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Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 1
Ministère des Enseignements République du Mali Secondaire, Supérieur et de la Un Peuple – Un But – Une Foi Recherche Scientifique
UNIVERSITE DE BAMAKO *******************
FACULTE DE MEDECINE, DE PHARMACIE ET D’ODONTO-STOMATOLOGIE Année universitaire : 2008-2009 N˚………..
THESE :
Présentée et soutenue publiquement le………………..devant la Faculté de
Médecine, de Pharmacie et d’Odonto-Stomatologie du Mali Par Monsieur Caleb Guirou Pour obtenir le grade de DOCTEUR en Pharmacie (Diplôme d’Etat) JURY Président : Pr Amagana Dolo Membres : Pr Ababacar Maïga Dr Cheick Traoré Directrice de Thèse : Pr Rokia Sanogo
TITRE : ETUDE DE LA TOXICITE SUB-CHRONIQUE DE ARGEMONE MEXICANA UTILISEE DANS LE TRAITEMENT
TRADITIONNEL DU PALUDISME
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Je dédie ce travail :
A ma mère Yacouni Perou, toi qui me portas sur le dos, toi qui
m’allaitas, toi qui gouvernas mes premiers pas, toi qui supportas mes
caprices, toi qui te levais très tôt pour que je puisse être à l’école ventre
plein, toi qui t’es sacrifié pour que moi ton fils puisse réussir, voilà le
courenement des années de sacrifices, de souffrances, à travers ce travail
ton fils te demande pardon pour tous les chagrins causés maman,
j’espère que ce travail sera l’infloraison de l’espoir que tu as semé !
A mon père Tigué Guirou, merci de m’avoir mis à l’école, merci pour tes
conseils, tes mots d’encouragement, merci pour l’éducation reçut, que
DIEU vous prête longue vie.
A Karim Traoré, dans ce monde si difficile qui peut s’occuper de l’enfant
d’autrui comme le tien, merci pour le soutien matériel, financier et
moral, merci pour ton apport si grand dans mon éducation scolaire et
dans la vie de société, que DIEU te paie pour ta gratitude, ton amour
pour les autres.
A ma petite fille adorée Awa Amaga, que DIEU te prête longue vie.
DEDICACES
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Je remercie tout d’abord le bon DIEU, le Miséricordieux, l’Homnipotant,
pour tous ses bien faits envers nous.
Je remercie le Mali ma chère patrie.
Mes remerciements vont ensuite à l’endroit de :
Tous les enseignants qui m’ont encadré de l’école Maternelle à la
Faculté,
Tous mes parents : Papa, Maman, mes frères Pierre, Emma Noël,
Amadimé, Lazare, Josué, Ali, Etienne Dougnon, mes sœurs Nèma,
Dorkas, Marie, ma grande mère Awa Perou, mon tonton Alassane
Perou.
Fatoumata Kamoko, chère amie et confidente, merci pour ton soutient.
Tous les grands frères académiques : Ibrehim Guindo pour son soutient
indéfectible, Souley Ongoïba, Kirya Koné.
Tous mes camarades de promotion : Tidiany Siby, Minétou Siby,
Mamadou K Konaté pour leurs soutients dans les moments les plus
difficiles, Mory Dounbouya, Abdoulaye dit Aïgorou Guindo, Tiocri,
Dramane Koné, Abdoul Salam Bah, Amadou Guindo.
Tous mes collègues représentants des étudiants à l’ensemblée de Fac :
Harira Cissé, Modibo Doumbia, Ibrehim G Diall.
Tous mes camarades de la chambre B11.
Tous mes camarades thésards du DMT : Salimata Dagnogo, Ester
Coulibaly, Wassa Dembélé, Amed Dafolo Koné, Lamine Diarasouba,
Philipe Traoré.
REMERCIEMENTS
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Pr Rokia Sanogo pour sa disponibilité, son courage, son amour pour le
travail bien fait, félicitation pour votre réussite au concours du CAMES.
Pr Ababacar Maïga pour son apport à la réalisation de la thèse, Dr
Sékou Bah pour ces explications.
Pr Drissa Diallo pour sa disponibilité, son encadrement, son travail sans
faille dans la revalorisation de la médecine traditionnelle.
Tout le personnel du DMT particulièrement à Monsieur Fagnan Sanogo,
Tonton Kassim.
Tout le personnel des services de biochimie, hémato, anapath de
l’INRSP.
Rectorat de l’université de Bamako pour son financement.
Tout le personnel de la Pharmacie Djiguiya à Bamako au Banconi
Razel : Docteur Aïssata Kodio pour sa contribution dans ma formation,
Moussa Kodio, Saydou Dougnon, Moctar Kodio, Oumar Kodio,
Antoine Dougnon.
Mes remerciements vont à l’endroit de toutes les personnes qui de près
ou de loin ont contribué à ma formation depuis la maternelle jusqu’à
maintenant.
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A notre maître et Président du jury professeur Amagana Dolo,
Maître de conférence agrégé en Parasitologie-Mycologie, au
Département d’Epidémiologie des Affections Parasitaires (DEAP), vous
êtes une référence pour nous au sein de votre département et par la
qualité des enseignements reçus. Vous nous faites un grand honneur en
acceptant de présider ce jury de thèse malgré vos multiples occupations,
Trouvez ici, cher maître, l’expression de notre profonde gratitude.
Hommage aux membres
du jury
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A notre maître et juge professeur Ababacar Maïga,
Maître de conférence en Toxicologie, Directeur Adjoint à la Direction de
la Pharmacie et du Médicament, nous nous souvenons de vos cours de
toxicologie bien dispenser, vous avez participé à améliorer ce travail,
votre présence dans ce jury nous honore beaucoup, trouvez ici nos
sincères remerciements.
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A notre maître et juge Docteur Cheick Traoré,
Maître assistant en Anatomie-Pathologie, Chef de service d’Anatomie-
Pathologie à l’INRSP, la spontanéité avec laquelle vous avez accepté de
contribuer à ce travail et d’être parmi ce jury, malgré vos multiples
occupations nous est allée droit au cœur, trouvez ici nos sincères
remerciements.
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A notre maître et directrice de thèse professeur Rokia Sanogo,
Maître de conférence agrégé en Pharmacognosie, Votre désir pour le
travail bien fait, votre ponctualité, votre sens élevé pour le respect de la
dignité humaine, votre courage et votre rigueur scientifique, sont entre
autres des qualités enviées de tous, vous avez accepté de diriger ce
travail malgré vos multiples occupations et malgré que vous prépariez le
concours du CAMES, trouvez ici chère maître nos sincères sentiments de
reconnaissance.
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SIGLES ET ABREVIATIONS DMT : Département Médecine Traditionnelle
DL50 : Dose Létale à 50%
INRSP : Institut National de Recherche en Santé Publique
MTA : Médicament Traditionnel Amélioré
OMS : Organisation Mondiale de la Santé
IC50 : Concentration Inhibitrice à 50%
PIB : Produit Intérieur Brut
GB : Globules Blancs (mm3)
GR : Globules Rouges (mm3)
HGB : Hémoglobine (g/l)
HCT : Hématocrite (%)
VGM : Volume Globulaire Moyen (mm3)
TGMH : Taux Globulaire Moyen en Hémoglobine (pg)
CCMH : Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine (g/dl)
IDR : Indice de Distribution érythrocytaire (%)
PLA : Plaquettes (mm3)
VMP : Volume Plaquettaire Moyen (mm3)
LYM% : Pourcentage de Lymphocytes
LYM# : Nombre de Lymphocytes (mm3)
MON% : Pourcentage de Monocytes
MON# : Nombre de Monocytes (mm3)
GRA% : Pourcentage de Granulocytes
GRA# : Nombre de Granulocytes (mm3)
IDP : Indice de Distribution Plaquettaire (%)
THT: Plaquettocrite (%)
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L1: Lot 1
L2: Lot 2
L3: Lot 3
L4: Lot 4
$ US: Dollars des Etats Unis d’Amérique.
CHU : Centre Hospitalo Universitaire.
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Sommaire Introduction…………………………………………………………………...6 Motivation……………………………………………………………………..8 Objectifs………………………………………………………………………..8 Généralités 1-Généralités sur le paludisme……………………………………………..10 1.10-MTA contre le paludisme……………………………………………..15 1.11-Plantes antipaludiques………………………………………………...15 2-Généralités sur A. mexicana………………………………………………16 3-Notion de toxicité………………………………………………………....25 Travaux personnels 5-Méthodologie……………………………………………………………..30 5.1-Lieu d’étude…………………………………………………………….30 5.2-Matériel végétal………………………………………………………...30 5.3-Etude botanique………………………………………………………..31 5.4-Préparation des extraits……………………………………………….32 5.5-Etude phytochimique………………………………………………….33 5.6-Etude de la toxicité sub-chronique…………………………………...41 6-Résultats………………………………………………………………….43 6.1-Caractères organoleptiques…………………………………………..43 6.2-Macroscopie……………………………………………………………43 6.3-Microscopie…………………………………………………………….43 6.4-Rendement des extractions…………………………………………...45 6.5-Etudes phytochimiques……………………………………………….46 6.6-Données de la toxicité sub-chronique……………………………….56 6.7-Effet sur la diurèse de base…………………………………………...67
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Commentaires et discussions……………………………………………..70 Conclusion…………………………………………………………………..76 Recommandations………………………………………………………….77 Références Bibliographiques………………………………………………79 Annexes……………………………………………………………………..81
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INTRODUCTION
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Introduction Le paludisme est une maladie parasitaire causée chez l’homme par un
protozoaire du genre Plasmodium transmis par le moustique du genre
Anopheles.
Selon le rapport de l’OMS 2005 on estime que 350 à 500 millions de
personnes soufrent de paludisme chaque année. Le paludisme est une
maladie qui tue un enfant toutes les 30 secondes en Afrique
subsaharienne. Plus d’un million de personnes meurent chaque année de
paludisme dans le monde, dont une majorité d’enfants de moins de 5 ans
et 90% de décès ``due˝ au paludisme surviennent en Afrique. On estime à
plus de 12 milliards de $ US la perte annuelle de PIB due au paludisme en
Afrique alors qu’une fraction de cette somme suffirait à le maîtriser
(OMS, 2005).
Au Mali le paludisme occupe 48% des consultations quotidiennes des
centres de santé et est responsable de 26,77% de morbidité et de 11,64%
de mortalité dans le service de pédiatrie du CHU Gabriel Touré. (Diabaté,
2006)
Ces chiffres nous montrent combien le paludisme reste encore un
problème de santé publique dans le monde, particulièrement en Afrique
et au Mali.
Les accessibilités économiques et géographiques aux soins de santé
moderne, l’insuffisance et la mauvaise répartition des personnels de santé
modernes de même que les habitudes socioculturelles sont des facteurs
qui font que 80% de la population en Afrique fait recours à la médecine
traditionnelle.
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Cette médecine traditionnelle est tenue pour une grande part par les
thérapeutes traditionnels. Il existe un tradithérapeute pour 2000 à 4000
habitants contre un agent de santé moderne pour 20000. (Traoré, 1999 ;
Sangaré, 2003)
La recherche sur les plantes antipaludiques a pris une ampleur
particulière depuis l’isolement de la quinine, de l’écorce de Cinchona spp,
et surtout de l’artémesinine d’une plante médicinale de la pharmacopée
traditionnelle Chinoise : Artemisia annua L.
Au Mali, le traitement de première intention pour 60% des enfants
atteints de forte fièvre due au paludisme fait appel aux plantes
médicinales administrées à domiciles.
Parmi les 7 médicaments traditionnels améliorés du DMT le Malarial seul
est utilisé pour le traitement du paludisme et est surtout actif contre les
symptômes que sur les schizontes, d’où la nécessité de trouver d’autre
médicament traditionnel amélioré contre le paludisme.
Argemone mexicana est une plante traditionnellement utilisée dans le
traitement du paludisme (Sangaré, 2003). L’activité anti-paludique in vitro
mise en évidence avec 7 autres plantes utilisées traditionnellement pour le
traitement du paludisme. Parmi ces 8 plantes Argemone mexicana a été la
plus efficace avec une IC50=1µg/ml pour l’extrait méthanolique même
meilleure à celle de la chloroquine témoins à l’époque mais actuellement
retirée du marché à cause de la chimiorésistance. L’étude de ``Sidibé˝ en
2006 a permis de montrer l’efficacité du décocté avec une réduction de la
parasitemie supérieure au Malarial, et l’étude clinique menée par
``Florent˝ en 2008 sur A.mexicana et les combinaisons thérapeutiques à
base d’artémisinine a montré que l’évolution vers un paludisme grave
dans les deux groupes d’étude était inférieure à 5%.
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Notre étude sur Argemone mexicana porte sur la toxicité sub-chronique.
Après administration de la dose du thérapeute pendant une certaine
période aux animaux, leurs organes d’éliminations ont été examinés.
Motivation :
Notre travail est motivé par :
- Le désir de lutter contre le paludisme en contribuant à l’amélioration
d’un médicament traditionnel antipaludique.
- Le souci de valoriser les médicaments traditionnels améliorés.
Objectif Général : Etudier la toxicité sub-chronique des feuilles d’Argemone mexicana.
Objectifs spécifiques
- Rechercher les éléments microscopiques de la poudre des feuilles de
Argemone mexicana.
:
- Caractériser les groupes chimiques présents dans le décocté des
feuilles de Argemone mexicana.
- Déterminer le rendement des extractions.
- Déterminer l’activité antioxydante du décocté.
- Déterminer l’impact du décocté sur les paramètres biochimiques,
hématologiques, histopatologiques des animaux traités.
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GENERALITES
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1-Généralités sur le paludisme :
1.1-Définition :
Le paludisme, encore appelé malaria est une parasitose due à un
protozoaire transmis par la piqûre d’un moustique femelle, l’anophèle,
provoquant des fièvres intermittentes.
1.2-Historique :
La cause de la maladie a été découverte le 6 novembre 1880 à l’hôpital
militaire de Constantine (Algérie) par un médecin de l’armée française,
Alphonse Laveran, qui reçut le prix Nobel de médecine et de physiologie
en 1907.
C’est en 1897 que le médecin anglais Ronald Ross (prix Nobel 1902) prouva
que les moustiques (Anopheles) étaient les vecteurs de la malaria.
Auparavant, c’était, le mauvais air (male aria en italien) émanant des
marécages qui était incriminé. Palud (zone de marécages en France) est à
l’origine du terme <<Paludisme>>.
1.3-Agents pathogènes
:
L’agent pathogène est le genre Plasmodium qui comporte quatre espèces
dont :
-Plasmodium falciparum : à l’origine de la fièvre tierce maligne (espèce
prédominante et responsable de 90% de la mortalité due au paludisme).
-Plasmodium vivax : à l’origine de la fièvre tierce bénigne avec des rechutes
à long terme.
-Plasmodium ovale à l’origine de la fièvre tierce bénigne avec des rechutes à
long terme.
-Plasmodium malariae à l’origine de la fièvre quarte.
-Plasmodium Paknowlesi.
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1.4-vecteurs :
Les moustiques sont les vecteurs, ils appartiennent au genre Anopheles.
Une soixantaine d’espèces d’anopheles a été identifiée comme vecteurs du
paludisme.
En Afrique les principales espèces sont : A.gambiae sensu lato et A.funestus.
A.gambiae et A.funestus se relayent dans la transmission du paludisme à
P.falciparum. Les mâles se nourrissent de nectars de fleurs et des sucs de
végétaux et les femelles utilisent le sang des mammifères pour la
maturation des œufs qu’elles portent, car les protéines sanguines y sont
indispensables. (Sidibé, 2006)
1.5-Symptomatologie
Le paludisme grave est causé quasi exclusivement par les infections de
P.falciparum et survient généralement 6-14 jours après infection. Ce type
de paludisme peut entraîner le coma et la mort s’il n’est pas traité. Les
enfants et les femmes enceintes sont particulièrement vulnérables. On
:
Les symptômes du paludisme incluent la fièvre, des tremblements
intermittents, des arthralgies, des nausées et vomissement, de l’anémie
causée par l’hémolyse, l’hémoglobinurie, et des convulsions. Des
sensations de picotements peuvent apparaître dans la peau notamment
quand le paludisme est causé par P.falciparum. Le symptôme le plus
classique du paludisme est la répétion cyclique d’une sensation de froid
soudaine suivie de frissons, de fièvre et de sudation durant quatre à six
heures, survenant tous les deux jours avec les infections dues à P.vivax et
P. ovale, tous les trois jours pour celles dues à P.malariae, P.falciparum peut
entraîner des fièvres toutes les 36-48 heures ou une fièvre continue et
moins prononcée.
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note d’autres symptômes : Splénomégalie, céphalées sévères, ischémie
cérébrale, hypoglycémie, nausées, vomissements. (OMS, 2005)
1.6-Clinique du paludisme :
Les manifestations cliniques n’apparaissent qu’au cours de la
multiplication asexuée des plasmodiums à l’intérieur des hématies faisant
du paludisme au sens propre, une érythrocytopathie parasitaire. Cette
dernière aboutit à :
- des accès fébriles violents rythmés,
- une destruction massive d’hématies qui entraîne une anémie
hémolytique,
- une biligenie pigmentaire, d’où subictère,
- une détérioration de l’état général pouvant aboutir à la cachexie.
1.7-Diagnostic :
La méthode de diagnostic la moins chère, la plus fiable et la plus
répandue est l’examen au microscope de frottis sanguin, ce qui permet
d’identifier les caractéristiques uniques de chacune des quatre espèces de
parasites. Deux types de frottis sont utilisés traditionnellement. Les
plaques fines sont similaires aux autres frottis sanguins et permettent
d’identifier l’espèce de parasites, car l’aspect du parasite est mieux
conservé. Le test par goutte épaisse permet de parcourir un volume
sanguin plus large d’où une sensibilité environ 11 fois plus élevée qu’avec
une plaque fine.
1.8-Traitement
Le traitement repose sur l’utilisation de molécules antipaludiques qu’on
peut classer selon leurs propriétés pharmacologiques, leurs propriétés
chimiques, et leurs origines. Ces molécules sont utilisées en fonction du
stade de la maladie et de la sensibilité du parasite aux antipaludiques.
:
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1.8.1-Classification :
1.8.1.1-Classification selon leurs propriétés pharmacologiques :
-Les schizonticides : ils sont actifs sur les schizontes, inactifs sur les
gamètes. Ils sont utilisés dans le traitement curatif des accès palustres,
mais n’empêchent pas la transmission de la maladie. Ce sont : la quinine,
et ses sels, les amino-4 quinoléines, les biguanides et dérivés, les
diaminopyridines, et les sulfamides.
-Les gametocides : ils ont peu d’intérêts thérapeutiques pour le paludéen
car ne sont actifs que sur les gamètes. Mais intéressant sur le plan de la
prévention au niveau de la collectivité car empêchent la transmission de
la maladie. Ce sont principalement les amino-8 quinoléines.
Certains antipaludiques comme l’artémisinine et ses dérivés auraient à la
fois les activités schizonticides et gamétocides.
1.8.1.2-Classification selon la famille chimique
:
-Les méthanol quinoléines : la quinine et la méfloquine
-Les amino-4 quinoléines : la chloroquine (retiré du marché) et
l’amodiaquine
-Les amino-8 quinoléines : la primaquine
-Les antifoliniques : les biguanides et les diaminopyrimidines
(pyriméthamine et triméthoprime).
-Les antifoliques : sulfadoxine, sulfalène, dapsone.
-Les phénanthrènes méthanols : halofantrine
-Les aryles-amino-alcool : artémisinine et dérivés (artemether,
artesunate)
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1.8.1.3-Classification selon l’origine :
-Origine naturelle : quinine, artemisinine et dérivés.
-Origine synthétique : la méfloquine, chloroquine, amodiaquine,
primaquine, halofantrine, les antifoliques et les antifoliniques.
1.8.2-Résistances aux antipaludiques
:
Les antipaludiques en monothérapie (traitement fondé sur un seul
médicament) perdent rapidement leur efficacité. A certains endroits, le
paludisme est résistant à toutes les thérapies de première intention qui
sont financièrement accessibles. Il importe de suivre l’ampleur et la
propagation de la pharmacorésistance pour parvenir à la juguler. La
résistance à un médicament n’est pas nécessairement uniforme à l’échelle
d’un pays et il peut subsister des poches régionales où la résistance
l’emporte, où le médicament reste efficace. Toute fois, les victimes du
paludisme et les dispensateurs de soins ignorent trop souvent si le
paludisme auquel ils ont à faire est résistant ou non. Par conséquent il
faut cerner les zones de pharmacorésistances et, le cas échéant,
recommander et fournir des médicaments de substitution. Pour ce faire,
l’OMS aide les pays à cartographier la pharmacorésistance et leur
recommande de s’orienter vers un nouveau traitement efficace lorsque ou
avant que le niveau de résistance aux médicaments utilisés dépasse 15%,
et de ne pas les laisser excéder 25% (OMS, 2005).
Actuellement on assiste à l’utilisation de combinaison thérapeutique à
base d’artemisinine et d’amodiaquine appelée CTA pour éviter la
résistance.
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1.9-Prophylaxie :
La prévention du paludisme repose sur la chimioprophylaxie et la
protection contre la piqûre des moustiques. Elle est individuelle et
collective.
1.10-Médicament traditionnel améliore (MTA) contre le paludisme :
Actuellement le Malarial reste le seul MTA disponible contre le
paludisme, c’est un mélange de poudre de Cassia occidentalis les feuilles
(activité antipyrétique) Lippia chevalieri les feuilles (aromatisant) Spilantes
oleracea les fleurs (activité antiparasitaires).
Présentation : Paquets de 11 sachets de 10g chacun,
Posologie : Adultes : 2 sachets/jour pendant 4 jours et 1 sachet/jour
pendant 3 jours. Enfants : ½ sachets 2 fois/jour pendant 4 jours et ½
sachet/jour pendant 3 jours.
1.11-Plantes antipaludiques
En Afrique il existe une importante ressource naturelle qui englobe près
de 5000 espèces de plantes supérieures vascularisées sur les 25000 espèces
du monde entier (Traoré, 1999).
:
Dans les différents documents consultés les auteurs ont signalé environ
710 espèces de plantes utilisées comme fébrifuges et/ou antipaludiques.
Elles sont contenues dans 120 familles, seulement 35 contiennent 72,96%
des espèces citées (518 espèces). Un peu plus de la moitié (55,92% soit 397
espèces) est concentré dans 18 familles. Sept familles représentent à elles
seules 35,07%(249 espèces) ce sont : les Verbenaceae (20 espèces), les
Mimosaceae (21 espèces), les Compositeae (32 espèces), les Ceasalpiniaceae (39
espèces), les Euphorbiaceae (41 espèces), les Papilionaceae (44 espèces) et
enfin les Rubiaceae (52 espèces). Les espèces les plus fréquemment
rencontrées sont Cassia occidentalis, Azadirachta indica, Combretum
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micrantum, Cassia sieberiana, Carica papaya, Nauclea latifolia, Guiera
senegalensis, Mitragyna inermis, Securinega virosa, Anogeisus leicarpus,
Ximenia americana, Tamarindus indica, Vitex ferruginea (Sangaré, 2003).
2-Généralités sur Argemone mexicana :
2.1-Systématique
Embranchement : Spermaphytes
: Règne : Végétal
Sous règne : Eucaryotes
Sous embranchement : Angiospermes
Classe : Dicotylédones
Ordre : Rannuculales
Famille : Papavéracée
Genre : Argemone
Espèce : Mexicana
Le genre Argemone comporte 12 espèces les principales sont A.alba,
A.platyceras, A.grandiflora, A.mexicana.
2.2-Nomenclature
Peulh : Simsimji
:
Français : Argémone mexicaine
Anglais : Mexican prickly ; Yellow poppy
Bambara: Bozobo; Nienidjeni
Dogon (cercle de koro) : Aignètawa, Sonkeriai
Indien : Satyanashi
Senoufo : Kakontapia
Malinké : Tonbo sama
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2.3-Description botanique :
A. mexicana est une herbe annuelle ramifiée et dressée, qui atteint 1 m de
hauteur (Figure N°1). La base est ligneuse, les feuilles sont alternes
sessiles et glabres lancéolées avec le bord lobé et dentellé, ces dents sont
terminées par des pointes épineuses, les nervures sont alternes, étalées
d’un blanc laiteux sur le limbe, on rencontre des épines à la partie
inférieure du limbe. Les fleurs sont terminales, ils peuvent atteindre 2,5 à
5 cm de diamètre avec des sépales verts et des pétales jaune vif. Les
fruits sont des capsules rectangulaires et ovoïdes avec de nombreuses
épines dressées ou étalées. Le latex est jaune, la graine est brun-noirâtre,
ronde et nette. Ces graines ressemblent aux graines de moutarde
(Brassica compestris) qui fournissent l’huile de moutarde avec lesquelles
des falsifications sont possibles.
Argemone mexicana est originaire de la partie méridionale de l’Amérique
du nord.
Elle vit en petit peuplement en général près des villages et campement,
c’est une espèce anthropogène.
Au Mali elle est retrouvée dans différentes régions (Sangaré, 2003).
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Figure N°1 : Argemone mexicana
2.4-Utilisations traditionnelles :
Les feuilles sont traditionnellement utilisées dans les entéralgies,
douleurs musculaires, la gonorrhée, constipation, mal fonctionnement
hépatique et jaunisse, paludisme simple, toux, inflammation.
Les tiges utilisées en infusion comme diurétique.
Les racines sont utilisées en infusion comme stimulant voir excitant, anti-
helminthique, en décoction contre le mal de dent, douleur des yeux,
écoulement urétral, en macération dans les blennorragies, troubles
hépatobiliaires, fièvres bilieuses hématurique.
Le suc est utilisé comme sédatif, antiémétique, dans les otites, les
affections oculaires.
Les graines infusées étaient utilisées comme diurétiques purgatifs.
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L’huile dans les constipations, insomnies, infections cutanées, plaies.
La partie aérienne en décoction utilisée comme diurétique, purgative,
diaphorétique, on l’utilise dans les maladies oculaires, eczéma, etc.
(Sidibé, 2006).
Les Indiens fumaient les feuilles de la plante à la manière de l’opium.
(Plante médicinale du monde).
2.5-Composition chimique : On note la présence des hétérosides
cardiotoniques, des composés réducteurs des tanins, benzoquinones,
coumarines, mucilages, stérols, triterpènes et les alcaloïdes.
Tableau I
Groupes
: Répartition des alcaloïdes en fonction des organes de
Argemone mexicana.
Alcaloïdes Organes
Protoberberine Berbérine Feuilles, tiges, graines
Coptisine Racines
Protopine Protopine Feuilles, tiges, graines
Allocryptopine Racines
Benzophenanthridine
Sanguinarine Huile de graines
Dihydrosanguinarine Huile de graines
Chelerythrine Racines
Dihydrochelerithrine Racines
Dihydrosanguinarine : 87%
Sanguinarine : 5%
Berbérine : 0,5%
Protopine : 0,12%
Chelerythrine : 0,03%
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 28
Coptisine : 0,13%
En plus des alcaloïdes signalés, on retrouve également :
-dans les graines : Huile 22 á 40% du poids sec, matières azotés, amidon,
eau, sels minéraux, cellulose, sucres, gommes.
-dans la plante entière : les racines contiennent du saccharose et les
feuilles de la vitamine C ; la poudre de feuilles séchées et la tige
renferme : des corps gras (alcool cérylique, bêta sistostérol…), des acides
organiques solubles dans l’eau (acide tartrique, acide succinique, acide
citrique, acide malique), des aminoacides libres et combinés, des
monosaccharides (glucose et fructose) et des sels minéraux.
-dans les fleurs : trois dérives flavonoïques ont été retrouvés
(isorhamnetine, isorhamnetine-3-glucose et isorhamnetine-3-7
diglucosides) (Sangaré, 2006 ; Kerharo).
2.6-Pharmacologie :
2.6.1-Les organes
Les racines antiblenoragiques, stimulantes voir excitantes.
: la plante entière est réputée hypotenseur, narcotique,
diaphorétique, diurétique.
Les graines sont toxiques pour les animaux mais aussi pour l’Homme.
Elles sont utilisées à doses thérapeutiques pour leurs propriétés
diurétique et purgative.
Les feuilles et la tige ont également des propriétés antibactérienne,
antivirale, hypotensive, spasmodique et stimulante. Les feuilles sont
laxatives, anti-inflammatoires pour les yeux, cicatrisantes pour les
ulcères mais également embryotoxique.
La tige a des propriétés diurétiques.
L’extrait de ses capsules constitue un excellent hypnotique et antitussif.
Le latex a des propriétés anticoagulantes.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 29
2.6.2-Les alcaloïdes totaux : stimulent tous les muscles lisses et se
comportent comme antagoniste de l’acétylcholine, l’histamine et de la 5-
hydroxytryptamine. Ils possèdent une action ocytocique….
2.6.3-Les alcaloïdes : ce sont probablement les principes actifs
d’Argemone mexicana :
La berbérine : est douée de propriétés bactériostatiques à faible dose,
bactéricide à dose plus forte. Elle est aussi fongicide et toxique à l’égard
des plasmodiums, les leishmanies et divers protozoaires …
Elle n’est pas toxique, elle déprime l’activité respiratoire et stimule les
muscles lisses de différents organes : intestin, utérus, bronches…
La protopine : est spasmolytique, anticholinergique, anti-arythmique
anti-bactérienne, elle augmente la fixation de l’acide gamma-
aminobutyrique sur ses récepteurs centraux.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 30
Allocryptopine : L’alpha-allocryptopine ralenti le cœur du rat et de la
grenouille et prolonge la systole.
Elle ralentit aussi les battements du cœur chez les chats et les lapins aux
doses de 10-20 mg/kg, provoque le blocage du cœur de la grenouille á
des doses élevées.
La sanguinarine : est en partie responsable de la toxicité de l’huile de la
plante. Elle stimule le cœur isolé de la grenouille, du cobaye et d’autres
mammifères, mais n’à aucun effet sur la pression sanguine du chien sur
l’intestin isolé, et sur l’utérus gravide du cobaye. Ses 3 actions sont : anti-
adrénaline, effets histopathologique sur la cornée, l’angle de filtration, la
rétine et la peau, et des effets sur l’équilibre tissus fluides.
La sanguinarine possède des propriétés : antimicrobienne, antifongique
et anti-inflammatoire.
L’hydro sanguinarine : Même á forte dose n’est pas toxique. Le chlorure
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 31
de Sanguinarine est utilisé en bain de bouche et dentifrice, surtout aux
Etats-Unis.
(Kerharo et Adams, 1974 Bruneton, 1993 Burkill, Sidibé, 2006)
2.7-Toxicité de Argemone mexicana :
Beaucoup d’étude sur A. mexicana ont surtout porté sur la toxicité de
cette plante qui est signalé à diverses reprises comme étant toxique pour
l’homme et les animaux. Elle peut entraîner la mort par hémorragies
intestinales qui serait due principalement à la consommation du latex et
des graines. En effet, l’huile de moutarde qui est utilisé pour la cuisson
des aliments se trouvait très souvent contaminée par l’huile de la graine
de A. mexicana ou la graine qui contamine les céréales comme le blé.
Beaucoup de cas d’intoxication ont été signalés à travers le monde ; la
première a été signalée à Calcutta en Inde en 1877, puis s’en est suivi
d’autres cas au cap, Afrique du sud entre 1946 et 1947 qui a fait 4
victimes sur 12 intoxiqués, chez les poules en Australie. Deux épidémies
touchant Delhi et alentours avec 65 morts pour la seule ville de Delhi en
1998, à Saptari au Népal en 1996.
Le mécanisme de la toxicité de l’huile de A.mexicana n’est pas encore clair
mais différentes hypothèses ont été émises, elle est plus ou moins liée à
la Sanguinarine :
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 32
inhibition de Na+ et K+ ATPase
dégradation de la membrane cellulaire par des réactions
d’oxydation et la peroxydation des lipides
inhibition de l’activité de l’ADN polymérase
accumulation de pyruvate due à une glucogénolyse accrue.
L’empoisonnement qui débute brutalement sans signes avant coureurs
se traduit rarement par les symptômes diarrhées, vomissement, mais
plus souvent par de la constipation et par des troubles de la vision .Les
premiers symptômes de l’empoisonnement sont caractérisés par des
douleurs et des œdèmes, mais la véritable épidémie commence avec
l’apparition de sarcoïdes, légères diarrhées et légers œdèmes des
jambes. Il a été montré chez le rat que la DL50 du chlorure de
sanguinarine est de 1,66g/Kg (per os) ; ce même animal ne semble pas
souffrir d’une dose quotidienne de 0,6 mg/Kg de sanguinarine pendant
30 jours.
La toxicité est beaucoup plus marquée par voie IV (29 mg/Kg) (Kerharo
et Adam, 1974 ; Sidibé, 2006).
2.8-Cytotoxicité :
Ces tests réalisés à l’institut des maladies tropicales de Bâle (Suisse) ont
été effectués sur tous les extraits aqueux. La méthode de cytotoxicité L6
a été utilisée et la drogue de référence était la podophyllotoxine. Selon
les résultats obtenus ils ont trouvé des IC50
toujours supérieures à
90 µg/ml pour tous les extraits quel que soit le solvant de dilution utilisé
(eau ou le diméthyl sulfoxide) et la drogue de référence variait de 0, 009-
0.01 µg/ml. (Sidibé, 2006)
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 33
2.9-Toxicité aigue: Elle a été déterminée au DMT (département médecine
traditionnelle de l’INRSP) sur des souris pendant 72 heures. La DL50
obtenue était supérieure à 3,205g/kg.
2.10-Activité antipaludique : Elle a été déterminée avec sept autres
plantes qui sont: Canthium acutiflorium (Rubiaceae), Cassia sieberiana
(Caesalpiniaceae), Feretiaapodanthera (Rubiaceae), Opilia celtidifolia
(Opiliaceae), Securidaca longepedunculata (Polyalaceae), Securinega virosa
(Euphorbiaceae), Spondias mombin (Anacardiaceae). Les parties utilisées sont
respectivement : feuilles et écorces, racines, feuilles et écorces, feuilles et
écorces, racines, feuilles et racines, feuilles. L’extrait méthanolique
d’Argemone mexicana a été le plus actif avec une IC50 d’un µg/ml contre
0,05 µg/ml pour la chloroquine qui était le témoin à l’époque. (Sangaré
2003).
3-Notion de toxicité
Il existe des drogues dont l’administration peut provoquer des
phénomènes d’intolérance ou d’allergie, d’autres plantes exercent leurs
effets thérapeutiques à des doses voisines de celles pour lesquelles on
observe des phénomènes on dit que la marge thérapeutique est réduite.
L’usage clinique d’une drogue est toujours précédé d’un test de toxicité
:
Les effets toxiques d’une substance varient considérablement selon sa
nature, l’organe cible et son mécanisme d’action. Ces effets constituent la
résultante d’interactions biochimiques entre la substance toxique et/ou
ses métabolites et les structures de l’organisme. Une meilleure
connaissance de ces caractéristiques permet d’améliorer l’évaluation des
risques potentiels pour la santé et facilite le développement de mesures
rationnelles dans la prévention et le traitement (Timbo, 2003).
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 34
afin d’établir le risque encouru par l’homme lors de l’administration du
produit (Fané, 2002).
L’étude de la toxicité aiguë permet d’exprimer la dose qui tue 50% des
animaux d’expérience (DL50) ainsi que la dose minimale létale (DML) la
plus petite dose qui tue un animal, ou encore la dose minimale sans effet
toxique (DME) c’est à dire la dose la plus élevée pour laquelle aucun
effet toxique n’est relevé par rapport au lot témoin (Traoré, 1999).
Il est à signaler que des troubles de toxicité se manifestent souvent après
une longue imprégnation de l’organisme.
Des essais de toxicité par administration réitérée chez l’animal sont
toujours effectués lorsqu’une molécule présente un éventuel intérêt
thérapeutique.
Certains risques thérapeutiques qui apparaissent que dans des
conditions particulières, font l’objet d’essais spéciaux à savoir
l’évaluation des effets tératogènes, cancérigènes et mutagènes (Rehaba,
2002).
3.1-Méthodes d’études :
3.1.2-Toxicité par administration unique : Toxicité aiguë :
C’est l’étude qualitative et quantitative des phénomènes toxiques, qu’il
est possible de rencontrer après administration unique de la ou des
substances actives, contenues dans le médicament. Cette étude décrit les
symptômes observés y compris les phénomènes locaux et fournit pour
autant que cela soit possible, l’indication de la dose létale (DL50
) avec ses
limites de confiance (95/100).
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 35
Détermination de la DL50 :
Définition : La DL50 est la dose d’une substance chimique qui
administrée à des animaux de laboratoire provoque la mort de la moitié
d’entre eux.
Différentes méthodes de détermination de la DL50
Méthodes de Miller et Tainter :
:
Principe : On dispose d’un papier logarithme-probabilité sur lequel on
porte en abscisse (échelle logarithme) les doses et en ordonnée (échelle
probits) les pourcentages de mortalité.
En général il se trouve dans chaque série d’essais une dose assez faible
pour laisser en survie tous les animaux et une dose assez élevée pour
tuer tous les animaux dans les lots assignés respectivement à chacune
des doses.
Pour ces 2 résultats la valeur des probits est infiniment grande.
Méthodes de Karber et Behrens :
Principe : On administre des doses croissantes de substances à des lots
de souris de masses uniformes, la dose administrée en mg/kg ou en
ml/kg de masse corporelle.
La différence entre les doses voisines doit être constante pour chaque lot,
on note aussi le pourcentage de mortalité dans l’heure qui suit ou au
bout du temps imparti. La DL50 est obtenue par la formule :
DL50=DL100-Σ(a.b)/n
NB:
DL100
Σ : somme.
: plus petite dose tuant tous les animaux
a : moyenne de la somme des morts à deux doses
b : différence entre 2 choses successives par lot
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 36
3.1.2-Toxicité par administration répétée : Toxicité subaiguë et toxicité
chronique
:
Ces épreuves ont pour objet de mettre en évidence les altérations
fonctionnelles et/ou pathologiques consécutives aux administrations
répétées de la substance active examinée et d’établir les conditions
d’apparition de ces altérations en fonction de la posologie.
Les expérimentations se font sur deux espèces de mammifères dont un
rongeur. Une des épreuves durera deux à quatre semaines l’autre trois
à six semaines.
Il est utile de choisir la dose la plus élevée de façon à faire apparaître des
effets nocifs. Les doses inférieures permettent alors de situer la marge de
tolérance du nouveau produit chez l’animal.
L’appréciation des effets toxiques est faite sur la base de l’examen du
comportement, de la croissance, de la numération formule sanguine et
des épreuves fonctionnelles particulièrement celles qui se rapportent
aux organes excréteurs ainsi que les comptes rendues microscopiques,
accompagnés des examens histopatologiques qui s’y rattachent. (Nana,
2007)
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 37
TRAVAUX PERSONNELS
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 38
5-Méthodologie :
5.1-Lieu d’étude
Cartographier les zones de peuplement naturel des plantes
médicinales,
:
Nous avons mené nos travaux au DMT (Département Médecine
Traditionnelle) de l’INRSP (institut national de recherche en santé
publique) sise à Sotuba à côté de la gare marchandises.
Le DMT a pour objectif de:
Produire des médicaments traditionnels améliorés.
Le DMT comprend :
Un laboratoire de biologie clinique
Un laboratoire de phytochimie
3 sales de consultation
Un bureau de vente des médicaments traditionnels améliorés
Une sale de séchage des plantes
Une unité de production des médicaments traditionnels améliorés
Un laboratoire de pharmacodynamie
Un jardin de culture des plantes.
5.2-Matériel végétal :
Nous avons travaillé sur SUMAFOURAR
de Tiemogo Bengaly, à base
des feuilles de Argemone mexicana.
SUMAFOURA se présente sous la forme d’un paquet de 21 sachets de
30g chacun, utilisé pour le traitement du paludisme (Figure N°2).
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 39
Figure N°2 : Etiquette de SUMAFOURA
Caractères organoleptiques : Nous avons procédé à une analyse
de l’aspect, de la couleur et de l’odeur de SUMAFOURA.
R
5.3-Etude botanique :
Caractères macroscopiques : Nous avons également procédé à une
observation macroscopique.
Caractères microscopiques :
Matériel :
- Microscope électrique
- Lame et lamelle
- Poudre de la drogue
- Aiguille
- Un flacon de réactif de Gazet du Chatelier
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 40
Mode opératoire :
Une petite quantité de poudre a été mise en suspension dans quelques
gouttes du réactif universel (réactif de Gazet du Chatelier). Une goutte
de la suspension a été déposée sur la lame et couverte avec la lamelle.
Pour l’observation au microscopique, la mise au point a été faite avec
l’objectif 10xn avant de passer à l’objectif 40xn. Nous avons dessiné les
éléments caractéristiques.
5.4-Préparation des extraits :
Matériel :
• Eprouvettes graduées
• Balance analytique de précision (type SARTORIUS)
• Plaque chauffante
• Tasse inoxydable
• Entonnoir, bêcher
• Compresses, flacons
• Eau distillée
• Rotavapor
• Ballon de lyophilisation
• Lyophilisateur
Mode opératoire :
La préparation a été faite selon la méthode du thérapeute : à 30g de
poudre ont été mise dans 500 ml d’eau distillée et l’ensemble a été porté
à ébullition pendant 30 mn. Après refroidissement, le décocté a été filtré
sur compresse, concentré puis lyophilisé. Le lyophilisat a été recueilli
dans des flacons bien propres.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 41
5.5-Etude Phytochimique :
5.5.1-Les réactions en tubes :
Les réactions de caractérisation en tube ont été effectuées sur le décocté
obtenu selon la méthode du thérapeute.
5.5.1.1-Alcaloïdes :
Nous avons prélevé 10cc du décocté auquel nous avons ajouté 40cc
d’acide sulfurique à 10%.
Dans 2 tubes différents nous avons introduit 1 ml de ce décocté acidifié
par l’acide sulfurique. Les tubes ont été portés au bain-marie pendant 5
minutes. Après nous avons ajouté dans le premier tube le réactif de
Dragendorff et dans le second le réactif de Mayer, l’apparition d’un
précipité montre la présence d’alcaloïdes, qui est confirmée par une
extraction.
5.5.1.2-Composés polyphénoliques :
Dans un tube à essais, introduire 5 ml du décocté et ajouter 1 ml de
solution aqueuse de FeCl3
A 30 ml du décocté, ajouter 15ml de réactif de Stiasney (10 ml de formol
à 40% et 5 ml de HCl concentré) et chauffer au bain-marie à 90°C
pendant 15 minutes environ. Le filtrat est ensuite saturé par 5g d’acétate
de sodium pulvérisé ; ajouter goutte à goutte 1ml d’une solution de
à 1%. La présence des tanins se matérialise par
une coloration verdâtre ou bleue noirâtre.
5.5.1.2.1-Tanins catéchiques :
A 5 ml du décocté, ajouter 5 ml d’HCl concentré. Ce mélange est porté à
l’ébullition pendant 15 minutes. L’apparition d’un précipité rouge
soluble dans l’alcool isoamylique, indique la présence de tanins
catéchiques.
5.5.1.2.2-Tanins galliques :
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 42
FeCl3 à 1%. L’obtention d’un précipité montre la présence de tanins
galliques.
Filtrer et saturer 10 ml du filtrat d’acétate de sodium obtenu. Ajouter
quelques gouttes de FeCl3 à 1%. L’apparition d’une teinte bleue noire
indique la présence de tanins galliques non précipités par le réactif de
Stiasney.
5.5.1.3-Mucilages :
Introduire 1 ml du décocté dans un tube à essai et ajouter 5 ml d’éthanol
à 95°C. Après une dizaine de minutes, l’obtention d’un précipité
floconneux par mélange, indique la présence de mucilages.
5.5.1.4-Dérivés anthracéniques :
Introduire 2 ml du décocté dans un tube à essai, puis ajouter 10 ml
d’H2SO4
-Les O-hétérosides : prélever encore 5 ml du décocté acidifié par l’acide
sulfurique à 10% auquel nous avons ajouté 3 à 4 gouttes de FeCl
à 10%.
5.5.1.4.1-Anthraquinones libres : Prélever 5 ml du décocté acidifié,
auquel nous avons ajouté 5 ml de chloroforme puis agiter. Soutirer la
phase organique auquel nous avons ajouté 1 ml d’ammoniaque dilué au
½. La présence de précipité rouge indique la présence d’anthraquinones
libres.
5.5.1.4.2-Anthraquinones combines :
3 à 10%
chauffé au bain-marie pendant 5minutes. Puis refroidit à l’eau. Nous
avons ajouté 5 ml de chloroforme, après nous avons procédé à la
séparation des 2 phases. La phase organique est introduite dans un tube
à essai auquel on ajoute 1 ml de NH4OH dilué au ½. La présence
d’anthranols ou des anthrones est révélée par présence de coloration
rouge intense.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 43
-C-hétérosides : A la phase aqueuse de la première étape, ajouter 1 ml de
FeCl3 à 10% et 10 ml d’eau. Le tout porté au bain-marie pendant 30
minutes. Après refroidissement dans l’eau nous avons agité avec 5 ml de
chloroforme. Nous avons soutiré la phase chloroformique dans un tube à
essai et on ajoute 1 ml de NH4OH dilué au ½. La présence de coloration
rouge plus ou moins intense indique la présence de C-hétérosides.
5.5.1.5-Hétérosides cardiotoniques :
-10 ml du décocté + 1 ml d’acétate de Pb, chauffé pendant 2 minutes,
-Refroidir et filtrer,
-Extraire le filtrat avec le même volume de chloroforme,
-Evaporer la phase chloroformique à sec,
-Reprendre le résidu avec 3 ml d’une solution à 3,5% de FeCl3 dans
l’acide acétique glacial,
-Laisser reposer une minute et mettre dans un tube à essai,
-Ajouter 1,5 ml de H2SO4
concentré en faisant glisser le long de la paroi
du tube à essai.
Une coloration brune à l’interface indique la présence de désoxysucres,
vert pâle de la couche supérieure : stéroïdes.
5.5.1.6-Composés réducteurs :
Diluer le décocté au 1/10, après prélever 5 ml de ce décocté dilué qu’on
introduit dans un creuset et évaporer à sec. Le résidu a été repris avec de
la Liqueur de Fehling (mélange extemporané de 0,5 ml de réactif A et 0,5
ml de réactif B). Un précipité rouge brique indique la présence de
composés réducteurs.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 44
5.5.1.7-Oses et holosides :
Introduire 5 ml de décocté dans un creuset et évaporer à sec. Après on
ajoute 2 à 3 gouttes d’acide sulfurique concentré. Après 5 minutes ajouter
3 à 4 d’alcool saturé avec du thymol.
Le développement d’une coloration rouge qui révèle la présence d’oses
et holosides.
5.5.1.8-Amidon :
Introduire 1 ml du décocté dans un creuset et évaporer à sec. Ajouter 2 à
3 gouttes d’une solution iodo-iodurée. La présence de coloration bleue
indique la présence de grains d’amidon.
5.5.1.9-Coumarines :
Introduire 1 ml du décocté dans un tube à essai, ajouter 4 ml d’éther,
agiter légèrement ; laisser reposer pendant 15 minutes. La solution est
séparée en 2 phases ; la phase etherique mise dans un creuset est
évaporée à sec. Reprendre le résidu avec 2 ml d’eau chaude et partager
entre 2 tubes à essai. Ajouter au contenu du premier tube 0,5 ml de
NH4
Laisser reposer pendant 15minutes et mesurer ensuite la hauteur de la
mousse dans chaque tube.
OH à 25% et observation sous UV à 366 nm.
La présence d’une fluorescence intense dans le tube ou il a été ajouté de
l’ammoniaque indique la présence de coumarines.
5.5.1.10-Saponosides :
Dans une série de 10 tubes à essais de 160.16 mm, numérotés de 1 à 10,
repartir successivement 1,2,…..10 ml de notre décocté.
Ajuster le volume dans chaque tube à 10 ml avec de l’eau distillée.
Agiter chaque tube dans le sens de la longueur pendant 15 secondes en
raison de 2 agitations par seconde.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 45
Le tube dans lequel la hauteur de mousse est de 1 cm indique la valeur
de l’indice de mousse : 1000/n du tube
5.5.1.11-Flavonoïdes :
Au décocté, ajouter 5 ml de H2SO4 à 10%, puis, une base (NH4
. Ballon de concentration
OH). Si la
coloration s’accentue par acidification, puis vire au bleu violacé en
milieu basique, nous sommes en présence des anthocyanes.
5.5.1.11.1-Réaction à la cyanidine : Introduire dans un tube 5 ml du
décocté, et ajouter 5 ml d’alcool chlorhydrique (éthanol à 95º alcoolique,
eau distillée, HCl concentré à parties égales en volumes) ; puis, quelques
copeaux de magnésium et 1 ml d’alcool isoamylique.
L’apparition d’une coloration, rose orangée (flavones) ou rose violacée
(flavonones) ou rouge (Flavonols, flavanonols) rassemblée dans la
couche surnageante d’alcool isoamylique indique la présence d’un
flavonoïde libre (génines). Les colorations sont moins intenses avec les
hétérosides flavoniques.
5.5.1.11.2-Leucoanthocyanes : Effectuer la réaction à la cyanidine sans
ajouter les copeaux de magnésium et chauffer au bain marie pendant
15minutes.
La présence d’une coloration rouge cerise ou violacée indique une
réaction positive. En présence des catéchols nous avons une teinte brune
rouge.
5.5.2-Dosage de certains constituants :
5.5.2.1-Substances extractibles par l’eau :
Matériels :
. Balance analytique de précision (type SARTORIUS)
. Un Rotavapor
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 46
Mode opératoire :
Nous avons fait une décoction pendant 15 minutes avec 1g de poudre et
20 ml d’eau. Le filtrat est introduit dans un ballon préalablement taré et
concentré à sec au rotavapor. Le ballon est ensuite pesé et la masse du
résidu déduit.
5.5.2.2-Dose de l’eau par entraînement azéotropique :
Matériels :
. Ballon de 250 millilitres
. Réfrigérant à reflux tube droit de 20 cm de long
. Tube cylindre gradué
. Chauffe ballon
Mode opératoire : 5g de poudre sont portés à ébullition pendant une
heure dans un système de réfrigérant à reflux avec 100 ml de toluène et
1ml d’eau distillée. Apres 30minutes de repos, le niveau de l’eau N1 est
noté. L’ébullition est reprise à nouveau pendant une heure puis 30 mn de
repos. Le niveau N2
. Dessiccateur
est encore noté. L’augmentation du niveau d’eau
correspond à la quantité d’eau contenue dans la prise d’essai qui est
ensuite rapportée à 100g.
5.5.2.3-Dosage de l’eau par gravimétrie :
Matériels :
. Balance analytique de précision (type SARTORIUS)
. Four
. Verre de montre
. Pince
. Spatule métallique
. Capsules en verre
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 47
Mode opératoire : 5 prises d’essais de masse variant entre 1 et 2g de
poudre sont introduits dans 5 creusets tarés et sont placés dans le four à
la température de 105ºC pendant 24 heures. Après refroidissement dans
un dessiccateur nous les avons pesés et la perte de masse observée
correspond à la quantité d’eau perdue. La moyenne est calculée et
rapportée à 100g.
5.5.2.4- Dosage des cendres :
5.5.2.4.1-Dosages des cendres totales : Les prises d’essais du dosage de
l’eau par gravimétrie ont été réintroduites dans le four et calcinées à
600ºC pendant 6 heures. Après refroidissement dans un dessiccateur
nous les avons pesés. La quantité de cendre obtenue est pesée et la
moyenne rapportée à 100g de prise d’essai.
5.5.2.4.2- Dosage des cendres insolubles dans l’acide chlorhydrique à
10% : La cendre totale de la prise d’essai est receueillie dans une capsule.
On y ajoute 20 ml d’acide chlorhydrique à 10% puis on porte l’ensemble
à l’ébullition au bain-marie pendant 15 minutes. Le résidu est alors
recueilli sur un filtre sans cendre dans un creuset taré et calciné au four à
600ºC pendant 6 heures. Après refroidissement dans un dessiccateur
nous l’avons pesé et la masse de cendre obtenue est rapportée à 100g de
prise d’essai.
5.5.2.4.3- Dosage des cendres sulfuriques à 50% : Tarer un creuset, y
mettre 3g de poudre, peser, noter le poids, ajouter 5cc d’H2SO4
dilué au
1 /2 (la quantité nécessaire pour mouiller la poudre) mélanger et mettre
à l’étuve pour le séchage pendant 24 heures. Après séchage on met au
four pour calcination. Après les 6 heures de calcination refroidir, et peser
jusqu’à poids constant.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 48
5.5.3-Chromatographie sur couche mince :
5.5.3.1-Matériels et réactifs :
- Balance analytique de précision type SARTORIUS
- Plaque chromatographique de silicagel G
- Cuve et couvercle
- Micropipettes de 10 ml
- Séchoir de type Solis
- Lampe UV type DESAGA Min UVIS
- Pulvérisateur, règle et crayon
- Système de solvant : BAW (butanol-acide acétique-eau) (60-15-25)
- Révélateur : réactif de Godin, AlCl3, FeCl3
5.5.3.2-Mode opératoire : Nous avons dissout 10mg de notre lyophilisat
dans un ml d’un mélange de méthanol et d’eau à volume égal, et
procéder à la décoction selon la méthode du thérapeute, après nous
avons effectué le dépôt de 10 µl de chaque extrait sur la plaque qui a été
placée dans une cuve contenant le solvant d’élution. Après migration les
plaques ont été séchées et les substances chimiques identifiées sous UV
254 ont été encerclées en traits pleins et celles identifiées à 366 nm ont été
encerclée en pointillés.
Les plaques ont été enfin révélées avec le réactif de Godin puis chauffées
à l’aide du séchoir jusqu’à la mise en évidence des substances chimiques
sous diverses colorations et avec FeCl
, Dragendorff, DPPH.
3, AlCl3
, et le réactif de
Dragendorff.
Chaque substance a été identifiée par son facteur de rétention (Rf) dans
le BAW, sa fluorescence sous UV et sa coloration après révélation.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 49
5.6-Etude de la toxicité sub-chronique :
Matériel animal :
Nous avons travaillé sur 24 rats albinos, provenant du Centre Muraz de
Bobo-Dioulasso de poids variant de 165,15 à 312,68g.
Phase d’observation :
Les animaux ont été pesés quotidiennement pendant un mois avant de
commencer l’administration.
Evaluation de la toxicité :
Mode opératoire :
Les animaux (rats) ont été repartis en 4 lots comportant un nombre égal
de males et de femelles :
Lot 1 : recevait de l’eau distillée 6 ml/kg de poids corporels et
comportait 2 mâles et 2 femelles.
Lot 2 : recevait 100 mg/kg (1 ml/kg, 3 fois moins la dose du thérapeute)
de notre extrait et comportait 3 mâles et 3 femelles.
Lot 3 : recevait 300 mg/kg (3 ml/kg, la dose du thérapeute) de l’extrait
et comportait 3 males et 3 femelles.
Lot 4 : recevait 1500 mg/kg (15 ml/kg, 5 fois la dose du thérapeute) de
l’extrait, constitué de 3 mâles et 3 femelles.
La concentration de l’extrait était 100 mg (lyophilisat)/ml. Les animaux
recevaient leurs doses par gavage chaque matin 5 jours sur 7 pendant 4
semaines, après avoir été pesés. Ils étaient observés après administration
et en fin de journées, le samedi aussi ils étaient observés.
Au J15 sept rats ont été sacrifiés selon les recommandations de l’OMS sur
les animaux pour prélever leurs sangs pour des analyses hématologiques
et biochimiques. A la fin de l’administration sept autres rats ont été
sacrifiés toujours selon les recommandations de l’OMS sur les animaux
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 50
et prélever leurs sangs pour des analyses hématologiques et
biochimiques, et les organes tels que les 2 reins et le foie (qui sont les
principaux organes d’élimination) ont été prélevés pour l’analyse
histopathologique.
Effet sur la diurèse de base :
Nous avons pris 2 rats un mâle et femelle de poids respectifs 260g et
190g sur lesquels cette activité a été déterminée en utilisant une cage
métabolique. Nous avons utilisé de l’eau distillée comme témoins en
raison de 50 ml/kg de poids corporels, le volume d’urine a été lu à la
première heure et à la deuxième heure. Après avoir procéder à la
décoction selon la méthode du thérapeute nous avons effectué
l’administration en raison de 50 ml/kg de poids corporels, le volume
d’urine a été lu de la même manière aussi.
Le total des urines recueillies pour chaque rat a été analysé avec le
Cromatest Linear URS-10.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 51
6-Résultats :
6.1-Caractères organoleptiques : La poudre était rugueuse au touché et
présentait une odeur qui ressemble à l’odeur des feuilles de tabac, elle
était sans saveur.
6.2-Macroscopie : Les sachets avaient pour couleur le vert moyen et se
présentaient sous forme de poudres grossières.
6.3-Microscopie : Les éléments caractéristiques de la poudre de feuilles
d’Argemone mexicana sont représentés dans les figures suivantes :
Figure N°3
a : Groupe de fibres avec des cristaux d’oxalate de calcium,
b : Fragment de tissus vasculaires,
c : Fragment d’épiderme,
d : Poil tecteur,
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 52
Figure N°4
e : Vaisseaux spiralés,
f : Cellules laticifères,
Figure N°5
g : Vaisseaux de bois,
h : Parenchyme a cellule polyédrique,
i : Epiderme avec stomates,
j : Cristaux d’oxalate de calcium,
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 53
Figure N°6
k : Une épine,
l, m, n : Poils tecteurs.
Nous avons constaté lors de la microscopie que les groupes de fibres
avec cristaux d’oxalate de calcium, les vaisseaux spiralés, les cristaux
d’oxalate de calcium étaient très nombreux ; les fragments d’épidermes
un peu nombreux.
6.4-Rendement moyen de l’extraction :
Tableau II : POURCENTAGE DE RENDEMENT PAR SACHET.
Sachets Rendements
1er Sachet 22%
2e Sachet 25%
3e Sachet 23%
Rendement moyen 23,33%
La décoction dégage une odeur caractéristique qui rappelle l’odeur du
tabac et le décocté à une couleur de terre de sienne claire (Marron), il est
amère.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 54
6.5-Résultats de l’étude phytochimique :
6.5.1-Réactions en tubes :
Tableau III: GROUPES CHIMIQUES CARACTERISES DANS LE DECOCTE.
Recherches Résultats Interprétations
Tanins Précipités brun verdâtre + + +
Tanins galliques Coloration bleu noire + + +
Tanins catéchiques Précipités rouges + + +
Oses et holosides Coloration rouge + + +
Coumarines Fluorescence verte + +
Flavonoïdes Coloration bleu violacée +
Saponosides Indice de mousse <1cm
Réaction positive : + + +
Réaction peu positive : + +
Réaction très peu positive : +
Dans le décocté nous avons retrouvé, les tanins (galliques et
catéchiques), oses et holosides, les coumarines, les flavonoïdes. Les
groupes chimiques tels que les alcaloïdes, mucilages, anthracenosides,
hétérosides cardiotoniques, composés réducteurs, amidons et les
saponosides ont donné des réactions négatives.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 55
6.5.2-Dosage de certains constituants :
Tableau IV : POURCENTAGE DES CONSTITUANTS DANS LA POUDRE.
Méthode de dosage Pourcentage
Eau par la méthode gravimétrique 6,53%
par la méthode azéotropique 6%
Substance extractible par l’eau 20%
Cendre totale 16,51%
Cendre chlorhydrique 1,26%
Cendre sulfurique 17,33%
Il n’ya pas de différence significative entre la teneur en eau par la
méthode gravimétrique et la méthode azéotropique.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 56
6.5.3-Chromatographie sur couche mince (CCM):
Dans le système de solvant : Butanol-Acide acétique-Eau (60-15-25).
Tableau V : LA SEPARATION DES CONSTITUANTS DU DECOCTE EN FONCTION DES
FACTEURS DE RETENTION, PLAQUE REVELE AVEC DU GODIN
Extraits Tâches Rf 254 nm 366 nm Godin
Lyophilisat 0,7 - bleu violet - 0,13 - bleu -
0,18 - bleu - 0,25 - bleu violet - 0,31 - bleu - 0,36 - bleu violet - 0,41 - bleu Jaune 0,46 - bleu - 0,51 - bleu violet - 0,57 Visible jaune - 0,75 - bleu violet - 0,88 - rouge -
Décocté 0,06 Visible rouge jaune 0,11 - rouge jaune
0,17 - bleu jaune 0,29 - bleu violet jaune 0,30 - bleu jaune 0,35 - bleu sienne clair 0,40 - bleu violet sienne clair 0,45 - bleu jaune 0,50 - rouge chair tirant sur le gris 0,57 Visible jaune chair tirant sur le gris 0,75 - rouge chair tirant sur le gris 0,80 - bleu chair tirant sur le gris 0,87 Visible rouge chair tirant sur le gris
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 57
Figure N°7 : Chromatogramme des extraits (Lyophilisat et Décocté)
révélé avec le Godin.
Le Godin colore tous les composés, nous constatons qu’il y a plus de
tâches avec le décocté qu’avec le lyophilisat. Les tâches jaunes avec le
Godin sont des flavonoïdes.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 58
Tableau VI : PLAQUE REVELE AVEC DU FECL
3
Extraits Tâches Rf 254 nm 366 nm
Lyophilisat 0,10 - Bleu violet 0,16 - Bleu
0,21 - Bleu 0,27 - Bleu violet 0,33 - Bleu 0,38 - Bleu violet 0,43 - Bleu violet 0,48 - Bleu 0,52 - Rouge 0,58 Visible Jaune 0,96 - Rouge
Décocté 0,07 Visible Rouge 0,15 Visible Bleu
0,21 - Bleu 0,26 - Bleu violet 0,31 - Bleu 0,36 - Bleu 0,41 - Bleu violet 0,45 - Bleu 0,52 - Rouge 0,57 Visible Jaune 0,65 - Bleu 0,71 - Bleu 0,76 - Rouge 0,82 - Bleu 0,88 - Rouge
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 59
Figure N°8: Chromatogramme des extraits (Lyophilisat et Décocté)
révélé avec du FeCl3.
C’est au niveau des 2 dépôts que nous avons observé des tâches noires
qui indiquent la présence des tanins après révélation par le FeCl3
.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 60
Tableau VII : PLAQUE REVELE AVEC DE L’ALCL
Extraits
3
Tâches Rf 254 nm 366 nm AlCl3
Lyophilisat 0,18 - Bleu - 0,26 - Bleu violet -
0,36 - Bleu - 0,40 - Bleu - 0,46 - Bleu - 0,56 - Bleu violet - 0,61 Visible Jaune - 0,91 - Rouge -
Décocté 0,07 Visible Rouge Jaune 0,15 - Rouge Jaune
0,21 - Bleu - 0,27 - Bleu violet - 0,33 - Bleu - 0,38 - Bleu - 0,43 - Bleu violet - 0,48 - Bleu - 0,55 - Rouge - 0,60 Visible Jaune Jaune 0,80 - Rouge - 0,85 - Bleu - 0,92 Visible Rouge -
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 61
Figure N°9 : Chromatogramme des extraits (Lyophilisat et Décocté)
révélé avec de l’AlCl3.
La présence de tâches jaunes après révélation par l’AlCl3 indique la
présence de flavonoïdes, ainsi nous avons noté la présence de tâches
jaunes aux Rf : 0.07 ; 0.15 ; 0.60 avec le décocté, et pour le lyophilisat c’est
au niveau du dépôt.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 62
Tableau VIII : PLAQUE REVELE AVEC DU DPPH
Extraits Tâches Rf 254 nm 366 nm DPPH
Lyophilisat 0,18 - Bleu - 0,36 - Bleu -
0,42 - Bleu - 0,60 - Bleu violet - 0,66 Visible Jaune - 0,82 - Bleu violet - 0,96 - Rouge -
Décocté 0,10 Visible Rouge - 0,16 Visible Bleu violet -
0,22 - Bleu - 0,26 - Bleu - 0,30 - Bleu - 0,36 - Bleu Jaune 0,41 - Bleu - 0,47 - Bleu violet - 0,53 - Bleu - 0,60 - Rouge - 0,63 - - Jaune 0,65 Visible Jaune - 0,83 - Bleu violet - 0,88 - Bleu - 0,96 Visible Rouge -
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 63
Figure N°10 : Chromatogramme des extraits (Lyophilisat et Décocté)
révélé avec du DPPH.
La présence de tâches jaunes après révélation par le DPPH indique la
présence d’antioxydants, ainsi nous avons constaté la présence de 2
tâches jaunes aux Rf : 0.36 ; 0.63 avec le décocté, mais pas de tâches avec
le lyophilisat.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 64
6.6-Etude de la toxicité sub-chronique :
Tableau IX : POIDS (G) MOYENS DES RATS UN MOIS AVANT L’ADMINISTRATION
Nous avons enregistré un gain de poids des rats au niveau de chaque lot.
Tableau X : POIDS (G) MOYENS DES RATS DURANT LA PERIODE D’ADMINISTRATION DU
MEDICAMENT
Nous avons enregistré une perte de poids des rats au niveau de chaque
lot.
Lots/sexes Poids Première
semaine
Poids Quatrième
semaine
Variation de
poids
Lot 1 Mâles
femelles
212,58
171,07
228,00
222,59
+15,42
+ 51,52
Lot 2 Mâles
femelles
270,10
151,73
313,06
179,28
+ 42,96
+27,55
Lot 3 Mâles
femelles
214,98
147,31
250,48
177,65
+35,50
+30,34
Lot 4 Mâles
femelles
238,79
178,54
281,32
194,50
+42,53
+15,96
Lots/sexes Poids Première
semaine
Poids Quatrième
semaine
Variation de
poids
Lot 1 Mâles
femelles
237,77
237,63
216,77
237,77
-21.00
-0.14
Lot 2 Mâles
femelles
325,82
184,68
253,22
189,42
-72.60
+04.74
Lot 3 Mâles
femelles
258,36
180,84
223,94
181,35
-34.42
+00.51
Lot 4 Mâles
femelles
287,77
198,24
288,06
189,96
+0.29
-08.28
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 65
Tableau XI: VOLUME (ML) D’EAU CONSOMME PENDANT L’ADMINISTRATION A J15
Lots/sexes Traitements/doses Première
semaine
Deuxième
semaine
Variation
de volume
Lot 1 Mâles
femelles
Eau distillée
186
145
328
165
+142
+ 20
Lot 2 Mâles
femelles
Décocté 100mg/kg
345
308
445
328
+ 100
+20
Lot 3 Mâles
femelles
Décocté 300mg/kg
140
290
285
368
- 20
+78
Lot 4 Mâles
femelles
Décocté 1500mg/kg
305
240
175
295
+35
+55
Nous avons constaté une augmentation de la quantité d’eau consommée
à la fin de la deuxième semaine sauf chez les mâles du lot 3 où nous
avons observé une baisse.
Tableau XII : VOLUME (ML) D’EAU CONSOMME PENDANT L’ADMINISTRATION A J30
Lots/sexes Traitements/doses Troisième
semaine
Quatrième
semaine
Variation
de volume
Lot 1 Mâles Eau distillée 120 160 +40
Lot 2 Mâles
femelles
Décocté 100mg/kg
267
129
290
227
+ 23
+98
Lot 3 Mâles
femelles
Décocté 300mg/kg
155
260
210
218
+55
- 42
Lot 4 Mâles
femelles
Décocté 1500mg/kg
120
130
125
150
+5
+20
Nous avons constaté une augmentation de la quantité d’eau consommée
à la fin de la quatrième semaine sauf chez les femelles du Lot 3 où nous
avons observé une baisse.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 66
Tableau XIII : QUANTITES (G) DE NOURRITURES CONSOMMEES PENDANT
L’ADMINISTRATION A J15
Lots/sexes Traitements/doses Première
semaine
Deuxième
semaine
Variation
de volume
Lot 1 Mâles
Femelles
Eau distillée
56,22
70,56
99,24
137,39
+43,4
+ 66,83
Lot 2 Mâles
Femelles
Décocté 100mg/kg
222,12
163,48
268,34
244,66
+ 46,22
+81,18
Lot 3 Mâles
Femelles
Décocté 300mg/kg
194,90
173,48
300,00
176,07
+105,10
+03,04
Lot 4 Mâles
Femelles
Décocté 1500mg/kg
76,08
90,57
64,63
112,62
-11,45
+22,45
Nous avons constaté une augmentation de la quantité de nourritures
consommées à la fin de la deuxième semaine sauf chez les mâles du Lot 4
où nous avons observé une baisse.
Tableau XIV : QUANTITES (G) DE NOURRITURES CONSOMMEES PENDANT
L’ADMINISTRATION A J30
Lots/sexes Traitements/doses Troisième
semaine
Quatrième
semaine
Variation
de volume
Lot 1 Mâles Eau distillée 27,03 74,98 +47,95
Lot 2 Mâles
femelles
Décocté 100mg/kg
150,26
175,87
185,58
125,22
+ 35,32
-43,54
Lot 3 Mâles
femelles
Décocté 300mg/kg
91,62
111,18
133,49
125,22
+41,87
+14,04
Lot 4 Mâles
femelles
Décocté 1500mg/kg
71,58
51,69
82,96
64,49
+11,38
+12,80
Nous avons constaté une augmentation de la quantité de nourritures
consommées à la fin de la quatrième semaine sauf chez les femelles du
Lot 2 où nous avons observé une baisse.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 67
Tableau XV : POIDS (G) DES RATS SACRIFIES AU J15
(*)Poids relatif du foie = (Poids du foie/Poids corporel).100
Nous constatons qu’il n’ya pas de différence significative entre les rats
du lot témoins et les rats des lots qui ont reçu le décocté.
Poids en gramme
Lots/doses Corporel Foie (*) Rate Reins
Lot1 (Eau distillée) M: 237.49 4.96 (2.08) 0.62 0.58
F: 176.58 4.09 (2.31) 0.59 0.42
Lot2 (100mg /kg) M: 328.08 7.56 (2.30) 0.65 0.75
F: 162.68 4.65 (2.85) 0.49 0.36
Lot3 (300mg/kg) M: 265.35 6.45 (2.43) 0.48 0.68
F: 178.91 4.55 (2.54) 0.58 0.43
Lot4 (1500mg/kg) M: 288.06 5.80 (2.01) 0.58 0.50
F: 185.95 3.90 (2.09) 0.46 0.40
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 68
Tableau XVI : POIDS (G) DES RATS SACRIFIES AU J30
(*)Poids relatif du foie = (Poids du foie/Poids corporel).100
Nous constatons qu’il n’ya pas de différence significative entre les rats
du lot témoins et les rats des lots qui ont reçu le décocté.
Poids en gramme
Lots/doses Corporel Foie (*) Rate Reins
Lot1 (Eau distillée) M: 220.47 5.57 (2.52) 0.68 0.50
F: 186.50 4.29 (2.30) 0.50 0.48
Lot2 (100mg/kg) M: 327.18 8.05 (2.46) 0.77 0.81
F: 180.55 3.94 (2.18) 0.59 0.41
Lot3 (300mg/kg) M: 181.31 5.03 (2.77) 0.76 0.50
F: 174.03 4.20 (2.41) 0.44 0.38
Lot4 (1500mg/kg) M: 286.41 6.80 (2.37) 0.74 0.60
F:188.12 4.80 (2.55) 0.58 0.40
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 69
Tableau XVII : RESULTATS DES EXAMENS BIOCHIMIQUES AU J15
Examens Eau distillée Mâles Femelles
100 mg/kg Mâles Femelles
300 mg/kg Mâles Femelles
1500mg/kg Femelles
Glycémie 4.43 4.04 5.75 4.30 4.39 4.78 4.22 Urée 5.56 4.56 6.27 6.00 4.86 5.71 4.44 Acide urique 8.25 46.64 32.35 104.9 15.91 74.08 66.78 Cholestérol 1.19 1.45 1.45 1.38 2.03 1.38 1.49 Triglycerides 0.30 0.19 0.28 0.90 0.27 0.36 0.28 Créatinine 77.44 71.72 90.22 73.70 77.33 75.14 75.74 Protides 72 62 74 65 75 71 48 Transa SGOT 186 243 269 493 269 233 262 Transa SGPT 55 63 59 86 105 57 55 Na 152 145 148 140 152 141 144 K 8.1 8.1 8.1 8.00 7.5 8.4 6.5
Nous avons constaté une augmentation de transaminases et d’acide
urique chez les rats ayant reçu le décocté.
Tableau XVIII : RESULTATS DES EXAMENS BIOCHIMIQUES AU J30
Examens Eau distillée Mâles
100 mg/kg Mâles Femelles
300 mg/kg Mâles Femelles
1500 mg/kg Mâles Femelles
Glycémie 5.39 5.63 4.91 5.13 6.21 4.40 4.31 Urée 5.29 4.47 4.25 6.51 7.14 5.59 6.22
Acide urique 89.89 62.94 95.11 80,80 93.32 86.27 78.06 Cholestérol 1.56 1.15 0.78 1.41 1.23 0.90 1.34
Triglycérides 0.30 0.64 0.32 0.31 0.45 0.53 0.45 Créatinine 72.19 70.54 82.99 66.22 92.84 63.03 80.29 Protides 66 75 76 69 71 68 76
Transa GOT 230 292 200 231 281 293 311 Transa GPT 58 64 53 67 54 110 80
Na 145 150 144 151 149 145 145 K 8.4 8.4 7.0 8,0 8.2 6.4 7.4
Nous avons remarqué une augmentation de transaminases chez les rats
traités avec le décocté notamment les rats de la dose forte.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 70
Figure N°11 : Variation des transaminases chez les rats mâles.
Figure N°12 : Variation des transaminases chez les femelles.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 71
Tableau XIX : RESULTATS DES EXAMENS HEMATOLOGIQUES AU J15
Eléments Eau distillée
Mâles Femelles
100 mg/kg
Mâles Femelles
300 mg/kg
Mâles Femelles
1500 mg/kg
Femelles
GB(102 81 61 ) 40 79 70 49 39
GR(106 8.57 7.79 ) 7.98 8.21 8.15 7.71 7.38
HGB 14.2 14.0 13.2 15.0 13.7 14.8 14.9
HCT 46.5 44.7 43.6 46.9 44.7 44.3 43.0
PLA(103 625 819 ) 192 635 104 533 361
THT 542 499 203 446 077 349 272
VGM 54 57 55 57 55 57 58
TGMH 16.5 17.9 16.5 18.3 16.9 19.2 20.1
CCMH 30.5 31.3 30.2 32.1 30.7 33.5 34.5
IDR 16.4 15.3 15.9 15.5 14.9 14.5 14.8
VMP 8.7 6.1 10.5 7.0 7.3 6.5 7.5
IDP 4.1 9.6 0.0 10.0 0.0 9.4 11.0
%LYM 72.4 87.4 93.3 82.5 87.2 93.4 88.1
%MON 19.5 10.1 5.7 13.1 8.5 5.1 8.0
%GRA 8.1 2.5 1.0 4.4 4.3 1.5 3.9
#LYM 5800 5300 3600 6500 600 4500 3400
#MON 1500 600 200 1000 00 200 300
#GRA 800 200 200 400 100 200 200
Nous avons constaté ici une élévation du taux de plaquettes et une
diminution de monocytes et granulocytes chez les trois lots traités.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 72
Tableau XX : RESULTATS DES EXAMENS HEMATOLOGIQUES AU J30
Eléments Eau
Mâles
100 mg/kg
Mâles Femelles
300 mg/kg
Mâles Femelles
1500 mg/kg
Mâles Femelles
GB (102 54 ) 52 40 123 41 41 54
GR(106 7,66 ) 8,87 8,02 7,89 7,97 8,28 7,93
HGB 15.1 15.6 15.0 15.3 15.7 14.9 15.7
HCT 43.9 48.9 47.2 42.8 47.2 45.5 46.7
PLA(103 570 ) 666 517 806 198 633 560
THT 432 508 336 628 161 431 379
VGM 56 55 59 54 59 55 59
TGMH 19.1 17.8 18.7 19.4 19.7 18.0 19.8
CCMH 34.3 32.3 31.8 35.7 33.3 32.7 33.5
IDR 17.1 16.1 14.2 16.1 13.4 16.0 14.4
VMP 7.6 7.6 6,5 7.8 8.1 6.8 6.8
IDP 9.0 6.7 10.4 8.8 5.0 8.6 10.6
%LYM 84.8 88.0 91.4 68.7 83.4 88.2 82.3
%MON 12.2 9.4 7.3 22.7 13.5 9.9 14.2
%GRA 3.0 2.6 1.3 8.6 3.1 1.9 3.5
#LYM 4500 4500 3600 8400 3300 3600 4400
#MON 600 400 200 2700 500 400 700
#GRA 300 300 200 1200 300 100 300
Nous avons observé une augmentation de plaquettes, de monocytes et
de granulocytes chez les mâles de la dose 300 mg/kg.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 73
Figure N°13 : Variation du taux de globules rouges et de globules blancs
chez les mâles.
Figure N°14 : Variation du taux de globules rouges et globules blancs
chez les femelles.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 74
Tableau XXI : LES RESULTATS DES ANALYSES HISTOPATHOLOGIQUES AU J30.
Sexes
Organes
Eau distillée
100 mg/kg
300 mg/kg
1500 mg/kg
Mâles
Foie normal hépatite
congestive
hépatite hépatite
congestive
Rein normal néphrite
congestive
néphrite néphrite
congestive
Femelles
Foie normal normal hépatite
congestive
hépatite
subaiguë
congestive
Rein normal néphrite
subaiguë
congestive
néphrite
congestive
néphrite
congestive
Nous avons observé une inflammation au niveau rénal et hépatique chez
tous nos rats ayant reçu le décocté sauf chez la femelle de la dose faible
(100 mg/kg) qui présentait un foie normal.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 75
6.7-Effet du décocté sur la diurèse de base :
Tableau XXII : QUANTITE D’URINE RECUEILLIE AVEC L’ADMINISTRATION DE L’EAU
DISTILLEE ET DU DECOCTE.
Figure N°15 : Variation du volume d’urine recueillie après
administration du décocté et de l’eau distillée.
Nous avons constaté une baisse du volume d’urine avec le décocté par
rapport à l’eau distillée.
Rats Eau distillée
Volume urine
Décocté
Volume urine
Mâle 9ml 4.7ml
Femelle 7ml 5.5ml
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 76
Tableau XXIII : LES RESULTATS DU TEST DES URINES AVEC LE CROMATEST LINEAR URS-
10.
Rats Paramètres Eau distillée
Résultats
Décocté
Résultats
Mâle
Sang + + +Ca.300
Densité 1.005
pH 7
Glucose normal
+ + +Ca.300
1.005
8
normal
Femelle
Sang + +Ca.50
Densité 1.010
pH 5
Glucose normal
+ +Ca.50
1.010
7
normal
Figure N°16 : Variation du pH des urines recueillies avec l’eau distillée
et le décocté.
Nous avons constaté que le décocté augmentait le pH des urines des rats.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 77
COMMENTAIRES ET DISCUSSIONS
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 78
Commentaires et discussions :
Dans le processus de mise au point d’un phytomédicament à base de
feuilles de Argemone mexicana, dans ce travail nous avons étudié la
toxicité sub-chronique du décocté lyophilisé de la plante.
Le contrôle de qualité de la matière première a été effectué par des essais
botaniques et physico-chimiques :
La microscopie nous a permis d’identifier des éléments caractéristiques
de la poudre des feuilles utilisables pour le contrôle de qualité du
phytomédicament. Ces éléments sont : groupe de fibres avec des cristaux
d’oxalate de calcium, des vaisseaux spiralés, des cellules laticifères et des
fragments d’épidermes avec stomates.
Pour les essais physico chimiques, la teneur en eau a été inférieure à 7%
ce qui montre le bon état de conservation de l’échantillon utilisé.
Les constituants chimiques du décocté, caractérisés par les réactions
colorées et par la CCM sont : les tanins, les oses et holosides, les
coumarines, les flavonoïdes. Alors qu’avec le décocté du thérapeute en
plus de ces groupes chimiques, Sidibé en 2006, avait caractérisé les
alcaloïdes, les hétérosides cardiotoniques (Baljet) et les mucilages. Cette
différence peut être due au temps de décoction du thérapeute pendant
d’au moins 3 heures contre les 30 minutes pour notre expérimentation.
La CCM nous a permis de confirmer la présence des groupes chimiques
rencontrés dans le décocté et de mettre en évidence la présence des
antioxydants dans le décocté. L’activité antioxydante des décoctés serait
un apport important pour la réussite du traitement antiplasmodial, car
les neutrophiles activés par les parasites déclenchent une destruction des
cellules endothéliales qui peut être prévenue par les antioxydants et les
inhibiteurs d’enzymes protéolytiques in vitro (Sidibé, 2006).
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 79
Avant de procéder à l’étude de la toxicité proprement dite, les animaux
ont été mis en observation pendant un mois, ce qui a permis de suivre
l’évolution de leur poids corporel, et également leur consommation
d’eau et de nourriture. C’est ainsi qu’il a été enregistré en général une
augmentation de poids chez des rats mâles et femelles.
Lors de l’étude de la toxicité sub-chronique avec l’administration
quotidienne du décocté aux différentes doses, nous avons constaté en
général une baisse de poids chez les rats mâles et femelles au bout des
quatre semaines. Nous avons cependant noté une augmentation de leurs
consommations de nourritures et d’eau par semaine.
La mort de trois rats qui recevaient la dose la plus élevée (1500 mg/kg)
pour raison d’indigestion nous a permis de revoir le protocole par
rapport à la durée du temps de 3 heures à 12 heures de jeun avant
l’administration. C’est ainsi que nous avons compris que la mort de ces
rats n’était pas causée par le décocté car nous n’avons pas enregistré de
perte d’animaux. L’augmentation de la consommation de nourritures et
d’eau chez tous les rats restés en expérimentation a été une ultérieure
confirmation.
Les résultats des analyses biochimiques réalisées au quinzième jour ont
montré une augmentation nette du taux d’acide urique chez les rats
femelles traités avec la dose de 100 mg /kg. L’acide urique est une
substance qui est normalement éliminée dans les urines, une
augmentation montre une insuffisance au niveau rénal. Il a été
également remarqué une élévation du taux de transaminases chez tous
les rats aux 15 ème et 30 ème jours. Les transaminases sont des enzymes
ayant une activité métabolique importante à l’intérieur des cellules. Leur
augmentation reflète une lésion cellulaire ; en particulier au niveau
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 80
hépatique, cardiaque, rénal ou musculaire. Ces élévations de
transaminases et d’acide urique sont confirmées par les résultats des
analyses histopatologiques qui ont montré chez les mâles (100 et 1500
mg/kg) une hépatite congestive (inflammation des cellules hépatiques
avec présence de sang) et une néphrite congestive (inflammation des
cellules rénales avec présence de sang). Pour la dose thérapeutique (300
mg/kg) nous avons seulement constaté une hépatite et une néphrite. A
part une seule femelle du lot 2 (100 mg/kg), qui avait le foie normal,
toutes les autres femelles présentaient une hépatite congestive ou sub-
aiguë et une néphrite congestive.
L’équipe du Pr Guissou de l’Université de Ouagadougou a montré que
ces hépatites et néphrites sont réversibles à l’arrêt du traitement (DMT,
2007). Et lors de l’étude de Sidibé en 2006 ils n’ont pas constaté une
augmentation significative de transaminases chez les patients traités
avec le décocté.
Les résultats des analyses hématologiques ont montré une baisse du taux
de plaquettes, de plaquetocrites chez les rats traités avec le décocté de
Argemone mexicana au bout de 15 jours ; une baisse du pourcentage de
monocytes, de granulocytes et une légère augmentation du pourcentage
de lymphocytes chez les rats traités qui ont reçu les doses de 100 et 300
mg/kg.
Au trentième jour, nous avons constaté une augmentation du nombre de
globules rouges et de plaquettes chez les 3 lots de rats; légère baisse de
lymphocytes et légère augmentation de monocytes, de granulocytes chez
le mâle traité avec 300 mg/kg. Cette augmentation du taux de
monocytes indique une lésion hépatique, la baisse du taux de plaquettes
montre une augmentation du temps de saignement.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 81
Les autres paramètres biochimiques et hématologiques n’ont pas montré
de différence significative entre le lot témoin et les lots traités avec le
décocté.
L’effet du décocté sur la diurèse normale de rat a démontré une
diminution du volume d’urine et une augmentation du pH de l’urine par
rapport à l’eau distillée. Selon la littérature existante la plante entière est
réputée diurétique. (Kerharo et Adams, 1974). Des études
supplémentaires sont nécessaires pour confirmer l’effet diurétique ou
anti-diurétique du décocté de Argemone mexicana.
Il est à signaler que les femelles ont mieux supporté le décocté que les
mâles, car il y a eu 2 rats mâles morts contre une femelle et une femelle
du lot 2 (100 mg/kg) qui avait son foie normal après les analyses
histopathologiques à la fin de l’expérimentation.
Notre présente étude fait suite à celle réalisée par le DMT sur la prise en
charge du paludisme par les thérapeutes traditionnels dans les aires de
santé de Kendié (Badiangara) et de Finkolo (Sikasso). Ce travail a permis
d’identifier un certain nombre de plantes utilisées dans le traitement
traditionnel du paludisme dont A. mexicana (Sangaré, 2003). A. mexicana
a été la plante la plus active in vitro avec une concentration inhibitrice à
50% (IC50) de 1 µg/ml pour l’extrait méthanolique contre 0,05 µg/ml
pour la chloroquine (Sangaré, 2003). Une autre étude réalisée en 2006 sur
A. mexicana dans le traitement traditionnel du paludisme non compliqué
dans le village de Missidougou (Région de Sikasso) a permis de montrer
l’efficacité du décocté avec une réduction de la parasitemie supérieure au
Malarial entre J0 et J7 (98,83%pour le décocté et 69,39% pour le Malarial)
(Sidibé, 2006). Dans la même étude, la négativation de la parasitemie a
été obtenue chez 7 patients après 14 jours de traitement. Ces études ont
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 82
démontré une réelle activité du décocté de A.mexicana sur les parasites
du paludisme. L’étude de la toxicité aiguë a montré l’innocuité du
décocté de la partie aérienne sans graines de A. mexicana avec une DL50
supérieure 3000 mg/kg de décocté, correspondant 7730 mg de poudre
(Sidibé, 2006). Ces études sur des parties aériennes sans graine ont
montré l’absence de toxicité. Il faut cependant mentionner qu’il existe
une littérature abondante sur la toxicité des graines de Argemone
mexicana qui a eu à occasionner plusieurs épidémies d’hydropisies avec
de nombreux cas de décès en Asie et Amérique du Nord (Kerharo et
Adams, 197). Dans ces zones très peu d’auteurs ont rapporté l’activité
antipaludique (Sidibé, 2006).
Plus récemment, un essai clinique a permis de comparer l’activité
antipaludique du décocté de Argemone mexicana à celle des
combinaisons thérapeutiques à base d’Artémisinine dans la prise en
charge du paludisme simple à Missidougou, dont l’évolution vers un
paludisme grave dans les 2 groupes d’étude était inférieure à 5%.
Nos résultats et ceux de ces travaux vont permettre de compléter le
dossier d’autorisation de mise sur le marché (AMM) du
phytomédicament à base des feuilles de Argemone mexicana dans la prise
en charge du paludisme simple au Mali.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 83
CONCLUSION ET
RECOMMANDATIONS
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 84
Conclusion Face aux problèmes économiques que le paludisme pose aux pays en
voie de développement et notamment les pays Africains,
Face aux problèmes de pharmacorésistance rencontrés dans le traitement
de cette maladie,
Face à l’absence de vaccin à l’heure actuelle,
Le développement de la recherche sur les plantes antipaludiques reste
un espoir pour diminuer le coût du traitement et aussi permettre la
découverte d’autres molécules provenant des plantes.
Au cours de cette présente étude nous avons apporté notre modeste
contribution pour une meilleure connaisance de la toxicité sub-chronique
de Argemone mexicana utilisée pour le traitement du paludisme simple.
C’est ainsi que nous avons identifié des éléments caractéristiques de la
poudre des feuilles utilisables pour le contrôle de qualité du
phytomédicament.
Les principaux constituants chimiques du décocté ont été les tanins, les
oses et holosides, les coumarines et les flavonoïdes.
La dose thérapeutique du décocté de Argemone mexicana, administrée
par voie orale par jour pendant un mois ne provoque pas de mort, ni
d’anémie chez les rats. Nous avons cependant constaté une légère
augmentation des transaminases confirmée par les résultats des analyses
histopathologiques.
Dans la perspective de faciliter la prise en charge du paludisme chez les
enfants, nous avons initié des essais de formulation de sirops à base du
décocté de Argemone mexicana qui feront l’objet de travaux ultérieurs.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 85
Recommandations . Aux décideurs du DMT : La poursuite des investigations sur
A.mexicana et les sirops formulés pour mettre à la disposition de la
population un médicament traditionnel amélioré.
. Aux autorités politiques : D’investir encore plus dans la recherche
en générale et sur les plantes médicinales en particulier qui regorgent
beaucoup de potentialités.
. Aux thérapeutes et toutes autres personnes qui utiliseraient cette
plante: D’utiliser les parties aériennes sans les graines, bien séchées et
bien conservées.
Après un traitement de procéder à un contrôle de la fonction rénal et
hépatique.
Il est préférable de ne pas utiliser les extraits de cette plante pendant
longtemps.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 86
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 87
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Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
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Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 89
Annexe
Composition des réactifs:
Réactif de Mayer
Iodure de potassium……………………….25 g
Chlorure mercurique………………………6.77 g
Eau distillée qsp…………………………...500 ml
Réactif de Dragendorff
Nitrate de bismuth pulvérisé………………20,80 g
Iode………………………………………..38,10 g
Iodure de sodium anhydre………………...200 g
Eau distillée qsp…………………………...1000 ml
Agiter pendant 30 mn.
Réactif de Keede
Acide dinitro 3-5 benzoïque……………….1 g
Ethanol á 95˚ qsp………………………….100 ml
Réactif de Raymond Marthoud
1-3 dinitro benzène………………………...1 g
Ethanol á 96˚ qsp…………………………..100 ml
Réactif de Baljet
Acide picrique……………………………..1 g
Ethanol á 50˚ qsp…………………………..100 ml
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 90
Réactif de Fehling
Solution A : CuSO4……………………….35 g
Eau distillée………………….500 ml
H2SO4……………………….5 ml
Laisser refroidir et compléter á un litre avec de l’eau distillée.
Solution B : Sel de Seignette………………150 g
Eau distillée……………………500 ml
Refroidir et ajouter 300 ml de lessive non carbonaté et compléter á un
litre avec l’eau distillée.
Réactif de Godin
Solution A : Vanilline……………………….1 g
Ethanol á 95%..........................1000 ml
Solution B : Acide perchlorique……………..3 ml
Eau distillée…………………….100 ml
Mélanger les 2 solutions au moment de l’emploi ensuite pulvériser les
plaques avec une solution se H2SO4 á 10%.
Réactif de DPPH
1-1 diphényle 2 picril hydrazyle 2 mg par ml de méthanol
Formule nutritionnelle des rats
Farine de maïs…………………………………50 kg
Pâte d’arachide………………………………...20 kg
Son de mil ou haricot niébé……………………17,5 kg
Lait en poudre………………………………….7 kg
Farine de poisson………………………………3 kg
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 91
Feuille de salade………………………………..2 kg
Sel (sel gemme)………………………………...0,5 kg
Eau qsp (100kg)…………………………………38 l.
La formule est calculée á 100 kg d’aliments.
Appareil et méthode utilisés pour les examens biochimiques :
Cobas Integra 400 Plus
Spectrophotomètre (visuel)
Photométrie de flamme
Glycémie………….mmol/l
Urée……………….mmol/l
Acide urique………µmol/l
Cholestérol total…..mmol/l
Triglycérides……….mmol/l
Créatinine………….mmol/l
Protides totaux…….g/l
Transa SGPT………URF/ml
Transa SGPT………URF/ml
Na………………….mmol/l
K…………………..mmol/l
Appareil de numération : Cell-Dyn 3200
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 92
Fiche Signalétique NOM : GUIROU
PRENOM : CALEB
TITRE DE LA THESE : ETUDE DE LA TOXICITE SUB-CHRONIQUE DE ARGEMONE MEXICANA
UTILISEE DANS LE TRAITEMENT TRADITIONNEL DU PALUDISME.
VILLE DE SOUTENANCE : BAMAKO
LIEU DE DEPOT : Bibliothèque de la Faculté de Médecine de Pharmacie et d’Odonto Stomatologie.
SECTEUR D’INTERET : Médecine Traditionnelle
Résumé de la thèse : Notre travail a porté sur l’étude de la toxicité sub-chronique de Argemone mexicana
utilisé dans le traitement traditionnel du paludisme.
Dans le processus de mise au point d’un phytomédicament à base de feuilles de
Argemone mexicana, dans ce travail nous avons étudié la toxicité sub-chronique du
décocté lyophilisé de la plante.
La microscopie nous a permis d’identifier des éléments caractéristiques de la poudre
des feuilles utilisables pour le contrôle de qualité du phytomédicament. Ces éléments
sont : groupe de fibres avec des cristaux d’oxalates de calcium, des vaisseaux
spiralés, des cellules laticifères et des fragments d’épidermes avec stomates. Les
principaux constituants chimiques du décocté ont été les tanins, les oses et holosides,
les coumarines et les flavonoïdes.
Pour l’étude de la toxicité sub-chronique nous avons utilisé 3 doses : 100 mg/kg, 300
mg/kg (dose du thérapeute), 1500 mg/kg, administrées par jour pendant un mois.
La dose thérapeutique du décocté de Argemone mexicana, administrée par voie orale
par jour pendant un mois n’a pas provoqué de mort, ni d’anémie chez les rats. Nous
avons cependant constaté une légère augmentation des transaminases confirmée par
les résultats des analyses histopathologiques.
Nos résultats et ceux des travaux antérieurs vont permettre de compléter le dossier
d’autorisation de mise sur le marché (AMM) du phytomédicament à base des feuilles
de Argemone mexicana dans la prise en charge du paludisme simple au Mali.
Mots clés : Argemone mexicana, Paludisme, Traitement, Toxicité sub-chronique,
Contrôle de qualité, Phytomédicament.
Etude de la toxicité sub-chronique d’Argemone mexicana
Thèse de Pharmacie Caleb Guirou 93
Je jure, en présence des maîtres de la faculté, des conseillers
de l’ordre des pharmaciens et de mes condisciples :
D’honorer ceux qui m’ont instruit dans les préceptes de
mon art et de leur témoigner ma reconnaissance en
restant fidèle à leur enseignement ;
D’exercer dans l’intérêt de la santé publique, ma
profession avec conscience et de respecter non
seulement la législation en vigueur, mais aussi les règles
de l’honneur, de la probité et du désintéressement.
De ne jamais oublier ma responsabilité et mes devoirs
envers le malade et de sa dignité humaine.
En aucun cas, je ne consentirai à utiliser mes
connaissances et mon état pour corrompre les mœurs et
favoriser les actes criminels.
Que les hommes m’accordent leur estime si je suis fidèle
à mes promesses.
Que je sois couvert d’opprobres et méprisé de mes
confrères si j’y manque.
Je le jure !
SERMENT DE GALIEN