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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA DE QUÍMICA Y FARMACIA
MODALIDAD INVESTIGACIÓN
TEMA:
EVALUACIÓN DE LA TOXICIDAD AGUDA ORAL DE LOS EXTRACTOS
ACUOSOS DE LAS HOJAS DE Malva sylvestris y Malva pseudolavatera.
Trabajo de titulación previo a la obtención del título de:
Químico y Farmacéutico
AUTORES:
• STEPHANY MADELYNE GARCÍA GUTIÉRREZ
• ANGIE BRIDGET MACÍAS SUÁREZ
TUTOR DE TITULACIÓN:
Q.F. GLENDA SARMIENTO TOMALÁ. MSC.
Guayaquil – Ecuador
2019
xii
DEDICATORIA
Este trabajo de titulación se lo dedico a mi Dios, por darme la sabiduría e
inteligencia para cumplir esta meta, sin la ayuda de Él esto no sería posible.
A mi padre Marcelo García al cual amo y admiro mucho quien amorosamente
todos los días madrugaba a dejarme en el terminal de mi ciudad y nunca faltaba
el mensaje de “ya llegué a la u papi”; a mi linda madre Johanna Gutiérrez por
sus palabras de amor y motivación en los momentos difíciles y decirme “este
equipo nunca pierde”, gracias por brindarme siempre su apoyo e inculcarme
buenos valores, los amo.
A mis hermanos, Nicole, Daniela y Mathías García que me brindaron su total
apoyo y motivación en momentos difíciles.
También a mi mami Chilo por siempre estar pendiente y darme palabras de
amor y motivación, a mi tía Mariela por su apoyo incondicional y por enseñarme
que todo lo puedo lograr si me lo propongo de verdad.
Madelyne García Gutiérrez.
xiii
DEDICATORIA
Dedico este trabajo principalmente a Dios que ha sido esa fuerza de impulso
en el transcurso de mi carrera universitaria.
A mis padres Enia Suárez y Hugo Macías, por brindarme el apoyo y amor de
forma incondicional los cuales han sido fuente de inspiración y motivación en
esta etapa de formación profesional, porque este logro se lo debo
indiscutiblemente a ello por su esfuerzo tanto económico como emocional y
porque supieron educarme para no rendirme ante las dificultades que se
presentaron durante estos cinco años.
Mis hermanas Keberlin Macías quién es un ejemplo de profesionalismo, pues
me contagió de esas ganas de ser mejor cada día y de esa pasión por el estudio;
a Nahomi Macías que a pesar de corta edad supo aconsejarme en cada
momento.
A mis abuelitos y demás familiares por su apoyo incondicional. Y no podían
faltar los grandiosos amigos que hice ente etapa de mi vida Ximena, Jennifer,
Madelyne, Narcisa, Carlos y Henry porque lograron transformar el estrés
universitario en alegrías y además porque siempre estuvieron en cada momento
para mí.
Angie Macías Suárez
xiv
AGRADECIMIENTO
Agradezco en primer lugar a mi Dios Todopoderoso el cual ha estado conmigo
siempre, a mis hermosos padres Marcelo y Johanna que me han dado su apoyo
al 100% durante toda mi formación profesional, secular y espiritual. A mis
hermanos Nicole, Danielita y mi príncipe Mathías por su apoyo tanto en lo
emocional como motivacional.
A mis abuelos y mi tía Mariela por ser ese pilar fundamental en mi vida para
lograr mis metas. A mi gran amigo, mi amor y futuro compañero para toda la vida
–Will- le agradezco por estar siempre pendiente de cada detalle.
De la misma manera, agradezco a mi Tutora de Tesis, mi querida Dra. Glenda
Sarmiento Tomalá por ser mi guía y darme todo su apoyo durante este proceso
de titulación, para así gracias a su ayuda y conocimiento poder ser una Química
Farmacéutica.
Y como no mencionar a los amigos que me regaló la Universidad, Ximena,
Angie (Pastelito), Carlitos, Narcisa, Jennifer (Nucita) y Henry. Gracias a cada uno
de ellos por la ayuda y los momentos que compartimos.
Madelyne García Gutiérrez.
xv
AGRADECIMIENTO
Agradezco en primer lugar a Dios por hacer posible la culminación de este
trabajo de titulación. A mis padres Enia y Hugo por su apoyo incondicional en
cada momento y por su esfuerzo para que logre ser una profesional de ética.
A mis hermanas Keberlin y Nahomi por sus palabras de aliento y por nunca
decirme no cuando necesite de su ayuda. Además, a mi tía Lucía Suárez y me
querido padrinito Wilson Toala por su apoyo y cariño sincero que me han
brindado durante toda mi vida y en especial en el transcurso de mi carrera
universitaria.
Finalmente, y muy importante agradezco a mi tutora la Dra. Glenda Sarmiento
Tomalá por la enorme que nos brindó como docente y especialmente durante el
desarrollo del trabajo de titulación para la obtención al título de Química
Farmacéutica, por brindarnos cada uno los conocimientos que posee para
permitir que sea una profesional de éxito.
Angie Macías Suárez
xvi
INDICE
RESUMEN ...................................................................................................... xxv
ABSTRACT .................................................................................................... xxvi
INTRODUCCIÓN ............................................................................................... 1
CAPITULO I ....................................................................................................... 3
PROBLEMA ....................................................................................................... 3
I. 1. Planteamiento y Formulación del Problema ......................................... 3
I. 2. Justificación e Importancia ................................................................... 3
I. 3. Hipótesis ............................................................................................... 4
I. 4. Objetivos............................................................................................... 4
I. 4.1. Objetivo general ............................................................................. 4
I. 4.2. Objetivos específicos ..................................................................... 4
I. 5. Operacionalización de las Variables ..................................................... 4
CAPÍTULO II ...................................................................................................... 6
MARCO TEÓRICO ............................................................................................. 6
II. 1. Antecedentes ........................................................................................ 6
II. 2. Toxicidad .............................................................................................. 7
II 2.1 Factores de riesgo de acuerdo al consumo y manejo de compuestos
químicos. ..................................................................................................... 7
II 2.2 Tipos de Toxicidad .......................................................................... 7
II. 3. Metodologías de Estudio para la Toxicidad Aguda ............................... 8
II 3.1 Procedimiento de dosis fija. Guía OECD 420 ................................. 8
II 3.2 Método de las Clases Tóxica Aguda. Guía OECD 423 ................... 8
II 3.3 Método arriba y abajo (UDP). Guía OECD 425 .............................. 9
II 4. Estudios de Toxicidad Preclínicos ........................................................ 9
xvii
II 4.1 Ensayos de toxicidad aguda. ........................................................ 9
II 4.2 Ensayos de toxicidad subagudos ................................................ 10
II 4.3 Ensayos de toxicidad sub-crónicos. ............................................ 10
II 4.4 Ensayos de toxicidad crónicos. ................................................... 10
II 5. Malva pseudolavatera ...................................................................... 10
II 5.1 Descripción botánica ................................................................... 10
II 5.2 Componentes activos ................................................................. 11
II 5.3 Propiedades terapéuticas ........................................................... 11
II 6. Malva sylvestris ................................................................................. 12
II 6.1 Clasificación científica ................................................................. 12
II 6.2 Descripción de la planta .............................................................. 13
II 6.3 Recolección y conservación de la M. sylvestris .......................... 13
II 6.4 Componentes principales de la malva. ....................................... 14
II 6.5 Toxicidad de la Malva sylvestris .................................................. 14
II 6.6 Efectos secundarios de la malva. ............................................... 15
II 7. Requisitos y características relacionados al uso de animales
experimentales .............................................................................................. 15
II 7.1 Condiciones ................................................................................ 15
II 7.2 Microambiente ............................................................................ 15
II 7.3 Macroambiente ........................................................................... 16
II 7.4 Temperatura y humedad relativa ................................................ 16
II 7.5 Tipo de luz y grado de iluminación .............................................. 16
II 7.6 Ética y experimentación animal .................................................. 16
CAPÍTULO III ................................................................................................... 17
MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................ 17
III. 1. Método científico empleados en la investigación ............................... 17
xviii
III. 1.1. Métodos Teóricos ....................................................................... 17
III. 1.2. Método Empírico ......................................................................... 17
III 2. Diagrama de Métodos ....................................................................... 17
III. 3. Tipo de Investigación ........................................................................ 19
III. 3.1. Exploratoria ................................................................................. 19
III. 4. Equipos, Aparatos, Materiales y Reactivos ....................................... 19
III. 4.1. Equipos ...................................................................................... 19
III. 4.2. Aparatos .................................................................................... 19
III. 4.3. Materiales .................................................................................. 20
III 4.4. Reactivos ................................................................................... 20
III 5. Muestra ............................................................................................. 20
III 6. Metodología Experimental................................................................. 20
III 6.1. Condiciones ambientales .......................................................... 20
III 6.2. Conformación de Grupos .......................................................... 21
III 6.3. Obtención de extractos acuoso de hojas de Malva sylvestris y
Malva pseudolavatera ................................................................................ 21
III 6.4. Toxicidad aguda oral mediante el método de las clases ........... 22
III 6.5. Administración del tratamiento .................................................. 22
III 6.6. Procedimiento de la experimentación ....................................... 23
CAPÍTULO IV ................................................................................................... 24
RESULTADOS Y DISCUSIONES .................................................................... 24
IV 1. Resultados de las pruebas de los Biomodelos ............................... 24
IV 1.1. Pesos corporales de los Biomodelos ........................................ 24
IV 1.2. Consumo de alimento durante los días de experimentación .... 28
IV 1.3. Consumo de agua durante los días de experimentación. ......... 30
IV 1.4. Signos tóxicos observados durante el tiempo de evaluación ... 32
xix
IV 1.5. Observaciones macroscópicas de órganos al finalizar la
experimentación ........................................................................................ 44
IV. 2. Discusiones ........................................................................................ 50
CONCLUSIONES ............................................................................................. 52
RECOMENDACIONES .................................................................................... 52
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................. 53
GLOSARIO ....................................................................................................... 58
ANEXOS .......................................................................................................... 60
xx
INDICE DE TABLAS
Tabla I: Operacionalización de las variables...................................................... 5
Tabla II: Pesos promedios iniciales y desviación estándar de los grupos
trabajados en el estudio de Toxicidad Agua Oral de los extractos acuosos de
hojas de Malva pseudolavatera y Malva sylvestris. .......................................... 21
Tabla III: Grupos de animales tratados con extractos acuosos de Malva sylvestris
y Malva pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Agua Oral ........................ 22
Tabla IV: Comparación de la ganancia de peso corporal durante los siete
primeros días de la experimentación ................................................................ 25
Tabla V: Comparación de la ganancia de peso corporal del día siete al día
catorce de experimentación. ............................................................................ 27
Tabla VI: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera a
una dosis de 2000 mg/Kg. ................................................................................ 32
Tabla VII: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera a
una dosis de 300 mg/Kg. .................................................................................. 33
Tabla VIII: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera a
una dosis de 50 mg/Kg. .................................................................................... 34
Tabla IX: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera a
una dosis de 5 mg/Kg. ...................................................................................... 35
Tabla X: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad
aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva sylvestris a una dosis de 300
mg/Kg ............................................................................................................... 38
Tabla XI: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva sylvestris a una
dosis de 50 mg/Kg. ........................................................................................... 39
xxi
Tabla XII: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva sylvestris a una
dosis de 5 mg/Kg. ............................................................................................. 41
Tabla XIII: Signos observados durante los días de experimentación de la
Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de hojas de Malva sylvestris. ....... 42
Tabla XIV: Valoraciones macroscópicas de Órganos diana. ........................... 44
xxii
INDICE DE FIGURAS
Figura I: Malva pseudolavatera ....................................................................... 11
Figura II: Malva sylvestris ................................................................................ 12
Figura III: Composición Fitoquímica de Malva sylvestris ................................. 14
xxiii
INDICE DE GRÁFICOS
Gráfico I: Peso promedio inicial de los grupos tratados con los extractos acuosos
de hojas de Malva pseudolavatera y M. sylvestris en el estudio de toxicidad
aguda oral ........................................................................................................ 24
Gráfico II: Peso promedio a los siete días de experimentación de los grupos
tratados con el Extractos acuosos de Hojas de Malva pseudolavatera y M.
sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ............................................ 25
Gráfico III: Peso promedio a los catorce días de la experimentación de los
grupos tratados con Extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M.
sylvestris en el estudio de la Toxicidad aguda oral. ......................................... 26
Gráfico IV: Consumo de balanceado (g) durante los primeros siete días de la
experimentación de los grupos tratados con Extractos acuosos de las hojas de
Malva pseudolavatera y M. sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. 28
Gráfico V: Consumo de balanceado (g) durante la segunda semana de
experimentación de los grupos tratados con Extractos acuosos de hojas de
Malva pseudolavatera y M. sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. 29
Gráfico VI: Consumo de agua diaria (ml) durante la primera semana de
experimentación en el estudio de la Toxicidad aguda oral de los extractos
acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M. sylvestris ............................. 30
Gráfico VII: Consumo de agua diaria (ml) durante la segunda semana de
experimentación en el estudio de la Toxicidad aguda oral de los extractos
acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M. sylvestris. ............................ 31
INDICE DE DIAGRAMAS
Diagrama I: Diagrama de Métodos .................................................................. 17
xxiv
INDICE DE ANEXOS
Anexo A. Conformación de grupos de trabajo ................................................. 60
Anexo B. Observación de los signos tóxicos durante las primeras 4 horas. Post-
tratamiento. ...................................................................................................... 60
Anexo C. Disección de Animales de experimentación .................................... 61
Anexo D. Disección de animales en el día 14 ................................................. 61
Anexo E. Realización de Cortes para pruebas histopatológicas ..................... 62
xxv
FACULTAD: CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA: QUÍMICA Y FARMACIA
UNIDAD DE TITULACIÓN
“EVALUACIÓN DE LA TOXICIDAD AGUDA ORAL DE LOS EXTRACTOS
ACUOSOS DE LAS HOJAS DE Malva sylvestris y Malva pseudolavatera”
Autores: García Gutiérrez Stephany Madelyne
Macías Suárez Angie Bridget
Tutor: Q.F Glenda Marcela Sarmiento Tomalá
RESUMEN
El objeto de estudio fue evaluar la toxicidad aguda oral de los extractos
acuosos de hojas de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera. Para el estudio
se realizó una administración única de los extractos; se utilizaron cuatro grupos
de ratones, cada uno conformado por 5 hembras, las dosis fueron 2000, 300, 50
y 5 mg/Kg y un grupo control al cual no se le administró el extracto. Se evaluó el
peso inicial de los ratones, a los siete y catorce días post administración, de
forma periódica se calculó el consumo de agua, balanceado y presencia de
signos tóxicos. Con los datos obtenidos de la evaluación de signos tóxicos, las
primeras cuatro horas post administración a la dosis de 2000 mg/Kg se observó
1 de 5 ratones presentaron una sola vez heces blandas y 1 de 5 animales
presentó orina de color amarillo intenso, pasado este tiempo los signos
desaparecieron.
Palabras clave: Toxicidad aguda, dosis, extractos acuosos
xxvi
FACULTAD: CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA: QUÍMICA Y FARMACIA
UNIDAD DE TITULACIÓN
“EVALUACIÓN DE LA TOXICIDAD AGUDA ORAL DE LOS EXTRACTOS
ACUOSOS DE LAS HOJAS DE Malva sylvestris y Malva pseudolavatera”
Autores: García Gutiérrez Stephany Madelyne
Macías Suárez Angie Bridget
Tutor: Q.F Glenda Marcela Sarmiento Tomalá
ABSTRACT
The object of the study was to evalue the acute oral toxicity of the aqueous
extracts of Malva sylvestris and Malva pseudolavatera leaves. For the study, a
single administration of the extracts was performed; four groups of mice were
used, each consisting of 5 females, the doses were 2000, 300, 50 and 5 mg/Kg
and a control group to which the extract was not administered. The initial weight
of the mice was evaluate, at seven and fourteen days after administration, the
consumption of water, balanced and presence of toxic signs was calculate
periodically. With the data obtained from the evaluation of toxics signs, the first
four hours after administration at the dose of 2000 mg/Kg, 1/5 mice were observe
once presented with soft stools and 1/5 animals presented with intense yellow
urine, past this time the signs disappeared.
Keywords: acute toxicity, doses, aqueous extracts,
1
INTRODUCCIÓN
Desde épocas milenarias las plantas medicinales han sido utilizadas por la
humanidad, debido a sus grandes aportaciones terapéuticas en el sistema de
salud y constituye una opción farmacológica en el tratamiento de diversas
enfermedades.
Generalmente la utilización de diversas especies vegetales en forma de
infusión, decocción o maceración se visualiza principalmente en las zonas
rurales del país. Sin embargo, muchas de sus aplicaciones no poseen bases
científicas, por el contrario, son empleadas a manera de experiencias o en modo
de supervivencia por el ser humano, por lo que es necesario llevar a cabo
estudios pre-clínicos que nos ayuden a descubrir posibles efectos tóxicos
después de su administración1.
En el Ecuador2, gracias a la diversidad climática registra el 10% de las
especies de plantas del planeta de las cuales la mayoría crece en la Cordillera
de Los Andes; debido a esto nuestro territorio se ha constituido en uno de los
países con gran potencial en lo referente a la medicina tradicional, por lo que es
importante establecer los diversos aspectos de usos y beneficios curativos de
cada planta.
Malva es una planta que se la puede encontrar en nuestro país, pertenece al
reino plantae, a la familia Malvaceae, se han encontrado alrededor de 30
especies las cuales se encuentras ubicadas en las zonas templadas del Ecuador;
se considera una especie herbácea y perenne, que mide alrededor de 1,5 m de
alto, a la cual se le atribuyen grandes propiedades medicinales3.
A la especie Malva sylvestris se le atribuyen propiedades laxantes,
antiinflamatorias, antimicrobianas, debido a que poseen gran cantidad de
mucílagos, vitaminas, betacarotenos, flavonoides y aceites esenciales; de la
misma manera Malva pseudolavatera es la especie más utilizada en nuestro país
principalmente para contrarrestar problemas gastrointestinales, pero no existe
gran cantidad de datos que nos proporcionen información sobre la M.
pseudolavatera sus demás componentes y propiedades4.
2
Debido a la falta de conocimiento sobre reacciones adversas, efectos
secundarios y las consecuencias que pueden ocurrir debido a la ingesta de
extractos de plantas medicinales es necesario establecer la seguridad de su
consumo. Por lo que el presente trabajo de investigación se pretende evaluar la
toxicidad aguda oral de los extractos acuosos de las hojas de dos tipos de Malva
(Malva sylvestris y Malva pseudolavatera).
3
CAPITULO I
PROBLEMA
I. 1. Planteamiento y Formulación del Problema
¿Cuál será la dosis aguda en que los animales a los que se les ha
administrado extracto acuoso de las hojas de Malva pseudolavatera y Malva
sylvestris presentan signos tóxicos?
I. 2. Justificación e Importancia
Las intoxicaciones agudas en la actualidad son un importante problema en la
morbilidad y mortalidad del mundo. Es muy probable que los productos de origen
vegetal tóxicos fueron manejados por el hombre y esto depende de la cantidad
de toxinas ingeridas en una unidad de tiempo.
Desde hace mucho tiempo las plantas medicinales dejaron de ser parte
solamente de los bosques y han pasado a formar parte de los jardines de
nuestras casas por su destacada forma y belleza.
En un estudio realizado en el país de Cuba, reporta que de 52 pacientes,
arrojaron un resultado de 95.8% de intoxicación de plantas medicinales
administradas por vía oral, siendo la Nuez moscada el de mayor prevalencia
toxicológica5.
En el Ecuador en el periodo 2008-2010 según el CIATOX asesoró un total de
3878 casos de intoxicación de los cuales solo el 3% fue por plantas.
En el presente trabajo se evaluó la seguridad en cuanto a la determinación de
la dosis con la que se podría consumir los extractos acuosos de las especies
vegetales en estudio; debido a que una de ellas Malva pseudolavatera es de
gran expendio en los mercados y la población ecuatoriana la consume por sus
propiedades medicinales ya sea para aliviar disturbios a nivel gástricos o también
en afectaciones respiratorias como mucolítico.
4
I. 3. Hipótesis
Los animales tratados con los extractos acuosos de las hojas de Malva
pseudolavatera y Malva sylvestris no presentan signos clínicos que indiquen
toxicidad por parte de las especies vegetales.
I. 4. Objetivos
I. 4.1. Objetivo general
➢ Evaluar la toxicidad aguda oral de los extractos acuosos de las hojas de
Malva pseudolavatera y Malva sylvestris.
I. 4.2. Objetivos específicos
➢ Definir presencia de mortalidad con la administración de dosis tóxica
aguda de los extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y Malva
sylvestris.
➢ Registrar los signos tóxicos que presentan los grupos de animales que
se les ha administrado los extractos acuosos de las hojas de Malva
pseudolavatera y Malva sylvestris.
➢ Describir los resultados macroscópicos de los órganos diana de los
diferentes grupos de animales ensayados.
I. 5. Operacionalización de las Variables
VARIABLES
DEPENDIENTE
➢ Porcentaje de mortalidad.
5
➢ Signos tóxicos
➢ Alteración macroscópica y microscópica de órganos diana.
INDEPENDIENTE
➢ Dosis: mg/kg de peso.
➢ Extractos: Malva sylvestris y Malva Pseudolavatera.
Tabla I: Operacionalización de las variables
Conceptualización Indicador
Dependiente
Órganos
diana
Es el órgano específico
que reacciona frente a un
estímulo ya sea interno o
externo
Sistema nervioso
central
Sistema gástrico
Sistema
genitourinario.
Macroscópica:
Estómago –
Intestinos – Hígado
– Riñón.
Mortalidad
Cantidad de personas
que fallecen en un lugar y un
periodo de tiempo en
relación con el total de
población.
%
Independiente
Dosis Cantidad de droga
administrada mg/kg peso
Extractos
Sustancia concentrada
que se obtiene de una planta
por diversos procesos
Fuente: Autores
6
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
II. 1. Antecedentes
Las especies medicinales utilizadas de forma tradicional por la población son
Malva sylvestris o también llamada malva común y Malva pseudolavatera,
quienes forman parte de la familia Malvaceae. Estas especies son originarias de
Europa, África del Norte y Asia. Algunas partes de estas plantas como las hojas
y las flores son empleadas en medicina tradicional. Se ha puesto de manifiesto
que las hojas en particular poseen grandes beneficios medicinales como
actividad antiinflamatoria, antioxidante, anticancerígena y antiulcerogénico ya
que entre sus principales principios activos se encuentran los mucílagos y
flavonoides6.
En ensayos fitoquímicos anteriormente realizados en Malva pseudolavatera
evidenciaron la presencia de taninos, flavonoides, saponinas y mucílagos; así
también se evidenció la presencia de lactonas, triterpenos, fenoles, taninos,
alcaloides, flavonoides y mucílagos en la especie Malva sylvestris; estos
principios activos son los que les dan propiedades terapéuticas a dichas
especies7.
Dentro de los ensayos Pre-Clínicos se encuentran los estudios de toxicidad
aguda los cuales son importantes para estimar el potencial tóxico de una
sustancia, esto hace referencia al análisis cualitativo y cuantitativo de las
manifestaciones tóxicas y su aparición después de un tiempo luego de una
administración única o de varias dosis de la sustancia en el tiempo de 24 horas1.
No se evidencia estudios científicos como tal que demuestren que los
extractos acuosos de hojas de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera son
tóxicas para los seres humanos.
7
II. 2. Toxicidad
La toxicidad se define como la capacidad intrínseca que posee un agente
químico de producir efectos adversos sobre un órgano8, esto va a depender de
un conjunto de circunstancias y condiciones tales como: procesos de
biotransformación y los mecanismos de defensa del individuo; estos dos factores
están determinados de acuerdo a las características genéticas y circunstancias
fisiológicas de cada individuo9.
Se menciona también que las categorías de toxicidad se refieren a una
calificación arbitraria de las dosis o niveles de exposición que causan efectos
tóxicos10. La clasificación de la toxicidad se refiere a la agrupación de las
sustancias químicas en categorías generales conforme a su efecto tóxico
principal.
II 2.1 Factores de riesgo de acuerdo al consumo y manejo de
compuestos químicos.
a) Características Físico-Química de las sustancias
b) Potencialidad tóxica (pT) Está inversamente relacionado a las
cantidades exactas que causan alteraciones a los seres vivos.
c) Probabilidad de que sea absorbida por el hombre, depende de la
Exposición y la frecuencia lo cual va a definir el riesgo o probabilidad que se
produzca un efecto tóxico.
II 2.2 Tipos de Toxicidad
Clasificación a la toxicidad en dos categorías: aguda y crónica11.
II 2.2.1Toxicidad Aguda: Aparece durante el tratamiento o en el periodo
inmediatamente posterior a la administración
II 2.2.2. Toxicidad Crónica: Aparecen en lapsos de tiempos más
prolongados, los cuales oscilan a meses o años tras el tratamiento.
II 2.2.3 Toxicidad Sub-Aguda: Toxicidad causada por intoxicaciones a
corto plazo, es considerada de gravedad inferior a diferencia de la Toxicidad
aguda.
8
II. 3. Metodologías de Estudio para la Toxicidad Aguda
II 3.1 Procedimiento de dosis fija. Guía OECD 420
Este método en un principio se basaba en la utilización de la dosis mayor
(2000 mg/kg peso) en el cual la muerte de los animales era indicativa de toxicidad
aguda, para el año de 1984 la Asociación Británica de Toxicología sugirió un
nuevo método, el cual, se basaba en una serie de niveles de dosis fija, este
nuevo enfoque evitó la muerte de los animales de experimentación como punto
final, y se basó en la observación de signos claros de toxicidad. La directriz
OECD 420 incluye un estudio de observación con el fin de elegir una dosis inicial
y minimizar el número de animales a utilizar12.
Las dosis fijas pre-especificadas de 5, 50, 300 o 2000 mg/Kg peso, se utilizan
tanto en el estudio de observación como en el estudio principal. Existe la opción
de usar una dosis adicional de 5000 mg/Kg peso, pero solo cuando esté
justificado por una necesidad regulatoria específica. Se seleccionará una dosis
inicial, al cual se espera que produzca algunos signos de toxicidad, dependiendo
de la presencia de los signos tóxicos o el porcentaje de mortalidad de los
animales en experimentación se les administra dosis más altas o bajas hasta
alcanzar el objetivo de estudio el cual finaliza en la clasificación de la sustancia
tóxica13.
II 3.2 Método de las Clases Tóxica Aguda. Guía OECD 423
El método se basa en un procedimiento por etapas, utilizando un mínimo
número de animales por paso, en el cual utiliza dosis predefinidas de 5, 50, 300
y 2000 mg/kg peso y el resultado permite obtener la información necesaria sobre
la toxicidad aguda de la sustancia a ensayar, lo que permite clasificarla de
acuerdo con el Sistema Globalmente Armonizado en productos químicos que
causan toxicidad aguda14.
La sustancia en ensayo se administra a los animales de experimentación por
vía oral a las dosis ya definidas, se utilizan animales de un mismo sexo
preferiblemente hembras. El porcentaje de mortalidad de los animales de
experimentación ayudará a determinar el siguiente paso de la prueba, es decir,
si se requieren más pruebas, o se aumenta o disminuye la dosis en los
animales15.
9
II 3.3 Método arriba y abajo (UDP). Guía OECD 425
El método OECD 425 permite la estimación de una DL50 con un intervalo de
confianza, y los resultados permiten clasificar a la sustancia química dentro del
Sistema Globalmente Armonizado en productos químicos que causan toxicidad
aguda16.
Para esta prueba de laboratorio se debe considerar toda la información
disponible sobre la sustancia antes de la realización del estudio; dicha
información incluirá la identidad, estructura química, propiedades físico-
químicas, resultados toxicológicos de ensayos realizados anteriormente In Vivo
o In Vitro y datos toxicológicos relacionados con la sustancia estructuralmente o
mezclas similares, con el fin de determinar la relevancia de la prueba para la
protección de la salud humana y el medio ambiente17.
II 4. Estudios de Toxicidad Preclínicos
El descubrimiento o desarrollo de nuevos principios activos y medicamentos
llevan consigo una serie de pruebas previas a su estudio en seres humanos, las
cuales consisten en el empleo de ensayos preclínicos, con la finalidad de
identificar los posibles daños que podrían causar en el hombre, utilizando
organismos vivos (in vivo) con sistemas similares al del ser humano o empleando
cultivos celulares (in vitro) 18.
Elegir el ensayo toxicológico adecuado, especie animal, vía de exposición, el
tiempo y los niveles de dosis a emplear, dependerán del objetivo de su posible
uso en el hombre y de las características propias de la sustancia a estudiar.
Dentro de los diversos estudios de toxicidad se encuentran los estudios de
toxicidad aguda, subaguda y crónica, estudios de dosis únicas, de dosis
repetidas, estudios de citotoxicidad, genotoxicológicos y estudios de la fertilidad
y la reproducción19.
Los ensayos preclínicos nos permiten establecer propiedades toxicológicas,
farmacodinámicas y farmacocinéticas de la sustancia en estudio, debido a que
posibilitan el implemento de técnicas de análisis que no pueden ser ejecutadas
en el ser humano20.
II 4.1 Ensayos de toxicidad aguda. Permiten establecer en primera
instancia si una sustancia es nociva. La prueba consiste en administrar el
10
compuesto a dos especies experimentales distintas, a fin de establecer un rango
entre la eficacia y dosis tóxica.
II 4.2 Ensayos de toxicidad subagudos. Consiste en la administración
repetida de una sustancia por un periodo de 14 a 30 días.
II 4.3 Ensayos de toxicidad sub-crónicos. Se observan efectos
secundarios debido a una toxicidad causada por acumulación de la sustancia o
de sus metabolitos. Este análisis permite establecer la dosis máxima en la que
no presenta signos tóxicos (NOEL), y la dosis máxima tolerada.
II 4.4 Ensayos de toxicidad crónicos. Se basa en la administración
repetida del compuesto durante un tiempo prolongado con el objetivo de
determinar el potencial toxicológico de la muestra en estudio. Permite determinar
dosis mínimas y dosis máximas (tóxica) 21.
II 5. Malva pseudolavatera
II 5.1 Descripción botánica
La planta Malva pseudolavatera es un organismo herbáceo terrestre cuyas
estípulas son lineales y deciduas; sus hojas son simples, en forma de espirales
y ampliamente ovaladas; sus bordes tienen forma festoneada con unas
mediciones de 7-12 x 7-12 cm, dispone de tricomas en forma de estrella y en el
reverso poseen formas tomentulosas. Su base es cordada o subcordada con
peciolos de 6 a 10 cm de longitud. Posee un Cáliz de cinco sépalos los cuales
están unidos en la base, lóbulos en forma triangular, corola de color azul
tornándose blanco hacia el interior; sus estambres están unidos por filamentos
de un solo cuerpo; posee siete mericarpios que se abren espontáneamente22.
11
Figura I: Malva pseudolavatera
Fuente: Kramer (2009)
Las porciones más provechosas en la planta son: las hojas, las flores, y el
fruto. Para la recolección de las hojas es preferible realizarla cuando la planta
está bien florecida, esto se da en las épocas de verano o primavera; por otra
parte, las flores de Malva pseudolavatera se las recolectan antes que se abran.
Este tipo de Malva se las ubica como maleza en partes de la costa y sierra23.
II 5.2 Componentes activos
Malva pseudolavatera posee grandes porcentajes de mucílagos y su flor es
rica en cianósidos. Sus hojas contienen varias vitaminas como: A, B y C. Las
flores poseen un colorante llamado malvina, la cual se descompone en malvidina
y glucosa.
II 5.3 Propiedades terapéuticas
Las características de los mucílagos es que éstos son polisacáridos
heterogéneos o también llamados hidrocoloides polisacáridos por tener la
propiedad de hincharse con el agua y formar sistemas coloidales o geles. Los
mucílagos actúan como emolientes, y en el cuerpo tienen la función de ablandar
los abscesos y favorecer la maduración de los mismos, también actúan como
antiinflamatorios, lubrican los intestinos y protegen la mucosa gástrica24.
12
II 6. Malva sylvestris
Nombres vulgares: Malva común, Alboeza, malva vulgar, malva yedra, en
inglés llamada Common mallow
Nombre científico: Malva sylvestris L.
El nombre de Malva se deriva del latín mollire, que significa que tiene
propiedades emolientes. Proveniente de la familia de las Malváceas
(Malvaceae)25.
Figura II: Malva sylvestris
Fuente: Álvarez (2016)
II 6.1 Clasificación científica
▪ Reino: Plantae
▪ Subreino: Tracheobionta
▪ División: Magnoliophyta
▪ Clase: Magnoliopsida
▪ Subclase: Dilleniidae
▪ Orden: Malvales
▪ Familia: Malvaceae
▪ Subfamilia: Malvoideae
13
▪ Género: Malva
▪ Especie: M. sylvestris
Otras especies del mismo género son25:
▪ Malva alcea L.
▪ Malva moschata L.
▪ Malva neglecta Wallr.
▪ Malva nicaeensis All.
▪ Malva parviflora L.
▪ Malva pusilla Sm.
▪ Malva thuringiaca (L.) Vis.
▪ Malva trimestris (L.) Salisb.
▪ Malva verticillata L.
II 6.2 Descripción de la planta
La malva silvestre es una planta herbácea, perenne cuya base es un poco
leñosa, alcanza una altura de 1.5 m, su raíz es fusiforme y de la cual salen tallos
ramificados y vellosos. Las hojas redondeadas tienen una extremidad con forma
de media circunferencia, es fina y ligeramente pubescente. Las flores consisten
en 5 lóbulos del cáliz gamosépalo y un calículo de 3 piezas más cortas, libres,
oblongas o elípticas-lanceoladas. Los sépalos son pubescentes. La corola, 3 a 4
veces más larga que el cáliz, presenta 5 pétalos violeta pálido o azul-violeta
oscuro cubiertos por venas oscuras que se vuelven azul violeta durante la
desecación26.
II 6.3 Recolección y conservación de la M. sylvestris
Las hojas se recolectan en primavera y verano, desechando las que no estén
perfectamente íntegras y sin parásitos27. Las flores se recolectan con todas sus
pertenencias, incluso el cabillo. Se recomienda secarlas lo más rápido posible,
un día de buen sol y de aire seco; estas son la parte que contiene la mayor
cantidad de mucílagos quien es uno de los principales componentes medicinales
de dicha planta.
14
II 6.4 Componentes principales de la malva.
La Malva s. posee Mucílagos, Betacarotenos, Vitamina C, tiamina, niacina,
riboflavina, flavonoides, taninos, antocianósidos y aceite esencial.
En un estudio realizado a través de un análisis fitoquímico en cuatro tipos de
extracto de hojas de malva silvestre, reportan la presencia de componentes
químicos como: presencia de Esteroides en extracto de diclorometánico;
compuestos fenólicos, flavonoides y esteroides en el extracto metanólico; y,
saponinas y flavonoides para el extracto acuoso28.
Los resultados presentados en este estudio fueron los siguientes:
Figura III: Composición Fitoquímica de Malva sylvestris
Fuente: Castillo (2010)
En su estudio comenta que dentro de las propiedades que le atribuyen a esta
planta, se encuentra el poder diurético, laxante, espasmolítico y efectos
coléricos29.
II 6.5 Toxicidad de la Malva sylvestris
La malva no se considera una planta tóxica pero sí puede presentar efectos
secundarios.
15
Las hojas y flores de la malva son inofensivas para la salud humana, pero
cabe resaltar que se debe tener precauciones sobre su consumo en la
alimentación ya que debido a que es una planta silvestre, es decir, es una planta
que está en el campo, se puede tener peligros al recolectarlas ya que pueden
estar contaminadas por compuestos organoclorados, organofosforados,
bacterias, pesticidas, fungicidas, insecticidas y también puede contener dosis
elevadas de nitratos en las hojas30.
II 6.6 Efectos secundarios de la malva.
Se puede mencionar de efectos secundarios de la Malva sylvestris porque
algunas personas pueden ser alérgicas a ella.
En cuanto a efectos secundarios gastrointestinales podemos mencionar que
puede provocar: náuseas, estreñimiento o diarrea, hinchazón o dolor de
estómago. Hablamos de estos efectos secundarios porque como lo
mencionamos anteriormente, ésta es una planta con un elevado contenido de
fibra, por lo que es muy importante consumirla con 1 o 2 vasos de agua al día
para evitar su obstrucción en el intestino. Ya que esta fibra tiende a hincharse en
el organismo aumentando su tamaño31.
II 7. Requisitos y características relacionados al uso de animales
experimentales
II 7.1 Condiciones
Es importante proveer un ambiente controlado, minimizando las condiciones
estresantes que aseguren la calidad de los animales de experimentación,
brindando un ambiente y manejo adecuado, asegurando el bienestar y
mostrando responsabilidad y respeto por la vida; minimizando el dolor y angustia
en su rol de reactivos biológicos32.
II 7.2 Microambiente
Se trata del área física que está en contacto inmediato con el animal,
compuesto por jaula, alimento, agua y cama; de modo que a cada animal se le
brinde un espacio que le permita movilizarse con normalidad asegurando
condiciones de higiene y protección de plagas33.
16
II 7.3 Macroambiente
Consiste en la zona de alojamiento de forma generalizada representado por
la temperatura, luz y ventilación. Cualquier alteración de dichos factores puede
provocar cambios en los Biomodelos y a su vez el tipo de respuesta, aumentando
la variabilidad en los resultados32.
II 7.4 Temperatura y humedad relativa
El control de estos factores es necesario, debido a que influyen directamente
a la reacción de los distintos tratamientos, por tanto, los valores establecidos
para Humedad relativa oscilan entre 40 y 70% con una Temperatura en un rango
de 20 a 25°C.
II 7.5 Tipo de luz y grado de iluminación
El entorno de desarrollo para animales de experimentación debe constar de
lámparas fluorescente que simule la luz del día; de modo que cada jaula
independiente a su ubicación reciba la misma cantidad de alumbrado, sin
provocar alteraciones clínicas. Se sugieren 12 horas luz y 12 horas de oscuridad,
utilizando reloj temporizador32, 33.
II 7.6 Ética y experimentación animal
La ética es un tema que involucra a todos los seres vivos, pero con más
relevancia a los que están inmiscuidos en la experimentación biológica. En lo
primero que debe pensar el analista es en el respeto por la vida, evitando el
sufrimiento y dolor de los animales de experimentación34.
En el año de 1959 nace el concepto propuesto por Russel y Burch de las tres
R, el cual se define como: Reemplazo, Reducción y Refinamiento de los
animales35.
Se recomienda aplicar las tres “R” para disminuir la tortura y el sufrimiento del
animal.
o Reemplazar en lo posible a los animales vivos por métodos in vitro u otros
métodos experimentales.
o Reducir el número de animales en la investigación.
o Refinar o modificar las técnicas evitando el sufrimiento, tortura o suplicio
que los animales puedan tener.
17
CAPÍTULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
III. 1. Método científico empleados en la investigación
El estudio desarrollado en el Bioterio de la Facultad de Ciencias Químicas se
basó en la evaluación de la toxicidad aguda oral de los extractos acuosos de
hojas de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera, siguiendo las buenas
prácticas de investigación establecidas en la Guía OECD 423.
III. 1.1. Métodos Teóricos
Para la realización de este estudio se empleó el Método Hipotético-Deductivo
que sirvió como base para el desarrollo de trabajo de Titulación, el cual consistió
en la observación del fenómeno a estudiar, a fin de plantear la hipótesis,
visualizando los posibles resultados con la finalidad de la solución del problema
planteado mediante estudios científicos.
III. 1.2. Método Empírico
Para la comprobación de la hipótesis se emplearon los métodos
observacionales y experimentales, obteniendo resultados favorables sobre la
Toxicidad Aguda Oral en animales de experimentación.
III. 1.3. Método matemático estadístico
Los datos obtenidos en el desarrollo de la investigación se analizaron
estadísticamente obteniendo Promedio, Desviación Estándar, mediante un
análisis de varianza (ANOVA) y se realizó una comparación de medias que
permitió establecer la diferencia significativa entre grupos.
III. 1.4. Metodología experimental
Hace referencia a la planificación, que radica en la ejecución de una serie de
actividades con consecuencias lógicas, para logar un objetivo.
III 2. Diagrama de Métodos
Diagrama I: Diagrama de Métodos
18
METODOLOGÍA EXPERIMENTAL
Extracto acuoso liofilizado
de hojas de Malva sylvestris
y Malva pseudolavatera
Dosis
• 5 mg/Kg
• 50 mg/Kg
• 300 mg/Kg
• 2000 mg/Kg
Material biológico
(Ratones Hembras)
Aclimatización
Conformación de
Grupos
Grupo Control
Normal
Grupo 1
2000 mg/Kg
Grupo 2
300 mg/Kg
Grupo 3
50 mg/Kg
Grupo 4
5 mg/Kg
Grupo 5
2000 mg/Kg
Grupo 6
300 mg/Kg
Grupo 7
50 mg/Kg
Grupo 8
5 mg/Kg
Malva pseudolavatera Malva sylvestris
Administración única de extractos en dosis establecidas
En el día 14 extracción de órganos dianas: Hígado, estómago, riñón e intestinos
Observación: Macroscópica
:
Recolección de datos para análisis estadísticos
Registro diario de balanceado y agua.
Registro de peso a los siete y 14 días
19
III. 3. Tipo de Investigación
III. 3.1. Exploratoria
El presente estudio se realizó a través de una investigación experimental,
observacional, de carácter cualitativa con aplicación del método hipotético.
Debido a que se llevó a cabo In Vivo, se administró diferentes dosis a animales
de experimentación sanos, posteriormente se observó la presencia de signos
tóxicos para aceptar o rechazar la hipótesis.
III. 4. Equipos, Aparatos, Materiales y Reactivos
III. 4.1. Equipos
• Estereoscopio
Marca 6ZEISS
Modelo StemiDV4
• Sorbona
Marca REMADEL
Modelo JG-120
• Balanza
Marca Shimadzu
Serie UW8200S
• Balanza analítica
Marca Shimadzu
Serie AUX220
III. 4.2. Aparatos
• Equipo de disección
• Mesa de disección
• Sonda intragástrica
20
III. 4.3. Materiales
• Vasos de precipitación
• Probeta
• Pipeta
• Envases de plástico esterilizado
• Jaulas plásticas
• Malla metálica
• Bebederos
• Matraz aforado de 1000ml
III 4.4. Reactivos
III 4.4.1. Reactivos Químicos
➢ Agua destilada
➢ Cloroformo al 10%
➢ Cloruro de Sodio al 0,9%
III 4.4.2 Reactivo Biológico
Los animales que se utilizaron para el Bioensayo fueron ratones hembras de
4 a 6 semanas con un peso promedio de 20 a 25 gramos, se los trasladó desde
el Bioterio del Instituto Nacional de Investigación de Salud Pública (INSPI).
III 5. Muestra
A partir de los extractos acuosos liofilizados de las hojas tanto de Malva
sylvestris y Malva pseudolavatera,
III 6. Metodología Experimental
III 6.1. Condiciones ambientales
El estudio se realizó en el Bioterio de la Facultad de Ciencias Químicas, se
les proporcionó agua y alimentación ab libitum con las siguientes condiciones
físicas: temperatura de 23 a 25 °C, humedad relativa 30-70% y fotoperiodo de
luz de 12 a 12 semanas previas al desarrollo de la experimentación de los
ratones que fueron adaptados a las condiciones del laboratorio.
21
III 6.2. Conformación de Grupos
Posterior al tiempo de adaptación, se realizó la conformación de 9 grupos de
trabajo, el cual constaba de 5 animales cada uno con un peso promedio de 30g
+ 3,0. Se identificaron con una marca en la cola y se registraron los pesos
utilizando la balanza Shimadzu UW8200S. Los animales, fueron colocados en
jaulas plásticas con rejillas de acero inoxidable provistos de comida y agua ab
libitum hasta el inicio del protocolo seleccionado.
Tabla II: Pesos promedios iniciales y desviación estándar de los grupos
trabajados en el estudio de Toxicidad Agua Oral de los extractos acuosos de
hojas de Malva pseudolavatera y Malva sylvestris.
Pesos
promedios (g)/
Desviación
estándar
Malva pseudolavatera
Grupo 1 26,84 ± 1,59
Grupo 2 26,4 ± 1,12
Grupo 3 26,78 ± 1,03
Grupo 4 26,5 ± 1,09
Malva sylvestris
Grupo 1 26,7 ± 1,95
Grupo 2 26,76 ± 1,14
Grupo 3 26,98 ± 1,24
Grupo 4 26,48 ± 1,83
Grupo Control 26,42 ± 1,26
Fuente: Autores
III 6.3. Obtención de extractos acuoso de hojas de Malva sylvestris y
Malva pseudolavatera
Para la formulación de los extractos acuosos de las hojas tanto de M.
sylvestris y M. pseudolavatera se pesó el material liofilizado requerido según la
22
dosis, luego se procedió a la dilución con agua destilada para la administración
correspondiente a cada grupo experimental.
III 6.4. Toxicidad aguda oral mediante el método de las clases
Para la realización de ese estudio se utilizó como base la Guía OECD 423
para la toxicidad aguda oral. Las dosis a ser utilizadas se basaron en los 4 niveles
fijos de la toxicidad aguda oral 5, 50, 300 y 2000 mg/Kg de peso corporal. Para
lo cual se hizo un cálculo en relación a la concentración del extracto y el peso
corporal.
III 6.5. Administración del tratamiento
Los grupos experimentales recibieron los diferentes tratamientos en las dosis
señaladas según la Tabla III. La administración correspondió a la vía oral con el
uso de una cánula intragástrica y el suministro de los tratamientos fue a una
dosis única.
Tabla III: Grupos de animales tratados con extractos acuosos de Malva
sylvestris y Malva pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Agua Oral
Grupos Tratamiento Dosis
1 Extracto de M.
pseudolavatera 2000 mg/Kg
2 Extracto de M.
pseudolavatera 300 mg/Kg
3 Extracto de M.
pseudolavatera 50 mg/Kg
4 Extracto de M.
pseudolavatera 5 mg/Kg
5 Extracto de M.
sylvestris 2000 mg/Kg
6 Extracto de M.
sylvestris 300 mg/Kg
23
7 Extracto de M.
sylvestris 50 mg/Kg
8 Extracto de M.
sylvestris 5 mg/Kg
9 Grupo control -----------
Fuente: Autores
III 6.6. Procedimiento de la experimentación
➢ La experimentación tuvo una duración de tres semanas (una semana de
adaptación y dos de ensayo).
➢ Al inicio de la experimentación se pesaron los animales para ser divididos
en nueve grupos de cinco ratones cada uno.
➢ Conformados los grupos y transcurrida la semana de adaptación, previo
ayuno, se realizó la administración de los extractos acuosos de M. sylvestris y
M. pseudolavatera. La vía de administración utilizada fue oral utilizando una
cánula intragástrica adaptada a una jeringa.
➢ La administración se realizó de acuerdo a lo especificado en la Tabla III.
➢ Después de la administración de los extractos, estuvieron en observación
continua por 4 horas, donde se procedió a registrar signos clínicos.
Posteriormente se realizó una observación diaria por 14 días.
➢ Durante ese periodo de experimentación se le racionó la comida
registrándose diariamente el consumo, así como también se midió el volumen de
agua consumida.
➢ En el día séptimo se procedió a pesar todos los animales.
➢ Al terminar el periodo de observación, se realizó nuevamente el pesaje de
los animales por grupo, para luego ser sometidos a necropsia y realizar las
observaciones macroscópicas de los órganos en estudio.
➢ Los órganos fueron almacenados en un recipiente con formol al 10% para
su conservación.
➢ Se extrajeron órganos como: Hígado, Intestinos, Estómago y Riñones.
24
CAPÍTULO IV
RESULTADOS Y DISCUSIONES
IV 1. Resultados de las pruebas de los Biomodelos
Durante el periodo de prueba se observó ausencia de mortalidad, variación
de peso corporal, se registraron diariamente el consumo de balanceado y agua;
se observó diariamente presencia de signos.
IV 1.1. Pesos corporales de los Biomodelos
En el siguiente gráfico se reportan los pesos iniciales de los Biomodelos. Al
realizar el análisis estadístico (ANOVA) se observó que los pesos no
presentaban diferencias significativas entre grupos.
Gráfico I: Peso promedio inicial de los grupos tratados con los extractos
acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M. sylvestris en el estudio de
toxicidad aguda oral
Fuente: Autores
Después de los siete días de administración de los extractos; se realizó la
toma de peso de los animales, y no evidenció una variación significativa de peso
entre los grupos.
26.84
26.4
26.78
26.5
26.7
26.56
26.98
26.4826.42
25.8
26
26.2
26.4
26.6
26.8
27
27.2
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PE
SO
PR
OM
ED
IO (
G)
GRUPOS TRATADOS
25
Gráfico II: Peso promedio a los siete días de experimentación de los grupos
tratados con el Extractos acuosos de Hojas de Malva pseudolavatera y M.
sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral.
Fuente: Autores
Se puede observar en los datos expuestos que a la dosis de 5 mg/kg (Grupo
4) del extracto de M. pseudolavatera los animales presentaron mayor porcentaje
de ganancia de peso (18,49%) en los primeros siete días post administración, a
diferencia de la M. sylvestris a la misma dosis incrementó un (13,25%). El grupo
que presentó menor porcentaje de ganancia de peso fue el Grupo 2 el cual tiene
una dosis de 300 mg/Kg de M. pseudolavatera.
Tabla IV: Comparación de la ganancia de peso corporal durante los siete
primeros días de la experimentación
Grupos Peso Promedio
inicial (g) Peso al
séptimo día (g) Diferencia
de Peso (g) Porcentaje
de ganancia
1 26,84 29,60 2,76 10,28%
2 26,40 28,72 2,32 8,79%
3 26,78 29,86 3,08 11,50%
4 26,50 31,40 4,90 18,49%
29.6
28.72
29.86
31.4
29.2
30.7
30.16 30
31.18
26
27
28
29
30
31
32
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PE
SO
PR
OM
ED
IO (
G)
GRUPOS TRATADOS
26
5 26,70 29,20 2,50 9,36%
6 26,56 30,70 4,14 15,59%
7 26,98 30,16 3,18 11,79%
8 26,48 30,00 3,52 13,29%
Grupo
control 26,42 31,18 4,76 18,02%
Fuente: Autores
En la segunda semana de observación se tomaron nuevamente los pesos de
los animales para comprobar si existe una variación al ser tratados con los
extractos de Malva pseudolavatera y Malva sylvestris, no hay registros de
referencia bibliográfica, mediante la experimentación se comprobó que los
grupos tratados no presentaron diferencias estadísticas entre grupos.
Gráfico III: Peso promedio a los catorce días de la experimentación de los
grupos tratados con Extractos acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M.
sylvestris en el estudio de la Toxicidad aguda oral.
Fuente: Autores
29.94
29.36
30.42
32
30.16
31.2830.88 30.74
31.82
27
28
29
30
31
32
33
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PE
SO
PR
OM
ED
IO (
G)
GRUPOS TRATADOS
27
En la Tabla V podemos observar la diferencia de peso del día siete hasta el
día catorce, en el cual podemos denotar el porcentaje de peso ganado. A la dosis
de 5 mg/Kg (Grupo 8) de M. sylvestris hay un incremento de 5,80% de peso,
seguido de la dosis de 2000 mg/Kg de la misma especie de planta el cual arrojó
un incremento del 3,29%, a diferencia del grupo 1 que a la dosis de 2000 mg/Kg
de M. pseudolavatera solo obtuvo un 1,15% de ganancia de peso.
Transcurridos los catorce días de la experimentación se observa que el grupo
con mayor ganancia de peso fue el grupo 4 al que se le administró 5 mg/Kg de
M. pseudolavatera, seguido del grupo 8 al cual se le administró 5 mg/Kg de M.
sylvestris con un incremento del 19,86%, así mismo el grupo que obtuvo menor
ganancia de peso fue al que se le administró 300 mg/Kg de M. pseudolavatera
(Grupo 2).
Tabla V: Comparación de la ganancia de peso corporal del día siete al día
catorce de experimentación.
Grupos Peso al
séptimo día (g) Peso al día catorce (g)
Diferencia de Peso (g)
Porcentaje de ganancia
Porcentaje de ganancia
total
1 29,60 29,94 0,34 1,15% 11,55%
2 28,72 29,36 0,64 2,23% 11,21%
3 29,86 30,42 0,56 1,88% 13,59%
4 31,40 32,00 0,60 1,91% 20,75%
5 29,20 30,16 0,96 3,29% 12,96%
6 30,70 31,28 0,58 1,89% 17,77%
7 30,16 30,88 0,72 2,39% 14,46%
8 30,00 31,74 1,74 5,80% 19,86%
Grupo
control 31,18 31,82 0,64 2,05% 20,44%
Fuente: Autores
28
IV 1.2. Consumo de alimento durante los días de experimentación
Gráfico IV: Consumo de balanceado (g) durante los primeros siete días de
la experimentación de los grupos tratados con Extractos acuosos de las hojas
de Malva pseudolavatera y M. sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral.
Fuente: Autores
En relación a los datos proporcionados en la primera semana de
experimentación tenemos que el grupo 1 presentó una ingesta de balanceado
de: (25,19 ± 3,66), el grupo 2 (24,21 ± 4,15), el grupo 3 (28,66 ± 3,37), el grupo
4 (29,00 ± 6,35), el grupo 5 (24,90 ± 2,89), el grupo 6 (29,99 ± 4,20), el grupo 7
(27,89 ± 5,80), el grupo 8 (25,79 ± 3,57) y el grupo control (27,04 ± 2,40).
Al realizar el análisis estadístico no presentaron significancias estadísticas
entre grupos; lo que indica que no hay una alteración en la ingesta del
balanceado.
25.1
9
24.2
1 28.6
6
29.0
0
24.9
0 29.9
9
27.8
9
25.7
9
27.0
4
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PR
OM
ED
IO D
E C
ON
SU
MO
GRUPOS TRATADOS
29
Gráfico V: Consumo de balanceado (g) durante la segunda semana de
experimentación de los grupos tratados con Extractos acuosos de hojas de
Malva pseudolavatera y M. sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral.
Fuente: Autores
De acuerdo a los datos el grupo 1 presentó una ingesta de balanceado de:
(18,90 ± 1,81), el grupo 2 (19,67 ± 1,15), el grupo 3 (21,79 ± 2,73), el grupo 4
(22,29 ± 3,44), el grupo 5 (21,21 ± 1,93), el grupo 6 (26,91 ± 5,14), el grupo 7
(20,19 ± 3,17), el grupo 8 (20,46 ± 1,96) y el grupo control (19,87 ± 1,76).
Al realizar el análisis estadístico presentaron significancias estadísticas entre
grupos; lo que indica una alteración en la ingesta del balanceado. Así tenemos,
que a la dosis de 2000 mg/kg de Malva pseudolavatera presentaron un menor
consumo (18,90 ± 1,81), lo que difiere del resto de los grupos, a la dosis de 300
mg/kg de Malva sylvestris presentaron un mayor consumo (26,91 ± 5,14),
seguido de la dosis de 5 mg/kg de M. pseudolavatera (22,29 ± 3,44); con la otras
dosis ensayadas 2000, 50, 5 mg/Kg de Malva sylvestris y a la dosis de 300, 50
mg/kg de Malva pseudolavatera y el grupo control guardan relación y no
presentan diferencia entre estos grupos.
18.9
0
19.6
7
21.7
9
22.2
9
21.2
1
26.9
1
20.1
9
20.4
6
19.8
7
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PR
OM
ED
IO D
E C
ON
SIM
O
GRUPOS TRATADOS
30
IV 1.3. Consumo de agua durante los días de experimentación.
Gráfico VI: Consumo de agua diaria (ml) durante la primera semana de
experimentación en el estudio de la Toxicidad aguda oral de los extractos
acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M. sylvestris
Fuente: Autores
En relación a los datos proporcionados en la primera semana de
experimentación tenemos que el grupo 1 presentó un consumo de agua de:
(38,43 ± 13,81), el grupo 2 (36,29 ± 18,48), el grupo 3 (34,86 ± 13,04), el grupo
4 (42,29 ± 16,76), el grupo 5 (37,71 ± 10,72), el grupo 6 (43,71 ± 17,68), el grupo
7 (39,43 ± 20,16), el grupo 8 (45,14 ± 21,45) y el grupo control (33,71 ± 10,69).
Al realizar el análisis estadístico no presentaron significancias estadísticas
entre grupos; lo que indica que no hay una alteración en el consumo de agua.
38.4
3
36.2
9
34.8
6
42.2
9
37.7
1 43.7
1
39.4
3 45.1
4
33.7
1
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PR
OM
ED
IO D
E C
ON
SU
MO
GRUPOS TRATADOS
31
Gráfico VII: Consumo de agua diaria (ml) durante la segunda semana de
experimentación en el estudio de la Toxicidad aguda oral de los extractos
acuosos de hojas de Malva pseudolavatera y M. sylvestris.
Fuente: Autores
De acuerdo a los datos el grupo 1 presentó un consumo de agua de: (27,29 ±
6,95), el grupo 2 (27,29 ± 4,50), el grupo 3 (25,57 ± 5,16), el grupo 4 (28,86 ±
4,41), el grupo 5 (26,71 ± 3,68), el grupo 6 (39,29 ± 4,79), el grupo 7 (30,14 ±
8,57), el grupo 8 (28,71 ± 6,07) y el grupo control (27,43 ± 8,22).
Al realizar el análisis estadístico presentaron significancias estadísticas entre
grupos; lo que indica una alteración en el consumo de agua. Así tenemos, que a
la dosis de 300 mg/kg de Malva sylvestris presentaron un mayor consumo de
agua (39,29 ± 4,79), lo que difiere del resto de los grupos en los que guardan
relación y no presentan diferencia entre estos grupos.
27.2
9
27.2
9
25.5
7
28.8
6
26.7
1
39.2
9
30.1
4
28.7
1
27.4
3
1 2 3 4 5 6 7 8 9
PR
OM
ED
IO D
E C
ON
SU
MO
GRUPOS TRATADOS
32
IV 1.4. Signos tóxicos observados durante el tiempo de evaluación
Tabla VI: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 2000 mg/Kg.
Dosis 2000 mg Horas Grupo I. Malva pseudolavatera
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
33
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Durante las primeras cuatro horas de observación de los animales de experimentación tratados con extractos acuosos de
hojas de M. pseudolavatera a una dosis de 2000 mg/Kg, no presentaron signos clínicos y tampoco se evidenció algún signo
durante los catorce días de la experimentación.
Tabla VII: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 300 mg/Kg.
Dosis 300 mg Horas Grupo II. Malva pseudolavatera
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
34
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Transcurrido el periodo de observación de los animales de experimentación tratados con extractos acuosos de hojas de M.
pseudolavatera a una dosis de 300 mg/Kg, no presentaron signos clínicos durante los catorce días que dura la prueba.
Tabla VIII: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 50 mg/Kg.
Dosis 50 mg Horas Grupo III. Malva pseudolavatera
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
35
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Durante el tiempo de observación de los animales de experimentación a quienes se les administró extractos acuosos de
hojas de M. pseudolavatera a una dosis de 50 mg/Kg, no presentaron signos clínicos durante toda la prueba.
Tabla IX: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 5 mg/Kg.
36
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Dosis 5 mg Horas Grupo IV. Malva pseudolavatera
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
37
Entre tanto que transcurrieron los catorce días de experimentación no se observaron signos clínicos en los animales a
quienes se le administró extractos acuosos de hojas de M. pseudolavatera a una dosis de 5 mg/Kg.
Tabla X: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva sylvestris a una dosis de 2000 mg/Kg.
Dosis 2000 mg Horas Grupo V. Malva sylvestris
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 R3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
38
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Durante el tiempo de observación de los animales de experimentación tratados con extractos acuosos de hojas de M.
sylvestris a una dosis de 2000 mg/Kg se observó que en la segunda hora post-administración 1/5 ratones presentaron una sola
vez heces blandas con presencia de mucosidad probablemente debido al efecto que presentan los principios activos que se
encuentran en esta planta como son los mucílagos, dado a que esta especie vegetal también se le atribuyen propiedades
laxantes, además a la misma hora 1/5 ratones presentó orina de color amarillo intenso que puede atribuirse a la eliminación de
la droga, se debe considerar la dosis administrada que fue 2000 mg/Kg; desapareciendo estos signos por completo a la tercera
hora post-administración. En los días posteriores no se observó presencia de signos clínicos.
Tabla X: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva sylvestris a una dosis de 300 mg/Kg
Dosis 300 mg Horas Grupo VI. Malva sylvestris
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
39
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
En las primeras cuatro horas de observación y los catorce días siguientes de la experimentación, los tratados con extractos
acuosos de hojas de M. sylvestris a una dosis de 300 mg/Kg, no presentaron signos clínicos.
Tabla XI: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva sylvestris a una dosis de 50 mg/Kg.
40
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Dosis 50 mg Horas Grupo VII. Malva sylvestris
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
41
En el tiempo de observación de los animales de experimentación a quienes se les administró extractos acuosos de hojas de
M. sylvestris a una dosis de 50 mg/Kg, no presentaron signos clínicos.
Tabla XII: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva sylvestris a una dosis de 5 mg/Kg.
Dosis 5 mg Horas Grupo VIII. Malva sylvestris
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
42
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Durante el tiempo de observación de los animales de experimentación tratados con extractos acuosos de hojas de M.
sylvestris a una dosis de 5 mg/Kg, ninguno evidenció alguna manifestación tóxica.
Tabla XIII: Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de extractos acuosos de
hojas de Malva sylvestris.
Horas GRUPO CONTROL
1 2 3 4 Dias de prueba
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
SIGNOS CLÍNICOS
Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad respiratoria
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Heces Blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
43
Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Dificultad de movimiento
(Incoordinación en la marcha)
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
Durante el tiempo de observación de los animales de experimentación el Grupo Control, no presentaron signos clínicos.
De lo que se puede apreciar en las tablas correspondientes al análisis de las observaciones clínicas, se puede indicar que a
ninguna de las dosis ensayadas presentan signos tóxicos los animales de experimentación con los extractos administrados.
44
IV 1.5. Observaciones macroscópicas de órganos al finalizar la
experimentación
Tabla XIV: Valoraciones macroscópicas de Órganos diana.
GRUPO/
ÓRGANOS
I II III IV V VI VII VIII Grupo
Control
Intestinos 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Hígado 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Riñones 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Estómago 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Fuente: Autores P: Presencia O: Ausencia
En lo referente a los órganos diana extraídos y observados
macroscópicamente al finalizar la experimentación no se observó presencia de
alteraciones en su estructura.
IV 1.5.1. Resultados de la observación macroscópica
Grupo 1 Malva pseudolavatera
Dosis: 2000 mg/Kg
Riñón Estómago
46
Grupo 3 Malva pseudolavatera
Dosis: 50 mg/Kg
Grupo 4 Malva pseudolavatera
Dosis: 5 mg/Kg
Intestinos
Estómago Riñón
Hígado
Hígado Riñón
48
Grupo 2 Malva sylvestris
Dosis: 300 mg/Kg
Grupo 3 Malva sylvestris
Dosis: 50 mg/Kg
Intestinos
Riñón Estómago
Hígado
Riñón Estómago
50
Grupo control
Muestra: Estómago
De las imágenes observadas anteriormente, se puede indicar que los órganos
(Riñones, hígado, estómago e intestinos) no presentaron alteración alguna en
cuanto a su morfología en los diferentes niveles de dosis ensayados y en las
condiciones del ensayo experimental.
IV. 2. Discusiones
Debido a la escasa información que existe con respecto a la determinación
sobre la seguridad que presenta la ingesta de extractos de las especies
vegetales ya sea en forma de infusión, decocción, etc. en una población, resulta
conveniente el informar los diferentes resultados aquí encontrados. Esto permite
no solo establecer dosis toxicas sino también los órganos dianas que son
afectados.
Hígado Riñón
Intestinos Estómago
51
Entre los pocos estudios encontrados existe uno llevado a cabo en Evaluación
de Citotoxicidad y Genotoxicidad de Malva santa en la que se pueda establecer
que se trabajaron algunas dosis que van entre 6, 12 y 18 gramos, dosis
superiores a las ensayadas en este trabajo, el mismo que se encuentra
enmarcada en las guías de ensayo de la OECD 423 de 2000 mg/Kg peso como
dosis limite.
En el estudio in-vitro de Genotoxicidad realizado con la Malva santa se
estableció que a las dosis aplicadas a los seis gramos produjo una actividad anti-
proliferativa. A dosis mayores que fueron a 12 y 18 gramos y en uso crónico se
pudo establecer que producía daños a nivel cromosómico, lo que demuestra que
las dos concentraciones más altas de infusión de Malva santa causan daño al
ADN celular37.
Cabe recalcar que estudios de toxicidad realizados en animales de
experimentación no han sido encontrados.
En cuanto al consumo del balanceado, de acuerdo a los resultados expuestos
presentó diferencias en la segunda semana post administración a dosis mayores
de 2000 mg/kg de Malva pseudolavatera teniendo un menor consumo, y a dosis
inferiores se puede denotar un mayor consumo. A lo que se puede inferir como
respuesta debido a la presencia de uno de los metabolitos mayoritarios como
son los mucilagos.
Además, a la dosis mayor del extracto de Malva Pseudolavatera se observó
la presencia de signos clínicos como heces blandas acompañadas de mucosidad
lo que se presume se debe a la presencia de mucílagos, metabolito mayoritario
de la planta, los cuales dentro de sus propiedades terapéuticas se encuentra su
efecto laxante como lo indica Serván en su trabajo de “Interés farmacéutico de
los mucilagos”38.
En cuanto al aumento del peso corporal esto se puede evidenciar en un
estudio realizado en conejos el cual muestra una menor digestibilidad de la
proteína debido a la presencia de unos de sus metabolitos como son los taninos,
los cuales forman complejos con las proteínas inhibiendo la digestión de la
misma39.
52
CONCLUSIONES
1) A las dosis ensayadas de 2000, 300, 50, 5 mg/kg con la administración de
los extractos de ambas especies vegetales bajo las condiciones del ensayo no
hubo presencia de mortalidad.
2) En relación al peso corporal se determinó que hubo ganancia de peso
durante los días de experimentación, en cuanto al consumo de balanceado y
agua presentó diferencias entre los grupos en la segunda semana.
3) En cuanto a los signos tóxicos, se puede indicar que a la dosis de 2000
mg/kg (G5) del extracto de Malva sylvestris uno de cinco animales del grupo
presentó en una sola vez heces con mucosidad, lo que puede estar relacionado
por la presencia de uno de los metabolitos que se encuentran en mayor
proporción en estas especies estudiadas como son los mucílagos, luego de esto
no se apreció más este signo, así también uno de cinco animales del mismo
grupo presentó eliminación urinaria del extracto por una sola vez,
desapareciendo estos signos por completo.
4) De los hallazgos obtenidos en cuanto al análisis macroscópico se puede
determinar que los extractos de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera no
causan daños a nivel de tejido en órganos estudiados, a ninguna de las
diferentes dosis ensayadas.
RECOMENDACIONES
1.- Realizar un estudio histopatológico de otros órganos.
2.- Realizar una evaluación de toxicidad Sub-crónica y Crónica.
53
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58
GLOSARIO
Capacidad Intrínseca
El significado de intrínseco se refiere a aquello que es natural o propio de la
cosa que se habla. Se refiere a la esencia propia de algo en concreto, como
también podría ser su peculiaridad.
Decocción
La decocción se usa para principios activos que no sufran alteraciones con la
temperatura; generalmente, las raíces, hojas, flores y pedúnculos foliados se
hierven en agua durante unos 15 minutos, mientras que las ramas y otras partes
más duras pueden precisar hasta una hora, tiempo durante el cual deberá ir
reponiéndose el agua evaporada.
Dehiscentes
Que se abre de forma espontánea para dispersar su contenido, ya sea polen
o semillas.
Estambres monadelfos
Se aplica a los estambres que están soldados entre sí por sus filamentos,
formando un solo haz.
Glabros
Que está desprovisto de pelos y glándulas.
Herbáceo
Que tiene el aspecto o las características de la hierba.
Infusión
Acción de sumergir una sustancia orgánica en un líquido caliente, pero sin que
llegue a hervir, para que se disuelvan sus partes solubles.
Maceración
La maceración se realiza a temperatura ambiente y los líquidos que con más
frecuencia se utilizan son el agua y el alcohol ó combinación de ambos, aunque
también pueden emplearse vinos tintos o blancos.
59
Milenario
Que tiene mil años o más de edad o de existencia, o que tiene muchos años
Morbilidad
Cantidad de personas que enferman en un lugar y un período de tiempo
determinados en relación con el total de la población.
Mucolítico
Que disuelve el moco o ayuda a eliminarlo.
Perenne
Como tal, perenne alude a todo aquello que dura todo un año, o perdura por
años, es para siempre.
Tricomas
Los Tricomas son apéndices epidérmicos con diversa forma, estructura y
función. Su nombre proviene del griego trichos, que significa cabellera. Pueden
estar en cualquier órgano de la planta, pueden persistir durante toda la vida de
esos órganos o ser efímeros.
60
ANEXOS
Anexo A. Conformación de grupos de trabajo
Fuente: Autores
Anexo B. Observación de los signos tóxicos durante las primeras 4 horas.
Post-tratamiento.
Fuente: Autores
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Anexo C. Disección de Animales de experimentación
Fuente: Autores
Anexo D. Disección de animales en el día 14
Fuente: Autores