uloga i organizacija laboratorije 2009
DESCRIPTION
.TRANSCRIPT
ULOGA I ORGANIZACIJA TOKSIKOLOŠKE LABORATORIJE
Kvalitativna i kvantitativna analiza otrova
prof. dr Biljana Antonijević
Uloga i značaj toksikološke laboratorije
•U postavljanju dijagnoze
•U situacijama kada dijagnoza nije jasna
•U proceni efikasnosti terapije trovanja
Primeri dokaza po ekshumaciji (Weining, 1967)
Detekcija
Nakon …
godina
Detekcija
Nakon …
dana
As, Pb
Tl
Strihnin
Sb, Ba
Atropin,
Skopolamin
Morfin
(metab.)
Kolhicin
Paration
CO
9
8
6
5
3
1,1
0,8
0,7
0,6
P
HCN
F
Akonitin
Hg
Kiseline
Barbiturati
152
116
53
48
30
23
21
Supstanca Starost Starost Uloga laboratorije< 5 god. > 5 god. Smrtnost ZnačajHosp. Hosp.
Salicilati 7,8 7,8 4,5 +++Barbiturati 1,5 8,4 9,0 +++Petrolej pr. 9,7 0,5 0,0 -Pesticidi 5,3 1,0 3,5 +++Holinesteraza +++Hlor. ugljovod. ++Arsen +++Talijum ++Cijanidi +Korozivi 5,2 0,6 2,0 -Benzodiazepini 3,8 12,2 1,0 ++Tricikl. antidep. 1,4 3,4 3,5 ++Sr. za beljenje 2,4 0,2 0,0 -Fenotiazini 1,2 1,7 0,5 ++CO 0,1 0,5 7,0 ++Narkotici 0,2 0,8 7,0 ++Gvožđe 2,1 0,1 1,0 +++Sapun, deterg. 2,4 0,2 0,0 -
Procenat pacijenata usled trovanja i uloga laboratorije
+++ - ključna za terapiju ++ - značaj za dijagnozu, isključenje drugih mogućnosti + - koristi se za potvrdu - - nema značaja za terapiju i dijagnozu
Supstanca Razlog za analizuParacetamol Specifi čna terapijaSoli gvo žđa Specifi čna terapijaSalicilati Aktivno uklanjanjeFenobarbiton Aktivno uklanjanjeLitijum Aktivno uklanjanjeParakvat Aktivno uklanjanjeMetanol Specifi čna terapija i aktivno uklanjanjeBarbiturati Kod sna žnih trovanja zbog izbora postupka uklanjanjaGlutetimid Kod sna žnih trovanja zbog izbora postupka uklanjanjaMeprobamat Kod sna žnih trovanja zbog izbora postupka uklanjanjaEtanol Kod sna žnih trovanja zbog izbora postupka uklanjanjaHloralhidrat Kod sna žnih trovanja zbog izbora postupka uklanjanjaTeofilin Kod sna žnih trovanja zbog izbora postupka uklanjanja
Indikacije za toksikološke analize
Materijal ili ambalaža
Neobjašnjena bolest
Nepoznato trovanje
Diferencijalna dijagnoza
Istorija bolestiIstraživanje Toksikološka analiza
Prethodna dijagnoza
»Poznata« ekspozicija
Izveštaj laboratorije
Procena težine trovanja
Konačna dijagnoza
Koordinacija klinike i laboratorije u dijagnozi trovanja
Metodologija u toksikološkim laboratorijama
•Maksimalna osetljivost
•Minimalna interferencija sa matriksom uzorka
•Jednostavna priprema uzorka
•Brzina
•Specifičnost
•Tačnost
•Visok informativni potencijal
Dobra laboratorijska praksa (DLP)Good Laboratory Practice (GLP)
DLP - koncept organizacije procesa rada u laboratoriji i uslove pod kojima se vrši planiranje, izvođenje, zapisivanje i prikazivanje rezultata
Američka agencija za hranu i lekove – 1976. god.(US Food and Drug Agency – FDA)
Američka agencija za zaštitu okoline – 1983. god.(US Environmental Protection Agency – EPA)
Evropska agencija za evaluaciju medicinskih proizvoda(European Agency for the Evaluation of Medical Products)
Japansko ministarstvo zdravlja(Japanese Ministry of Health and Welfare)
Međunarodna konferencija za harmonizaciju(International Conference on Harmonization)
ISO 17 025
Dobra laboratorijska praksa (DLP)
DLP
Saradnici
Oprema
Kontrolni i testuzorci
Rukovodilac
Služba obezbeđenjakvaliteta
Stand. operativne procedure (SOP)
Organizacija DLPLaboratorija koja funkcioniše u saglasnosti sa DLP standardimaispunjava uslove date šemom
Standardne operativne procedure (SOP) opisuju sve postupke u toksikološkoj laboratoriji za aktivnosti:
•Rutinski pregled, čišćenje, održavanje, kalibraciju i standarizaciju aparata
•Postupak koji se primenjuje ako dođe do kvara na nekom od aparata
•Opis analitičkih metoda
•Definisanje šta predstavlja sirove podatke
•Postupak za obradu, arhiviranje i pretraživanje podataka
•Opis kvalifikacija saradnika
•Mere u cilju očuvanja zdravlja saradnika
•Autorizovan pristup opremi
•Prijem i uzorkovanje kontrolnih i test uzoraka
•Propisivanje uslova i načina za arhiviranje dokumentacije, uzoraka, preparata i
pretraživanje arhive
•Uputstvo za šifrovanje studija, obradu podataka i korišćenje kompjuterizovanih
sistema
•Uputstvo za rad službe za kontrolu kvaliteta
Koje su prednosti i nedostaci?
Prednosti:Proces rada se bolje kontroliše i rezultati su kvalitetniji, služba interne kontrole kvaliteta obezbeđuje da se sve obavlja prema SOP-ovima, smanjena je potreba za ponavljanjem
Nedostaci:Uvođenje je skupo, značajno se povećava obim pisane dokumentacije, aktivnosti u laboratoriji postaju rutinske i stereotipne
Program kliničko-toksikološke laboratorije
Formiranje LISTE OTROVA
1. Farmaceutski proizvodi2. Pesticidi 3. Industrijske hemikalije
Lista sadrži:
•Naziv leka ili otrova•Tip analize (kvalitativna/kvantitativna), donja granica osetljivosti•Tip potrebnog uzorka (krv, urin, serum, lavat, …)•Količina uzorka•Vreme obrade
Lek, otrov, test Mogućnost analize Uzorak Vreme (h)Acetaldehid Ne postoji - -Alkohol, etil Kvant. Serum, urin 4Amfetamin Kval. Samo urin 4Disulfiram Ne postoji - -Arsen Semikvant. Samo urin 4Atropin Semikvant. Samo urin 24+Barbiturati Kvant. Serum 4Barbiturati Ne postoji Urin -Bromidi Kvant. Serum 4HbCO Kvant. Krv 4Hloralhidrat (kaotrihlorsirćetna kis.)
Semikvant. Urin 24+
Holinesteraza Kvant. Krv 4Kokain(kao metabolit)
Kval. Samo urin 24+
Kodein Semikvant. Samo urin 24+Diazepam (kaoskrining hipnotika)
Kval. Serum 4
Diazepam Kvant. Serum 24+Dikumarol Ne postoji - -Teški metali(As, Sb, Hg)
Kval. Samo urin 4
MetHb Kvan. Krv 4Morfin Kval. Samo urin 24+Fenol Kval. Serum 24+Fenol Kvant. Serzm 24+Salicilati Kvant. Serum, urin 4Sulfonamidi Semikvant. Urin 24
Lista lekova i otrova
Nivo 3 Nivo 2 Nivo 1Nacionalna laboratorija
Za populaciju od oko 2miliona stanovnika (1 – 4)
Regionalna laboratorija
Za populaciju između 1 i 2miliona stanovnika
Oblasni centar
Za populaciju od 20 000 do100 000 stanovnika uradijusu 10 – 50 km
Organizacija kliničko-toksikološke laboratorije
Nivo Obim poslova Druge aktivnosti1
2
3
Oblasni centar
Regionalna laboratorija
Nacionalna laboratorija
Identifikacija otrova in vitro(tablete, rastvarači), Hb CO,MetHb, kvalitativna procenanarkotika
Nivo 1 + narkotici, drugilekovi, alkohol u krvi,rastvarači
Svi toksikološki testovi
Preporuke za nivo 1;Istraživanje
Preporuke za nivoe1 i 2, istraživanje,edukacija
Program rada toksikoloških laboratorija
Nivo Osoblje OpremaKapacitet
Slučajevi-godišnje
Analit. Tehničari OtroviAlkohol u
krvi1
2
3
Oblasnicentar
Regionalnalaboratorija
Nacionalnalaboratorija
-
2-3
3-6
1
6
10-15
Fotometar (VIS/UV),TLC
Nivo 1 +spektrofotometar
(VIS/UV), GC, HPLC
Nivo 1,2 +Spektrofotometar(VIS/UV/IR), AAS, NMR,MS, imunoesej, ICP,
FD...
50
200
1000
-
2000
5000
Ljudi i oprema
Organizacija kliničko-toksikološke službe u R Srbiji
•Stanice za hitnu pomoć i domovi zdravlja
•Opšte bolnice i zdravstveni centri (+)
•Kliničko-bolnički centri (+)
•Nacionalni centar za kontrolu trovanja (+)
Zakon o zdravstvenoj zaštiti
Modeli proučavanja i rezultati
Toksikološki zahtevFormular (Uputnica)
Informacije o pacijentuIme, starost, pol, stanje svesti, istorija bolesti i dijagnoza, aktuelna terapija, znaci i simptomi, sumnja na lek ili otov, datum dobijanja uzorakaInformacije o lekaruIme lekara, telefon ili lokalZahtev za laboratorijuTraženi testoviLaboratorijski rezultatiŠta je rađeno, u kom uzorku, rezultati, ime analitičara, datum
Interpretacija laboratorijskih rezultata
Liste terapijskih, toksičnih i letalnih koncentracijaJedinstven sistem jedinica (SI sistem)
Laboratorijski rezultat
Vreme proteklo od unosa Stanje pacijenta
Optimizacija terapije
Lek Koncentracije (mg/l) PrimedbeTerapijske Toksične
Acetilsal. Kis. 150-300 500 Eliminacija zavisi oddoze. Podaci se odnosena salicilnu kis.
Amfetamin 0,02-0,03 0,2 Kod zloupotrebe uurinu konc. 30-50
Cijanidi 5Diazepam 0,1-1,0 5Digitoksin 0,02-0,035 0,035Etanol 500-1000Ethlorvinol 2-8 30Fenobarbiton 15-40 35Glutetimid 2-6 5Heroin Odmah prelazi u
diacetil morfinImipramin 0,125-0,250 0,5Izoniazid 1-7 20Kofein 3-15 50Hloralhidrat 2-12 20Hloramfenikol 10-25 25Hlorpromazin 0,05-0,30 0,75 Veliki br. metabolitaKokain 0,1-0,5 1Kodein 0,01-0,10 0,2Kinin 5-10 10Litijum 0,6-1,2 2 Kod hronične terapije
niže toksične konc.LSD 0,009Meprobamat 6-12 60 Podaci o konc.
neujednačeniMetadon 0,1-0,4 2Metakvalon 2-3 10Metildopa 1-5 7Morfin 0,165-0,08 0,2Nikotin Kod pušača 0,1-1 u
urinuParacetamol 10-30 200Prokain do 11 21Sekobarbital 1-2 5Teofilin 8-20 20Tiopenton 1-5 10Valproičnakis.
50-100 100
Terapijske i toksične koncentracijenekih lekova i otrova
“Real mistakes in analytical toxicology are real disasters”
““If one does not look one does not find”If one does not look one does not find”
Nedeljković M, Antonijević B. Uloga i značaj kliničko-toksikološke laboratorije. Arh farm 2005; 55: 266-279.