Studi Farmasi
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt.
NIP: 1956010619851010001
i
KATA PENGANTAR
Alhamdulillahirobbil ‘alamin. Segala pujian hanya pantas ditujukan kepada Allah SWT. Tak ada satu pun makhluk di dunia ini yang pantas mendapatkan pujian melebihi diri- Nya. Shalawat dan Salam hanyalah untuk Muhammad Rasulullah SAW, seorang manusia luar biasa. Ia senantiasa menjadi inspirasi dan semangat semangat penulis ketika melemah dan membutuhkan dukungan.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat menempuh ujian akhir guna mendapatkan gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Adapun judul skripsi ini adalah ”Uji Efek Analgetik dan Antiinflamasi Ekstrak Kering Air Gambir Secara In Vivo”.
Selesainya penelitian dan penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak, maka dalam kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang tulus dan sebesar-besarnya, khusunya kepada:
1. Prof. Dr. (hc) dr. M. K. Tadjudin, Sp.And selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
2. Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
3. Ahmad Musir, Apt sebagai pembimbing I yang senantiasa dan dengan sabar membimbing penulis dalam menyelesaikan penyusunan skripsi ini.
4. Azryfitria, M.Si, Apt sebagai pembimbing II yang senantiasa dan dengan sabar membimbing penulis dalam menyelesaikan penyusunan skripsi ini.
5. Ayahanda Hartono dan Ibunda tercinta Endang Ketut Setyowati yang selalu mendoakan dan mendukung penulis baik moril maupun materiil.
6. Ibu/Bapak Dosen dan Staf Akademika Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
7. Untuk kakakku Fariz Agung Kurniawan, dan sister tersayang Dymitri Adhita, Nuri Prita Wardhani yang selalu memberikan dateline, dukungan materiil dan semangat kepada penulis.
8. Sahabat-sahabat farmasiku Alfi Inayati, Arny Fitri Agus, Eli Felasih, Nailul Hana, Reni Yandwi Sari, Putrisa Amnel Viona, Nindi Sesarowanti, dan Yunita Haryati untuk kebersamaan yang sangat berharga dalam 4 tahun terakhir ini, semoga ini bukanlah perpisahan untuk kita.
9. Sahabat-sahabat farmasi UHAMKA ibu Fith, Pak Hadi, Ibu Dwita, Ibu Alma, Hakim, Heru, Dian yang dengan senang hati mengajarkan dan membantu pelaksanaan uji antiinflamasi.
10. Teman-teman apotek JMED bang udin, mba imah, mba Yeni dan Ricky yang selalu memaklumi keterlambatan saya serta dr. Elsa, dr. Salfiah, dr. Hestin, drg. Dede, dan drg. Desy yang memberikan masukan serta motivasi dalam penyusunan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Farmasi Teofilin 2006 untuk kekompakan dan canda-tawa yang dihadirkan setiap hari meskipun saat kelas berlangsung.
ii
12. Dan kepada semua pihak yang telah membantu penulis selama ini yang tidak dapat disebutkan namanya satu persatu.
Penulis meyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan karena tiada gading yang tak retak oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun untuk lebih menyempurnakan skripsi ini serta memperbaiki kemampuan penulis dalam kesempatan lainnya.
Jakarta, September 2010
Penulis
iii
DAFTAR ISI
Kata Pengantar …………………………………………………………………... i Daftar Isi …………………………………………………………………………. iii Daftar Tabel ……………………………………………………………………… v Daftar Gambar ………………………………………………………………....... vi Daftar Lampiran …………………………………………………………………. vii Abstrak …………………………………………………………………………… viii Bab I Pendahuluan
1.1 Latar Belakang ……………………………………………………... 1 1.2 Perumusan Masalah …………………………………………………. 2 1.3 Hipotesa …………………………………………………………… 3 1.4 Tujuan Penelitian ……………………………………………………. 3 1.5 Manfaat …………………………………………………………….. 3
Bab II Tinjauan Pustaka
2.1 Uraian Tanaman ……….……………………………………………. 4 2.1.1 Klasifikasi ……….…………………………………….………. 4
2.1.2 Nama Daerah …………………………………………………. 4 2.1.3 Deskripsi …………. ………………………………………… 5 2.1.4 Kandungan Kimia …………………………………………….. 5 2.1.5 Khasiat ………………………………………………………… 6 2.2 Persiapan Simplisia …….…………………………………………… 6 2.3 Ekstrak dan Ekstraksi ……………………………………………….. 7 2.3.1 Pengertian ekstrak dan ekstrak ………………………………... 7 2.3.2 Cara pembuatan ekstrak ……..………………………………… 7 2.4 Metode Ekstraksi …………………………………………………….. 8 2.5 Pengeringan Beku (Freeze Drying) ………………………………….. 10 2.6 Parameter Ekstrak ………………………………………………….... 11 2.7 Analgetik …………………………………………………………… .. 12
2.7.1 Pengertian analgetik ……………………………………… 11 2.7.2 Mekanisme nyeri………………………… ……………….. 13 2.7.3 Golongan obat analgetik.………………..………………… 14 2.7.4 Asam mefenamat …………………………………….…… 15 2.7.5 Asam asetat ……………………………………………….. 15 2.7.6 Pengujian efek analgetik …..……………………………… 16
2.8 Inflamasi …………………………………………………………….. 18 2.8.1 Pengertian inflamasi ………………………………………. 18
2.8.2 Mekanisme inflamasi ………………………………… 18 2.8.3 Golongan obat antiinflamasi ……………………………… 19 2.8.4 Natrium diklofenak ……………………………… 20 2.8.5 Karagenan ……………………………………………… 20 2.8.6 Pengujian efek antiinflamasi ……………………………… 21 Bab III Kerangka Konsep Kerja ………………………………………………….. 24
iv
Bab IV Metodelogi Penelitian
4.1 Tempat dan Waktu Penelitian ………………………………………. 25 4.2 Alat dan Bahan Penelitian ………………………………………….. 25
4.2.1 Alat penelitian …………………………………………… 25 4.2.2 Bahan tanaman …………………………………………..... 25 4.2.3 Bahan kimia ………………………………………………. 26 4.2.4 Bahan pereaksi ……………………………………………. 26 4.2.5 Hewan percobaan …………………………………………. 26
4.3 Prosedur Penelitian …………………………………………………. 26 4.3.1 Penyiapan simplisia ………………………………………. 26 4.3.2 Pembuatan ekstrak air gambir…………………………….. 27 4.3.3 Uji cemaran gambir (urea) ……………………………… 27 4.3.4 Penapisan fitokimia ………………………………………. 27 4.3.5 Pengujian parameter non spesifik ekstrak ………………... 30 4.3.6 Persiapan hewan coba (aklimatisasi) ……………………... 32 4.3.7 Penetapan dosis …………………………………………… 33 4.3.8 Persiapan bahan …………………………………………… 34 4.3.9 Metode pengujian …………………………………………. 34
4.3.9.1 Uji analgetik ………………………………………. 34 4.3.9.2 Uji antiinflamasi …………………………………... 35
4.3.10 Teknik analisa data ……………………………………….. 37 Bab V Hasil Penelitian dan Pembahasan 5.1 Hasil Penelitian ………………………………………………………. 39 5.1.1 Penapisan fitokimia …………………………………….... . 39 5.1.2 Pengujian parameter ekstrak ……………………………… 40 5.1.3 Hasil penelitian …………………………………………... 40 5.1.3.1 Analgetik ………… …………………………….. 40 5.1.3.2 Antiinflamasi …………………………………… 42 5.2 Pembahasan …………………………………………………………. 44 Bab VI Kesimpulan dan Saran 6.1 Kesimpulan ………………………………………………………….. 55 6.2 Saran ………………………………………………………………… 56 Daftar Pustaka ……………………………………………………………………. 60 Lampiran ……………………………………………………………………… 61
v
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1 Kelompok Perlakuan uji analgetik & antiinflamasi……………….. 33 Tabel 2 Kelompok Dosis Untuk Uji Analgetik…………………………….. 33 Tabel 3 Kelompok Dosis Untuk Uji Antiinflamasi………………………… 33 Tabel 4 Hasil Pengujian Penapisan Fitokimia……………………………… 39 Tabel 5 Karakteristik Ekstrak………………………………………………. 40 Tabel 6 Data Pengamatan Rata-rata Geliat..……………………………….. 40 Tabel 7 Data Persentase Proteksi Analgetik.……………………………….. 41 Tabel 8 Data Persentase Radang Telapak Kaki Tikus……………………… 42 Tabel 9 Data Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus…………………. 43 Tabel 10 Konversi Dosis Hewan ke HED Berdasarkan BSA……………… 71 Tabel 11 Data Pengamatan Geliat Mencit Pada Uji Analgetik ……………. 80 Tabel 12 Data Persentase Proteksi Analgetik ……………………………… 81 Tabel 13 Hasil Pengamatan Radang Pada Uji ANtiinflamasi …………… .. 83 Tabel 14 Hasil Persentase Radang Telapak Kaki Tikus …………………... 84 Tabel 15 Hasil Persentase Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus … .. 86 Tabel 16 Uji Normalitas ANOVA pada Analgetik ……………………… .. 88 Tabel 17 Uji Homogenitas ANOVA pada Analgetik ……………………… 90 Tabel 18 Uji ANOVA pada Analgetik …………………………………… . 91 Tabel 19 Uji Bobot Nyata Terkecil pada Analgetik ……………………… . 91 Tabel 20 Uji Normalitas ANOVA pada Antiinflamasi ……………… …… 94 Tabel 21 Uji Homogenitas ANOVA pada Antiinflamasi………………….. 95 Tabel 22 Uji ANOVA pada Antiinflamasi……………………………… … 97 Tabel 23 Uji Kruskal Wallis pada Antiinflamasi Jam 1………………… … 99 Tabel 24 Uji Bobot Nyata Terkecil pada Antiinflamasi…………………… 100
vi
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1 Data Rata-rata jumlah Geliat………………………………….. . 41 Gambar 2 Data Persentase Proteksi Analgetik ............................................. 42 Gambar 3 Data Persentase Radang Telapak Kaki Tikus .............................. 43 Gambar 4 Data Persentase Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus...... 44 Gambar 5 Bongkahan Gambir ...................................................................... 60 Gambar 6 Hasil Freeze Drying Gambir........................................................ 60 Gambar 7 Hewan Uji Mencit DDY .............................................................. 60 Gambar 8 Hewan Uji Tikus SD.................................................................... 60 Gambar 9 Plethysmometer............................................................................ 60 Gambar 10 Freeze Drying Gambir ............................................................... 61 Gambar 11 Penyondean Zat Uji ................................................................. 61 Gambar 12 Penyuntikkan Asam Asetat Secara IP ....................................... 61 Gambar 13 Mencit Meregangkan Perutnya (writhing)................................. 61 Gambar 14 Penyuntikkan Karagenan Secara Subplantar ............................. 61 Gambar 15 Radang Pada Telapak Kaki Tikus.............................................. 62 Gambar 16 Pengukuran Volume Radang Pada Telapak Kaki Tikus............ 62 Gambar 17 Identifikasi Cemaran Gambir (Urea) ......................................... 62
vii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman Lampiran 1Gambar Alat dan Bahan Penelitian............................................ 61 Lampiran 2 Kegiatan Penelitian ................................................................... 62 Lampiran 3 Sertifikat Natrium Diklofenak .................................................. 64 Lampiran 4 Sertifikat Analisa Diklofenak Sodium ...................................... 65 Lampiran 5 Sertifikat Karagenan ................................................................. 66 Lampiran 6 Absorbansi Asam Mefenamat................................................... 67 Lampiran 7 Skema Kerja (Pembuatan Ekstrak) ………………………..…. 68 Lampiran 8 Skema Kerja Uji Analgetik …………………………………… 69 Lampiran 9 Skema Kerja Uji Antiinflamasi…...…………………………… 70 Lampiran 10 Rumus Perhitungan Dosis Hewan …………………………. 71 Lampiran 11 Perhitungan Dosis Untuk Hewan Uji ……………………… 72 Lampiran 12 Pemeriksaan Parameter Ekstrak …………………………… 79 Lampiran 13 Data Pengamatan Geliat Mencit……………………………... 80 Lampiran 14 Data Persentase Proteksi Analgetik ….……………………… 81 Lampiran 15 Hasil Pengamatan Radang Pada Uji Antiinflamasi………… .. 83 Lampiran 16 Hasil Persentase Radang telapak Kaki Tikus………………… 84 Lampiran 17 Hasil Persentase Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus.. 86 Lampiran 18 Hasil Statistik Uji Efek Analgetik …………………………… 88 Lampiran 19 Hasil Statistik Uji Efek Antiinflamasi……………………….. 94
viii
ABSTRACT
Title : Analgesic and Anti-Inflammatory Effect of The Dryed Aqueous Extract of Gambir In Vivo
The dryed aqueous extract of gambir was investigated for the analgesic and anti-inflammatory effect in scienctific. This experiment is aims as a anti-inflammatory and analgesic drugs thus the side effect of AINS drugs can be minimize. The result showed that the dryed aqueous extract of gambir administered at dose of 3,5 mg/200 g body weight, 7 mg/200 g body weight dan 14 mg/200 g body weight reduced significantly the formation of oedema induced by carrageenan in rat. In the acetic-acid induced writhing model, the extract showed a good analgesic effect characterized by a significant reduction in the number of writhes or abdominal stretches in mice with dose 1,4 mg/20 g body weight used when compared to the positive control group. The analgesic and anti-inflammatory effect of the dryed aqueous extract of gambir could be related to the presence of catechin, tannin and gambiriin in this extract, which it can inhibition the siklooxygenase and lipooxygenase pathway thus the formation arachidonat acid can be eliminated. ANOVA statistic result showed in analgetic and anti-inflammatory there is no different significantly with the positive control group. Key word : Anti-inflammatory, Analgesic, Cathecin, Tannin, Gambiriin
ix
ABSTRAK
Judul : Uji Efek Analgetik dan Antiinflamasi Ekstrak Kering Air Gambir Secara In Vivo
Ekstrak air gambir diasumsikan memiliki efek analgetik dan antiinflamasi secara ilmiah. Penelitian ini bertujuan sebagai obat analgetik dan antiinflamasi sehingga efek samping yang ditimbulkan oleh obat-obat AINS dapat diminimalisasi. Hasil penelitian menunjukkan pemberian oral pada dosis 3,5 mg/200 gBB, 7 mg/200 gBB dan 14 mg/200 gBB dapat menghambat pembentukkan radang yang ditimbulkan oleh karagenan dan histamine pada tikus. Pada metode writhing yang diinduksi dengan asam asetat,ekstrak air gambir menunjukkan efek analgetik yang baik dalam mereduksi jumlah geliat mencit pada dosis 1,4 mg/20 g BB dibandingkan dengan control positif. Efek analgetik dan antiinflamasi pada ekstrak air gambir berhubungan dengan katekin, tannin dan gambiriin yang terkandung didalamnya yang dapat menghambat jalur siklooksigenase dan lipooksigenase sehingga pembentukan asam arakidonat tidak terbentuk. Hasil statistik ANOVA menunjukkan bahwa data analgetik dan antiinflamasi tidak terdapat perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif Kata kunci : Antiinflamasi, Analgetik, Katekin, Tannin, Gambiriin
i
DAFTAR ISI
Kata Pengantar …………………………………………………………………... i
Daftar Isi …………………………………………………………………………. ii
Daftar Tabel ……………………………………………………………………… iii
Daftar Gambar ………………………………………………………………....... iv
Daftar Lampiran …………………………………………………………………. v
Abstrak ……………………………………………………………………………. vi
Bab I Pendahuluan
1.1 Latar Belakang ……………………………………………………... 1
1.2 Perumusan Masalah …………………………………………………. 2
1.3 Hipotesa …………………………………………………………… 2
1.4 Tujuan Penelitian ……………………………………………………. 2
1.5 Manfaat …………………………………………………………….. 3
Bab II Tinjauan Pustaka
2.1 Uraian Tanaman ……….……………………………………………. 4
2.1.1 Klasifikasi ……….…………………………………….………. 4
2.1.2 Nama Daerah …………………………………………………. 4
2.1.3 Deskripsi …………. ………………………………………… 5
2.1.4 Kandungan Kimia …………………………………………….. 5
2.1.5 Khasiat ………………………………………………………… 5
2.2 Persiapan Simplisia …….…………………………………………… 6
2.3 Ekstrak dan Ekstraksi ………………………………………………... 6
2.3.1 Pengertian ekstrak dan ekstrak ………………………………... 6
2.3.2 Cara pembuatan ekstrak ……..………………………………… 7
2.4 Metode Ekstraksi ……………………………………………………... 8
2.5 Pengeringan Beku (Freeze Drying) …………………………………... 9
2.6 Parameter Ekstrak ……………………………………………………. 10
2.7 Analgetik ……………………………………………………………... 11
2.7.1 Pengertian analgetik …………………………………………... 11
2.7.2 Golongan obat analgetik ………………………………………. 11
ii
2.7.3 Beberapa pengujian untuk menentukan efek analgetik ……….. 12
2.8 Inflamasi ……………………………………………………………… 13
2.8.1 Pengertian inflamasi …………………………………………... 13
2.8.2 Pengujian efek antiinflamasi ………………………………….. 14
2.8.3 Golongan obat antiinflamasi ………………………………….. 15
Bab III Kerangka Konsep Kerja 17
Bab IV Metodelogi Penelitian
4.1 Tempat dan Waktu Penelitian ………………………………………. 18
4.2 Alat dan Bahan Penelitian ………………………………………….. 18
4.2.1 Alat penelitian …………………………………………… 18
4.2.2 Bahan tanaman …………………………………………..... 18
4.2.3 Bahan kimia ………………………………………………. 19
4.2.4 Bahan pereaksi ……………………………………………. 19
4.2.5 Hewan percobaan …………………………………………. 19
4.3 Prosedur Penelitian …………………………………………………. 19
4.3.1 Penyiapan simplisia ………………………………………. 20
4.3.2 Pembuatan ekstrak air gambir…………………………….. 20
4.3.3 Identifikasi Urea ………………………………………….. 20
4.3.4 Penapisan fitokimia ………………………………………. 21
4.3.5 Pengujian parameter non spesifik ekstrak ………………... 23
4.3.6 Persiapan hewan coba (aklimatisasi) ……………………... 25
4.3.7 Penetapan dosis …………………………………………… 26
4.3.8 Persiapan bahan …………………………………………… 27
4.3.9 Metode pengujian …………………………………………. 27
4.3.9.1 Uji analgetik ………………………………………. 27
4.3.9.2 Uji antiinflamasi …………………………………... 28
4.3.10 Teknik analisa data ……………………………………….. 30
Bab V Hasil Penelitian dan Pembahasan
5.1 Hasil Penelitian ………………………………………………………. 32
iii
5.1.1 Penapisan fitokimia ………………………………………….... 32
5.1.2 Pengujian parameter ekstrak …………………………………... 33
5.1.3 Hasil penelitian ………………………………………………... 33
5.1.3.1 Analgetik ……………………………………………… 34
5.1.3.2 Antiinflamasi ………………………………………..... 36
5.2 Pembahasan …………………………………………………………... 38
Bab VI Kesimpulan dan Saran
6.1 Kesimpulan …………………………………………………………… 48
6.2 Saran ………………………………………………………………….. 49
Daftar Pustaka ……………………………………………………………………. 50
Lampiran ……………………………………………………………………… 54
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Kesehatan merupakan suatu hal yang sangat penting bagi manusia demi
mencapai kesejahteraan dan kebahagian baik moral maupun spiritual. Untuk
mendapatkan kesehatan yang diinginkan, dapat ditempuh dengan menggunakan
obat-obatan, baik dengan tujuan penyembuhan ataupun pencegahan. Untuk
tujuan ini selain digunakan obat-obatan modern yang berupa bahan kimia dapat
juga digunakan obat-obatan tradisional. Pengetahuan tentang obat tradisional
berdasar pada pengalaman dan ketrampilan yang secara turun temurun telah
diwariskan dari satu generasi ke generasi berikutnya.
Pengertian obat tradisional berdasarkan Peraturan Menteri kesehatan
Nomor 246/Menkes/Per/V/1990 Pasal 1 menyebutkan bahwa : Obat tradisional
adalah ramuan bahan yang berupa bahan tumbuhan, bahan hewan, bahan
mineral, sediaan galenik atau campuran dan bahan-bahan tersebut, yang secara
traditional telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman.
Dari berbagai macam tanaman obat terdapat satu jenis tanaman yang
akan dijadikan objek penelitian yaitu gambir yang memiliki nama latin Uncaria
gambir Roxb, tanaman ini termasuk dalam suku Rubiaceae. Gambir merupakan
2
ekstrak air panas dari daun dan ranting tanaman gambir dan kemudian dicetak
serta dikeringkan (Puguh, 2009)
Kandungan utama gambir adalah katekin (51%), zat penyamak (20-25%),
asam catechutannat, guersetin, catechu merah, gambir flouresein, abu, asam
lemak, lilin (BPOM RI, 2007). Kelarutan katekin yang optimum pada keadaan
hangat sekitar 400 C (Lusida et al., 2007).
Menurut jurnal The key to medicinal plants research resolves around the
detection, isolation, and characterization of antioxidants as therapeutic agents
(Misra, 2009) mengatakan gambir dapat digunakan sebagai analgetik, dimana
kandungan dari gambir seperti tannin, katekin dan gambiriin berfungsi sebagai
antioksidan. Antioksidan ini diasumsikan sebagai penghambat siklooxygenase
dan lipooxygenase sehingga nyeri dan inflamasi tidak terjadi (Esvandiary et
al.,2004). Nyeri adalah suatu mekanisme protektif bagi tubuh, ia timbul
bilamana jaringan sedang dirusak. Inflamasi merupakan suatu gejala pada
beberapa penyakit dan dirasa oleh banyak orang tidak nyaman (Ganiswara et al.,
1995).
1.2 Perumusan Masalah
Apakah ekstrak kering air gambir memiliki efek analgetik dan
antiinflamasi yang diberi secara oral pada mencit putih jantan dan tikus putih
betina.
3
1.3 Hipotesa
Ekstrak kering air gambir memiliki efek analgetik dan antiinflamasi yang
diberi secara oral pada mencit putih jantan dan tikus putih betina.
1.4 Tujuan Penelitian
Penelitian ini dilakukan untuk menguji pengaruh pemberian ekstrak
kering air gambir terhadap pengurangan rasa nyeri pada mencit putih jantan dan
radang (inflamasi) pada tikus putih betina dalam berbagai konsentrasi dengan
asam mefenamat dan natrium diklofenak sebagai pembanding.
1.5 Manfaat Penelitian
1) Penelitian diharapkan memberikan informasi ilmiah mengenai efek analgetik
dan antiinflamasi dari ekstrak kering air gambir.
2) Untuk pengembangan penggunaan zat analgetik dan antiinflamasi yang
berasal dari ekstrak kering air gambir sebagai bahan pengganti obat
analgetik dan antiinflamasi.
3) Sebagai dasar penelitian lebih lanjut dalam usaha pengembangan obat
tradisional lain sebagai upaya peningkatan kesehatan masyarakat.
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tanaman
2.1.1 Klasifikasi (DepKes RI,1989)
Berdasarkan ilmu taksonomi, klasifikasi tumbuhan gambir adalah sebagai
berikut:
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Asteridae
Familia : Rubiaceae
Genus : Uncaria
Spesies : Uncaria gambir Roxb
Sinonim : Uncaria gambir Roxb
2.1.2 Nama daerah (DepKes RI, 1989)
Sumatera: gambee, gani, kacu, sontang, gambie, gambu, gimber,
pangilom, sepelet.
Jawa: santun, ghambhir
Kalimantan: kelare, abi, gamer, kambin, sori.
5
Maluku: kampir, kambir, ngamir, gaamer, gabi, tagabere, gagabere,
gabere, gambe.
Nusa Tenggara: tagambe, gambele, gamelo, gambit, gambe, gambiri.
2.1.3 Deskripsi
Tanaman gambir termasuk tumbuhan perdu memanjat yang
memiliki batang keras, bila dibiarkan akan tumbuh melingkar. Tinggi
tanaman 1,5-2 meter, warna batang coklat muda sampai coklat tua,
percabangan banyak bersudut 30-50 derajat dari batang utama. Daunnya
berwarna hijau muda-hijau coklat dan coklat muda, dengan panjang 0,2-0,4
cm berwarna hijau. Bunganya berwarna putih, berbentuk kecil-kecil dan
tongkol bulat. Perakaran tanaman gambir adalah berakar tunggang atau
tunjang dan fungsi akar adalah untuk mempengaruhi pertumbuhan daun
dan batang. Perakaran tanaman gambir sangat penting sekali sebagai organ
penyerap air dan unsur hara, tempat menyimpan makanan, jangkar
tanaman, dan sebagai tempat terbentuknya berbagai senyawa organik
(BPOM RI, 2007).
2.1.4 Kandungan Kimia
Kandungan utama gambir adalah katekin, asam catechutannat,
guersetin, catechu merah, gambir flouresein, abu, asam lemak, lilin,
alkaloid tannin (BPOM RI, 2007).
6
2.1.5 Khasiat
Kandungan tannin dalam gambir bekerja baik sebagai antibakteri
dan antifungi. Gambir dapat digunakan sebagai astringent dan pada dosis
besar dapat digunakan untuk mengobati diare (Kress, 2009). Secara
empirik gambir telah digunakan untuk radang gusi, radang tenggorokan,
serak batuk, caries gigi, bisul, dan obat luka bakar (Haryanto, 2009).
Sediaan antiseptic mulut dari katekin gambir dapat mencegah plak pada
gigi (Lucida et al.,2007).
2.2 Persiapan Simplisia
Simplisia adalah bahan alamiah yang digunakan sebagai obat yang
belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dikatakan lain, berupa
bahan yang telah dikeringkan (Gunawan, Didik et al., 2004).
Simplisia dibedakan menjadi simplisia nabati, simplisia hewani,
simplisia pelican (mineral). Simplisia nabati yang akan digunakan pada
penelitian kali ini. Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tumbuhan
utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan ialah isi sel
dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya. Eksudat tanaman dapat berupa zat-
zat atau bahan-bahan nabati lainya yang dengan cara tertentu dipisahkan atau
diisolasi dari tanaman (Gunawan, Didik et al., 2004).
7
2.3 Ekstrak dan Ekstraksi
2.3.1 Pengertian ekstrak dan ekstraksi
Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair yang diperoleh
dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia
hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir
semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan
sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes RI,
2000).
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat
larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut
cair (Harbone, 1996).
2.3.2 Cara pembuatan ekstrak (DepKes RI, 2000)
Pembuatan ekstrak melalui tahap-tahap sebagai berikut:
a. Pembuatan serbuk simplisia
Proses awal pembuatan ekstrak adalah tahapan pembuatan serbuk
simplisia kering. Dari simplisia dibuat serbuk simplisia.
b. Cairan pelarut (penyari)
Cairan pelarut dalam proses pembuatan ekstrak adalah pelarut yang
baik (optimal) untuk dapat melarutkan kandungan zat aktif sehingga
senyawa tersebut dapat terpisahkan dari senyawa lainnya.
8
c. Pemisahan dan pemurnian
Tujuan dari tahapan ini adalah untuk menghilangkan (memisahkan)
senyawa yang tidak dikehendaki semaksimal mungkin tanpa
berpengaruh pada senyawa kandungan yang dikehendaki, sehingga
diperoleh ekstrak yang lebih murni.
d. Pengeringan ekstrak
Pengeringan berarti menghilangkan pelarut dari bahan sehingga
menghasilkan serbuk, massa kering-rapuh.
e. Rendemen
Rendemen adalah perbandingan antara ekstrak yang diperoleh dengan
simplisia awal.
2.4 Metode Ekstraksi (DepKes RI, 2000)
Metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut terdiri dari dua cara,
yaitu cara dingin dan cara panas.
1. Cara dingin
a. Maserasi
Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan
pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada
temperatur ruang (kamar). Maserasi kinetik berarti dilakukan
pengadukan yang kontinu (terus-menerus), sedangkan remaserasi berarti
9
dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan
penyaringan maserat pertama dan seterusnya.
b. Perkolasi
Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai
sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada
temperatur ruang.
2. Cara panas
a. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut sampai pada temperatur titik
didihnya selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif
konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan
pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat
termasuk proses ekstraksi sempurna.
b. Sokhletasi
Sokhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang
umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi
berkelanjutan dengan jumlah pelarut yang relatif konstan dengan adanya
pendingin balik.
c. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinyu) pada
temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan, secara umum
dilakukan pada temperatur 40o-50oC.
10
d. Infus
Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air
(bejana infus tercelup dalan penangas air mendidih), temperatur terukur
96o-98oC selama waktu tertentu (15-20 menit).
e. Dekok
Dekok adalah infus ada waktu yang lebih lama (≥ 30oC) dan temperatur
sampai titik didih air.
2.5 Pengeringan Beku (Freeze Drying)
Prinsip kerja Freeze drying meliputi pembekuan larutan,
menggranulasikan larutan yang beku tersebut, mengkondisikannya pada
vacum ultra-high dengan pemanasan yang sedang sehingga mengakibatkan air
pada bahan pangan tersebut akan menyublin dan akan menghasilkan produk
padat (solid product) (Ridwansyah, 2003).
Metode ini menghilangkan air melalui 3 tahap yaitu pembekuan atau
freezing dengan cara sublimasi, pengeringan primer, dan pengeringan
sekunder. Pada proses freezing sampel dibekukan pada suhu -400C, kemudian
pada pengeringan primer padatan tersebut disublimkan tanpa menjadi cair
dahulu dengan cara menurunkan tekanan udara pada ruangan sampai 0,1 bar
kemudian suhu dinaikkan dan menarik H2O ke kondensor. Kemudian pada
proses selanjutnya untuk mengangkat air yang masih tersisa, zat diuapkan
11
dengan cara biasa namun dengan tekanan udara yang sangat rendah dan suhu
lebih tinggi daripada pengeringan primer (Tambunan, 2000).
2.6 Parameter Ekstrak (DepKes RI, 2000)
a. Susut pengeringan
Susut pengeringan adalah pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada
temperatur 105oC selama 30 menit atau sampai berat konstan, yang
dinyatakan sebagai nilai persen (%). Tujuannya untuk memberikan batasan
maksimal (rentang) tentang besarnya senyawa yang hilang pada proses
pengeringan. Nilai untuk susut pengeringan jika tidak dinyatakan lain
adalah kurang dari 10%.
b. Kadar air
Kadar air adalah pengukuran kandungan air yang berada di dalam bahan.
Tujuannya untuk memberikan batasan maksimal (rentang) tentang besarnya
kandungan air di dalam bahan. Nilai untuk kadar air sesuai dengan yang
tertera dalam monografi.
c. Kadar abu
Untuk penentuan kadar abu, bahan dipanaskan pada temperatur dimana
senyawa organik dan turunannya terdestruksi dan menguap sehingga hanya
tersisa unsur mineral dan anorganik. Tujuannya adalah untuk memberikan
gambaran tentang kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal
12
dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak. Nilai untuk kadar abu sesuai
dengan yang tertera dalam monografi.
2.7 Analgetik
2.7.1 Pengertian nyeri
Nyeri adalah pengalaman sensorik dan emosional yang tidak
menyenangkan dan yang berkaitan dengan (ancaman) kerusakan
jaringan. Rasa nyeri dalam kebanyakan hal hanya merupakan suatu
gejala, yang berfungsi melindungi tubuh. Nyeri disebabkan oleh
rangsangan mekanis, kimiawi atau fisis (kalor, listrik), dapat
menimbulkan kerusakan pada jaringan (Tjay & Rahardja, 2002).
Kualitas nyeri berdasarkan tempat terjadinya dibagi atas nyeri
somatik dan nyeri visceral. Nyeri somatik dibagi atas dua kualitas yaitu
nyeri permukaan dan nyeri dalam (Mustchler, 1991).
Nyeri dalam bila rasa nyeri berasal dari kulit, otot, persendian,
dan tulang. Nyeri dalam bersifat menekan dan membakar yang sukar
dilokalisasi sertag kebanyakan menyebar ke daerah sekitar. Sedangkan
nyeri permukaan bertempat pada kulit, misalnya tertusuk dengan jarum
pada kulit. Nyeri permukaan mempunyai karakter yang ringan, dapat
dilokalisasi (Mustchler, 1991).
13
Nyeri viseral atau nyeri perut adalah nyeri yang disebabkan oleh
rangsangan pada saraf nyeri di daerah visera terutama dalam rongga
dada dan perut (Mustchler, 1991).
2.7.2 Mekanisme nyeri (Guyton, 1995)
Mekanisme terdiri atas 4 proses utama, yaitu:
1. Transduksi adalah proses dimana stimulus nyeri merupakan aktivitas
elektrik reseptor terkait.
2. Transmisi, dalam proses ini terlibat tiga komponen saraf yaitu saraf
sensorik perifer yang meneruskan impuls ke medulla spinalis,
kemudian jaringan saraf yang meneruskan impuls yang menuju ke
atas (ascendens), dari medulla spinalis ke batang otak dan
hipothalamus. Yang terakhir hubungan timbal balik antara
hipothalamus dan cortex.
3. Modulasi yaitu aktivitas saraf untuk mengontrol transmisi nyeri. Suatu
analgetik tubuh secara selektif menghambat transmisi nyeri di medulla
spinalis. Analgetik ini diaktifkan oleh stress atau obat analgetika
seperti morfin.
4. Persepsi, Proses impuls nyeri yang ditransmisikan hingga
menimbulkan perasaan subyektif dari nyeri sama sekali belum jelas.
bahkan struktur otak yang menimbulkan persepsi tersebut juga tidak
jelas. Sangat disayangkan karena nyeri secara mendasar merupakan
14
pengalaman subyektif sehingga tidak terhindarkan keterbatasan untuk
memahaminya.
2.7.3 Golongan obat analgetik
Analgetik adalah senyawa yang dalam dosis terapetik
meringankan rasa nyeri (Mutschler, 2007). Berdasarkan kerja
farmakologinya, analgetik dibagi 2 kelompok besar, yaitu analgetik
narkotik dan analgetik non-narkotik.
a. Analgetik narkotik
Zat ini mempunyai daya penghalau nyeri yang kuat sekali dengan
titik kerja yang terletak di sistem saraf sentral, analgetik ini
umumnya menurunkan kesadaran (sifat meredakan dan menidurkan)
dan menimbulkan perasaan nyaman (euforia), serta mengakibatkan
ketergantungan fisik dan psikis (ketagihan, adiksi) bila pengobatan
dihentikan (Tjay & Rahardja, 2002).
b. Analgetik non-narkotik
Analgetik non-narkotik bersifat tidak adiktif dan kurang kuat
dibandingkan dengan analgetik narkotik. Obat-obat ini juga
dinamakan analgetik perifer, tidak menurunkan kesadaran dan tidak
mengakibatkan ketagihan secara kimiawi (Tjay & Rahardja, 2002).
15
2.7.4 Asam Mefenamat
Asam mefenamat digunakan sebagai obat analgetik. Asam
mefenamat bekerja dengan cara menghambat sintesa prostaglandin
dalam jaringan tubuh dengan menghambat enzim siklooxygenase. Efek
samping dapat terjadi gangguan saluran cerna, antara lain iritasi
lambung, kolik usus, mual, muntah dan diare, rasa mengantuk, pusing
sakit kepala, penglihatan kabur, vertigo (Wilmana, 1995). Asam
mefenamat memiliki waktu paruh (T ½) sekitar 2 jam dan waktu puncak
2-4 jam. Ikatan protein asam mefenamat > 90% dan eliminasi ginjal
sekitar 52% (Sukandar, 2008).
2.7.5 Asam asetat
Asam asetat, asam etanoat atau asam cuka adalah senyawa
kimia asam organik yang dikenal sebagai pemberi rasa asam dan aroma
dalam makanan. Asam cuka memiliki rumus empiris C2H4O2. Rumus ini
seringkali ditulis dalam bentuk CH3-COOH, CH3COOH, atau
CH3CO2H. Asam asetat murni (disebut asam asetat glasial)
adalah cairan higroskopis tak berwarna, dan memiliki titik beku 16,7°C.
16
2.7.6 Beberapa pengujian untuk menentukan efek analgetik (Turner, R.A,
1965)
1. Analgetik narkotik
a. Metode tgail-clip
Dilakukan oleh Bianchi dan Franchesch ini menggunakan
rangsang tekan melalui suatu artery clip pada pangkal ekor
mencit.
b. Metode green at.al.
Ransang analgetik pada metode ini adalah tekanan yang
diberikan kepada ekor tikus menggunakan suatu tabung yang
diisi oleh suatu cairan. Tabung tersebut dihubungkan dengan
sebuah manometer untuk mengukur tekanan (dalam mm Hg).
c. Metode dengan rangsang panas (Thermal stimulus)
Metode ini dilakukan dengan cara menempatkan hewan
percobaan di atas suatu permukaan panas.
2. Analgetik non narkotik
a. Peritoneal test (writhing test)
Pemberian secara intra peritoneal dari beberapa zat kimia, dapat
memberikan respon yang khas pada mencit, yaitu adanya
gerakan peregangan berupa konstraksi dari dinding perut,
kepala dan kaki ditarik ke belakang sehingga abdomen
menyentuh dasar dari ruang yang ditempatinya. Gejala ini
17
dinamakan writhing atau peregangan yang dapat dihitung
secara kuantiitatif (Carvalho et.al., 1999).
b. Podolorimeter
Metode ini menggunakan arus listrik sebagai rangsang
analgetik. Mencit diletakkan pada alas yang terbuat dari logam.
Alat tersebut dialiri arus listrik yang voltasenya diketahui.
Voltase minimum yang menimbulkan respon mencicit dicatat,
kemudian voltase berangsur-angsur dinaikkan. Zat-zat yang
berefek analgetik akan menyebabkan kenaikan voltase yang
dibutuhkan untuk menimbulkan respon mencicit. Pertambahan
voltase ini diidentikan dengan efek analgetik.
c. Rectodolorimeter
Metode ini menggunakan plate tembaga yang dihubungkan
dengan sebuah kumparan induksi. Kumparan tersebut
dihubungkan dengan sebuah elektroda tembaga berbentuk
silinder yang dimasukkan ke dalam rectum. Untuk mengukur
voltase (tegangan) listrik digunakan sebuah voltmeter dengan
sensitifitas 0,1 volt. Prosedur kerja dan pengamatan sama
seperti pada metode podolorimeter. Voltase yang dibutuhkan
untuk menimbulkan respon mencicit adalah 1 sampai 2 volt.
18
2.8 Inflamasi
2.8.1 Pengertian inflamasi
Inflamasi adalah respon terhadap cedera jaringan dan infeksi.
Ketika proses inflamasi berlangsung, terjadi reaksi vaskular dimana
cairan, elemen-elemen darah, sel darah putih dan mediator kimia
berkumpul pada tempat cedera jaringan atau infeksi. Proses inflamasi
merupakan suatu mekanisme perlindungan tubuh untuk menetralisir dan
membasmi agen-agen yang berbahaya pada tempat cedera dan
mempersiapkan keadaan untuk perbaikan jaringan (Wilmana, 1995).
Ciri khas inflamasi dikenal dengan tanda-tanda utama inflamasi, yaitu:
a. Eritema (kemerahan)
b. Edema (pembengkakan)
c. Kolor (panas)
d. Dolor (nyeri)
e. Functio laesa ( hilangnya fungsi )
2.8.2 Mekanisme inflamasi
Terjadinya inflamasi dimulai dengan adanya stimulus yang
merusak jaringan, mengakibatkan sel mast pecah dan terlepasnya
mediator-mediator inflamasi. Terjadi vasodilatasi dari seluruh pembuluh
darah pada daerah inflamasi sehingga aliran darah meningkat.
Terjadinya perubahan volume darah dalam kapiler dan venula yang
19
menyebabkan sel-sel endotel pembuluh darah meregang dan terjadi
kenaikan permeabilitas pembuluh darah serta protein plasma keluar dari
pembuluh sehingga timbul edema. Infiltrasi leukosit dengan cara
melengket pada dinding endotelium venula kemudian menuju daerah
inflamasi dan memfagositosis penyebab inflamasi (EkaPutri, 2001).
2.8.3 Golongan obat antiinflamasi
NSAID dikenal sebagai penghambat prostaglandin, mempunyai
efek analgetik dan antipiretik yang berbeda-beda tetapi terutama dipakai
sebagai agen antiinflamasi untuk meredakan inflamasi dan nyeri
(Wilmana, 1995). Berdasarkan mekanisme kerjanya obat-obat
antiinflamasi terbagi kedalam golongan :
a. Antiinflamasi steroid
Bekerja dengan cara menghambat pelepasan prostaglandin dari sel-
sel sumbernya, termasuk golongan obat ini antara lain :
hidrokortison, pednison, prednisolon, metyl prednisolon,
triamsinolon, deksametason dan betametason (Bowman, WC,
1980).
b. Antiinflamasi non steroid
Bekerja dengan cara menghambat enzim siklooxygenase sehingga
konversi asam arakidonat menjadi terganggu. Termasuk golongan
20
obat ini adalah aspirin, natrim diklofenak ibuprofen dan lain-lain
(Gan, Sulistia, 1995).
2.8.4 Natrium Diklofenak
Natrium diklofenak memiliki efek sebagai antiinflamasi,
analgetik dan antipiretik. Efek sampingnya adalah gangguan saluran
cerna, perdarahan saluran cerna dan tukak lambung (Katzung, 2001).
Obat ini adalah penghambat siklooksigenase yang relatif nonselektif dan
kuat, juga mengurangi bioavailabilitas asam arakidonat (Tjay dan
Kirana, 2002). Obat ini terikat 99% pada protein plasma dan mengalami
efek lintas awal (first-pass) sebesar 40-50%. Waktu paruh natrium
diklofenak singkat yakni 1-3 jam (Wilmana, 1995).
2.8.5 Karagenan
Karagenan merupakan suatu ekstrak kering ganggang laut merah
(EkaPutri, 2001). Zat ini dapat digunakan untuk memicu terbentuknya
udem yang diinduksikan secara subplantar pada telapak kaki tikus
(Anggraini, 2008).
21
2.8.6 Pengujian efek antiinflamasi
1. Pengujian berdasarkan penghambatan radang yang ditimbulkan oleh
iritan pada telapak kaki mencit
Zat penginduksi untuk menghasilkan radang sangat mempengaruhi hasil
pengujian obat. Efek penghambatan pembentuk radang oleh obat
antiinflamasi dinilai dengan pengukuran volume telapak kaki mencit pada
selang waktu tertentu dengan menggunakan alat plethysmometer (Hamid,
2004).
2. Pengujian berdasarkan penghambatan leukosit terhadap peritonitis
Percobaan ini menggunakan 0,25 ml karagenin 0,75% dalam NaCl
fisiologis sebagai iritan yang diinjeksikan intraperitoneal, 4 jam kemudian
hewan dibedah dan cairan peritonealnya dikumpulkan lalu dicampur
dengan NaCl fisiologis dengan dapar fosfat yang bebas Ca2+ Mg2+. Total
leukosit ditentukan dalam kamar hitung Neubauer (Turner, R.A, 1965).
3. Pengujian berdasarkan penghambatan pembentukan eritema dengan
radiasi ultra violet
Pengujian ini dilakukan dengan penyinaran sinar ultra violet kulit hewan
uji yang telah dicukur rambutnya, lalu eritema yang terbentuk diamati
Penekanan respon eritema berhubungan dengan keefektifan obat yang
dipakai dalam pengobatan arthritis rematoid. Perubahan suhu kulit pada
daerah inflamasi juga dapat dipakai untuk mengukur efek obat anti
inflamasi pada inflamasi sendi karena arthritis rematoid. Dinding
22
pembuluh juga akan mengalami kebocoran terhadap protein dan hal ini
dapat digunakan untuk mengukur kemampuan obat dalam menekan efek
mediator endogen terhadap permeabilitas vaskuler. Dalam pengujian ini
biasanya digunakan zat warna biru seperti evans blue, trypan blue yang
dapat bergabung dengn protein plasma dan memperlihatkan terjadinya
perubahan permeabilitas vaskuler. Zat warna ini disuntikkan melalui
pembuluh darah ekor hewan coba. Peningkatan permeabilitas vaskuler
dapat menimbulkan kebococran protein yang telah berikatan dengan zat
warna biru, sehingga kulit bewarna biru pada daerah yang rusak. Tingkat
pembiruan dapat diukur dengan berbagai cara, dapat dengan
mengekstraksi daerah kulit yang biru atau hanya diamati secara visual
(Turner, R.A, 1965).
4. Pengujian berdasarkan metode granuloma pouch
Metode ini dilakukan dengan penyuntikkan 20-25 ml udara dan sejumlah
kecil iritan ke dalam jaringan subkutan punggung tikus, yang terjadi
inflamsi yang berupa abses. Luasnya inflamasi yang terbentuk diukur 4-14
hari sesudah induksi dengan mengukur tebalnya dinding granulasi yang
terbentuk sekitar abses, ditimbang potongan granuloma (Turner, R.A,
1965).
23
5. Pengujian dengan metode pembentukan granuloma oleh cotton pellets
atau sponge (kubus busa poliuretan)
Metode ini menggunakan cotton pellets atau sponge yang ditanam secara
subkutan pada hewan coba, 5-8 hari sesudahnya cotton pellets atau sponge
dikeluarkan. Pellets kemudian diinkubasi pada suhu 37 0C selama 24 jam
lalu dikeringkan pada suhu 60 0C hingga beratnya konstan. Pertambahan
berat pada bobot keringnya menunjukkan formasi granuloma (Turner,
R.A, 1965).
24
BAB III
KERANGKA KONSEP KERJA
Ekstrak kering air gambir
1. Uji penapisan fitokimia 2. Uji cemaran gambir (urea) 3. Susut pengeringan 4. Kadar abu
Serbuk
Uji efek analgetik
Larutan ekstrak kering air gambir
Uji efek antiinflamasi
Ekstrak kering air gambir
Ekstrak uji 0,7; 1,4; 2,8 mg/20 gBB
Ekstrak uji 3,5; 7; 14 mg/200 gBB
Freeze drying
Dibuat infusa
25
BAB IV
METODOLOGI PENELITIAN
4.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia dan Farmakologi Jurusan
Farmasi Fakultas Kedokteran & Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri
Syarif Hidayatullah Jakarta dan Laboratorium Farmakologi UHAMKA
Jakarta. Penelitian ini dilakukan selama ± tiga bulan (Mei– Juli 2010).
4.2 Alat dan Bahan Penelitian
4.2.1 Alat penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi : (1) Neraca analitik
(Wiggen Hauser); (2) Spuit injeksi suplantar dan peroral 1 ml
(Terumo); (3) Stopwatch (Olympic); (4) Alat-alat gelas (Pyrex Iwaki
Glass); (5) Freeze drying (LIPI); (6) Plethysmometer; (7) Kandang
mencit & tikus; (8) Sonde; (9) Timbangan hewan; (10) Kapas; (11)
Lumpang dan stamfer; (12) Tissu gulung; (13) Label; (14) Botol vial;
(15) Spatel.
4.2.2 Bahan tanaman
Simplisia yang digunakan adalah bongkahan gambir yang diperoleh
dari perkebunan gambir Payakumbuh, Sumatra Barat.
26
4.2.3 Bahan kimia
Aquades, Asam asetat, Asam mefenamat dari PT. Kimia Farma,
Natrium Karboksimetilselulosa (NaCMC) dari PT. Brataco, Aquades,
Karagenan (LIPI), Na diklofenak dari PT. Kimia Farma, NaCl 0,9%
steril (Otsuka Pharmaceutical Indonesia), Air Raksa (Hg), Methylen
blue.
4.2.4 Bahan pereaksi
Bahan pelarut untuk ekstraksi adalah aquades.
Bahan untuk penapisan fitokimia adalah ammonia (10%, 25%), etil
asetat, HCl (1%, 1:10), pereaksi Dragendorff, pereaksi Mayer,
aquadest, lempeng magnesium, HCl pekat, butanol, larutan besi (III)
klorida (FeCl3) 1%, pereaksi Stiasny, NaOH 1 N, eter, asam asetat
anhidrat, H2SO4 pekat, pereaksi Libermann-Burchard, petroleum eter.
4.2.5 Hewan percobaan
Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian adalah mencit
putih jantan (Mus musculus) dan tikus putih betina (Rattus novergicus)
yang diperoleh dari Laboratorium Fakultas Kedokteran Hewan Institut
Pertanian Bogor (IPB).
4.3 Prosedur Penelitian
4.3.1 Penyiapan simplisia
Bongkahan gambir langsung digerus sampai diperoleh serbuk halus.
27
4.3.2 Pembuatan ekstrak air gambir
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode infusa. Sebanyak 200
gram serbuk ekstrak air gambir dilarutkan dalam aquades secukupnya,
kemudian dididihkan selama 15 menit pada suhu 900-980 sambil
diaduk. Setelah itu, larutan gambir disaring menggunakan kapas dan
ditampung dalam botol. Selanjutnya filtrat gambir yang sudah disaring
kemudian diuapkan menggunakan freeze drying di LIPI. Dihitung hasil
rendemen ekstrak dengan rumus:
4.3.3 Uji cemaran gambir (urea)
Panaskan 500 mg dalam tabung kimia hingga meleleh dan bau
ammonia. Lanjutkan pemanasan hingga cairan keruh lalu dinginkan
dan larutkan dalam campuran 10 ml air dan 0,5 ml larutan Natrium
hidroksida P, tambahkan 1 tetes larutan tembaga (III) sulfat P; terjadi
perubahan warna violet. Larutkan 100 mg dalam 1 ml air, tambahkan 1
ml asam nitrat P; terbentuk endapan hablur putih. (Anonim, 1995).
4.3.4 Penapisan fitokimia (Fansworth,1969)
Pada pemeriksaan terhadap kandungan golongan senyawa kimia dari
serbuk dan ekstrak gambir (Uncaria gambir Roxb) seperti alkaloid,
flavonoid, saponin, tanin, steroid/terpenoid, kuinon, minyak atsiri dan
kumarin.
28
a. Identifikasi alkaloid
Sebanyak ± 5 gram serbuk dilembabkan dengan 5 ml ammoniak 25
% digerus dalam mortir, kemudian ditambahkan 20 ml kloroform
dan digerus kembali dengan kuat, campuran tersebut disaring
dengan kertas saring, filtrat berupa larutan organik diambil
(sebagai larutan A), sebagai larutan A (10 ml) diekstraksi dengan
10 ml larutan HCl 1:10 dengan pengocokan dalam tabung reaksi,
diambil larutan bagian atasnya (larutan B).
Larutan A diteteskan beberapa tetes pada kertas saring dan
disemprot atau ditetesi dengan pereaksi Dragendroff, terbentuk
warna merah atau jingga pada kertas saring menunjukkan adanya
senyawa alkaloid.
Larutan B dibagi dalam 2 tabung reaksi, ditambahkan masing-
masing pereaksi Dragendroff dan pereaksi Mayer, terbentuk
endapan merah bata dengan pereaksi Dragendroff atau endapan
putih dengan pereaksi Mayer menunjukkan adanya senyawa
alkaloid.
b. Identifikasi flavonoid
Sebanyak ± 10 gram serbuk ditambah 100 ml air panas, didihkan
selama 5 menit, saring. Ambil 5 ml filtratnya (dalam tabung
reaksi), ditambahkan serbuk Mg secukupnya dan 1 ml asam klorida
pekat dan 2 ml amil alkohol, kocok kuat dan biarkan memisah.
Terbentuknya warna merah, kuning, atau jingga pada lapisan amil
alkohol menunjukkan adanya flavonoid.
29
c. Identikasi saponin
Serbuk dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambah 10 ml air
panas. Setelah dingin kocok kuat secara vertikal selama 10 detik.
Terbentuknya busa yang stabil menunjukkan adanya saponin, bila
ditambahkan 1 tetes HCl 1% busa tetap stabil.
d. Identifikasi tanin
Sebanyak ± 10 gram serbuk ditambah 10 ml air, didihkan selama
15 menit, setelah dingin kemudian di saring dengan kertas saring.
Filtrat ditambah 1-2 tetes FeCl3 1 %, terbentuknya warna biru,
hijau atau hitam menunjukkan adanya seyawa golongan tanin.
e. Identifikasi steroid/terpenoid
Sebanyak ± 5 gram serbuk dimaserasi dalam 20 ml eter selama 2
jam kemudian disaring. Diuapkan dalam cawan penguap sampai
kering. Ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam
sulfat pekat ke dalam residu. Terbetuknya warna hijau atau merah
menunjukkan adanya steroid/triterpenoid.
f. Identifikasi kuinon
Sebanyak ± 1 gram serbuk dipanaskan dalam air selama 5 menit,
disaring. Sebanyak 5 ml filtat ditambah beberapa tetes larutan
NaOH 1 N, terbentuk warna merah menunjukkan adanya kuinon.
g. Identifikasi minyak atsiri
Sebanyak ± 2 gram serbuk dimasukkan ke dalam tabung reaksi
(volume 20 ml), tambahkan 10 ml pelarut petroleum eter. Pada
mulut tabung dipasang corong yang diberi lapisan kapas yang telah
30
dibasahi dengan air, kemudian disaring dengan kertas saring.
Filtrat yang diperoleh diuapkan pada cawan penguap, selanjutnya
residu dilarutkan dengan pelarut etanol 95 % sebanyak 5 ml lalu
saring dengan kertas saring. Filtratnya diuapkan dengan cawan
penguap, residu yang berbau aromatik menunjukkan adanya
senyawa golongan minyak atsiri.
h. Identifikasi kumarin
Sebanyak ± 2 gram serbuk dimasukkan ke dalam tabung reaksi,
ditambahkan 10 ml kloroform. Corong yang diberi lapisan kapas
yang telah dibasahi dengan air dipasang pada mulut tabung,
kemudian dipanaskan selama 30 menit, setelah dingin disaring.
Filtrat diuapkan dengan cawan penguap hingga kering, sisa
ditambah air panas 10 ml, dinginkan kemudian dimasukkan ke
dalam tabung reaksi, ditambahkan 0,5 ml amoniak 1 %. Diamati
dibawah sinar UV 366 nm, flouresensi biru atau hijau
menunjukkan adanya kumarin.
4.3.5 Pengujian parameter non spesifik ekstrak (Depkes RI, 2000)
a. Susut pengeringan
Ekstrak ditimbang dengan seksama sebanyak 1 gram sampai 2 gram
dan dimasukan ke dalam botol timbang dangkal bertutup yang
sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105oC selama 30 menit dan
telah ditara. Sebelum ditimbang, ekstrak diratakan dalam botol
timbang dengan menggoyang-goyangkan botol, hingga merupakan
31
lapisan setebal lebih kurang 5 mm sampai 10 mm, kemudian
dimasukan ke dalam oven, buka tutupnya. Pengeringan dilakukan pada
suhu penetapan yaitu 105oC hingga diperoleh bobot tetap lalu
ditimbang. Sebelum setiap pengeringan, botol dibiarkan dalam
keadaan tertutup mendingin dalam eksikator hingga suhu kamar.
Hitung susut pengeringan dan kadar air dengan rumus sebagai berikut :
b. Kadar abu
Lebih kurang 2 g sampai 3 g ekstrak yang telah digerus dan ditimbang
seksama, dimasukan kedalam krus platina atau krus silikat yang telah
dipijarkan dan ditara, lalu ekstrak diratakan. Dipijarkan perlahan-
lahan hingga arang habis, didinginkan, ditimbang. Jika arang tidak
dapat hilang, ditambahkan air panas, disaring dengan menggunakan
kertas saring bebas abu. Dipijarkan sisa abu dan kertas saring dalam
krus yang sama. Filtrat dimasukkan ke dalam krus, diuapkan,
dipijarkan hingga bobot tetap, ditimbang. Kadar abu dihitung terhadap
berat ekstrak dan dinyatakan dalam % b/b.
Hitung kadar abu dengan rumus sebagai berikut :
32
4.3.6 Persiapan hewan coba (aklimatisasi)
Hewan coba yang digunakan adalah mencit putih jantan (Mus
musculus) dengan berat badan 20-25 gram dan tikus putih betina (Rat
nervicus) dengan berat badan 200-250 gram, diaklimatisasi selama dua
minggu agar dapat menyesuaikan dengan lingkungannya. Selama
perlakuan, pakan dan minum diberikan secara ad libitum (Harmita,
2004).
Hewan uji dipilih sebanyak 25 ekor mencit putih jantan dan 25
ekor tikus putih betina secara acak untuk dibagi menjadi 10 kelompok,
masing-masing terdiri dari 5 ekor. Penentuan jumlah mencit tiap
kelompok dihitung berdasarkan rumus Federer, yaitu:
Rumus Federer untuk uji analgetik dan antiinflamasi :
(n-1) (t-1) > 15
(n-1) (5-1) > 15
(n-1) (4) >15
4n – 4 > 15
n > 4,75 ≈ 5
dimana t menunjukkan jumlah perlakuan dan n menunjukkan jumlah
ulangan minimal dari tiap perlakuan. Jumlah minimal mencit yang
digunakan tiap kelompok adalah 4,75 ekor atau dibulatkan menjadi 5
ekor. Kelompok perlakuan dibagi secara acak menjadi 5 kelompok
seperti yang terdapat pada tabel berikut:
33
Tabel 1. Kelompok perlakuan uji analgetik dan antiinflamasi
No Kelompok Perlakuan
1 Kontrol negatif Diberikan NaCMC atau NaCl fisiologis
2 Kontrol positif Diberikan obat analgetik atau obat antiinflamasi
3 Dosis 1 Diberikan ekstrak kering air gambir dosis I
4 Dosis 2 Diberikan ekstrak kering air gambir dosis II
5 Dosis 3 Diberikan ekstrak kering air gambir dosis III
4.3.7 Penetapan Dosis
Untuk uji analgetik
Tabel 2. Kelompok dosis untuk uji analgetik
Dosis I 35 mg/KgBB ≈ 0,7 mg/20 gBB
Dosis II 70 mg/KgBB ≈ 1,4 mg/20 gBB
Dosis III 140 mg/KgBB ≈ 2,8 mg/20 gBB
Untuk uji antiinflamasi
Tabel 3. Kelompok dosis untuk uji antiinflamasi
Dosis I 17 mg/KgBB ≈ 3,5 mg/200 gBB
Dosis II 35 mg/KgBB ≈ 7 mg/200 gBB
Dosis III 70 mg/KgBB ≈ 14 mg/200 gBB
34
4.3.8 Persiapan Bahan
A. Pembuatan suspensi asam mefenamat
Asam mefenamat ditimbang sebanyak 18,2 mg digerus perlahan di
dalam lumpang, tambahkan 0,5 ml suspensi NaCMC 1% sambil
diaduk homogen, kemudian dilarutkan dengan NaCMC 1% sampai 10
ml dalam gelas ukur.
B. Pembuatan suspensi natrium diklofenak
Natrium diklofenak ditimbang sebanyak 5,15 mg digerus perlahan di
dalam lumpang, tambahkan 0,5 ml suspensi NaCMC 1% sambil
diaduk homogen, , kemudian dilarutkan dengan NaCMC 1% sampai
10 ml dalam gelas ukur.
C. Pembuatan karagenan 2% b/v
Karagenan ditimbang sebanyak 200 mg, kemudian kemudian
dilarutkan dengan NaCl fisiologis sampai 10 ml dalam gelas ukur. Lalu
diaduk dan dipanaskan diatas waterbath sampai larut dengan
sempurna.
4.3.9 Metode Pengujian
4.3.9.1 Uji Analgetik
Pengujian efek analgetik
1. Hewan percobaan dipuasakan makan selama lebih kurang
18 jam, minum tetap diberikan.
2. Setelah ditimbang, hewan dikelompokkan secara acak,
yaitu kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif,
35
dan kelompok uji. Masing-masing kelompok terdiri dari
lima ekor.
3. Untuk kelompok kontrol negatif diberikan NaCMC 1%
dengan volume 0,5 ml/20 gBB.
4. Untuk kelompok positif diberikan asam mefenamat secara
oral dengan volume 0,4 ml/20 gBB.
5. Pada kelompok uji, masing-masing kelompok diberikan zat
uji secara oral dengan volume 0,5 ml/20 gBB pada
beberapa dosis.
6. Tiga puluh menit kemudian, disuntikkan secara intra
peritoneal (IP) larutan asam asetat 0,5% v/v dengan volume
0,5 ml/20 gBB. Kemudian hewan uji diletakkan dalam
kotak pengamatan masing-masing.
7. Diamati dan dicatat jumlah geliatan dalam 5 menit selama
30 menit untuk setiap mencit. Jumlah geliatan untuk tiap
kelompok dirata-ratakan.
8. Dihitung persentase proteksi analgetik pada masing-masing
kelompok dosis.
4.3.9.2 Uji Antiinflamasi
Pengujian efek antiinflamasi
1. Hewan percobaan dipuasakan makan selama lebih kurang
18 jam, minum tetap diberikan.
36
2. Pada hari pengujian, hewan ditimbang dan dikelompokkan
secara acak, yaitu kelompok kontrol negatif, kelompok
kontrol positif, dan kelompok uji. Masing-masing
kelompok terdiri dari lima ekor.
3. Untuk kelompok kontrol negatif diberikan suspensi NaCl
fisiologis dengan volume 2 ml/200 gBB.
4. Untuk kelompok positif diberikan suspensi natrium
diklofenak dalam NaCMC 1% secara oral dengan volume 2
ml/200 gBB.
5. Pada kelompok uji, masing-masing kelompok diberikan
suspensi zat uji dalam NaCMC 1% secara oral dengan
volume pemberian 2 ml/200 gBB pada beberapa dosis.
6. Satu jam setelah pemberiaan obat uji atau larutan kontrol,
telapak kaki semua tikus disuntik secara intraplantar dengan
karagenan 2% b/v sebanyak 0,4 ml, sebelumnya kaki tikus
dibersihkan dengan etanol 70%.
7. Setelah satu jam, volume kaki kiri diukur dengan cara
mencelupkannya ke dalam alat plethysmometer untuk
setiap selang waktu 1 jam selama 4-5 jam setelah
penyuntikkan suspensi karagenan 2% b/v.
8. Semua data yang diperoleh ditabulasi dan hasil setiap
kelompok dirata-rata.
9. Dihitung persentase radang dan persentase penghambatan
radang.
37
4.3.10 Teknik analisa data
1. Proteksi analgetik (Saha, 2007)
Analisis dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui perbedaan
pada semua kelompok perlakuan. Data penelitian pada metode
sigmund berupa jumlah kumulatif geliat pada masing-masing
kelompok perlakuan digunakan untuk menghitung proteksi
analgetik dengan rumus sebagai berikut :
Keterangan:
P = Jumlah geliat kumulatif kelompok percobaan rata-rata tiap
individu
K = Jumlah geliat kumulatif kelompok kontrol rata-rata
Jumlah kumulatif geliat mencit dan persen proteksi analgetik dari
semua kelompok perlakuan, diuji dengan Anova satu jalan untuk
mengetahui perbedaan tiap kelompok-kelompok perlakuan dan
dilanjutkan dengan uji LSD jika terdapat perbedaan bermakna.
2. Persentasi penghambatan radang
Data yang diperoleh dianalisis dengan uji Kolmogorov Smirnovz
untuk melihat distribusi data dan dianalisis dengan uji Levene
untuk melihat homogenitas data. Jika data terdistribusi normal dan
homogen maka dilanjutkan dengan uji Analisis varians (ANAVA)
satu arah dengan taraf kepercayaan 95% sehingga dapat diketahui
apakah perbedaan yang diperoleh bermakna atau tidak (Santoso,
2008). Jika terdapat perbedaan bermakna, dilanjutkan dengan uji
38
beda nyata terkecil (LSD) dan setiap kelompok tikus dihitung
persentasi penghambatan radang rata-rata untuk setiap dosis zat uji
dengan rumus (Turner, 1965):
Keterangan:
Vt dan Vo adalah volume telapak kaki tikus pada waktu t dan
waktu nol
Keterangan:
a = volume radang pada kelompok hewan kontrol negatif
b = volume radang pada kelompok hewan uji
39
BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN
5.1 Hasil Penelitian
5.1.1 Penapisan fitokimia
Berdasarkan pemeriksaan pada penapisan fitokimia, baik pada
serbuk maupun ekstrak air gambir (Uncaria gambir Roxb.) terdapat
kandungan alkaloid, flavanoid, saponin, tannin, kuinon. Hasil uji
penapisan dapat dilihat pada tabel dibawah ini:
Tabel 4. Hasil Pengujian Penapisan Fitokimia
Jenis Pengujian Hasil Pengujian
Serbuk simplisia Ekstrak
Alkaloid + +
Flavonoid + +
Saponin + +
Tanin + +
Kuinon + +
Steroid & Triterpenoid - -
Minyak atsiri - -
Kumarin - -
Keterangan : (+) Memberikan reaksi positif, (-) Memberikan reaksi
negatif
40
5.1.2 Pengujian parameter ekstrak
Hasil uji karakteristik ekstrak dapat dilihat pada tabel dibawah ini:
Tabel 5. Karakteristik ekstrak (Berdasarkan MMI ed. V, 1989)
Jenis Pengujian Hasil Pengujian Persyaratan
Bentuk Serbuk Kering --
Rasa Pahit Pahit
Warna Coklat Muda Coklat muda
Bau Lemah Lemah
Susut Pengeringan 0,29 % Kurang dari 10%
Kadar Abu 0,18 % Tidak lebih dari 4%
Rendemen 48,16 % ---
5.1.3 Hasil penelitian
5.1.3.1 Analgetik
Data rata-rata jumlah geliat mencit dari masing-masing
kelompok perlakuan.
Tabel 6. Data pengamatan rata-rata jumlah geliat
No. Kelompok Rata-rata jumlah geliat mencit pada 5 menit ke… 1 2 3 4 5 6
1 NaCMC 1% 0,5ml/20 gBB
44 39 38 35 24 16
2 Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB
20.67 16.67 13.67 12.33 10 9
3 Ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB
41.33 32.67 23 19.33 13.67 14
41
4 Ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB
17 16.33 12.33 7.33 4.67 3.33
5 Ekstrak air gambir 2,8 mg/20 gBB
32.67 25 23.67 19.33 14.33 9
Dari data diatas ditampilkan dalam bentuk grafik, dapat dilihat
pada gambar berikut:
Gambar 1. Data rata-rata jumlah geliat mencit
Dari nilai rata-rata jumlah geliat dapat dihitung nilai presentase
analgetik, yaitu :
Tabel 7. Persentase proteksi analgetik ekstrak air gambir dan
asam mefenamat
D
a
No. Kelompok Perlakuan Persentase proteksi analgetik
1 Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB
59.84 %
2 Ekstrak air gambir
0,7 mg/20 gBB 27.54 %
3 Ekstrak air gambir
1,4 mg/20 gBB 68.04 %
4 Ekstrak air gambir
2,8 mg/20 gBB 36.14 %
42
Dari data diatas ditampilkan dalam bentuk grafik pada gambar
berikut :
Gambar 2. Data persentase proteksi analgetik
5.1.5.2 Antiinflamasi
Berikut data persentase radang telapak kaki tikus pada masing-
masing kelompok perlakuan.
Tabel 8. Data persentase radang telapak kaki tikus
Waktu
NaCl 2 ml/200 gBB
Na diklofenak 1,03 mg/ 200 gBB
Ekstrak air gambir 3,5
mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 7 mg/200
gBB
Ekstrak air gambir 14
mg/200 gBB
1 jam 112.45 30.55 48.77 22.22 56.67 2 jam 135.69 58.89 74.54 45 66.06 3 jam 143.09 68.33 84.54 63.89 81.51 4 jam 149.15 86.67 91.21 76.11 90.9 5 jam 135.69 73.89 78.18 63.89 75.15
43
Data diatas ditampilkan dalam bentuk grafik, dapat dilihat pada
gambar berikut:
Gambar 3. Data persentase radang telapak kaki tikus
Kemudian presentase penghambatan radang dapat ditampilkan
pada tabel berikut:
Tabel 9. Data penghambatan radang telapak kaki tikus
Waktu
Na diklofenak 1,03 mg/ 200 gBB
Ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB
1 jam 70.06 52.82 79.8 47.32 2 jam 55.81 43.77 65.77 51.47 3 jam 50.99 38.87 53.48 42.67 4 jam 41.27 38.04 48.35 39.09 5 jam 44.14 40.74 51.67 44.24
Dan dari data diatas ditampilkan dalam bentuk grafik, dapat dilihat
pada gambar berikut:
44
Gambar 4. Data persentase penghambatan radang telapak kaki tikus
5.2 Pembahasan
Tanaman gambir (Uncaria gambir Roxb) memiliki khasiat unuk
pengobatan berbagai penyakit. Dari literature diperoleh informasi bahwa
tanaman ini digunakan sebagai obat diare, luka bakar dan lain-lain (Haryanto,
2009). Dari hasil penapisan fitokimia ekstrak air gambir mengandung
flavanoid, alkaloid, saponin, tannin dan kuinon. Menurut jurnal the key to
medicinal plants research revolves around the detection, isolation, and
characterisation of antioxidants as therapeutic agent (Misra, 2009)
mengatakan bahwa gambir dapat digunakan sebagai analgetik dan
antiinflamasi karena gambir mengandung katekin (flavanoid), tannin dan
gambiriin yang berfungsi sebagai antioksidan. Antioksidan ini diasumsikan
dapat menghilangkan nyeri (analgetik) dan radang (inflamasi) (Lieber dan
Leo, 1999).
45
Untuk mengekstraksi kandungan kimia dari tanaman gambir
digunakan metode cara panas, yaitu dengan memasak panas daun tanaman
gambir yang kemudian dicetak selagi panas menjadi bongkahan gambir.
Kemudian dari hasil bongkahan ekstrak kering air gambir ini kita ekstrak
kembali dengan freeze drying yang sebelumnya bongkahan gambir dibuat
infusa terlebih dahulu. Tujuan dilakukan pengekstrakan dua kali adalah
karena ekstrak air yang dilakukan oleh masyarakat tidak sesuai standar dan
untuk meminimalisasi kemungkinan adanya variasi kandungan kimia
sehingga ditakutkan adanya tambahan zat lain sebagai pengotor dalam gambir
tersebut oleh karena itu, perlu dilakukan ekstrak air terstandar yaitu dengan
metode freeze drying.
Berdasarkan kandungan berkhasiat yang dimiliki oleh gambir seperti
tannin, katekin, asam katekutanat yang kelarutannya lebih baik dalam
senyawa polar dan akan lebih besar kelarutannya apabila menggunakan air
panas (Pambayun, 2007). Sehingga, diharapkan dengan metode infusa dapat
menarik semua komponen berkhasiat dalam gambir karena proses infundasi
sendiri adalah ekstraksi dengan pelarut air selama 15 menit setelah suhu
dalam penangas mencapai 95-980C (DepKes 2000). Pada saat proses
penyaringan, gambir harus segera disaring dalam keadaan panas agar
kandungan dalam gambir tetap larut dan tersaring selain itu karena gambir
akan cepat mengeras (membentuk seperti pasta) dalam keadaan dingin
sehingga dikhawatirkan komponen berkhasiat gambir tidak ikut terbawa saat
46
proses penyaringan. Kemudian, hasil infusa gambir dikeringkan dengan cara
freeze drying. Prinsip kerja freeze drying meliputi pembekuan larutan,
menggranulasikan larutan yang beku tersebut, mengkondisikannya pada
vacum ultra-high dengan pemanasan yang sedang sehingga mengakibatkan air
pada bahan pangan tersebut akan menyublin dan akan menghasilkan produk
padat (solid product) (Tambunan, 2000).
Efek analgetik ekstrak air gambir dilakukan dengan metode Writhing
Test. Metode Writhing Test digunakan untuk pengujian analgetik non
narkotik. Metode ini dipilih karena metodenya sederhana, sensitive untuk
pengujian analgetik-analgetik lemah. Prinsip metode ini adalah mengamati
jumlah geliat pada mencit yang terjadi akibat pemberian induksi asam asetat
0,5% v/v dengan pemberian volume 0,5 ml/20 gBB mencit secara intra
peritoneal (IP). Larutan asam asetat ini digunakan sebagai pemicu nyeri yang
berupa geliat (cacah perut) pada mencit. Penggunaan asam asetat 0,5% v/v
karena asam asetat pada 0,5% v/v dapat memberikan geliat (cacah perut) pada
mencit yang tidak terlalu banyak ataupun sedikit sehingga dapat teramati serta
dapat dihitung secara kuantitatif dibandingkan penggunaan asam asetat
dengan konsentrasi 1% v/v. Penyuntikkan asam asetat 0,5% v/v dilakukan
secara intra peritoneal (IP) karena penyuntikkan secara IP absorpsi terjadi
secara cepat dan konstan sehingga efek yang dihasilkan lama (Setiawati,
1995) sehingga rasa nyeri yang dirasakan mencit cukup lama. Dengan durasi
47
nyeri yang cukup lama maka geliat mencit dapat teramati dan dihitung selama
30 menit.
Pada metode Writhing Test efek analgetik diamati mulai dari waktu 0
menit sampai 30 menit (Cavalho et.al,. 1999) setelah diinduksi dengan asam
asetat pada tiap-tiap kelompok perlakuan, dimana kelompok perlakuannya
adalah kontrol negatif (NaCMC 1%), kontrol positif (asam mefenamat 1,82
mg/20 gBB) dan variasi kelompok dosis (0,7 mg/20 gBB, 1,4 mg/20 gBB dan
2,8 mg/20 gBB). Penggunaan asam mefenamat sebagai kontrol positif
dikarenakan penggunaan obat ini sebagai analgetik sudah cukup umum dalam
masyarakat dan efek samping yang ditimbulkan oleh asam mefenamat
khususnya dalam mengiritasi saluran cerna masih terbilang rendah jika
dibandingkan dengan aspirin (asam asetil salisilat) (Sukandar, 2008).
Penggunaan NaCMC sebagai suspending agent karena NaCMC dapat
mensuspensikan ekstrak air gambir. Selain itu keuntungan penggunaan
NaCMC karena kelarutan dalam air cukup baik.
Pada grafik rata-rata jumlah geliat mencit (gambar 1) terlihat asam
asetat 0,5% v/v memberikan efek geliat yang banyak pada 5 menit pertama
kemudian rata-rata jumlah geliat menurun sedikit demi sedikit sampai 5 menit
keenam di setiap kelompok perlakuan. Hal ini kemungkinan terjadi karena
asam asetat mengalami sekresi di dalam tubuh mencit yang dapat terlihat
bahwa hewan coba (mencit) mengeluarkan urin selama uji pengamatan. Hasil
rata-rata jumlah geliat mencit pada tiap kelompok perlakuan terlihat hubungan
48
antara dosis dengan penurunan rata-rata jumlah geliat mencit. Semakin kecil
rata-rata jumlah geliat mencit semakin besar efek analgetik yang ditimbulkan
oleh kelompok perlakuan, dimana didapatkan kelompok dosis 1,4 mg/20 gBB
(dosis sedang) memberikan nilai rata-rata jumlah geliat mencit yang paling
rendah, baik dari 5 menit pertama sampai 5 menit keenam (30 menit).
Kemudian diikuti oleh asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB (kontrol positif),
dosis 2,8 mg/20 gBB (dosis tinggi), dosis 0,7 mg/20 gBB (dosis rendah).
Kemudian dari hasil rata-rata jumlah geliat mencit kita dapat
menghitung persentase proteksi analgetik (gambar 2). Dari perhitungan ini,
didapat nilai persentase dosis 1,4 mg/20 gBB yang memiliki nilai persentase
proteksi analgetik terbesar yaitu sebesar 68,04%, kemudian diikuti oleh asam
mefenamat (kontrol positif) 59,84%, kelompok dosis 2,8 mg/20 gBB (dosis
tinggi) 36,18%, dan kelompok dosis 0,7 mg/20 gBB (dosis rendah) 27,54%.
Hasil-hasil ini menunjukkan hubungan antara rata-rata jumlah geliat mencit
benbanding terbalik dengan persentase proteksi analgetik. Artinya semakin
rendah nilai rata-rata jumlah geliat mencit maka semakin besar nilai
persentase proteksi analgetik sebaliknya makin besar nilai rata-rata jumlah
geliat mencit maka semakin besar nilai persentase proteksi analgetik.
Pada grafik hubungan antara dosis dengan rata-rata jumlah geliat
(gambar 1) terlihat bahwa pada dosis 2,8 mg/20 gBB menurun efek analgetik.
Hal ini kemungkinan karena ekstrak gambir dibuat secara suspensi sehingga
mungkin gambir tidak terdispersi secara sempurna sehingga konsentrasi
49
gambirpun juga tidak merata. Menurut persentase proteksi analgetik
kelompok dosis sedang (1,4 mg/20 gBB) dimana persentasenya mendekati
kontrol positif (asam mefenamat), berarti gambir dapat dipertimbangkan
sebagai obat analgetik.
Pengujian efek antiinflamasi menggunakan metode Rat hind paw
oedema atau pembentukan radang buatan pada telapak kaki belakang tikus
putih betina. Metode ini dipilih karena edema atau radang merupakan salah
satu gejala inflamasi yang dapat digunakan sebagai parameter untuk
mengukur potensi antiinflamasi suatu senyawa. Potensi antiinflamasi diukur
berdasarkan kemampuan senyawa tersebut untuk menghambat dan
mengurangi terjadinya radang. Selain itu, metode ini sederhana, tidak
membutuhkan keahlian serta mudah pelaksanaanya.
Pada penelitian ini radang dibuat dengan menginduksi telapak kaki
tikus dengan larutan karagenan 2% b/v sebanyak 0,4 ml. Pemilihan hewan uji
tikus karena tikus memiliki kaki yang besar dibandingkan mencit dan pada
tikus putih betina memiliki hormon estrogen yang dapat memperbesar radang
di telapak kakinya dibandingkan dengan jantan. Dimana berdasarkan jurnal
sex steroid regulation of the inflammatory response, menyatakan bahwa pada
tikus betina terdapat steroid sex (estrogen) yang dapat meningkatkan inflamasi
melalui mediator kimia (bradikinin) (Green et al., 1999) dibandingkan dengan
tikus jantan sehingga pada saat pengukuran radang dapat terbaca di
plethysmometer. Karagenan dipilih karena dapat menimbulkan radang pada
50
waktu relatif singkat dan radang yang terbentuk berkembang lambat dan dapat
kembali normal dalam 1-2 hari. Pembentukan radang oleh karagenan dapat
diamati dengan jelas dan tidak menyebabkan kerusakan permanen pada
jaringan disekitar inflamasi. Pemilihan penggunaan karagenan sebesar 2% b/v
dikarenakan radang yang terbentuk oleh karagenan 1% terlalu kecil sehingga
pengukuran menjadi kurang jelas dan dikhawatirkan terjadinya kesalahan
dalam pembacaan besar radang.
Alat yang digunakan untuk mengukur volume radang pada kaki tikus
adalah plethysmometer air raksa. Pada saat pengukuran, hal-hal yang harus
diperhatikan adalah volume air raksa harus sama pada setiap kali pengukuran,
tanda pada pergelangan kaki tikus harus jelas dan dipastikan pada saat
mencelup kaki tikus harus tercelup sempurna sampai tanda batas yang telah
ditentukan. Hal ini bertujuan agar mendapatkan data pengukuran yang selalu
konstan pada tiap waktu dan dalam kondisi yang sama.
Bahan pembanding yang digunakan adalah natrium diklofenak.
Pemilihan natrium diklofenak sebagai bahan pembanding karena natrium
diklofenak memiliki daya absorbsi yang cepat, dilihat dari waktu paruh
natrium diklofenak 0,5-1 jam dalam tubuh (Sukandar, 2008). Selain itu,
penggunaan natrium diklofenak sebagai antiinflamasi dalam masyarakat
sudah cukup umum.
Volume radang rata-rata telapak kaki tikus maksimal dicapai pada jam
ke 4 setelah pemberian larutan karagenan 2% b/v. Demikian juga persentase
51
radang rata-rata hewan coba maksimal dicapai pada jam ke-4 (Gambar 3).
Pada jam ke-5 persentase radang sudah mulai menurun, hal ini mungkin
disebabkan karena absorbsi karagenan cepat dalam tubuh sehingga efek
radang sudah mulai menurun. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa pada
dosis sedang ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB mampu menghambat proses
radang, kemudian diikuti oleh kontrol positif (natrium diklofenak 3,04
mg/200 gBB), dosis tinggi (14 mg/200 gBB) dan dosis rendah (3,5 mg/200
gBB).
Hasil penelitian pada beberapa tanaman, diketahui flavonoid
mempunyai aktivitas antiinflamasi karena dapat menghambat beberapa enzim
seperti lipooxygenase dan cyclooxygenase (Esvandiary, 2002). Melalui jalur
enzim cyclooxygenase dan lipooxygenase dari metabolisme asam arakidonat
ini yang memfasilitasi terbentuknya mediator proses inflamasi (Katzung,
2002). Flavonoid dalam bentuk aglikon bersifat non-polar dan dalam bentuk
glikosidanya bersifat polar. Untuk melakukan penyarian flavonoid dapat
dilakukan dengan pelarut air (Harborne, 1987).
Aktivitas gambir sebagai penghambat analgetik dan antiinflamasi
diasumsikan berhubungan dengan ketersedian kandungan katekin, tannin dan
gambiriin dalam gambir, dimana kandungan katekin mencapai 51% katekin,
tannin dan gambiriin memiliki aktivitas sebagai antioksidan alami (Misra,
2009). Katekin, tannin dan gambiriin mampu menghambat oksidasi asam
arakhidonat menjadi endoperoksida dan menurunkan aktivitas enzim
52
lipoksigenase. Apabila oksidasi asam arakhidonat dapat dihambat maka tidak
terbentuk oksigen reaktif dan mediator-mediator kimia yang dapat
menyebabkan nyeri dan radang. Penurunan aktivitas enzim lipooxygenase
menyebabkan tidak terbentuknya leukotrien yang dapat mengaktivasi leukosit
yang memacu terjadinya peradangan serta enzim cyclooxygenase menurun
mengakibatkan prostaglandin tidak terbentuk (Lieber dan Leo, 1999). Adanya
hambatan pada oksidasi asam arakhidonat dan penetralan oksigen reaktif
menyebabkan gambir berefek analgetik dan antiinflamasi.
Hasil uji dilanjutkan dengan pengolahan data melalui statistik,
sehingga didapat uji distribusi normal dan uji distribusi homogen. Pada uji
analgetik didapatkan signifikansi normal (ρ = 0,883) dan uji homogenitas (ρ =
0,102) hal ini menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dan homogen (ρ
≥ 0,05) (lampiran 17). Analisa dilanjutkan dengan metode analisa varian satu
arah (ANAVA) untuk mengetahui apakah ada perbedaan yang bermakna atau
tidak pada setiap kelompok perlakuan. Hasil analisa diperoleh nilai ρ = 0,00
(ρ ≤ 0,05), maka Ho ditolak atau data memiliki perbedaan secara bermakna,
dimana kontrol negatif berbeda secara bermakna dengan kontrol positif (asam
mefenamat 1,82 mg/20 gBB), kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 2,8 mg/20
gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB) dan dosis 3 (ekstrak air
gambir 2,8 mg/20 gBB). Tetapi jika dibandingkan antara kontrol positif (asam
mefenamat 1,82 mg/20 gBB) dengan kelompok dosis 2 (ekstrak air gambir
2,8 mg/20 gBB) tidak terdapat perbedaan secara bermakna, artinya efek yang
53
ditimbulkan oleh kontrol positif (asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB) dalam
memberikan proteksi analgetik sama dengan dosis 2 (ekstrak air gambir 1,4
mg/20 gBB).
Pada uji antiinflamasi dilanjutkan dengan pengolahan data melalui
statistik untuk mendapatkan nilai distribusi normal dan uji distribusi homogen
(lampiran 18). Pada uji antiinflamasi didapatkan signifikansi normal (ρ ≥
0,05) dan uji homogenitas (ρ ≥ 0,05) hal ini menunjukkan bahwa data
terdistribusi normal dan data homogen kecuali pada jam 1 data tidak homogen
karena ρ = 0,039 (ρ ≤ 0,05). Oleh karena itu data pada jam 1 dilanjutkan
dengan metode Kruskal Wallis untuk mengetahui apakah ada perbedaan yang
bermakna atau tidak pada setiap kelompok perlakuan. Hasil analisa diperoleh
nilai ρ = 0,028 (ρ ≤ 0,05), maka Ho ditolak atau data memiliki perbedaan
secara bermakna. Pada hasil BNT antiinflamsi didapatkan bahwa baik pada
jam 1 sampai jam 5 kontrol negatif (NaCl 0,9% 2 ml/200 gBB) memiliki
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif (Na diklofenak 3,04
mg/200 gBB), kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB), dosis 2
(ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB) dan dosis 3 (ekstrak air gambir 14 mg/200
gBB). Sedangkan kontrol positif (Na diklofenak 3,04 mg/200 gBB) tidak
berbeda secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5
mg/200 gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB) dan dosis 3 (ekstrak
air gambir 14 mg/200 gBB). Hasil ini menunjukkan bahwa efek kontrol
positif (Na diklofenak 3,04 mg/200 gBB) dalam menghambat radang pada
54
telapak kaki tikus sama dengan dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB),
dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB) dan dosis 3 (ekstrak air gambir 14
mg/200 gBB).
55
BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Dari penelitian yang telah dilakukan dapat di ambil beberapa kesimpulan, yaitu:
1. Didapatkan dosis ekstrak kering air gambir yang berefek analgetik adalah 1,4
mg/20 gBB dengan menggunakan metode Writhing test (geliat) pada mencit
putih jantan.
2. Dosis ekstrak kering air gambir yang berefek sebagai antiinflamasi adalah 3,5
mg/200 gBB, 7 mg/200 gBB, 14 mg/200 gBB dengan menggunakan metode
Rat hind paw (pembentukan radang) pada tikus putih betina.
3. Pada uji ANOVA ekstrak kering air gambir yang sebagai analgetik dengan
variasi dosis 0,7 mg/20 gBB, 1,4 mg/20 gBB dan 2,8 mg/20 gBB terdapat
perbedaan secara bermakna terhadap kontrol negatif (p ≤ 0,05). Tetapi semua
variasi dosis ini tidak memiliki perbedaan secara bermakna (p ≥ 0,05)
terhadap kontrol positif (asam mefenamat) dengan dosis 1,82 mg/20 gBB.
4. Pada uji ANOVA dan Kruskal Wallis ekstrak kering air gambir sebagai
antiinflamasi dengan variasi dosis 3,5 mg/200 gBB, 7 mg/200 gBB dan 14
mg/200 gBB terdapat perbedaan secara bermakna terhadap kontrol negatif (p
≤ 0,05). Tetapi semua variasi dosis ini tidak memiliki perbedaan secara
bermakna (p ≥ 0,05) terhadap kontrol positif (natrium diklofenak) dengan
dosis 3,04 mg/200 gBB.
56
6.2 Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut pada ekstrak gambir yang berkhasiat
sebagai analgetik dan antiinflamasi dengan pelarut yang berbeda untuk
mengetahui pengaruh perbedaan pelarut dalam menghambat nyeri dan radang.
57
DAFTAR PUSTAKA
Almahdy, A. 2000. Skrining Hipokratik LD50, serta Efek Teratogenitas Uncaria gambir Roxb. Padang. Jurusan FMIPA Universitas Andalas. Dalam: Jurnal Sains dan Teknologi Famasi vol 6(2). Hal: 47-59
Anggraini, Wenni. 2008. Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Jambu
(Psidum guajava Linn.) Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar. Surakarta.: Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Anonym. 1995. Penapisan Farmakologi, pengujian Fitokimia dan Pengujian
Klinik Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam. Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI. 2007. Acuan Sediaan Herbal vol 3 Ed I. Jakarta: Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. Jakarta
Bowman, WC. Textbook of pharmacology 2nd ad. 1980. London : .Blackweell
Scientific Publication. Oxford. Hal 1315,1317. Brown, Dr. O. Phelps.2009. The Complete Herbalist.
http://chestofbooks.com/health/herbs/O-Phelps-Brown/The-Complete-Herbalist/Gambir-Plant-Uncaria-Gambir.html Diakses pada tanggal 29 Maret 2010 pukul 01.35 WIB
Carvalho, J.C.T., L.S. Santus, E.P. Vianna. 1999. Anti-Inflammatory and
Analgesic Activities of The Crude Extracts From Stem Bark of Bauhinia Guianensis. Journal Pharmaceutical Biology. Vol 37, no. 4, pp 281-284.
Departemen Kesehatan RI. 1989. Material Medika Jilid V. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. hal: 137 Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan
Obat. Jakarta.: Direktorat Jendral POM. hal :7-8; 10-11; 13-17 Esvandiary, Jeanne. Maria Firmina. Yosef Wijoyo. 2001. Efek Analgetik dan Efek
Antiinflamasi Beta Karoten Pada Mencit. Yogyakarta.: Fakultas Farmasi Universitas Santa Dharma Yogyakarta.
Fansworth, N. R. 1969. Biological and Phytochemical Screening of Plants.
Journal Pharmaceutical Science. hal 255-265 Green,Paul G., Solbritt Rantapa, Dahlqvist, William M. Isenberg, Holly J.
Strausbaugh, Frederick J.-P. Miao, and Jon D. Levine. 1999. Sex Steroid
58
Regulation of the Inflammatory Response: Sympathoadrenal Dependence in the Female Rat. Journal of Neuroscience: 19(10):4082–4089
Haryanto, Sugeng. 2009. Ensiklopedi Tanaman Obat Indonesia. Yogyakarta.
Pallmal: 183-184 Henderson, Velyien Ewart.2009. A Text-Book Of Materia Medica And Pharmacy
For Medical Students. http://chestofbooks.com/health/materia-medica-drugs/Text-Book-Materia-Medica-Pharmacy-Medical-Students/Catechu-Catechu.html Diakses pada tanggal 29 Maret 2010 pukul 02.07 WIB
Harmita., Radji, M. 2004. Buku Ajar analisis Hayati. Depok: Departemen
Farmasi FMIPA UI. Ganiswara, Sutistia G (editor). 1995. Farmakologi Dan Terapi edisi IV. Jakarta:
Departemen Kesehatan RI. Gunawan, Didik. 2004. Ilmu Obat Alam Farmakognosi Jilid I. Jakarta.: Penebar
Swadaya. hal:9. Hamid, Hinna, S.Tarique Abdullah, Asif Ali. 2004. Anti-Inflammatory and
Analgesic Activity of Uraria Logopoides. Journal Pharmaceutical Biology. Vol 42, no. 2, pp 114-116.
Harborne, JB. 1996. Metode Fitokimia Penuntun Cara modern Menganalisis
Tumbuhan. Bandung ITB .Terjemahan: Kosasih P, Soediro Iwang. Harmita., Radji, M. 2005. Buku Ajar analisis Hayati. Depok: Departemen
Farmasi FMIPA UI: 47-88 Haryanto, Sugeng. 2009. Ensiklopedi Tanaman Obat Indonesia. Yogyakarta.
Pallmal: 183-184 Katzung.G.Bertram 2001. Farmakologi Dasar dan Klinik Edisi VIII Bagian ke II.
Jakarta : Salemba Medika. Kress H. 2009. Gambir (Uncaria gambir).
http://www.henriettesherbal.com/plants/uncaria/gambir.html. Diakses pada tanggal 4 Maret 2010 pukul 19.25 WIB
Lieber, C.S., and Leo, M.A., 1999. Alcohol, Vitamin A and β Carotene: Adverse
Interactions, Including Hepatotoxicity and Carcinogenicity. Am. J. Clin. Nut. 69 (6), 1071-1085.
59
Lucida, Henny, Amri Bakhtiar, Wina Astari. 2007. Formulasi Sediaan Antiseptik Mulut dari Katekin Gambir.. Dalam: Jurnal Sains dan Teknologi Famasi vol 12(1). Padang.
Misra, Meena. 2009. The key to medicinal plants research revolves around the
detection, isolation, and characterisation of antioxidants as therapeutic agents. Journal of Medicinal Plants Research Vol. 3(10).
Mutschler, E. 1991. Dinamika Obat; Buku Ajar Farmakologi dan Toksikologi.
Edisi ke lima, diterjemahkan oleh Widianto, M. B. Dan A. S. Ranti. Bandung : Penerbit ITB. Pp 177-195.
Pambayun, Rindit.. 2007. Kandungan fenol dan sifat antibakteri dari berbagai
jenis ekstrak produk gambir (Uncaria gambir Roxb). Majalah Farmasia Indonesia 18(3): 141 – 146
Puguh. 2009. Gambir Dapat Mencegah Gangguan Perut dan Kanker.
http://puguh.com/2009/09/09/gambir-dapat-mencegah-gangguan-perut-dan-kanker/">. Diakses tanggal 28 Febuari 2010 pukul 21.54 WIB
Putri, Eka. 2001. Uji Efek Analgetik, Antipiretik dan Anti Inflamasi Ekstrak
Metanol Batang Brotowali (Tinospora crispa (L) Miers ex Hook. F. & Thems). Padang: Skripsi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam UNAND.
Reagan-Shaw S,. Nihal M and Ahmad N. 2008. Dose translation from animal to
human studies revisited. The FASEB Journal 2007, 22:659-661. http://www.fasebj.org. Diakses tanggal 4 Maret 2010 pukul 19.25 WIB
Ridwansyah. 2003. Pengolahan Kopi.
http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/776/1/tekper-ridwansyah4.pdf. Diakses pada tanggal 17 Juli 2010 pukul 22.29 WIB
Saha, Achinta, Mohammad A. Masud, Sitesh C. Bahtiar. 2007. The Analgesic and Anti-inflammatory Activities of The Extracts of Phyllantus reticulatus. Journal Pharmaceutical Biology.Vol 45 no.5, pp 355-359.
Santoso, S. Panduan Lengkap Menguasai SPSS 16. PT. Jakarta: Elex Media
Komputindo Kelompok Gramedia. 2008: 237-247. Setiawati, Arini, Zunilda S.B., F.D. Suyatna. 1995. Farmakologi dan Terapi edisi
V. Jakarta: Bagian Farmakologi. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Siswandono, M. S. 1995, Kimia Medisinal. 301-302. Surabaya: Airlangga Press.
Wade,Ainley (editor). 1992. Handbook of Pharmaceutical Excipients section II.78-79. London : The Pharmaceutical Press.
60
Suhendi, Andi, Kuswandi, Agung Endro Nugroho. 2003. Efek Analgetik Infusa
Daun Dewa (Gynura procumbens (Lour) Merr.) Pada Mencit Putih Jantan Galur DDY. Pharmaceutical Journal of Indonesia. Vol. 4, no. 2.
Tambunan, Armansyah., Solahudin. 2000. Simulasi Karakteristik Pengeringan
Beku Daging Sapi Giling. Bulletin Keteknikan Pertanian Vol 14: 1. Sukandar, Ellin Yulinah, Retnosari, Joseph I Sigit, I Ketut Adnyana. 2008. Iso
Farmakoterapi. Jakarta: PT. ISFI Penerbitan. Tjay, Tan Hoan, Kirana Rahardja. 2002. Obat-obat Penting. Jakarta: PT. Elex
Media Komputindo. Turner, R.A. 1965. Screening Methods in Pharmacology. New York: Academic
Press. Wilmana, P.F. 1995. Farmakologi dan Terapi edisi V. Jakarta: Bagian
Farmakologi. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
62
Lampiran 1. Gambar Alat dan Bahan Penelitian
Gambar 5: Bongkahan Gambir
Gambar 6: Hasil Freeze Drying
Gambir
Gambar 7: Hewan uji Mencit DDY
Gambar 8: Hewan uji Tikus SD
Gambar 9: Plethysmometer
62
Lampiran 2. Kegiatan Penelitian
Gambar 10: Freeze Drying Gambir
Gambar 11: Penyondean Zat Uji
Gambar 12: Penyuntikkan asam
asetat secara IP
Gambar 13 :mencit meregangkan
perutnya (writhing)
Gambar 14 : Penyuntikkan karagenan sec subplantar
62
Gambar 15: Radang pada telapak
kaki tikus
Ga
mbar 16: Pengukuran volume
radang tikus
Gambar 17: Identifikasi cemaran
gambir (urea)
62
68
Lampiran 7. Skema kerja (Pembuatan Ekstrak)
Gambir (sampel)
Determinasi gambir
1. Uji penapisan fitokimia 2. Uji cemaran urea
Serbuk
Uji efek analgetik
Ekstrak air Gambir
Uji efek antiinflamasi
Ekstrak kering gambir
Ekstrak uji 100,200,400 mg./KgBB
Ekstrak uji 50,100,200 mg./KgBB
Freeze drying
Dibuat infusa
69
Lampiran 8. Skema kerja uji analgetik
Perlakuan tiap Kelompok
Setiap ekor disuntikkan asam asetat 0,5% secara IP
Pengukuran jumlah geliat selama 30’ dengan interval waktu 5’
Analisa data
Kelompok Dosis
Rendah
Kontrol Negatif
Kelompok Dosis Tinggi
Kelompok Dosis
Sedang
Kontrol Positif
30’
5’
Persiapan Hewan Uji 25 ekor mencit
70
Lampiran 9. Skema kerja uji antiinflamasi
1 jam
1 jam
Persiapan Hewan Uji 25 ekor mencit
Timbang Berat Badan
Ukur Volume Telapak Kaki Kiri Belakang Tikus
Perlakuan tiap Kelompok
Masing-masing diinjeksikan suspensi karagenan 2%
Ukur Volume Telapak Kaki Kiri Belakang Tikus selama 4 jam interval waktu 15’
Analisa data
Kelompok Dosis
Rendah
Kontrol Negatif
Kelompok Dosis Tinggi
Kelompok Dosis
Sedang
Kontrol Positif
71
Lampiran 10. Rumus perhitungan dosis hewan dan tabel konversi dosis hewan
ke HED berdasarkan BSA (Reagan-Shaw dkk, 2008)
Tabel 10. Konversi Dosis Hewan ke HED Berdasarkan BSA
Species Weight (kg) BSA (m2) Km factor
Human
Adult 60 1.6 37
Chile 20 0.8 25
Baboon 12 0.6 20
Dog 10 0.5 20
Monkey 3 0.24 12
Rabbit 1.8 0.15 12
Guinea pig 0.4 0.05 8
Rat 0.15 0.025 6
Hamster 0.08 0.02 5
Mouse 0.02 0.007 3
72
Lampiran 11. Perhitungan Dosis Untuk Hewan Uji
Dosis gambir diperoleh berdasarkan kebiasaan penggunaan gambir di
masyarakat yaitu sekitar 250 mg-1250 mg perhari. Jika dirata-ratakan
penggunaan gambir adalah sekitar 350 mg perhari. Kemudian dari hasil
rendemen ekstrak air gambir diperoleh sekitar 48%.
Perhitungan dosis untuk uji analgetik pada mencit putih jantan
a. Dosis 1. Ekstrak air gambir 35 mg/KgBB 0,7 mg/20 gBB
350 mg x 48% = 168 mg
HED =
60168mg =
Dosis hewan = 34,5 mg/Kg 35 mg/ KgBB 0,7 mg/20 gBB
= ml5,0
gBB 20 x gBB 20mg/ 0,7
= 1,4 mg/ml
VAO = mlmg /4,1
gBB 20 x gBB 20mg/ 0,7
VAO = 0,5 ml
b. Dosis 2. Ekstrak air gambir 69 mg/KgBB 1,4 mg/20 gBB
700 mg x 48% = 336 mg
73
HED =
60336 =
Dosis hewan = 69 mg/Kg 1,38 mg/20 gBB 1,4 mg/20 gBB
= ml5,0
gBB 20 x gBB 20mg/ 1,4
= 2,8 mg/ml
VAO = mlmg /8,2
gBB 20 x gBB 20mg/ 1,4
VAO = 0,5 ml
c. Dosis 3. Ekstrak air gambir 138 mg/ KgBB 2,8 mg/20 gBB
1400 mg x 48%= 672 mg
HED =
60672 =
Dosis hewan = 138 mg/Kg 2,8 mg/20 gBB
= ml5,0
gBB 20 x gBB 20mg/ 2,8
= 5,6 mg/ml
74
VAO = mlmg /6,5
gBB 20 x gBB 20mg/ 2,8
VAO = 0,5 ml
Jadi dosis yang digunakan untuk uji analgetik adalah :
1) Dosis 1 (rendah) = 0,7 mg/20 gBB
2) Dosis 2 (sedang) = 1,4 mg/20 gBB
3) Dosis 3 (tinggi) = 2,8 mg/20 gBB
Perhitungan dosis untuk asam mafenamat 0,05% (Andi Suhedi, Kuswandi dan
Agung Endro Nugroho. 2003)
Dosis lazim asam mefenamat untuk manusia adalah 500 mg untuk sekali pakai.
Untuk dosis analgetik adalah 91 mg/kgBB mencit sekali pakai maka dosis yang
dapat diberikan pada mencit (20 gr) adalah:
VAO
= 0,364 ml
VAOtota l
75
Jumlah Asam mefenamat
Perhitungan dosis untuk uji antiinflamasi pada tikus putih betina
a. Dosis 1. Ekstrak air gambir 17,2 mg/KgBB 3,5 mg/200 gBB
350 mg x 48% = 168 mg
HED =
60168 =
376? x
Dosis hewan = 17,2 mg/Kg 3,5 mg/200 gBB
= ml2
gBB 200 x gBB 200mg/ 3,5
= 1,75 mg/ml
VAO = mlmg /75,1
gBB 200 x gBB 200mg/ 3,5
VAO = 2 ml
b. Dosis 2. Ekstrak air gambir 34,4 mg/KgBB 7 mg/200 gBB
700 mg x 48% = 336 mg
HED =
76
60336 =
376? x
Dosis hewan =34,4 mg/Kg 7 mg/200gBB
= ml2
gBB 200 x gBB 200mg/ 7
= 3,5 mg/ml
VAO = mlmg /5,3
gBB 200 x gBB 200mg/ 7
VAO = 2 ml
c. Dosis 3. Ekstrak air gambir 68,8 mg/ KgBB 14 mg/200 gBB
1400 mg x 48% = 672 mg
HED =
60672 =
376? x
Dosis hewan= 68,8 mg/Kg 14 mg/200 gBB
= ml2
gBB 200 x gBB 200mg/ 14
= 7 mg/ml
77
VAO = mlmg /7
gBB 200 x gBB 200mg/ 14
VAO = 2 ml
Jadi dosis yang digunakan untuk uji antiinflamasi adalah :
1) Dosis 1 (rendah) = 3,5 mg/200 gBB
2) Dosis 2 (sedang) = 7 mg/ 200 gBB
3) Dosis 3 (tinggi) = 14 mg/200 gBB
Perhitungan dosis natrium diklofenak ( Tjay dan Rahardja, 2007)
Dosis lazim diklofenak untuk manusia adalah 25 – 50 mg garam Na/K
untuk sekali pakai. Untuk dosis anti inflamasi adalah 25 - 50 mg sekali
pakai maka dosis yang dapat diberikan pada tikus (200 gr) adalah:
HED (mg/kg)
VAO
78
[ ] =
VAOtotal
Jumlah Diklofenak
79
Lampiran 12. Pemeriksaan Parameter Ekstrak
A. Perhitungan Perolehan Kembali Ekstrak yang didapat
B. Pemeriksaan Susut Pengeringan
Berat cawan kosong (A) = 19,0017
Berat cawan + sampel sebelum di oven (B )= 20,015
Berat cawan + sampel setelah di oven (C) = 19,9563
% Susut Pengeringan =
=
C. Pemeriksaan Kadar Abu
Berat cawan kosong (A) = 25,3726
Berat cawan + sampel sebelum di tanur (B) = 27,3829
Berat cawan + sampel setelah di tanur (C) = 25,3764
% Kadar Abu =
=
80
Lampiran 13. Data Pengamatan Geliat Mencit Selama Pengukuran Pada Uji
Efek Analgetik
Tabel 11. Data Pengamatan Geliat Mencit Pada Uji Efek Analgetik
Kel Perlakuan Dosis N Jumlah geliat menit ke 5’ 10’ 15’ 20’ 25’ 30’
1 Kontrol negatif 0,5 ml/20 gBB 1 47 42 42 41 21 19 (Asam asetat 0,5%) 2 40 38 37 29 22 14 3 45 37 35 35 29 15 Rata-rata 44 39 38 35 24 14,67 SD 3,61 2,65 3,61 6 4,36 2,64
2 Kontrol Positif 1,82 mg/20 gBB 1 30 24 17 16 15 14 (As. Mefenamat) 2 12 11 10 9 7 6 3 20 15 14 12 8 7 Rata-rata 20,67 16,67 13,67 12,33 10 9 SD 9,02 6,66 3,51 3,51 4,36 4,36
3 Ekstrak Air 0,7 mg/20 gBB 1 42 28 16 16 15 13 Gambir 2 37 30 22 19 11 10 3 45 40 31 23 15 10 Rata-rata 41,33 32.67 23 19,33 13,67 14 SD 4,04 6,42 7,54 3,51 2,3 1,73
4 Ekstrak Air 1,4 mg/20 gBB 1 18 17 14 7 4 2 Gambir 2 14 14 10 6 3 3 3 19 18 13 9 7 5 Rata-rata 17 16,33 12,33 7,33 4,67 3,33 SD 2,64 2,08 2,08 1,52 2,08 1,52
5 Ekstrak Air 2,8 mg/20 gBB 1 32 27 27 26 17 10 Gambir 2 26 26 22 19 15 9 3 40 22 22 13 11 8 Rata-rata 32,67 25 23,67 19,33 14,33 9 SD 7,02 2,64 2,88 6,5 3,05 4,35
81
Lampiran 14. Data Persentase Proteksi Analgetik
Tabel 12. Data Persentase Proteksi Analgetik
No Kelompok Perlakuan N Rata-rata kumulatif
% proteksi analgetik
1 NaCMC 1% 0,5 ml/20 gBB 1 38.6 0 2 33.2 0 3 36.2 0 Rata-rata 0
2 Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB 1 20.4 47.15 2 9.8 70.48 3 13.8 61.88 Rata-rata 59.84
3 Ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB 1 23.4 39.38 2 23.8 28.31 3 30.8 14.92 Rata-rata 27.54
4 Ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB 1 12 68.91 2 9.4 71.69 3 13.2 63.53 Rata-rata 68.04
5 Ekstrak air gambir 2,8 mg/20 gBB 1 25.8 33.16 2 21.6 34.94 3 21.6 40.33 Rata-rata 36.14
82
Contoh perhitungan:
Pada kelompok Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB:
83
Lampiran 15. Hasil Pengamatan Radang Pada Uji Antiinflamasi
Tabel 13. Hasil Pengamatan Radang Pada Uji Antiinflamasi
Kel Perlakuan Dosis N Volume radang (ml) selama 4 jam
pengamatan 0 1 2 3 4 5 1 Kontrol negative 2 ml/200 gBB 1 0,18 0,40 0,44 0,46 0,46 0,44 (NaCl 0,9%) 2 0,18 0,42 0,44 0,46 0,46 0,44 3 0,22 0,40 0,48 0,48 0,52 0,48 Rata-rata 0,19 0,41 0,45 0,47 0,48 0,45 SD 0,02 0,01 0,02 0,01 0,03 0,02
2 Kontrol Positif 1,03mg/200grBB 1 0,20 0,24 0,30 0,32 0,36 0,34 (Na diklofenak) 2 0,20 0,26 0,32 0,34 0,36 0,32 3 0,24 0,34 0,40 0,42 0,48 0,46 Rata-rata 0,21 0,28 0,35 0,36 0,40 0,37 SD 0,02 0,05 0,05 0,05 0,06 0,07 3 Dosis 1 3,5 mg/200 gBB 1 0,20 0,30 0,34 0,38 0,40 0,36 (rendah) 2 0,22 0,30 0,36 0,36 0,36 0,34 3 0,20 0,32 0,38 0,40 0,42 0,40 Rata-rata 0,21 0,31 0,36 0,38 0,39 0,37 SD 0,01 0,02 0,02 0,02 0,03 0,03 4 Dosis 2 7 mg/200 gBB 1 0,24 0,28 0,30 0,34 0,38 0,34 (sedang) 2 0,20 0,26 0,30 0,34 0,36 0,34 3 0,20 0,24 0,32 0,36 0,38 0,36 Rata-rata 0,21 0,26 0,31 0,35 0,37 0,35 SD 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,01 5 Dosis 3 14 mg/200 gBB 1 0,20 0,34 0,36 0,38 0,40 0,36 (tinggi) 2 0,22 0,32 0,36 0,40 0,42 0,38 3 0,22 0,34 0,34 0,38 0,40 0,38 Rata-rata 0,21 0,36 0,38 0,40 0,42 0,38 SD 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01
84
Lampiran 16. Hasil Persentase Radang Telapak Kaki Tikus
Tabel 14. Hasil Persentase Radang Telapak Kaki Tikus
Kel Perlakuan Dosis N Waktu pengamatan (jam) 0 1 2 3 4 5 1 Kontrol negative 2 ml/200 gBB 1 0 122,22 144,44 155,55 155,55 144,44 (NaCl 0,9%) 2 0 133,33 144,44 155,55 155,55 144,44 3 0 81,81 118,18 118,18 136,36 118,18 Rata-rata 0 112,45 135,69 143,09 149,15 135,69 SD 0 27,11 15,16 21,57 11,08 15,16 2 Kontrol Positif 1,03 mg/200grBB 1 0 20 50 60 80 70 (Na diklofenak) 2 0 30 60 70 80 60 3 0 41,67 66,67 75 100 91,67 Rata-rata 0 30,55 58,89 68,33 86,67 73,89 SD 0 10,85 8,39 7,64 11,55 19,51 3 Dosis 1 3,5 mg/200 gBB 1 0 50 70 90 100 80 (rendah) 2 0 36,36 63,63 63,63 63,63 54,54 3 0 60 90 100 110 100 Rata-rata 0 48,78 74,54 84,54 91,21 78,18 SD 0 11,87 13,76 18,78 24,40 22,78 4 Dosis 2 7 mg/200 gBB 1 0 16,67 25 41,62 58,33 41,67 (sedang) 2 0 30 50 70 80 70 3 0 20 60 80 90 80 Rata-rata 0 22,22 45 63,87 76,11 63,89 SD 0 6,93 18,03 19,91 16,18 19,88 5 Dosis 3 14 mg/200 gBB 1 0 70 80 90 100 80 (tinggi) 2 0 45,45 63,63 81,81 90,9 72,72 3 0 54,54 54,54 72,72 81,81 72,72 Rata-rata 0 56,66 66,06 81,51 90,9 75,15
SD 0 12,41 12,90 8,64 9,09 4,20
85
Contoh perhitungan :
Pada Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB :
86
Lampiran 17. Hasil Persentase Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus
Tabel 15. Hasil Persentase Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus
Kel Perlakuan Dosis N Waktu pengamatan (jam) 0 1 2 3 4 5
1 Kontrol negative 2 ml/200 gBB 1 0 122,22 144,44 155,55 155,55 144,44 (NaCl 0,9%) 2 0 133,33 144,44 155,55 155,55 144,44 3 0 81,81 118,18 118,18 136,36 118,18 Rata-rata 0 112,45 135,69 143,09 149,15 135,69 SD 0 27,11 15,16 21,57 11,08 15,16
2 Kontrol Positif 1,03 mg/200grBB 1 0 83,63 65,38 61,43 48,57 51,54 (Na diklofenak) 2 0 77,49 58,46 54,99 48,57 58,46 3 0 49 43,58 36,54 26,67 22,43 Rata-rata 0 70,04 55,81 50,99 41,27 44,14 SD 0 18,47 11,14 12,92 12,64 19,12
3 Dosis 1 3,5 mg/200 gBB 1 0 59,09 51,54 42,14 35,71 44,61 (rendah) 2 0 72,72 55,95 59,09 59,09 62,24 3 0 26,66 23,84 15,38 19,33 15,38 Rata-rata 0 52,82 43,77 38,87 38,04 40,74 SD 0 23,66 17,41 18,12 18,88 19,66
4 Dosis 2 7 mg/200 gBB 1 0 86,36 82,69 73,24 62,50 71,15 (sedang) 2 0 77,49 65,38 54,99 48,57 51,54 3 0 75,55 49,22 32,20 33,99 32,31 Rata-rata 0 79,8 65,76 53,48 48,35 51,67 SD 0 5,76 16,73 20,56 14,26 19,42
5 Dosis 3 14 mg/200 gBB 1 0 42,73 44,61 42,14 35,71 44,61 (tinggi) 2 0 65,91 55,94 47,40 41,56 49,65 3 0 33,33 53,85 38,47 40 38,47 Rata-rata 0 47,32 51,47 42,67 39,09 44,24 SD 0 16,77 6,03 4,49 3,03 5,59
87
Contoh perhitungan :
Pada Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB :
88
Lampiran 18. Hasil Statistik Uji Efek Analgetik
1. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov dan Uji Homogenitas Levene Terhadap
Geliat Menciat Tiap 5 Menit Pada Tiap Kelompok Perlakuan
a. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov
Tujuan : untuk mengetahui kenormalan data sebagai syarat uji ANOVA
Hipotesis
Ho : Data geliat mencit yang terdistribusi normal
Ha : Data geliat mencit yang tidak terdistribusi normal
Pengambilan keputusan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima
Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak
Tabel 16. Uji Normalitas ANOVA pada Analgetik
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
ProteksiAnalg
etik
N 15
Normal Parametersa,,b Mean 38.3120
Std. Deviation 25.97856
Most Extreme
Differences
Absolute .151
Positive .130
Negative -.151
Kolmogorov-Smirnov Z .586 Asymp. Sig. (2-tailed) .883
89
a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.
Keputusan : Ho diterima artinya uji normalitas geliat pada mencit seluruh
kelompok hewan uji terdistribusi normal
Kesimpulan : hasil data signifikansi (ρ = 0,883) lebih besar dari 0,05. Hal
ini menunjukkan distribusi data normal.
b. Uji Homogenitas Levene
Tujuan : Untuk melihat data geliat pada menit homogeny atau tidak
Hipotesis
Ho : Data geliat mencit bervariasi homogen
Ha : Data geliat mencit bervariasi tidak homogen
Pengambilan keputusan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho doiterima
Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak
90
Tabel 17. Uji Homogenitas ANOVA pada Analgetik
Test of Homogeneity of Variances
ProteksiAnalgetik
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.587 4 10 .102
Keputusan : Uji homogenitas geliat pada mencit seluruh kelompok hewan
uji bervariasi homogen
Kesimpulan : Data signifikansi (ρ = 0,102) lebih besar dari 0,05. Hal ini
menunjukkan data bervariasi homogen.
c. Uji Anava Satu Arah dan BNT (Beda Nyata Terkecil) terhadap geliat
mencit
Tujuan : Untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan data geliat pada
mencit
Hipotesis
Ho : Data geliat mencit tidak berbeda secara bermakna
Ha : Data geliat mencit berbeda secara bermakna
Pengambilan Keputusan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima
Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak
91
Tabel 18. Uji ANOVA pada Analgetik
ANOVA ProteksiAnalgetik Sum of
Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups 8807.651 4 2201.913 34.365 .000 Within Groups 640.746 10 64.075
Total 9448.397 14
Kesimpulan : Data geliat mencit ρ = 0,00 (ρ ≤ 0,05) berarti Ho ditolak dan Ha
diterima atau data geliat mencit berbeda secara bermakna maka dilanjutkan
dengan uji BNT menggunakan metode LSD. Uji BNT merupakan uji lanjutan
yang dilakukan apabila hasil pengujian menunjukkan adanya perbedaan
secara bermakna. Tujuannya adalah untuk menentukan kelompok mana yang
memberikan nilai yang berbeda secara bermakna dengan kelompok lainnya.
Tabel 19. Uji Bobot Nyata Terkecil pada Analgetik
Multiple Comparisons ProteksiAnalgetik LSD
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean Difference (I-
J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
Negatif Positif -59.83667* 6.53578 .000 -74.3993 -45.2740
Dosis 1 -27.53667* 6.53578 .002 -42.0993 -12.9740
Dosis 2 -68.04333* 6.53578 .000 -82.6060 -53.4807
Dosis 3 -36.14333* 6.53578 .000 -50.7060 -21.5807
92
Positif Negatif 59.83667* 6.53578 .000 45.2740 74.3993
Dosis 1 32.30000* 6.53578 .001 17.7374 46.8626
Dosis 2 -8.20667 6.53578 .238 -22.7693 6.3560
Dosis 3 23.69333* 6.53578 .005 9.1307 38.2560
Dosis 1 Negatif 27.53667* 6.53578 .002 12.9740 42.0993
Positif -32.30000* 6.53578 .001 -46.8626 -17.7374
Dosis 2 -40.50667* 6.53578 .000 -55.0693 -25.9440
Dosis 3 -8.60667 6.53578 .217 -23.1693 5.9560
Dosis 2 Negatif 68.04333* 6.53578 .000 53.4807 82.6060
Positif 8.20667 6.53578 .238 -6.3560 22.7693
Dosis 1 40.50667* 6.53578 .000 25.9440 55.0693
Dosis 3 31.90000* 6.53578 .001 17.3374 46.4626
Dosis 3 Negatif 36.14333* 6.53578 .000 21.5807 50.7060
Positif -23.69333* 6.53578 .005 -38.2560 -9.1307
Dosis 1 8.60667 6.53578 .217 -5.9560 23.1693
Dosis 2 -31.90000* 6.53578 .001 -46.4626 -17.3374 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Kesimpulan:
1. Pada kontrol negatif (NaCMC 1% 0,5 ml/20 gBB) terdapat perbedaan
secara bermakna dengan kontrol positif, (Asam mefenamat 1,82 mg/20
gBB) kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB), dosis 2
(ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB) dan dosis 3 (ekstrak air gambir 2,8
mg/20 gBB). Hal ini terlihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
2. Pada kontrol positif (Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB) terdapat tidak
ada perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 2 (ekstrak air
gambir 1,4 mg/20 gBB) karena nilai signifikansi ρ = 0,238 (ρ ≥ 0,05)
93
tetapi terdapat perbedaan secara bermakna dengan kontrol negatif dan
kelompok dosis 1 dan 3, terlihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
3. Pada kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB) terdapat tidak
ada perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 3 (ekstrak air
gambir 2,8 mg/20 gBB) karena nilai signifikansi ρ = 0,217 (ρ ≥ 0,05)
tetapi terdapat perbedaan secara bermakna dengan kontrol negatif, kontrol
positif dan kelompok dosis 2, terlihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
4. Pada kelompok dosis 2 (ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB) tidak ada
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif (Asam mefenamat
1,82 mg/20 gBB) karena nilai signifikansi ρ = 0,238 (ρ ≥ 0,05) tetapi
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kontrol negatif dan kelompok
dosis 1 dan 3, terlihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
5. Pada kelompok dosis 3 (ekstrak air gambir 2,8 mg/20 gBB) tidak ada
perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir
0,7 mg/20 gBB) karena nilai signifikansi ρ = 0,217 (ρ ≥ 0,05) tetapi
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kontrol negatif, kontrol
positif dan kelompok dosis 2, terlihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
94
Lampiran 19. Hasil Uji Efek Antiinflamasi
1. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov dan Uji Homogenitas Levene terhadap
persen penghambatan udem kaki tikus
a. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov
Tujuan : untuk mengetahui kenormalan data sebagai syarat uji ANOVA
Hipotesis
Ho : Data persen penghambatan udem kaki tikus yang terdistribusi normal
Ha :Data persen penghambatan udem kaki tikus yang tidak terdistribusi
normal
Pengambilan keputusan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima
Jika nilai signifikansi ≤ maka 0,05 Ho ditolak
Tabel 20. Uji Normalitas ANOVA pada Antiinflamasi One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Jam1 Jam2 Jam3 Jam4 Jam5
N 15 15 15 15 15 Normal Parametersa,,b Mean 49.9973 43.8160 37.2007 34.0180 36.1593
Std. Deviation 31.44801 25.94830 23.61241 20.47289 23.54744 Most Extreme Differences
Absolute .165 .246 .156 .233 .173 Positive .144 .154 .142 .152 .138 Negative -.165 -.246 -.156 -.233 -.173
Kolmogorov-Smirnov Z .639 .951 .602 .902 .672 Asymp. Sig. (2-tailed) .809 .326 .861 .391 .757 a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.
95
Keputusan : Ho diterima artinya uji normalitas udem kaki tikus seluruh
kelompok hewan uji terdistribusi normal
b. Uji Homogenitas Levene
Tujuan : Untuk melihat data persen penghambatan udem kaki tikus homogen
atau tidak
Hipotesis
Ho : Data persen penghambatan udem kaki tikus bervariasi homogen
Ha : Data persen penghambatan udem kaki tikus bervariasi tidak homogen
Pengambilan keputusan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho doiterima
Jika nilai signifikansi ≤ maka 0,05 Ho ditolak
Tabel 21. Uji Homogenitas ANOVA pada Antiinflamasi
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
Jam1 3.807 4 10 .039 Jam2 2.559 4 10 .104 Jam3 2.562 4 10 .104 Jam4 2.710 4 10 .092 Jam5 2.540 4 10 .106
96
Keputusan : Uji normalitas persen penghambatan udem kaki tikus seluruh
kelompok perlakuan bervariasi homogen karena
signifikansinya ρ ≥ 0,05 kecuali pada jam 1 ρ ≤ 0,05 (ρ = 0,039)
Kesimpulan : Data persen penghambatan udem kaki tikus pada jam 1 tidak
dapat memenuhi syarat ANOVA sehingga dilanjutkan dengan
uji Kruskal Wallis
d. Uji Anava Satu Arah terhadap geliat mencit
Tujuan : Untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan data geliat pada
mencit
Hipotesis
Ho : Data geliat mencit tidak berbeda secara bermakna
Ha : Data geliat mencit berbeda secara bermakna
Pengambilan Keputusan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima
Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak
97
Tabel 22. Uji ANOVA pada Antiinflamasi
ANOVA
Sum of
Squares Df Mean Square F Sig.
Jam1 Between Groups 11414.332 4 2853.583 11.737 .001
Within Groups 2431.349 10 243.135
Total 13845.681 14
Jam2 Between Groups 7940.599 4 1985.150 13.361 .001
Within Groups 1485.800 10 148.580
Total 9426.399 14
Jam3 Between Groups 5614.656 4 1403.664 6.407 .008
Within Groups 2190.987 10 219.099
Total 7805.643 14
Jam4 Between Groups 4550.112 4 1137.528 8.632 .003
Within Groups 1317.836 10 131.784
Total 5867.948 14
Jam5 Between Groups 5094.249 4 1273.562 4.773 .021
Within Groups 2668.498 10 266.850
Total 7762.747 14
98
Kesimpulan : Data persen penghambatan udem telapak kaki tikus memiliki
signifikansi (ρ ≤ 0,05) berarti Ho ditolak dan Ha diterima atau data persen
penghambatan udem telapak kaki tikus berbeda secara bermakna maka
dilanjutkan dengan uji BNT menggunakan metode LSD. Uji BNT merupakan
uji lanjutan yang dilakukan apabila hasil pengujian menunjukkan adanya
perbedaan secara bermakna. Tujuannya adalah untuk menentukan kelompok
mana yang memberikan nilai yang berbeda secara bermakna dengan
kelompok lainnya.
e. Uji Kruskal Wallis dan BNT (Beda Nyata Terkecil) terhadap persen
penghambatan udem kaki tikus
Tujuan : Untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan persen
penghambatan udem kaki tikus karena tidak memenuhi syarat
pengujian ANOVA
Hipotesis
Ho :Data persen penghambatan udem kaki tikus tidak berbeda secara
bermakna
Ha : Data persen penghambatan udem kaki tikus berbeda secara bermakna
Pengambilan keputusan
Jika nilai signifikansinya ≥ 0,05 maka Ho diterima
Jika nilai signifikansinya ≤ 0,05 maka Ho ditolak
99
Tabel 23.Uji Kurskal Wallis pada Antiinflamasi Jam1
Test Statisticsa,b
Jam1
Chi-Square 10.838
Df 4
Asymp. Sig. .028
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
Keputusan : Uji kurskal wallis persen penghambatan udem kaki tikus
signifikansinya ρ ≤ 0,05 (ρ = 0,028) berarti Ho ditolak atau
adanya perbedaan secara bermakna di semua perlakuan
kelompok
Kesimpulan : Data persen penghambatan udem kaki tikus terhadap perbedaan
secara bermakna maka dilanjutkan dengan uji BNT menggunakan metode
LSD. Uji BNT merupakan uji lanjutan yang dilakukan apabila hasil pengujian
menunjukkan adanya perbedaan secara bermakna. Tujuannya adalah untuk
menentukan kelompok mana yang memberikan nilai yang berbeda secara
bermakna dengan kelompok lainnya.
100
Tabel 24. Uji Bobot Nyata Terkecil pada Antiinflamasi
Multiple Comparisons
LSD
Depe
ndent
Varia
ble
(I)
Kelom
pok
(J)
Kelomp
ok
Mean
Difference (I-
J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
Jam1 Negatif Positif -70.04000* 12.73145 .000 -98.4074 -41.6726
Dosis 1 -52.82333* 12.73145 .002 -81.1908 -24.4559
Dosis 2 -79.80000* 12.73145 .000 -108.1674 -51.4326
Dosis 3 -47.32333* 12.73145 .004 -75.6908 -18.9559
Positif Negatif 70.04000* 12.73145 .000 41.6726 98.4074
Dosis 1 17.21667 12.73145 .206 -11.1508 45.5841
Dosis 2 -9.76000 12.73145 .461 -38.1274 18.6074
Dosis 3 22.71667 12.73145 .105 -5.6508 51.0841
Dosis 1 Negatif 52.82333* 12.73145 .002 24.4559 81.1908
Positif -17.21667 12.73145 .206 -45.5841 11.1508
Dosis 2 -26.97667 12.73145 .060 -55.3441 1.3908
Dosis 3 5.50000 12.73145 .675 -22.8674 33.8674
101
Dosis 2 Negatif 79.80000* 12.73145 .000 51.4326 108.1674
Positif 9.76000 12.73145 .461 -18.6074 38.1274
Dosis 1 26.97667 12.73145 .060 -1.3908 55.3441
Dosis 3 32.47667* 12.73145 .029 4.1092 60.8441
Dosis 3 Negatif 47.32333* 12.73145 .004 18.9559 75.6908
Positif -22.71667 12.73145 .105 -51.0841 5.6508
Dosis 1 -5.50000 12.73145 .675 -33.8674 22.8674
Dosis 2 -32.47667* 12.73145 .029 -60.8441 -4.1092
Jam2 Negatif Positif -56.40667* 9.95255 .000 -78.5823 -34.2310
Dosis 1 -43.77667* 9.95255 .001 -65.9523 -21.6010
Dosis 2 -65.76333* 9.95255 .000 -87.9390 -43.5877
Dosis 3 -53.13333* 9.95255 .000 -75.3090 -30.9577
positif Negatif 56.40667* 9.95255 .000 34.2310 78.5823
Dosis 1 12.63000 9.95255 .233 -9.5457 34.8057
Dosis 2 -9.35667 9.95255 .369 -31.5323 12.8190
Dosis 3 3.27333 9.95255 .749 -18.9023 25.4490
Dosis 1 Negatif 43.77667* 9.95255 .001 21.6010 65.9523
positif -12.63000 9.95255 .233 -34.8057 9.5457
Dosis 2 -21.98667 9.95255 .052 -44.1623 .1890
102
Dosis 3 -9.35667 9.95255 .369 -31.5323 12.8190
Dosis 2 Negatif 65.76333* 9.95255 .000 43.5877 87.9390
positif 9.35667 9.95255 .369 -12.8190 31.5323
Dosis 1 21.98667 9.95255 .052 -.1890 44.1623
Dosis 3 12.63000 9.95255 .233 -9.5457 34.8057
Dosis 3 Negatif 53.13333* 9.95255 .000 30.9577 75.3090
positif -3.27333 9.95255 .749 -25.4490 18.9023
Dosis 1 9.35667 9.95255 .369 -12.8190 31.5323
Dosis 2 -12.63000 9.95255 .233 -34.8057 9.5457
Jam3 Negatif positif -50.98667* 12.08577 .002 -77.9154 -24.0579
Dosis 1 -38.87000* 12.08577 .009 -65.7988 -11.9412
Dosis 2 -53.47667* 12.08577 .001 -80.4054 -26.5479
Dosis 3 -42.67000* 12.08577 .005 -69.5988 -15.7412
Positif Negatif 50.98667* 12.08577 .002 24.0579 77.9154
Dosis 1 12.11667 12.08577 .340 -14.8121 39.0454
Dosis 2 -2.49000 12.08577 .841 -29.4188 24.4388
Dosis 3 8.31667 12.08577 .507 -18.6121 35.2454
Dosis 1 Negatif 38.87000* 12.08577 .009 11.9412 65.7988
positif -12.11667 12.08577 .340 -39.0454 14.8121
103
Dosis 2 -14.60667 12.08577 .255 -41.5354 12.3221
Dosis 3 -3.80000 12.08577 .760 -30.7288 23.1288
Dosis 2 Negatif 53.47667* 12.08577 .001 26.5479 80.4054
Positif 2.49000 12.08577 .841 -24.4388 29.4188
Dosis 1 14.60667 12.08577 .255 -12.3221 41.5354
Dosis 3 10.80667 12.08577 .392 -16.1221 37.7354
Dosis 3 Negatif 42.67000* 12.08577 .005 15.7412 69.5988
Positif -8.31667 12.08577 .507 -35.2454 18.6121
Dosis 1 3.80000 12.08577 .760 -23.1288 30.7288
Dosis 2 -10.80667 12.08577 .392 -37.7354 16.1221
Jam4 Negatif Positif -44.60333* 9.37314 .001 -65.4880 -23.7187
Dosis 1 -38.04333* 9.37314 .002 -58.9280 -17.1587
Dosis 2 -48.35333* 9.37314 .000 -69.2380 -27.4687
Dosis 3 -39.09000* 9.37314 .002 -59.9747 -18.2053
positif Negatif 44.60333* 9.37314 .001 23.7187 65.4880
Dosis 1 6.56000 9.37314 .500 -14.3247 27.4447
Dosis 2 -3.75000 9.37314 .698 -24.6347 17.1347
Dosis 3 5.51333 9.37314 .569 -15.3713 26.3980
Dosis 1 Negatif 38.04333* 9.37314 .002 17.1587 58.9280
104
positif -6.56000 9.37314 .500 -27.4447 14.3247
Dosis 2 -10.31000 9.37314 .297 -31.1947 10.5747
Dosis 3 -1.04667 9.37314 .913 -21.9313 19.8380
Dosis 2 Negatif 48.35333* 9.37314 .000 27.4687 69.2380
positif 3.75000 9.37314 .698 -17.1347 24.6347
Dosis 1 10.31000 9.37314 .297 -10.5747 31.1947
Dosis 3 9.26333 9.37314 .346 -11.6213 30.1480
Dosis 3 Negatif 39.09000* 9.37314 .002 18.2053 59.9747
positif -5.51333 9.37314 .569 -26.3980 15.3713
Dosis 1 1.04667 9.37314 .913 -19.8380 21.9313
Dosis 2 -9.26333 9.37314 .346 -30.1480 11.6213
Jam5 Negatif positif -44.14333* 13.33791 .008 -73.8620 -14.4246
Dosis 1 -40.74333* 13.33791 .012 -70.4620 -11.0246
Dosis 2 -51.66667* 13.33791 .003 -81.3854 -21.9480
Dosis 3 -44.24333* 13.33791 .008 -73.9620 -14.5246
positif Negatif 44.14333* 13.33791 .008 14.4246 73.8620
Dosis 1 3.40000 13.33791 .804 -26.3187 33.1187
Dosis 2 -7.52333 13.33791 .585 -37.2420 22.1954
Dosis 3 -.10000 13.33791 .994 -29.8187 29.6187
105
Dosis 1 Negatif 40.74333* 13.33791 .012 11.0246 70.4620
positif -3.40000 13.33791 .804 -33.1187 26.3187
Dosis 2 -10.92333 13.33791 .432 -40.6420 18.7954
Dosis 3 -3.50000 13.33791 .798 -33.2187 26.2187
Dosis 2 Negatif 51.66667* 13.33791 .003 21.9480 81.3854
positif 7.52333 13.33791 .585 -22.1954 37.2420
Dosis 1 10.92333 13.33791 .432 -18.7954 40.6420
Dosis 3 7.42333 13.33791 .590 -22.2954 37.1420
Dosis 3 Negatif 44.24333* 13.33791 .008 14.5246 73.9620
positif .10000 13.33791 .994 -29.6187 29.8187
Dosis 1 3.50000 13.33791 .798 -26.2187 33.2187
Dosis 2 -7.42333 13.33791 .590 -37.1420 22.2954
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Kesimpulan :
1. Pada jam 1, kontrol negatif (NaCl 0,9% 2ml/200 gBB) terdapat
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif, (Na diklofenak 3,04
mg/200 gBB) kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB),
dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan dosis 3 (ekstrak air
gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
106
2. Pada jam 1, kontrol positif, (Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB) tidak
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air
gambir 3,5 mg/200 gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan
dosis 3 (ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ
≥ 0,05 tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif (NaCl
0,9% 2ml/200 gBB), dilihat dari nilai signifikansi ρ = 0,00 (ρ ≤ 0,05).
3. Pada jam 2, kontrol negatif (NaCl 0,9% 2ml/200 gBB) terdapat
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif (Na diklofenak 1,03
mg/200 gBB) kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB),
dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan dosis 3 (ekstrak air
gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
4. Pada jam 2, kontrol positif (Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB) tidak
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air
gambir 3,5 mg/200 gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan
dosis 3 (ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ
≥ 0,05 tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif (NaCl
0,9% 2ml/200 gBB), dilihat dari nilai signifikansi ρ = 0,00 (ρ ≤ 0,05).
5. Pada jam 3, kontrol negatif (NaCl 0,9% 2ml/200 gBB) terdapat
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif (Na diklofenak 1,03
mg/200 gBB) kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB),
dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan dosis 3 (ekstrak air
gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
107
6. Pada jam 3, kontrol positif (Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB) tidak
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air
gambir 3,5 mg/200 gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan
dosis 3 (ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ
≥ 0,05 tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif (NaCl
0,9% 2ml/200 gBB), dilihat dari nilai signifikansi ρ = 0,00 (ρ ≤ 0,05).
7. Pada jam 4, kontrol negatif (NaCl 0,9% 2ml/200 gBB) terdapat
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif (Na diklofenak 1,03
mg/200 gBB) kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB),
dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan dosis 3 (ekstrak air
gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
8. Pada jam 4, kontrol positif (Na diklofenak 3,04 mg/200 gBB) tidak
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air
gambir 3,5 mg/200 gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan
dosis 3 (ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ
≥ 0,05 tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif (NaCl
0,9% 2ml/200 gBB), dilihat dari nilai signifikansi ρ = 0,00 (ρ ≤ 0,05).
9. Pada jam 5, kontrol negatif (NaCl 0,9% 2ml/200 gBB) terdapat
perbedaan secara bermakna dengan kontrol positif (Na diklofenak 1,03
mg/200 gBB) kelompok dosis 1 (ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB),
dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan dosis 3 (ekstrak air
gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ ≤ 0,05.
108
10. Pada jam 4, kontrol positif (Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB) tidak
terdapat perbedaan secara bermakna dengan kelompok dosis 1 (ekstrak air
gambir 3,5 mg/200 gBB), dosis 2 (ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB), dan
dosis 3 (ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB) dilihat dari nilai signifikansi ρ
≥ 0,05 tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif (NaCl
0,9% 2ml/200 gBB), dilihat dari nilai signifikansi ρ = 0,00 (ρ ≤ 0,05).
UJI EFEK ANALGETIK DAN ANTIINFLAMASI EKSTRAK AIR GAMBIR (Uncaria gambir Roxb)
SECARA IN VIVO
Disusun Oleh:GITA PERMATA SARI
106102003392
Pembimbing 1 : Drs. Ahmad Musir, M.Sc, Apt.Pembimbing 2 : Azryfitri, M.Si, Apt.
PROGRAM STUDI FARMASIFAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) SYARIF HIDAYATULLAHJAKARTA
2010
B A B I
P E N D A H U L U A N
LATAR BELAKANG Menguji manfaat ekstrak air gambir (Uncaria gambir
Roxb) sebagai analgetik dan antiinflamasi secara invivo
Mengembangkan obat tradisiolnal khususnya gambir sbagai obat analgetik dan antiinflamasi
PERMASALAHAN MASALAH
Apakah ekstrak air gambir (Uncaria gambir Roxb)
memiliki aktivitas analgetik dan antiinflamasi yang
diberi secara oral pada mencit dan tikus putih jantan.
HIPOTESA
Ekstrak air gambir (Uncaria gambir Roxb) memiliki
aktivitas analgetik dan antiinflamasi yang diberi
secara oral pada mencit putih jantan dan tikus putih
jantan.
TUJUAN PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan untuk menguji pengaruh
pemberian ekstrak air gambir (Uncaria gambir Roxb)
terhadap pengurangan rasa nyeri pada mencit putih
jantan dan radang (inflamasi) pada tikus putih jantan
dalam berbagai konsentrasi dengan asetosal dan
natrium diklofenak sebagai pembanding.
MANFAAT PENELITIAN
1) Penelitian diharapkan memberikan informasi ilmiah
mengenai aktivitas analgetik dan antiinflamasi dari
ekstrak air gambir (Uncaria gambir Roxb).
2) Untuk pengembangan penggunaan zat analgetik dan
antiinflamasi yang berasal dari ekstrak gambir (Uncaria
gambir Roxb) sebagai bahan pengganti analgetik dan
antiinflamasi.
3) Sebagai dasar penelitian lebih lanjut dalam usaha
pengembangan obat tradisional lain sebagai upaya
peningkatan kesehatan masyarakat.
B A B I I
T I N J A U A N P U S T A K A
GAMBIRKlasifikasi tumbuhan gambir :
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Asteridae
Familia : Rubiaceae
Genus : Uncaria
Spesies : Uncaria gambir Roxb
KANDUNGAN KIMIAKandungan yang utama adalah flavonoid (terutama gambirin),
katekin (sampai 51%), zat penyamak. Kandungan gambir lain adalah asam
catechutannat, guersetin, catechu merah, gambir flouresein, abu, asam
lemak, lilin, alkaloid tannin (BPOM RI, 2007).
EKSTRAKSI
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia
yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang
tidak dapat larut dengan pelarut cair (Harbone,
1996).
INFUNDANSI
Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada
temperatur penangas air, temperatur terukur 96o-
98oC selama waktu tertentu (15-20 menit) (DepKes
RI, 2000).
Serbuk gambirSerbuk gambir
Dipanaskan dengan penambahanaquades selama 15 menit
Dipanaskan dengan penambahanaquades selama 15 menit
Saring panas menggunakankapas
Saring panas menggunakankapas
Filtrat gambirFiltrat gambir
Freeze dryingFreeze drying
NYERI/ ANALGETIK
Nyeri adalah gejala penyakit atau kerusakan yang
paling sering. Walaupun nyeri sering berfungsi
untuk mengingatkan dan melindungi serta sering
memudahkan diagnosis, pasien merasakannya
sebagai hal yang tidak mengenakkan.
PENGUJIAN EFEK ANALGETIK
Metode tgail- clip
Metode green
Metode dengan rangsang panas
Metode peritoneal test
Metode podolorimeter
Metode rectodolorimeter
INFLAMASI
Inflamasi adalah respon terhadap cedera
jaringan dan infeksi.
Ciri khas inflamasi adalah :
Eritema
Edema
Kolor
Dolor
PENGUJIAN EFEK ANTIINFLAMASI
Pengujian berdasarkan penghambatan udem yang ditimbulkan oleh iritan yang pada telapak kaki mencit
Pengujian berdasarkan penghambatan leukositterhadap peritonitis
Pengujian berdasarkan penghambatan pembentukaneritema dengan radiasi ultra violet
Pengujian berdasarkan metode granuloma pouch
Pengujian dengan metode pembentukan granulomaoleh cotton pellets atau sponge (kubus busapoliuretan)
B A B I I I
A L U R P E N E L I T I A N
SKEMA KERJA
Gambir(sampel Serbuk
Ekstrakair gambir
Ekstrakkeringgambir
Uji efekanalgetik
Uji efekantiinflama
siUjipenapisanfitokimia
Ujicemarangambir
DOSIS UNTUK MENCIT
0,7 mg/20 g BB
1,4 mg/20 g BB
2,8 mg/20 g BB
DOSIS UNTUK TIKUS3,5 mg/200 g BB
7 mg/200 g BB
14 mg/200 g BB
B A B I V
METODOLOGI PENELITIAN
SKEMA KERJA UJI ANALGETIK
Persiapan hewan uji
Perlakuan tiap kelompok
Kontrolnormal
Kontrolpositif
Kelompokdosis
rendah
Setiap ekor disuntikan0,5% asam asetat sec IP
Pengukuran jumlah geliatselama 30’
Analisa data
Kelompokdosis
sedang
Kelompokdosistinggi
30’
5’
SKEMA KERJA UJI ANTIINFLAMASI
Selama 4 jam
1 jam kemudian
Perlakuan tiap kelompok
AklimatisasiPersiapan hewan
uji
Ukur volume telapak kaki
tikus
Kontrolnormal
Kontrolpositif
Kelompokdosis
rendah
Masing- masingdiinjeksikan suspensi
karagenan 2%
Ukur volume telapakkaki tikus
Analisa data
Kelompokdosis
sedang
Kelompok dosistinggi
Timbang beratbadan tikus
B A B V
HASIL PENELITIAN
PENGUJIAN PARAMETER EKSTRAK
Jenis Pengujian Hasil Pengujian Persyaratan
Bentuk Serbuk Kering --
Rasa Pahit Pahit
Warna Coklat Muda Coklat muda
Bau Lemah Lemah
Susut Pengeringan 0,29 % Kurang dari 10%
Kadar Abu 0,18 % Tidak lebih dari 4%
Rendemen 48,16 % ---
DATA PENGAMATAN JUMLAH GELIAT
No. Kelompok
Rata-rata jumlah geliat mencit pada 5 menit ke…
1 2 3 4 5 6
1 NaCMC 0,5ml/20 gBB
44 39 38 35 24 16
2 Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB
20.67 16.67 13.67 12.33 10 9
3 Ekstrak air gambir
0,7 mg/20 gBB
41.33 32.67 23 19.33 13.67 14
4 Ekstrak air gambir
1,4 mg/20 gBB
17 16.33 12.33 7.33 4.67 3.33
5 Ekstrak air gambir
2,8 mg/20 gBB
32.67 25 23.67 19.33 14.33 9
GRAFIK RATA-RATA JUMLAH GELIAT
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
1 2 3 4 5 6
Jum
lah
geli
at
Waktu (menit)
Rata-rata Jumlah Geliat Mencit
NaCMC 1% 0,5 ml/20 gBB
Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB
Ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB
Ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB
Ekstrak air gambir 2,8 mg/20 gBB
PERSENTASE PROTEKSI ANALGETIK
No. Kelompok PerlakuanPersentase proteksi
analgetik
1 Asam mefenamat 1,82 mg/20 gBB 59.84 %
2 Ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB 27.54 %
3 Ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB 68.04 %
4 Ekstrak air gambir 2,8 mg/20 gBB 36.14 %
GRAFIK PROTEKSI ANALGETIK
0.00%
10.00%
20.00%
30.00%
40.00%
50.00%
60.00%
70.00%
80.00%
Asam mefenamat 1.82 mg/20 gBB
Ekstrak air gambir 0,7 mg/20 gBB
Ekstrak air gambir 1,4 mg/20 gBB
Ekstrak air gambir 2,8 mg/20 gBB
% p
rote
ksi a
nalg
etik
Kelompok Perlakuan
Persentase Proteksi Analgetik
Series1
DATA PERSENTASE RADANG
WaktuNaCl 2
ml/200 gBB
Na diklofenak1,03 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 3,5
mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 7
mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 14
mg/200 gBB
1 jam 112.45 30.55 48.77 22.22 56.67
2 jam 135.69 58.89 74.54 45 66.06
3 jam 143.09 68.33 84.54 63.89 81.51
4 jam 149.15 86.67 91.21 76.11 90.9
5 jam 135.69 73.89 78.18 63.89 75.15
GRAFIK PERSENTASE RADANG
0
20
40
60
80
100
120
140
160
1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 5 jam
% e
dem
Waktu (jam)
Persentase Radang Telapak Kaki Tikus
NaCl 2 ml/200 gBB
Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB
DATA PERSENTASE PENGHAMBATAN RADANG
WaktuNa diklofenak1,03 mg/200
gBB
Ekstrak air gambir 3,5
mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 7
mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 14
mg/200 gBB
1 jam 70.06 52.82 79.8 47.32
2 jam 55.81 43.77 65.77 51.47
3 jam 50.99 38.87 53.48 42.67
4 jam 41.27 38.04 48.35 39.09
5 jam 44.14 40.74 51.67 44.24
GRAFIK PERSENTASE PENGHAMBATAN RADANG
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 5 jam
% e
dem
Waktu (jam)
Persentase Penghambatan Radang Telapak Kaki Tikus
Na diklofenak 1,03 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 3,5 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 7 mg/200 gBB
Ekstrak air gambir 14 mg/200 gBB
B A B V I
KESIMPULAN & SARAN
KESIMPULAN1. Didapatkan dosis ekstrak air gambir yang berefek analgetik
adalah 0,7 mg/20 gBB dengan menggunakan metode Writhing (geliat) pada mencit putih jantan.
2. Dosis ekstrak air gambir yang berefek sebagai antiinflamasiadalah 3,5 mg/200 gBB, 7 mg/200 gBB, 14 mg/200 gBB denganmenggunakan metode Rat hind paw (pembentukan udem) padatikus putih betina.
3. Pada uji ANOVA ekstrak air gambir yang sebagai analgetikdengan variasi dosis 0,7 mg/20 gBB, 1,4 mg/20 gBB dan 2,8 mg/20 gBB terdapat perbedaan secara bermakna terhadapkontrol negatif (p ≤0,05). Tetapi semua variasi dosis ini tidakmemiliki perbedaan secara bermakna (p ≥0,05) terhadap kontrolpositif (asam mefenamat) dengan dosis 1,82 mg/20 grBB.
4. Pada uji ANOVA dan Kruskal Wallis ekstrak air gambir yang sebagai antiinflamasi dengan variasi dosis 3,5 mg/200 gBB, 7 mg/200 gBB dan 14 mg/200 gBB terdapat perbedaan secarabermakna terhadap kontrol negatif (p ≤0,05). Tetapi semuavariasi dosis ini tidak memiliki perbedaan secara bermakna (p≥0,05) terhadap kontrol positif (natrium diklofenak) dengan dosis1,03 mg/200 grBB.
SARANPerlu dilakukan penelitian lebih lanjut seperti analgetik dan antiinflamasi pada ekstrak gambir dengan pelarut yang berbeda untuk mengetahui pengaruh perbedaan pelarut dalam menghambat intensitas nyeri dan radang.
T E R I M A K A S I H