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Informe Técnico Sanitario 1

UNIDAD DE EXPERIMENTACIONANIMALCENTRO DE INSTRUMENTACIÓNCIENTÍFICACIBMUNIVERSIDAD DE GRANADA

Informe Técnico y SanitarioSPEA/CIC/UGR. Noviembre, 2010

Informe Técnico-Sanitario

IntroducciónAnimales

- Procedencia- Especies- Identificación

Condiciones ambientales en módulos de alojamiento.- Ventilación- Temperatura- Humedad- Iluminación- Presión diferencial- Niveles de amoniaco

Cuidados- Habitáculo- Alimentación- Agua- Camas- Limpieza, desinfección y esterilización- Programa Sanitario- Cuarentena

Destino de los animalesRegistros

Emitido por:

Dña. Ana Nieto. Veterinaria. Colegiado nº 949. Responsable de Bienestar y Sanidaddel Servicio de Producción y Experimentación Animal (SPEA).D. Jesús M. Zúñiga, responsable de la SPEA/UGR UEA/CIBM

UNIVERSIDAD DE GRANADA


INTRODUCCIÓN

La investigación en el área biomédica, requiere del estudio de diversos parámetros yvariables en los animales utilizados como biomodelos. Dadas las técnicas cada vezmás sofisticadas y costosas que se emplean, el riesgo de dispersión de los datos porfactores que no se deban al propio desarrollo de la aproximación experimental a losobjetivos, debe ser minimizado.

En este sentido el desarrollo de animales de experimentación estandarizados,homogéneos, definidos y cada vez más particularizados para líneas concretas deinvestigación es cada día más necesario. El mantenimiento de este tipo de animalessolo puede ser posible en instalaciones que reúnan una serie de requisitos y barrerasque salvaguarden estos animales de afecciones que puedan alterar su respuesta a losdiferentes estímulos y por tanto puedan poner en peligro las investigaciones que conellos se desarrollan.

Por otra parte, la legislación en el área de sanidad y bienestar animal está cambiandopaulatinamente tanto por el proceso de adaptación y acercamiento de nuestroordenamiento jurídico al de los países de nuestro entorno, como por consideracioneséticas.

ANIMALES

Especies

Los animales que se mantendrán y producirán en la UEA se han indicado en elAnexo .3. (Memoria Descriptiva Procedimientos), fundamentalmente diferentescepas, líneas o variedades genéticas de ratas, ratones y conejo. Se ha planteadouna instalación de acuarios para pez Cebra.

Sin embargo es difícil concretar las cepas de ratones fundamentalmentetransgénicos, que la Unidad va a albergar, puesto que está condicionado por eltipo de investigaciones que se llevarán a cabo por los diferentes usuarios. Se estimaen unas 40 líneas diferentes.

Procedencia

Todos los animales que no son producidos en la UEA, son y serán adquiridos deempresas especializadas autorizadas que suministran animales específicamentepara investigación y otras finalidades científicas y con categoría sanitaria deanimales Libres de Gérmenes Patógenos Específicos (SPF) de la especie para elcaso de los roedores y lagomorfos. Todos los lotes deben ser enviados concertificado sanitario para su aceptación.

En un segundo nivel parte de los animales provendrán de otros Centros deinvestigación y/o Universidades, con diferentes grados de calidad sanitaria, queserán necesario someter a control y/o rederivación en la correspondienteCuarentena, antes de su entrada final a la Barrera.

Dependiendo del número de animales que se produzcan y de las característicasgenéticas de la cepa (cepas consanguíneas o no), se realizará un recambio orenovación genética periódica de los progenitores, bien adquiriendo sólo machos oadquiriendo tanto machos como hembras. Esto afecta principalmente a Roedores.


Métodos de Identificación

Roedores: Identificación en grupo: para animales en producción, mediante etiqueta en la

propia jaula (tarjeta de cartón en placa de inox.). Identificación individual en experimentación: rotulador indeleble en cola, ácido

pícrico diluido en dorso), numeración o pequeño circulo tatuado en oreja.

Lagomorfos: los conejos se solicitan tatuados en la cara interna de la oreja connúmero identificativo. No se producirán en la UEA.

Se realiza y realizará un control de las existencias, cruces, nacimientos y bajas,anotadas en las bases de datos específicas del software ANYBIO (Programa deControl y Planificación). Ver en Registros

CONDICIONES AMBIENTALES DEL ALOJAMIENTO DE LOS ANIMALES

En el Anexo .2. se resumen las características técnicas de los sistema de climatizaciónque garantizan las condiciones de ambientales fundamentales y se hace mención alas otros parámetros ambientales controlados. Existe un sistema de control de lasvariables ambientales,

Control ambiental

Los valores de Tª y HR% permanecendentro de un estrecho rango de 20 + 2ºC y 45 + 5 %. En la actualidad existe uncontrol de lectura continua mediantesondas conectadas a DELTA-T LOGGERcon lectura en software LOGGER.Conexión a grupo electrógeno.

Al menos 3 veces/semana se contrastanvalores al azar en unos 20 puntosmediante termo-higrómetro digital.

El equipo de climatización: dispone deun contrato de mantenimiento congarantía de reparación las 24 horas.

Los niveles de luz se miden mediante luxómetro. Al menos 1 vez/mes. Diferentespuntos de muestreo.

Los niveles de ruido mediante sonómetro. Al menos 1 vez/2 meses. Diferentespuntos de muestreo.

En puntos localizados de los modelos experimentales existen sondas demedición del nivel de NH3

Todas las variables ambientales se recopilan y registran en tiempo real,mediante un software (sistema Demótico).


CONDICIONES DE PRODUCCIÓN Y MANTENIMIENTO

- Cepas no consanguíneas: sistema de crucerotativo (Poyley, consanguinidad 1%),- Cepas isogénicas y consanguíneas: crucehermano x hermana (en "línea paralela","línea sencilla"). Líneas híbridas: se mantienela F1 evitando cruce entre híbridos.- Líneas mutantes: dominante cruce al azar ;recesiva (herno x herna)

colonia primaria, se parte de lotes dereproductores procedentes de empresasprivadas, con categoría certificada de libresde gérmenes patógenos(SPF) y mantenidosen condiciones de Barrera Tipo-II paraanimales SPF (ILAR).Condiciones Sanitarias: controles propiossegún lo establecido por FELASA (ver másadelante).

Habitáculo

Los animales son y serán alojados en jaulas dependiendo de la especie y edad delanimal, teniendo en cuenta las recomendaciones del Consejo Europeo del 18 demarzo de 1986. Según la tabla adjunta

Fuente: ETS 123, Anexo .A., 2000Peso (g) cm2 cm Superficie/animal cm2

Ratón > 20 330 12 60Rata < 200 800 18 200Gerbil < 40 1200 18 150Hámster < 60 800 14 150Cobaya < 200 1800 23 200

Tabla .5. Requerimientos de espacio mínimo para roedores en stock o duranteexperimentación. Superficie (cm2) y altura (cm) mínima de la cubeta.


Todos los animales, excepción hechade los conejos, se alojan en jaulas demakrolón, APEC o polisulfano limpias yautoclavadas, con una superficieacorde con el peso del animal y elnúmero de animales por jaula. Estasjaulas tienen una rejilla en su partesuperior por donde se suministra elpienso y donde se introduce el chupóndel biberón que contiene el agua. Sepriorizan las condiciones de bienestar,estableciendo grupo harmoniosos yevitando conflictos de jerarquía . En elcaso de ratones se añaden sistema demadrigueras e igloo

Los conejos están alojados en jaulas de acero inoxidable autoclavable dispuestas enestanterías fabricadas en igual material inoxidable con guías para la sujeción de lasjaulas y bandejas de recogida. Conejos de gran tamaño para la obtención decomplejo antígeno-anticuerpo se mantienen en jaulas doble.

Los animales especialmente sensible a agentespatológicos (como inmunodeficientes), o losinfectados experimentalmente, sonintroducidos en armarios aisladores dentro desus jaulas, realizándose el cambio de la camade estos animales en cabinas de flujo laminar.

Igualmente disponemos de sistema deaisladores y sistemas de Racks microventilados,para garantizar la ausencia de patógenos ycontaminaciones cruzadas entre diferentescepas de ratón.

Alimentación

Todo el alimento que se suministra a los animales es pienso adquirido a casascomerciales autorizadas y adecuado para a la especie y características del animal. Elpienso en el caso de los roedores es pasteurizado previamente, para prevenir elcontagio de cualquier enfermedad o parasitosis a través del mismo.


Ciertas líneas de investigación pueden requerirdel uso de dietas con ciertas característicasespeciales, que se fabrican en la Unidad deProducción de Dietas existente en el Servicio.

Generalmente la comida se suministra ad libituma no ser que la experimentación que se estéllevando a cabo aconseje otro tipo de suministro.Este es el caso de los animales mantenidos enenvejecimiento, sometidos a restricción calórica(40% o 60% ) o en estudios de actividadmetabólica oxidativa.Periódicamente se hace análisis proximal decontraste y vitaminas (A y D3), para verificar suadecuado estado nutricional. Igualmente sehacen análisis microbiológico pre y post-pasteurización.

Agua

El agua suministrada es potable, de la red de suministro. Es filtrada por filtros deporosidad decreciente y en último término pasa por un tubo de luz ultravioleta paraeliminar posibles gérmenes. Se verifica periódicamente su estado microbiológico y estratada mediante sistema de osmosis inversa previamente descalcificada.

Se somete en todos los casos a un proceso de esterilización en el interior de autoclavede vapor.

El agua se dispensa en los biberones de makrolón autoclavados, de forma que losanimales siempre tengan agua fresca y abundante.

Camas

La cama consiste en virutas de madera especialmente tratadas para este propósito.Sufre diferentes tratamientos para evitar que contengan polvo y para maximizar sugrado de absorción de purines. Toda la viruta que se pone en contacto con losroedores, es esterilizada en autoclave de vapor para eliminar cualquier agenteinfeccioso o insectos que pudiera contener.

En el caso de hembras pre-parturientes de Roedores, se les proporciona viruta especialpara la realización de nido.

En el caso de los conejos, estos no reposan sobre cama sino sobre el suelo de rejilla dela jaula. Las deyecciones van a parar a la bandeja inferior que lleva papel absorbenteo viruta.

Limpieza, desinfección y esterilización

La limpieza de las jaulas y biberones se realiza en Lava-racks con detergente y derivado de ácido cítrico, biodegradables y atóxicos para los animales. Se usan otrosdesinfectantes fundamentalmente derivados de peritrinas y amonios cuaternario.Existe un control periódico de la dureza del agua realizado por la propia firmasuministradora de los detergentes para seleccionar así los agentes anti-calcáreos quehaya que disponer en el lavaracks.


Por otra parte existen en la zona de limpieza pilas de inox para la limpieza ydesinfección de materiales previos a su introducción en el lavarcks y autoclaves.

El Área de limpieza o técnica comunica con los pasillos de la Zona de Mantenimiento yzona Experimental por sendas SAS para extracción del material sucio.

La limpieza y desinfección de todos los alojamientos destinados a los animales asícomo de las estanterías donde se encuentran las jaulas y demás aparatos se llevacabo por el personal al cuidado de los animales. Periódicamente se realizandesinsectaciones y desinfecciones mediante termonebulización parciales en la zonade animales y zonas de limpieza.

Trimestralmente se realiza un vacío sanitario, sin presencia de animales, de losdiferentes módulos, realizando una limpieza y desinfección en profundidad y posterioraplicación de desinfección absoluta mediante H2O2 en medio gaseoso mediante elequipo Clarus.

Todas las normas de higiene y desinfección para cada tipo de material, así como lasreferentes a la utilización, mantenimiento, limpieza y calibración de los aparatos yenseres utilizados en la limpieza, desinfección y esterilización, y los correspondientes ala higiene y limpieza que debe observar el personal, se hacen constar por escrito pormedio de Instrucciones Técnicas incluidas en el Procedimiento General de laInstalación, según cumplimiento de normas ISO 9001.

Cuarentena

A pesar de que los animales son adquiridos de centros especializados donde se lesometen a rigurosas pruebas sanitarias, es obligado el que todos los animalesadquiridos en el exterior sean introducidos en salas especiales separadas del resto demódulos de producción y/o experimentación, durante el cual los animales seaclimatan a su nuevo alojamiento. Los animales de categoría SPF sólo se adquieren deempresas especializadas que adjuntan un certificado sanitario exhaustivo en el que seindican todos los parásitos, bacterias y virus de los que deben estar exentos.Normalmente y ante infecciones de las colonias de origen somos avisados antes deadquirir los animales

El tiempo de duración de esta cuarentena es variable dependiendo de la especieanimal en concreto, la duración del transporte y la edad del animal, Además, en esteperiodo de cuarentena los animales serán observados diariamente para comprobar suestado sanitario y se realizarán en todos los casos pruebas diagnósticas de posiblesendo y/o ectopárasitos. La presencia de alteraciones o signos evidentes de patologíahacen obligado un control previo.

Una vez transcurrido el tiempo de cuarentena, estos animales se llevan a través de SASa los módulos de producción o mantenimiento correspondientes.

Destino de los animales

La nueva UEA dentro del Servicio de Producción y Experimentación Animal de laUniversidad de Granada, debe ser tanto Centro Productor como Usuario de animalesde experimentación según las definiciones del Real Decreto 223/1988, por tanto eldestino de los animales es diferente según sean utilizados o no en el propio Centro.


Los animales destinados a ser utilizadoen otros Centros Usuarios, se introducenen embalajes especiales de transportede un solo uso y distribuidosperiódicamente, manteniéndosemenos de 1 hora en el vehículo.

En los casos de transporte superior a 1hora, se les proporciona un gelhidratante (pienso molido mezcladocon gelatina). Se envían por medio deempresas de transporte especializadas.En servicios urgentes

- Experimentación

Los animales que hayan sido utilizados en los procedimientos en el Centro, y que nohayan sido sacrificados dentro del propio procedimiento experimental, se sacrificanmediante técnicas eutanásicas, según la especie de que se trate y siguiendo lasrecomendaciones que a este respecto dictan las organizaciones internacionales.

CONEJOPentobarbital sódico, vía intraperitoneal e intravenosaRATON, RATA, COBAYA:

Sobredosis de barbitúrico Vía IP CO2 + O2 (sobredosis en cámara cerrada) Dislocación cervical Decapitación en guillotina.

Todos los cadáveres de estos animales de experimentación se introducen en bolsashasta su posterior incineración. Restos de animales procedentes de estudios coninfecciosos se someten a esterilización previa. Este servicio, de eutanasia y posteriorincineración es empleado por otros centros usuarios.

Registros

La Unidad dispone de un sistema informatizado de recogida de datos y de gestión delas diferentes colonias mediante software según demanda estimada, por softwarePRODUC. Gestión y organización del stock y mantenimiento por BPL y registro mediantesoftware ANYBIO.

Gestión de la colonia/población animal: Permite identificación colectiva o individual de la población. Control y archivo de los procesos de mantenimiento y producción realizados Permite establecer los sistemas de control de partos, destetes, stock de renovación

y selección de reproductores según modelos experimentales (reubicaciones,destinos, cruces, partos, destetes).

Permite la reconstrucción de la historia un animal durante su permanencia en elCentro: origen, parentesco, controles rutinarios, reubicaciones, cruces, destino.

Seguimiento y control de los lotes experimentales (destino, tratamiento, eutanasia).


Gestión de la población animales (salidas):

Control de archivos de los servicios prestados por el Centro de producción a losinvestigadores con codificación del tipo y número de animales utilizados según elart. 13 de la Directiva 86/609/CEE, correspondiente al control estadístico.

Determinación de los animales asignados a un investigador, con datos de susubicaciones.

Generación de archivos y resúmenes temporales utilizables en otras aplicacionesde gestión de información antes de ser enviada a la autoridad competente.

Control de acceso al programa:

Control y archivo personalizado y codificado de las operaciones realizadas . Selección de usuarios con acceso a los módulos de aplicación. Archivos históricos,

donde se incluye la información enviada a la autoridad competente, nomodificables.

Gestión y organización:

Establecimiento temporizado y generación de las tareas rutinarias y suvalidación según BPL.

Definición de los PNTs rutinarios y su periodicidad en producción,mantenimiento o investigación. Indicación, una vez establecida, de laperiodicidad de cada tarea, con indicación del técnico que debe realizarla, lafecha de ejecución y validación del responsable. Cada PNT incluye un archivode texto explicativo de cómo debe realizarse.

Incluye un apartado donde se recopila toda la información generada por loscontroles ambientales, sanitarios y screening realizada en el Servicio.

PROGRAMA HIGIÉNICO

1. Controles microbiológicos de superficie

Para realizar este control se utiliza equipos de protección individual. Para el controlde la carga microbiológica del ambiente y/o superficies, se utilizan portas flexibles conmedios de cultivo (laminocultivos) o placas de contacto que tienen medios de cultivopara aerobios (PCA o TBS) y levaduras y hongos (Rosa de Bengala o Saboureaud).

Se incubaran en estufa de cultivo a 37º C durante 48 horas, para la valoración decolonias bacteriana y a 25ºC durante 5-7 días para la valoración de hongos ylevaduras. Se tomarán las muestras de aquellos lugares en los que la desinfección seamás delicada o en rincones donde la posibilidad de que el desinfectante no hayapodido penetrar sea mayor. Los resultados se anotarán en la parte correspondientedel libro de registro siguiendo el modelo detallado en la correspondiente IT.

2. Controles microbiológicos ambientales

Como en el control de superficies para realizarlo será necesario utilizar equipos deprotección individual. Para el control de la carga microbiológica del ambiente seutilizarán placas de cultivo microbiológicas TSA para bacterias aerobias y Saboureaudpara hongos y levaduras y el muestreador MAS-100 ECO. El programa preseleccionadorealiza una filtración de 1000 litros de aire en 10 minutos. Las placas de cultivo seincubarán a 37º C durante 48 horas, para la valoración de colonias bacterianas y seprolongará la incubación hasta 5 días a 25ºC para la valoración de hongos ylevaduras. El número total de colonias se puede calcular mediante unas tablas enfunción del número de colonias formadas y los 400 agujeros de filtración del MAC-100Eco. Los resultados se anotarán en la parte correspondiente del libro de registrosiguiendo el modelo detallado en el procedimiento normalizado de trabajo (PNT)


PROGRAMA SANITARIO

En un Centro como el que nos ocupa, destinado a la experimentación animal, lasanidad está basada en la prevención de enfermedades. Sólo en casosexcepcionales y con el consentimiento del investigador se realizarán tratamientosantiparasitarios. El animal no recibe tratamiento alguno puesto que estos tratamientosen determinados casos pueden interferir con los ensayos que se estén realizando. Laprevención de la aparición de procesos patológicos se lleva a cabo mediantetodo el sistema de barreras tanto físicas (sistemas antiinsectos, autoclavado,desinfecciones periódicas, filtración de aire etc.) como referente a la higiene delpersonal (cambio de vestuario, utilización de guantes, desinfección de manos etc). Lossistemas de barrera existentes en el Centro permiten mantener unas condicionessanitarias excelentes que posibilitan el que algunos animales sean mantenidos libres depatógenos específicos de la especie o estado sanitario (SPF).

Controles

Programa Sanitario

En un Centro como el que nos ocupa, destinado a la producción de animales deexperimentación, la sanidad del animal está basada básicamente en la prevenciónde enfermedades.

El animal, salvo excepciones programadas, no recibe tratamiento alguno puesto queestos tratamientos en determinados casos pueden interferir con los ensayos que seestén realizando. La prevención de la aparición de procesos patológicos se lleva acabo mediante todo el sistema de barreras tanto físicas (sistemas anti-insectos,autoclavado, desinfecciones periódicas, filtración de aire etc.), como referentes a lahigiene del personal (cambio de vestuario, utilización de guantes, desinfección demanos etc.), como organizativas (circuito de los materiales, circuitos del personal,cuarentenas etc.). Los sistemas de barrera existentes en el Centro permiten mantenerunas condiciones sanitarias excelentes que posibilitan el que los animales seanmantenidos libres de patógenos específicos de la especie o estado sanitario SPF.

El Servicio dispone de una unidad de Biopatología. Se realiza periódicamente unchequeo completo de una muestra de animales de cada módulo a nivel de parásitosinternos-externos. Una muestra de animales se somete a necropsia ante posiblesindicadores de patología a nivel de órganos o tejidos. Periódicamente se hace análisisde Micoplasma en roedores.

Las colonias de cría de roedores, en caso de parasitosis se pueden someter atratamientos en agua (piperacina e ivermectina)o o en pienso (fenbendazol). Laaplicación de antibioterapia si fuera necesaria, se hace siempre que no afecte aresultados experimentales posteriores. En el caso de signos evidentes de patología, obien se diagnosticara algún proceso patológico que afecte a una colonia deanimales se actuará según sea conveniente. En ciertos casos se utilizará esta coloniaen procedimientos o experimentos que no se vean afectados en sus resultados por lainfección concreta y se procederá a realizar un paulatino recambio de la cepa encuestión. En otros casos, si la enfermedad detectada es muy contagiosa para el restode animales de la misma u otra especie, se procede a la eliminación de estecolectivo, desinfección, vacío sanitario y renovación de los progenitores de esta cepaconcreta. En algunos casos de enfermedades que afectan a rata y ratón, el agenteinfeccioso puede eliminarse mediante cese de la cría durante un cierto tiempo yutilización de animales inmunes para la creación de la nueva colonia.

Y por último, en algunos casos, en animales valiosos y cuando la patología no setransmita por vía placentaria, se procederá a la eliminación del agente etiológico de


la enfermedad mediante transferencia de embriones o mediante cesárea asépticaprevia al parto y adopción de los fetos por madre nodriza sana. Sólo en casos muyconcretos, generalmente cuando se trata de animales que por alguna circunstanciasean únicos y por tanto tengan un valor intrínseco muy elevado, se aplica eltratamiento adecuado a la patología concreta que presenten previa consulta con losinvestigadores interesados. En el caso de los conejos, estos son adquiridos igualmenteen empresas que suministran estos animales SPF (libres de patógenos específicos deespecie). Igualmente en este caso el control sanitario se basa fundamentalmente en laadopción de barreras que impidan la entrada de los agentes patógenos, aunque encaso de presentarse patología en estos animales se suministra el tratamientoadecuado previa consulta con el investigador involucrado. e realiza periódicamenteun chequeo completo de una muestra de animales de cada módulo consistente en:

1. Control de visumDurante el manejo es imprescindible identificar los animales enfermos. Se realizará laobservación diaria de los animales para detectar la enfermedad en éstos y actuar conrapidez comunicándolo al veterinario con objeto de reducir o impedir contagios yevitar que el animal sufra.

2. Controles sanitarios2.1. Agentes a testar. Según las recomendaciones de FELASA, los controles

periódicos a realizar son:

RATÓNAgente FrecuenciaVirusVirus de la hepatitis murina TrimestralRotavirus murino (EDIM) TrimestralParvovirus TrimestralVirus minute murino TrimestralVirus de la neumonía murina TrimestralVirus Sendai TrimestralVirus de la encefalitis murina (Theiler disease) TrimestralVirus ectromelia AnualVirus de coriomeningitis linfocítica AnualAdenovirus murino tipo 1 (FL) AnualAdenovirus murino tipo 2 (K87) AnualCitomegalovirus murino AnualReovirus tipo 3 AnualOtros virus adicionalesBacterias, micoplasmas y hongosCitrobacter rodentium TrimestralCostridium piliforme Trimestral(enfermedad de Tyzzer)Corynebacterium kutscheri TrimestralMycoplasma spp TrimestralPasterellaceae TrimestralSalmonella spp TrimestralStreptococci(β Haemolitico (no grupo D) TrimestralHelicobacter spp AnualStreptobacillus monoliformis AnualOtras bacterias analizadasParásitosEctoparásitos (designar especie) TrimestralEndoparásitos (designar especie) TrimestralOtros parásitos analizadosLesiones macro y microscópicas observadas.


RATAAgente FrecuenciaVírusParvovirus de rata TrimestralVirus Kilham de rata TrimestralVirus de Toolan H1 de rata TrimestralVirus de la neumonía murina TrimestralVirus Sendai TrimestralCoronavirus sialodacrioadenitis TrimestralHantavirus AnualAdenovirus murino tipo 1 (FL) AnualAdenovirus murino tipo 2 (K87) AnualReovirus tipo 3 AnualOtros virus adicionalesBacterias, micoplasmas y hongosBordetella bronchiseptica TrimestralCostridium piliforme Trimestral(enfermedad de Tyzzer)Corynebacterium kutscheri TrimestralMycoplasma spp TrimestralPasterellaceae TrimestralSalmonella spp TrimestralStreptobacillus moniliformis TrimestralStreptococci(β Haemolitico (no grupo D) TrimestralStreptococcus pneumoniae TrimestralHelicobacter spp AnualOtras bacterias analizadasParásitosEctoparásitos (designar especie) Trimestral

ÁcarosEndoparásitos (designar especie) Trimestral

TrichomonasAscarisHelmintos

Otros parásitos analizadosLesiones macro y microscópicas observadasCONEJOSAgente FrecuenciaVirusVirus de la enfermedadHemorrágica TrimestralRotavirus del conejo TrimestralOtros virus analizadosBacteriasBordetella bronchiseptica TrimestralClostridium piliformis(enfermedad de Tizzer) TrimestralDermatofitos TrimestralPasterella multocida TrimestralOtras Pasterellas TrimestralSalmonella spp TrimestralOtras bacterias analizadasParásitosEctoparásitos (designar especie) TrimestralEndoparásitos (designar especie) TrimestralTrichomonas /Ascaris/ HelmintosEncephalitozoon cuniculi TrimestralOtros parásitos analizados y Lesiones macro y microscópicas observadas


Además, se realizará un control sanitario de los animales que entren en lasinstalaciones durante el periodo de cuarentena cuando su origen y la información delcertificado sanitario no sean de confianza.

Si la frecuencia con la que se introducen animales en la Unidad Experimental esalta, se recomienda que la monitorización sea también más frecuente, incluso deforma mensual, con un número inferior de animales: entre 3-5.

2.2. Tamaño de la muestra

El tamaño de la muestra depende en gran medida de la capacidad infectivadel agente, del sistema de alojamiento y del tipo de animales estabulados. Así, engeneral se emplean 3-5 animales por unidad microbiológica para realizar los análisisen un sistema de barrera convencional. Los animales se mantendrán en el módulo unmínimo de 4 semanas.

En el caso de sistemas de estabulación con aisladores o cuando por su elevadovalor intrínseco no se puedan utilizar animales de la misma colonia, se utilizaráncentinelas cuya viruta de las camas, alimento y biberones han estado en contactocon los animales a controlar. Son animales de una fuente externa, testados para losagentes infecciosos y preferentemente de la misma base genética. El número puedeser de 3-5 animales, prestando una especial atención en el caso de los axénicos (sinflora microbiana asociada) y gnotobióticos (con flora microbiana conocida).

2.3. PruebasLos análisis realizados serán una necropsia completa, ordenada y sistemática y

la toma demuestras para análisis serológicos (virus y micoplasma), cultivos (bacterias) yparasitología.

2.4. Resultados

Los resultados de las necropsias y los estudios realizados serán recogidos en loscorrespondientes informes e incluidos en el libro de registro.

Cuando mediante el uso de las técnicas establecidas para los controles se obtenga unresultado positivo que afecte a una colonia de animales, será necesario confirmar estepositivo con una técnica alternativa distinta de la primera. Si es también positivo, seactuará según sea conveniente. En ciertos casos se utilizará esta colonia enprocedimientos o experimentos que no se vean afectados en sus resultados por lainfección concreta y se procederá a realizar un paulatino recambio de la capa encuestión. En otros casos, si la enfermedad detectada es muy contagiosa para el restode animales de la misma u otra especie, se procederá a la eliminación de estecolectivo, desinfección, vacío sanitario y renovación de los progenitores de esta cepaconcreta. En algunos casos de enfermedades que afectan a rata y ratón, el agenteinfeccioso puede eliminarse mediante cese de la cría durante un cierto tiempo yutilización de animales inmunes para creación de la nueva colonia.

En algunos casos de animales valiosos y cuando la patología no se trasmita porvía placentaria, se procederá a la eliminación del agente etiológico de laenfermedad mediante cesárea aséptica previa al parto y adopción de los fetos pormadres nodrizas sanas.

Sólo en algunos casos muy concretos, generalmente cuando se trate deanimales que por alguna circunstancia sean únicos y por tanto, tengan un valorintrínseco muy elevado, puede intentarse el tratamiento adecuado a la patologíaconcreta que presenten previa consulta de con los investigadores interesados.


En el caso de los conejos, estos son adquiridos igualmente en empresas quesuministran estos animales SPF (libres de patógenos específicos de especie).Igualmente en este caso, el control sanitario se basa fundamentalmente en laadopción de barreras que impidan la entrada de agentes patógenos, aunque encaso de presentarse alguna patología en estos animales, se podría suministrar eltratamiento adecuado previa consulta con el investigador involucrado.

CUARENTENA

Según el RD 1201/2005 sobre protección de los animales utilizados paraexperimentación y otros fines científicos, la cuarentena se realizará incluso en animalesque presenten buena salud, como aclimatación. Su duración depende del estrés alque se haya sometido al animal que a su vez depende de la duración del transporte yedad del animal. En general, como recoge el RD 1201/2005, los días son:

Estos animales serán introducidos en salas especiales separadas del resto de losmódulos. Durante este periodo, los animales serán observados diariamente paracomprobar su estado sanitario y se realizarán en su caso las pertinentes pruebasdiagnósticas de posibles parasitaciones o infecciones. Una vez transcurrido eltiempo de cuarentena, estos animales se llevan a través de SAS a los móduloscorrespondientes.

DESTINO DE LOS ANIMALES

Los animales que hayan sido utilizados en los procedimientos en la Unidad y nohayan sido sacrificados dentro del propio procedimiento experimental, seránsacrificados humanitariamente, según la especie de que se trate y siguiendo lasrecomendaciones que a este respecto dictan las organizaciones internacionales.Todos los cadáveres de estos animales de experimentación se introducirán enbolsas y serán congelados hasta su retirada por parte de empresa autorizada(CESPA_ECO).

REGISTROS

La UEA dispondrá de un libro se registro (base de datos de ANIBIO), recogiendo:

1. Animales no utilizados en procedimientos y muertos durante su estancia en elcentro y sus causas.2. Observaciones efectuadas durante el periodo de cuarentena.3. Resultados de los exámenes periódicos sanitarios o de cualquier otro método dediagnóstico efectuado a los animales.4. Resultados de las necropsias realizadas.5. Casos de enfermedad y los tratamientos administrados.

ESPECIE DÍASRatón 5-15Rata 5-15Conejo 20-30Cobaya 5-15


Firmado:Veterinaria, Responsable de Sanidad Animal (Categoría D2).

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