unidad 8 cocos gram positivos-listo
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CONTENIDOS
Tema 16: Cocos Gram positivo:• Familia Micrococcaceae• Familia Enterococcaceae• Familia Streptococcaceae• Familia Staphylococcaceae
Tema 17: Cocos y cocobacilos Gram negativo:• Familia Neisseriaceae• Familia Moraxellaceae
Tema 18: Bacilos y cocobacilos aeróbicos Gram negativo:
• Familia Pseudomonadaceae• Familia Burkholderiaceae• Familia Alcaligenaceae
TEMA 16. COCOS GRAM POSITIVOS
FAMILIA: Streptococcaceae
Géneros: Streptococcus y Lactococcus
Género: Streptococcus
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS Y DE CULTIVO:
Morfología celular
Morfología colonial
Características de cultivo
Existen especies patógenos potenciales para el hombre y animales. Pueden
estar en piel, mucosas de vías genitales, digestivas y respiratorias superiores.
CLASIFICACIÓN:
1) Propiedades hemolíticas:
HÁBITAT
Hemólisis Alfa
Hemólisis Beta
Hemólisis Gamma
COCOS GRAMPOSITIVOS BETAHEMOLÍTICOS
FENÓMENO DE CAMP (Cristie, Atkins y Munch-Peterson)
S. agalactiae
Staphylococcus aureus
Otros
2) Características antigénicas y serológicas:
Lancefield (1933) Carbohidratos de superficie Proteína M Es el más difundido No incluye algunas especies, Ej.: estreptococos viridans y S. pneumoniae
3) Basada en la capacidad de crecimiento a temperaturas de 10º y 45º C se
diferencia en los siguientes grupos:
a) Estreptococos piógenos: crecen entre 10º y 45º C y se asocia a la
formación de pus; su habitad natural es la cavidad bucal y las vías
respiratorias superiores de humanos y animales. Incluye las siguientes
especies: S. agalactiae, S. canis, S. dysgalactiae, subespecies dysgalactiae y
equisimilis, S. equi subsp. equi, S. equi subsp. zooepidemicus, S. iniae, S.
porcinus, S. pyogenes y S. suis.
b) Estreptococos orales: El hábitat natural es la cavidad
bucal y las vías respiratorias superiores de humanos y
animales, donde se encuentran las especies: S. downei, S.
gordonii, S. mitis, S. mutans, S. oralis, S. pnemoniae, S.
salivarius.
c) Estreptococos anaerobios: S. hansenii, S. morbillorum, S.
parvulus y S. pleomorfus.
d) Otros estreptococos: no crecen a 10º C pero si a 45º C. S.
bovis, S. equinus, S. hyointestinalis, S. thermophilus, S. uberis.
MODO DE INFECCIÓN Y TRANSMISIÓN:
Las infecciones pueden ser endógenas o exógenas (inhalación o
ingestión). La afección puede propagarse por aerosol, contacto directo
o fómites.
FACTOR ES DE VIRULENCIA:
Cápsula (S. equi, S. suis, y S. pyogenes); estructuras de adhesión
(fimbrias), proteínas de la pared celular (M, T y R de S. pyogenes). Los
estreptococos de los grupos A, C y G liberan las siguientes sustancias,
enzimas y productos tóxicos, que favorecen la invasión de los tejidos
del hospedador: estreptoquinasa (actividad fibrinolítica); hemolisinas
(estreptolisina S y O); lipasas, esterasas, lisozimas y neuraminidasas.
ESPECIES IMPORTANTES Y PODER PATÓGENO:
ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO A:
Streptococcus pyogenes :
Presenta antígeno de pared celular del grupo A esta formado por
ramnosa y β-N-acetilglucosamida y antígenos específicos de tipo:
M, T y R.
La capsula esta formada por acido hialurónico.
Solo tiene importancia en medicina humana, asociado a
septicemias, faringoamigdalitis, impétigo, glomerulonefritis y
fiebre reumática.
ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO B:
Presenta antígeno del grupo B, un carbohidrato compuesto de L-
ramnosa, N-acetilglucosamida, galactosa y glucitol, oligosacaridos
unidos mediante enlaces fosfato.
Son m.o. capsulados.
Streptococcus agalactiae:
• Es uno de los principales agentes productos de mastitis bovina, junto con
S. dysgalactiae y S. uberis.
• También se asocia a procesos septicémicos, pielonefritis y neumonía en
perros.
• A peritonitis, septicemia y placentitis en gato, siendo reservorios del
m.o. el aparato urogenital de los animales sanos.
ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO C:
El antígeno especifico del grupo C esta compuesto por los
olisacaridos ramnosa y α-N-acetilglucosamida.
Presentan una cápsula de ácido hialurónico, no inmunógena.
Streptococcus dysgalactiae:
Subespecies dysgalactiae y equisimilis
Mastitis bovina.
Streptococcus equi subsp. equi:
En équidos es responsable de la papera, adenitis, gurma o
moquillo equino.
Streptococcus equi subsp. zooepidemicus:
Implicados en distintos cuadros clínicos en las especies
domesticas.
Equinos: infecciones neonatales, formación de abscesos,
endometritis y mastitis.
Porcinos: procesos septicémicos y artríticos (animales jóvenes),
endocarditis (cerdos de engorde), infertilidad y abortos en
hembras gestantes.
Perros: neumonía purulenta y septicemias.
CUADRO 1. PRINCIPALES DIFERENCIAS ENTRE ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO C.
Especies Hemólisis Lactosa Trehalosa Sorbitol
S. dysgalactiae
α + + +/-
S. dysgalactiae
subsp. equisimilis
ß + + _
S. equi subsp.
equi
ß _ _ _
S. equi subsp. zooepidemicus
ß + _ +
ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO D:
El antígeno especifico esta compuesto de ácido teicoico.
Entre los estreptococos que forman este grupo se pueden citar: S.
bovis, S. equinus y S. suis.
Streptococcus suis:
Muy importante en medicina veterinaria.
Son m.o capsulados.
En porcinos produce: endocarditis, neumonía, septicemias y
trastornos de la reproducción.
En humanos: septicemia, meningitis, endocarditis, se considera
una enfermedad laboral.
Artritis
Meningitis
Abscesos
ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO E:
Causan fundamentalmente septicemias, infecciones del tracto
respiratorio y otros procesos clínicos en humanos y animales.
En porcinos se consideran los causantes de la linfadenitis
estreptocócica.
Streptococcus uberis:
Puede o no ser alfa-hemólitico.
Esta implicado en mastitis subclínicas.
Streptococcus porcinus:
Son beta-hemóliticos.
En cerdos se asocia a la producción de abscesos mandibulares,
faríngeos (linfadenitis maxilar).
DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO
1. Muestras: varían con la enfermedad; pus (paperas), liquido
articular (artritis), leche (mastitis), órganos-sangre (septicemias) o
exudados meníngeos (infecciones por S. suis).
2. Examen directo: frotis teñidos de Gram.
3. Aislamiento y cultivo: tomar en cuenta las características de
crecimiento y cultivo del m. o en estudio.
4. Identificación (ver cuadro).
Historia Naturaleza de la muestra Patógeno Examen directo en
clínica (tejido, leche, orina, etc.) sospechoso frasco, frotis teñido
1. Selección e inoculación de medios primarios Tinción de
anticuerpo fluorescente
Incubación aerobio, microaerófilo
o anaerobio
2. Estudio de la morfología colonial en los medios y morfología celular
por frotis teñidos por Gram de colonias seleccionadas.
3. Iniciación de cultivos puros en medios sólidos o en caldo
prueba de suscetibilidad a
antimicrobianos (si urge)
4. Estudios de tinciones de Gram en agar inclinado; pruebas de
catalasa, oxidasa, etc.
5. Selección e inoculación de medios diferenciales
Incubación Pruebas de susceptibilidad a
antimicrobianos
6. Lecturas de pruebas diferenciales: pruebas serológicas si esta indicado
7. Identificación final del microorganismo (s)
Figura 1. Pasos seguidos en general en el aislamiento e identificación de bacterias de muestras biológicas.
Coloración de Gram: Cocos
Gram – positivos en cadenas
ALFA
S.pneumoniae Optoquina sensible
Grupo D (enterococo) crece
en NaCl
Grupo Viridans Identificación por reacciones bioquímicas
Grupo Viridans – Identificación por reacciones bioquímicas
Tipo de hemólisis
Grupo D (enterococo)Crece en NaCl
Agar sangre cordero 35º - C x 18
– 24 hrs.Aerobiosis y/o CO
Grupo A Sensible - a -
bacitracina
Grupon B Prueba CAMP
Positiva
Grupo D (enterococo)Crece en NaCl
Muestras clínicasAbscesos
HemocultivosL.C.R.
OTROS
Colonias aisladas observar hemólisis
Beta
GAMMA
Frotis directo coloreado con Gram: cocos
Gram - positivosPrueba de Catalasa
NEGATIVA
CUADRO 9 – 1. CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES DE ESTREPTOCOCOS IMPORTANTES EN LOS ANIMALES.
Grupo
Hemólisis
T r ehalosa
Sorbitol
Manitol
Salicina
Lactosa
Rafinosa
Inulina
Esculina
H s i o p du i r c a ot o
Nacl
al 6,5%
Categria
S. pyogenes A ß + _ V + + _ _ _ _ _ Piógeno
S. agalactiaeB C, ß, y + _ _ (+) + _ + _ Piógeno
S. dysgalactiae C c, ß, y + _ _ _ + _ _ _ SIS
S. dysgalactiaesubesp. equisimilis C ß
+ _ _ (+) V _ _ _SIS
S. equi subesp. equi
C ß _ _ _ + _ _ _ _ Piógeno
S. equi subesp. equizooepidermicus
C ß_ + _ + + _ _ _
Piógeno
S. bovis D V _ V + + + + + _ _ Otros
Grupo
Hemólisis
T r ehalosa
Sorbitol
Manitol
Salicina
Lactosa
Rafinosa
Inulina
Esculina
H S i oP dU iR cA oTo
Nacl
al 6,5%
CategoriA
S. equinus D V Otros
S. uberis C,D,EP,V x, y
+ _ Otros
S. suis D,R,S + SIS
S. pnumoniae
+ Piógeno
S. porcinus ß + + SIS
RESISTENCIA:
Sensibles a los desinfectantes comunes y a la desecación. Todas las
especies se destruyen a 60 ºC 30 – 60 minutos. Muchas especies
sobreviven por semanas en el suelo, ropa de cama, alimentos,
corrales, equipos para ordeñar y en recipientes para leche.
IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA:
Los estreptococos piógenos de animales pueden infectar al hombre.
ENTEROCOCOS (I)
Catalasa Oxidasa Crec. 10-45°C
Crec. NaCl 6,5%
Crec. 40% sales biliares
Crec. pH 9,6
ENTEROCOCOS (II)
Colonias
Hábitat
Importancia en ciencias veterinarias
Factores de
virulencia
Especies de importanci
a clínica
• Medio ambiente• Flora comensal en
mucosas de varias especies e intestinos
• Salud pública: indicadores de contaminación
fecal de alimentos
• Patógenos secundarios e
inmunosuprimidos
• Resistencia a antimicrobianos• Capacidades de
intercambio de material genético
ENTEROCOCOS (IV)Clasificación de los enterococos (Tomado y modificado de Hardie y Whiley, 1997)
Grupo Especies incluidasE. faecalis E. faecalis
E. duransE. faeciumE. hirae
E. faecium
E. mundtiiE. aviumE. pseudoaviumE. malodoratus
E. avium
E. raffinosusE. gallinariumE. casseliflavus
E. gallinarium
E. flavescensE. cecorumE. cecorumE. columbae
Especies misceláneas E. saccharolyticusE. sulfureusE. dispar
Situación taxonómica indefinida E. solitariusE. seriolicida
Importancia clínica
Importancia en salud pública: comensales en animales domésticos, pueden transmitir sus genes de resistencia a especies patógenas
2
FAMILIA: Staphylococcacea
GÉNERO: Staphylococcus
CARACTERISTICAS MORFOLÓGICAS Y DE CULTIVO:
Morfología Celular:
Morfología Colonial:
Doble hemólisisCaracterísticas de cultivo
Una característica especial es la zona doble de hemolisis. Para el
aislamiento de cepas patógenas en alimentos o heces se usan medios
de cultivos diferentes, como el Chapman – Stone.
HÁBITAT:
Piel y glándulas, mucosas (vías digestivas y respiratorias superiores)
del hombre y animales. También se encuentran contaminando
alimentos, aguas, plantas y suelo.
Doble hemólisis
CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES:
El género Staphylococcus se divide en varias especies según una
clasificación basada en:
La estructura de la pared celular (composición de
peptidoglucano, acido teicoico, presencia de proteína A).
Propiedades fisiológicas y bioquímicas (ver cuadro).
Características serológicas -------- Antígenos superficiales (no
veterinaria).
FACTORES DE VIRULENCIA:
1. Factores que interfieren la fagocitosis:
Capsula, Proteína A, Clumping factor, Coagulasa y leucocidina.
2. Hemolisinas.
3. Enzimas.
Además de la coagulasa y la leucocidina, son de importancia las
siguientes enzimas:
Estafilocinasa (fibrinolisina), Hialuronidasa,
Nucleasas (termonucleares o Dnasaa), otras enzimas (gelatinasa,
fosfatasa, lecitinasa, proteasa, lisozima, dehidrogenasa y catalasa).
4. Exotoxinas:
Enterotoxinas, Exotoxina tipo C (hasta ahora no demostrada en los
animales).
ESPECIES IMPORTANTES Y PODER PATÓGENO: Estafilococos coagulasa positivo (ECP)
S. aureusS. intermedius
S. hyicus Estafilococos coagulasa negativo (ECN)
S. capraeS. lugdunensisS. haemolyticusS. schleiferi
Staphylococcus aureus
Botriomicosis: lesiones granulomatosas crónicas poco comunes que afectan
la ubre de yeguas, vacas, marranas y el cordón espermático de los caballos.
S. AUREUS Poder patógeno.
Síndrome del shock tóxico
Síndrome de la piel escaldada
Mastitis en varias especies
Intoxicaciones alimentarias
Pioderma profunda
Pioderma superficial
Infecciones supurativas de heridas y septicemia en todos los
animales.
Pioderma, en especial en perros (mas común S. intermedius) y
caballos.
Piemia en corderos.
Mastitis en porcino y ovino, las hembras de ganado vacuno,
caprino, porcino y ovino.
Varias infecciones piógenas de la piel de numerosos animales.
S. aureus
Abscesos subcutáneos y celulitis en caballos y diversas infecciones
piógenas en conejos.
Artritis y septicemia en pavos.
Infecciones urinarias en hombres y animales.
Enterocolitis, que se observan principalmente en el hombre después
de terapéutica antibiótica prolongada; por ejemplo, después de
cirugía intestinal.
En el hombre: osteomielitis, sinusitis, mastitis, furúnculos, carbunco,
endocarditis, síndrome de choque toxico, neumonía, amigdalitis.
Infecciones hospitalarias. Envenenamiento alimentario.
S. aureus
Staphylococcus intermedius
Causa pioderma, otitis externa, mastitis, infecciones oculares y de
vías urinarias, foliculitis y furunculosis en perros.
Mastitis en vacas.
Staphylococcus hyicus
Es un patógeno porcino importante, causando epidermitis
exudativa o eczema húmedo y artritis séptica.
Dermatitis seborreica en caprinos, asnos, caballos.
Infecciones en piel y ubre de bovino.
Staphylococcus gallinarum
Se ha aislado de las cavidades nasales y de la piel de la gallina.
Nueva especie.
Poder patógeno incierto y el m.o se haya emparentado con S.
epidermidis.
Resistentes a concentraciones salinas.
Staphylococcus caprae
Se ha encontrado en la leche de cabra; poder patógeno
desconocido.
Staphylococcus epidermidis
Comensal piel y mucosa del hombre y los animales, por lo general
no es patógeno, pero en ocasiones causa mastitis, abscesos e
infecciones cutáneas en animales.
Staphylococcus saprophyticus
Existe libre en la naturaleza y en general no es patógeno para los
animales y el hombre.
Causa infecciones de vías urinaria y de heridas en el hombre.
DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO:
1. Muestra.
2. Examen directo (frotis y coloración de Gram).
3. Aislamiento y cultivo. Características de crecimiento y cultivos.
4. Identificación. Propiedades bioquímicas.
RESISTENCIA:
Son sensibles a los desinfectantes comunes.
El pus los protege y pueden conservarse en pus desecado por
semanas.
Algunos estafilococos pueden sobrevivir a temperaturas de 60º por
30 min.
IDENTIFICACIÓN DE COCOS GRAM POSITIVOS
GRAM – STAIN
(+)
OF – GLUCOSE
OXIDATIVE FERMENTATIVE
CATALASE
(-) (+)
Micrococcu
s
Staphylococcu
s
Streptococcus
Cuadro 10 – 1. Características diferenciales de Estafilococos y Micrococos
S. aureus
S. epidermidi
s
S. intermediu
s
S. hycus
S. saprophyticu
sMicrococc
i
Oxidasa
Coagulasa
Hemólisis
(Beta)
Pigmento
Maltosa
Producción de
acido(PAB)
Manitol
DNA asa.
Novobiosina
Glucosa (O –
F)
_
+
+
+
A ²
+³
A
+
S
F
_
_
_
_
A
+
_
_
S
F
_
+
+
_
_
+
V
V
S
F
_
V ¹
_
_
_
_
_
+
S
F
_
_
_
V
A
N T
V
_
R 6
_
+
_
_
V
_
NT
NT
_
S
O
MICROCOCCUS (I) Hábitat: suelo, agua, productos lácteos y
derivados animales, residente comensal de superficie corporal y mucosas de diversas especies.
Características morfológicas y de cultivo.
Morfología microscópica
Morfología macroscópica
Tetradas
MICROCOCCUS (II)
Potencial patógeno: solo como oportunista y cuando se han descartado otros agentes infecciosos.
Catalasa Oxidasa
Metabolismo oxidativo
3
FAMILIA: Micrococcae
GÉNEROS: Micrococcus
IMPORTANCIA EN SALUD PUBLICA:
GENERO: Micrococcus
Existen nueve especies, morfológicamente parecidos a los
Staphylococcus pero bioquímicamente diferentes.
Son cocos Grampositivos a Gram variables.
Oxidasa positivos e inmóviles.