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Unidad: Universidad Autónoma Metropolitana Iztapalapa
División: Ciencias Biológicas y de la Salud
Grado: Licenciatura
Título del trabajo: Efecto de los fitoestrógenos en la anatomía e histología de la
Vesícula Seminal de la rata Wistar.
Nombre del participante: Martínez Flores Karina
Nombre y firma de los asesores:
M. en C. Mario García Lorenzana M. en C. Ma. del Rosario Tarragó Castellanos
Lugar de realización del trabajo: Área de Neurociencias (Laboratorio de
Neurobiología Tisular, S-336), de la Universidad Autónoma Metropolitana
Iztapalapa.
México, D.F., a 1 de julio de 2004.
DR. OSCAR A. MONROY HERMOSILLO
DIRECTOR DE LA DIVISIÓN DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD
PRESENTE
Estimado Dr. Monroy:
Aprovecho la presente para saludarlo y al mismo tiempo informarle que la
alumna Karina Martínez Flores con matrícula 99335630, de la licenciatura en
Biología, terminó satisfactoriamente su Servicio Social titulado “Efecto de los
fitoestrógenos en la anatomía e Histología de la vesícula seminal de rata macho
Wistar”.
La fecha establecida para finalizar el Servicio Social era el 17 de Mayo del
2004, y esto no fue posible debido a que el número de ejemplares procesados y
por analizar fundamentales para el desarrollo y cumplimiento de los objetivos
propuestos, rebasarón la estimación proyectada.
Agradeciendo la fineza de sus atenciones me pongo a sus órdenes para
cualquier aclaración.
A t e n t a m e n t e
“Casa abierta al tiempo”
M. en C. Mario García Lorenzana
Profesor Titular “B” de Tiempo Completo
Area de Neurociencias,
Departamento de Biología de la Reproducción
México, D.F., a 1 de julio de 2004.
DR. OSCAR A. MONROY HERMOSILLO
DIRECTOR DE LA DIVISIÓN DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD
PRESENTE
Estimado Dr. Monroy:
Aprovecho la presente para saludarlo y al mismo tiempo informarle que la
alumna Karina Martínez Flores con matrícula 99335630, de la licenciatura en
Biología, terminó satisfactoriamente su Servicio Social titulado “Efecto de los
fitoestrógenos en la anatomía e Histología de la vesícula seminal de rata macho
Wistar”.
La fecha establecida para finalizar el Servicio Social era el 17 de Mayo del
2004, y esto no fue posible debido a que el número de ejemplares procesados y
por analizar fundamentales para el desarrollo y cumplimiento de los objetivos
propuestos, rebasarón la estimación proyectada.
Agradeciendo la fineza de sus atenciones me pongo a sus órdenes para
cualquier aclaración.
A t e n t a m e n t e
“Casa abierta al tiempo”
M. en C. Ma del Rosario Tarragó Castellanos.
Profesor Titular “C” de Tiempo Completo
Area de Neurociencias,Departamento de Biología de la Reproducción
FORMATO PARA SER LLENADO POR EL (LOS) ASESOR (ES) INTERNO Y EXTERNO
PARA EL PROYECTO INICIAL DEL SERVICIO SOCIAL
1. Nombre y adscripción de los asesores.
M. en C. Mario García Lorenzana
M. en C. Ma del Rosario Tarragó Castellanos.
Area de Neurociencias
Depto. Biología de la Reproducción, CBS, UAMI.
2. La naturaleza del que procede el servicio social es.
[ x ] a) Proyecto de Servicio Social asociado a la investigación que se realiza
en las áreas departamentales.
[ x ] Interno
[ ] Externo
[ ] Por convenio
[ ] b) Proyecto de Servicio Social asociado a actividades disciplinarias
realizadas por el asesor.
3. Nombre del proyecto que deriva el Servicio Social e institución u organismo que lo
avala.
“Efecto del Coumestrol sobre Glándulas Sexuales Accesorias en Ratas Macho Wistar”
Area de Neurociencias, Departamento de Biología de la Reproducción; División de
Ciencias Biológicas y de la Salud, Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa.
4. Justificar la vinculación del asesor con el proyecto de Servicio Social.
Dentro de las actividades del proyecto mencionado, se requiere el procesamiento
histológico y análisis morfométrico de material biológico, por lo que es necesario
incorporar alumnos a esta actividad.
5. Desglosar las actividades que desarrollará el asesor para dirigir el Servicio Social.
ETAPAS MESES
1 2 3 4 5 6
Revisión bibliográfica x x x x x x
Trabajo de bioterio x
Procesamiento de material
biológico
x X
Análisis morfométrico x x
Elaboración del informe x
¿ Considera que la formación que el alumno recibe en la UAM-I es adecuada y suficiente
para su desempeño profesional? ¿ Por qué?
Sí, porque permitió rápidamente incorporarse a la dinámica del proyecto (procesamiento
histológico y análisis morfométrico de material biológico).
6. Anote las fortalezas y debilidades detectadas por usted con respecto a la formación
del estudiante.
Una de las debilidades que encontramos, no solo en nuestro estudiante, sino en general
en todos los estudiantes, es la dificultad para expresarse de manera escrita. Creo que
sería conveniente promover cursos que les permitan desarrollar esta capacidad. Sin
embargo, en nuestro estudiante esta dificultad se subsano gracias a su empeño y
esfuerzo personal.
M. en C. Marío García Lorenzana M.enC. Ma del RosarioTarragó Castellanos.
Nombre: Martínez Flores Karina, Matrícula: 99335630, Licenciatura: Biología
Título del Proyecto: Efecto de los fitoestrógenos en la anatomía e histología de la
Vesícula Seminal de la rata Wistar.
Registro: B.057.03
Nombre de adscripción de los asesores:
M. en C. Mario García Lorenzana Departamento de Biología de la Reproducción
C.B.S.
M. en C. Ma. Del Rosario Tarragó Castellanos Departamento de Biología de la
Reproducción C. B.S.
El 17 de Noviembre se comenzó administrar diferentes dosis de coumestrol a las
ratas, posteriormente se les sometió a eutanasia para obtener las glándulas
seminales y se empezaron a registrar (Glándulas seminales) para comenzar a
prepararlas y procesarlas en el Histoquinet, posteriormente se incluyeron en
paraplast y así poder realizar los cortes transversalmente, luego de obtener el
número de cortes necesarios de los siete tratamientos se tiñeron con tres técnicas
de tinción: Hematoxilina-Eosina, PAS y Azul de Alciano.
Posteriormente se analizaron histológicamente las laminillas de cada tratamiento
para ver si se modificaron sus características de secreción y estructura además
se midió el tamaño de las células de el epitelio para realizar análisis estadístico.
Visto Bueno:
_________________________ _________________________
M. en C. Mario García Lorenzana M. en C. Ma. Del Rosario Tarragó
C.
____________________________
Martínez Flores Karina
“Efecto de los fitoestrógenos en la anatomía e histología de la Vesícula
Seminal de la rata Wistar”
INTRODUCCIÓN
A los compuestos presentes en las plantas que tienen la capacidad de
producir efectos estrogénicos se les denomina, de manera genérica,
fitoestrógenos. En un punto de vista más concreto, se definen así porque son
compuestos en los que se ha demostrado inducir una respuesta similar al de los
estrógenos, es decir que tienen la capacidad de unión a receptores a estrógenos y
la capacidad de inducir una respuesta específica a genes aceptores de estrógenos
(Kurzer, 1997).
Dentro de los fitoestrógenos existen diversas familias de moléculas que se
incluyen de manera general dentro de los denominados isoflavonoides y
corresponden en realidad a tres grupos: las isoflavonas, los pterocarpenos y los
coumestanos (O¨neil et al., 1986). Todos estos compuestos siguen la misma ruta
metabólica, lo cual las ubica en el mismo grupo (Dewick y Martin, 1979).
Los compuestos derivados del ácido cinámico, ácido p-coumárico, etc. son
derivados, en realidad, de amino ácidos aromáticos, dan origen a compuestos de
15 carbonos, como el coumestrol (Salisbury y Ross, 1992).
Estos compuestos están presentes en bajas concentraciones en las
plantas, su efecto en estas es principalmente antimicrobiano (Feet y Osman, 1982)
y fungicida (Sukumaran y Gnanamanickam, 1980).
Los efectos de las isoflavonas en machos es la reducción de la
concentración de testosterona en plasma, atrofia del epitelio de los seminíferos,
atrofia de las glándulas sexuales accesorias (vesículas seminales, coagulantes,
etc.) y provoca metaplasia en las vesículas seminales (Cline et al. 2004).
Los miembros de la familia de las glycoproteínas (gonadotropinas) están
compuestos por dos subunidades una ∝ y otra β, las cuales estimulan a las
gónadas. La subunidad β contribuye a la especificidad de la acción de las
hormonas. Estas subunidades son importantes para que sea eficiente la
interacción con el sistema receptor-hormona en las células blanco. Por lo que el
sistema hormona- receptor funciona como las señales electrónicas en la atmósfera
que son recibidas e interpretadas por la radio/televisión. Así que la hormona
circulante en la sangre es la señal que recibida por el receptor en la célula para
designar las funciones (Ram, 1999).
Con respecto a las denominadas vesículas seminales, estas se denominan
en el ratón como glándulas seminales porque están formadas por un sistema de
pliegues, formando un divertículo irregular y porque estas tienen actividad
secretora a diferencia de las vesículas seminales que solo sirven de receptáculos
y reservorios de espermatozoides (Brian, 1994).
Estas pueden ser identificadas por su epitelio cuboidal simple y por su
intensa tinción eosinófila de sus secreciones. El conducto por el cual se une a la
glándula coagulante también se identifica por su epitelio simple y por su
abundante secreción eosinófila (Smith,1968).
En ratas, las vesículas seminales son pareadas e internamente están
estructuradas por un sistema de divertículos irregulares, en cambio en otros
mamíferos esta consiste de tejido glandular compacto arreglado en forma de
múltiples lóbulos y con un sistema de conductos secretores. El epitelio es
generalmente pseudoestratificado con células columnares. (Smith, 1968)
Los principales conductos excretores están revestidos por epitelio cilíndrico
estratificado; toda la configuración de la glándula es semejante a una estructura
pinnada (es decir, un conducto central a partir del cual se ramifican radialmente
piezas terminales secretoras). También se observan subdivisiones lobulares.
La lámina propia submucosa es típica. La túnica muscular puede tener
capas interna circular y externa longitudinal, o bien éstas se mezclan. En caso de
estar presentes, las túnicas adventicia o serosa son características.
El líquido seminal, junto con las secreciones de otras glándulas sexuales
accesorias, proporcionan un vehículo para el transporte de los espermatozoides.
El producto blanco y gelatinoso secretado ayuda a la formación del tapón vaginal
en algunos roedores. Las secreciones ricas en fructosa son utilizadas como fuente
de energía por los espermatozoides eyaculados. (Banks, 1996). En cuyos la
vesícula seminal ha sido usada como un modelo de estudio de acción de
diferentes hormonas en el epitelio. (Smith, 1968)
OBJETIVO GENERAL.
Analizar el efecto de diferentes dosis de Coumestrol en la morfofisiología de la
vesícula seminal.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Análisis morfométrico de la vesícula seminal tratada con diferentes dosis de
coumestrol.
Análisis del efecto del coumestrol en la organización histológica de la vesícula
seminal.
Análisis estereológico del epitelio glandular de la vesícula seminal
MATERIAL Y MÉTODO
A 70 ratas juveniles se les administraron 0, 12.5, 25, 50, 100, 200 y 400 µg/100µl
de coumestrol durante 3 días, posteriormente se les eutanasió por decapitación,
luego se disecó el aparato reproductor y se aisló la vesícula seminal, que se fijó
con Bouin Dubosqu y se lavó con alcohol de 70% hasta desteñir de ácido pícrico,
posteriormente se deshidrataron con alcoholes graduales de 80, 96, 100, también
se aclararan con Xileno después se incluyeron en Paraplast, y así se realizaron
cortes a 7 µm de espesor, se tiñeron con la técnica de tinción de H-E, PAS y azul
de alciano (Presnell y Schreibman, 1997) la cual se realizó con los siguientes
tiempos: (EN ANEXO); posteriormente los cortes se analizaron con el software
KS-300 y un microscopio Axioskope (Zeiss). Se obtuvieron las medidas de cinco
células de cada epitelio estudiado, con los cuales se realizaron análisis
estadísticos como desviación estándar, promedio así como también se obtuvo el
índice órgano somático.
RESULTADOS
Los datos que se obtuvieron del material procesado se agruparon en
anatómicos (tabla 1 y gráfica 1), histológicos cualitativos (figura 1 y 2) y
morfométricos (tabla 2 y gráfica 2).
Tabla 1. Índice Glándula Seminal Somático (Peso glándula seminal /Peso
Corporal *100).
Grupo Promedio Desv Stan Error Stan
A 0.243 0.067 0.023
B 0.262 0.057 0.018
C 0.332 0.077 0.025
D 0.355 0.052 0.016
E 0.336 0.049 0.015
F 0.318 0.098 0.032
G 0.218 0.122 0.038
Tabla 2. Altura del Tejido Epitelial (Promedio y Desviación estándar). GRUPO A
1554 1558 1560 1585 1593
A3 A7 A4 A1 A8 PROM DESV
12.62 11.12 12.62 11.00 10.66 11.60 0.95
9.52 9.25 12.68 14.22 10.89 11.31 2.12
9.43 13.75 11.52 12.36 10.75 11.56 1.63
11.87 10.06 11.74 12.48 9.81 11.19 1.19
11.08 14.07 12.72 11.87 11.71 12.29 1.15
11.59 1.41
GRUPO B
1601 1613 1627 1629 1633 1637
B10 B5 B3 B6 B4 B1 PROM D. S
13.59 9.38 11.73 10.61 14.28 12.01 11.93 1.82
16.68 10.46 9.52 11.63 12.05 16.73 12.85 3.12
13.18 10.93 9.18 13.26 9.31 10.28 11.02 1.82
12.39 8.40 11.06 13.78 13.26 11.88 11.79 1.93
10.51 11.13 12.00 10.74 12.86 16.01 12.21 2.06
11.96 2.15
GRUPO C 1543 1567 1573 1577 1579 1599 1603 1607
C1 C6 C3 C10 C4 C9 C8 C7 DESV PROM
11.92 12.48 16.46 12.35 17.40 11.45 9.70 13.00 2.57 13.09
14.10 11.94 13.64 12.54 14.68 16.52 10.05 14.00 1.94 13.43
14.64 13.25 16.15 15.64 14.72 12.82 10.75 13.81 1.72 13.97
15.50 12.73 18.68 14.61 17.94 10.78 10.56 13.75 3.00 14.32
13.90 11.88 13.63 11.20 13.45 12.62 12.40 12.62 0.92 12.71
2.03 13.51
GRUPO D 1556 1581 1587 1605 1615 1623 1635 1639
D4 D6 D6 D7 D7 D2 D8 D10 PRO
M
DESV
11.20 9.98 12.01 13.17 12.40 11.57 14.18 14.80 12.41 1.59
12.31 12.05 8.59 11.36 14.57 10.11 13.74 11.95 11.83 1.90
11.12 10.57 11.19 13.57 12.76 12.76 10.95 12.25 11.89 1.08
11.61 13.68 8.17 15.51 12.54 10.34 13.61 11.19 12.08 2.27
13.05 13.26 13.78 16.60 10.78 8.72 10.68 12.00 12.36 2.39
12.12 1.85
GRUPO E 1563 1565 1569 1597 1617 1625
E4 E6 E9 E10 E8 E1 PRO
M
DESV
13.71 9.09 13.96 12.68 10.30 15.04 12.46 2.30
13.39 10.39 15.05 13.76 9.94 14.93 12.91 2.23
12.52 7.63 14.56 9.73 9.60 13.26 11.22 2.64
13.57 12.41 10.83 13.28 10.03 14.57 12.45 1.73
13.29 9.70 14.14 13.09 10.36 12.13 12.12 1.75
12.23 2.13
GRUPO F 1575 1589 1595 1609 1619 1621 1631
F10 F3 F8 F1 F2 F5 F6 PROM DESV
11.63 11.93 11.45 13.66 10.50 11.18 12.24 11.80 0.99
13.72 14.64 11.06 15.77 9.94 10.54 13.01 12.67 2.21
12.31 13.75 11.67 13.26 11.57 10.18 12.45 12.17 1.18
12.71 13.19 10.47 13.05 12.40 11.26 9.40 11.79 1.44
9.20 9.33 10.26 14.21 10.68 10.30 9.44 10.49 1.74
11.78 1.51
GRUPO G G5 G2 G4 G1 G7 G10 G8 G3 PROM DESV
15.21 10.72 11.97 11.16 12.57 9.66 15.98 13.48 12.59 2.19
12.86 9.95 12.48 11.26 15.43 12.49 13.04 13.46 12.62 1.60
12.18 10.04 9.24 12.08 14.25 10.64 18.07 11.71 12.27 2.80
11.21 9.59 9.87 8.24 13.84 11.16 14.28 11.18 11.17 2.06
12.38 14.41 12.49 12.05 11.23 10.35 13.99 14.32 12.65 1.49
12.26 2.03
Gráfica 1 de índice Glándula Seminal Somático
Indice Glándula SeminalSomático
A B C D E F G
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
Tratamientos
Prom
edio
Se presentan diferencias significativas entre el grupo control y las dosis C,
D y E; en tanto que las dosis D y E son diferentes de B
Gráfica 2. Altura del Tejido Epitelial
Altura del Tejdido Epitelial
A B C D E F G
0
10
20
Tratamientos
Prom
edio
El grupo control es significativamente diferente a las dosis C, E y G; B es
diferente a C; C es diferente de A, B, D, E, F y G; E es diferente de C; E es
diferente de A y C; F es diferente de C; G es diferente de A y C.
Análisis Cualitativo
Como se aprecia en los cortes de las gládulas seminales su aspecto histológico se
debe a las invaginaciones extensas y elaboradas de su epitelio secretor, lo cual le
proporciona una extensa superficie secretora que permite que la luz se dilate tanto
como se va llenando con la secreción almacenada. En los distintos tratamientos se
aprecia secreción merocrina, la más abundante; apocrina, no abundante; y
holocrina escasa. (Figura 1). La secreción tiende en lo general a ser azul de
alciano negativo.
Fig. 1. Fotomicrografías de Cortes Tranversales de Glándulas Seminales de Rata Wistar. A Control se observa una secreción homogénea de tipo merocrina; B 12.5 µg/100µl Apréciese que hay dos tipos de secreciones holocrina y merocrina y el epitelio se observa pseudoestratificado; C 25 µg/100µl; D 50 µg/100 µl; E 100 µg/ 100 µl; F 200 µg/
100 µl; G 400 µg/ 100 µl. Nótese que conforme aumentó la cantidad de Coumestrol en el último tratamiento mostraba un comportamiento similar al de sin tratamiento (400x, H-E).
Fig. 2. Fotomicrografías de Cortes Transversales de Glándulas Seminales de Rata Wistar. A Control; B 12.5 µg/ 100 µl; C µg/ 100 µl; D µg/ µl; E µg/ 100 µl; F µg/ 100 µl ; G µg/ 100µl. Nótese la tinción más intensa en grupo D y E por el aumento de secreción que muestra secreción merocrina y holocrina. (50x, Azul- Alciano).
DISCUSIÓN
El índice vesículo somático (IVS) muestra una tendencia hacia el
incremento, que después disminuye ligeramente y se vuelve a un incremento. Este
comportamiento parece coincidir con las variaciones que se presentan en la altura
del epitelio y el tipo de secreción. Estos resultados denotan una hiperplasia e
hipertrofia morfofuncional (Jurado,1989).
El análisis cualitativo muestra heterogeneidad en cuanto al tipo de
secreción por cantidad, con un aparente incremento que corresponde a la
variación en el (IVS) (Groos et al. 1999). La tecnica histoquímica muestra una
ligera variación en la composición que parece seguir el mismo patrón del IVS y del
tipo de secreción por cantidad.
Estos resultados sugieren un efecto estrogénico y antiestrogénico con cierta
ciclicidad, la cual puede explicarse por el comportamiento de los fitoestrógenos
con los receptores a estrógenos. (Newsome & Kitts, 1980).
Nuestros resultados contrastados con otros obtenidos en este grupo de
trabajo nos llevan a pensar en que en eltracto genital masculino se presentan
dieferencias en la distribución en los tipos de receptores a estrógenos, sin
embargo esto deberá confirmarse con técnicas de mayor sensibilidad, que
permitan distinguir los diferentes productos de secreción.
CRITERIOS DE EVALULACIÓN.
1. Presentación de avances en seminarios del área de investigación 2.Reporte escrito
3. Presentación de resultados y conclusiones en congreso
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ANEXO
Técnicas de Tinción
Hematoxilina-Eosina
1) Xileno I 5 min.
2) Xileno II 5 min.
3) Xilol-alcohol (1:1) 3 min.
4) Alcohol 100º I 2 min.
5) Alcohol 100º II 2 min.
6) Alcohol-eter 2 min.
7) Alcohol 96º 2 min.
8) Alcohol 80º 2 min.
9) Alcohol 60º 2 min.
10)Agua destilada 3 lavados
11)Hematoxilina 5:30 min.
12)Agua de la llave lavado
13) Alcohol ácido lavado
14) Agua destilada lavado
15) Solución de Scott 8 min.
16) Agua destilada lavado
17) Eosina 5 min.
18) Agua destilada lavado
19) Alcohol 96º I lavado
20) Alcohol 96º II lavado
21)Alcohol 100º I lavado
22) Alcohol 100º II lavado
23) Alcohol- xilol lavado
24) Xileno I lavado
25) Xileno II lavado
En esta técnica las combinación de los dos colorantes, hematoxilina (morado) y
eosina (rojo), es la tinción más útil para el examen de materiales biológicos
(Junqueira, 1976).
Azul de Alciano Ph 2.8
1) Xileno I 5 min.
2)Xileno II 5 min.
3)Xilol-alcohol (1:1) 3 min.
4)Alcohol 100º I 2 min.
5)Alcohol 100º II 2 min.
6)Alcohol 96º 2 min.
7)Alcohol 80º 2 min.
8)Alcohol 60º 2 min.
9)Agua destilada 3 lavados
10)Ácido Acético al 3% 3 min.
11)Azul de Alciano 30 min.
12) Bicarbonato 0.3% 30 min.
13) Agua corriente lavado 10 min.
14) Kernechtrot 10 min.
15) Agua destilada lavado
16) Alcohol 96° I lavado
17) Alcohol 96° II lavado
18) Alcohol 100° I lavado
19) Alcohol 100° II lavado
20) Alcohol- Xilol
21) Xilol 100° I
22) Xilol 100° II
El colorante Azul de Alciano se utiliza para poner de manifiesto mucinas ácidas
secretadas por algunas células epiteliales y pueden combinarse con la reacción
de PAS para diferenciar mucinas epiteliales ácidas de las neutras.
Variando el pH u otras variables en las solución pueden utilizarse de manifiesto
la matriz extracelular de glucosaminoglucanos de la célula de sostén (Junqueira,
1976).
PAS-HEMATOXILINA
1) Desparafinar e Hidratar
2) Xileno I 5 min.
3) Xileno II 5 min.
4) Xileno-Alcohol 100° 5 min.
5) Alcohol 100° I 5 min.
6) Alcohol 100° II 5 min.
7) Alcohol 96° I 5 min.
8) Alcohol 96° II 5 min.
9) Alcohol 80° 5 min.
10) Alcohol 60° 5 min.
11) Agua destilada 5 min.
12) Ácido Peryódico 5 min.
13) Agua corriente 5 min.
14) Reactivo de Shift 12 min.
15) Metabisulfito de sodio 5 lavados de 2 min. Cada uno
16) Agua corriente 5 min.
17) Agua destilada lavado
18) Hematoxilina 5:30 min.
19) Agua corriente lavado
20) Alcohol ácido lavado
21) Agua destilada lavado
22) Solución de Scott 8 min.
23) Agua destilada lavado
24) Alcohol 96° I lavado
25) Alcohol 96° II lavado
26) Alcohol 100° I lavado
27) Alcohol 100° II lavado
28) Alcohol-Xilol lavado
29) Xilol I lavado
30) Xilol II lavado
El método de PAS, tiene muchas aplicaciones en especial para poner de
manifiesto los hidratos de carbono, solos como glucógeno o combinados con otras
moléculas como proteínas (glucoproteínas). Puede utilizarse para delimitar las
membranas basales y algunas mucinas neutras secretadas por diversas células
epiteliales secretoras (Junqueira, 1976).
SOLUCIÓN DE BOUIN
Solución saturada acuosa de ácido pícrico 75 ml.
Formol 37-40% 2.5 ml.
Ácido acético glacial 5 ml.
HEMATOXILINA DE HARRIS
Hematoxilina 5.0 g.
Etanol al 100% 50.0 ml.
Alumbre de Potasio de amonio 100 g.
Agua destilada 1000 ml.
Óxido rojo de Mercurio 2.5 g.
Use un frasco de 2000 ml para el alumbre y el agua y uno más pequeño para el
etanol y la hematoxilina. Disuelva completamente el alumbre en el agua destilada
con la ayuda de color y de un agitador magnético. Agite vigorosamente para
disolver la hematoxilina en el alcohol a temperatura ambiente, remueva el alumbre
y el agua destilada de la fuente de calor, lentamente combine las dos soluciones
devolviendo la solución resultante a la fuente de calor hasta hervir tan rápido como
sea posible, aproximadamente durante un minuto o menos. Retire del calor y
lentamente añada el óxido de mercurio, ya que al añadirlo rápidamente provocaría
que la solución hierva y se derrame. Devuelva la solución a la fuente de calor
hasta que tome un color púrpura oscuro, después se retira del calor y se coloca en
un recipiente con agua fría hasta que baje su temperatura. La solución entonces
está lista, añada 20 ml de ácido acético glacial para intensificar la tinción nuclear,
filtre la solución cada vez antes de usarla.
SOLUCIÓN DE SCOTT
Bicarbonato de sodio 2.0 g.
Sulfato de magnesio 20.0 g.
Agua destilada 1000 ml.
A 2 g de bicarbonato de sodio disolverlos en 200 ml de agua destilada; a 20 g de
sulfato de magnesio disolverlos en 600 ml de agua destilada, mezclar ambas
soluciones y agregar 200 ml más de agua para aforar a 1000 ml (Presnell, Et. al,
1997).
HISTOQUINET
Alcohol 80° 1h.
Alcohol 96°I 1h.
Alcohol 96° II 1h.
Alcohol 96° III 1h.
Alcohol 100° I 1h.
Alcohol 100° II 1h.
Alcohol 100° III 1h.
Alchol-Xileno (1:1) 1h.
Xileno I 1:20min.
Xileno II 1:20min.
Paraplast I 2h.
Paraplast II 7h.
Nombre: Martínez Flores Karina
Matricula: 99335630
Teléfono: 01597-9777741
Licenciatura: Biología
División: Ciencias Biológicas y de la Salud
Unidad Universitaria: Iztapalapa
Trimestre Lectivo: P-04
Título del Proyecto de Investigación: EFECTO DEL COUMESTROL SOBRE
GLÁNDULAS SEXUALES ACCESORIAS EN RATA MACHO WISTAR.
Título del Trabajo del Servicio Social: EFECTO DE LOS FITOESTRÓGENOS EN
LA ANATOMIA E HISTOLOGÍA EN EL COMPLEJO GLANDULAR DE RATA
MACHO WISTAR.
Nombre de los Asesores:
M. en C. Mario García Lorenzana y M. en C. Maria del Rosario Tarragó
Castellanos
Lugar de realización: Área de Neurociencia (Laboratorio de Neurobiología Tisular,
S-336), de la Universidad Autónoma Metropolitana Iztapalapa.
Clave de Registro: B.057,03
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