urinálise
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Aula prática lecionada no Laboratório de Graduação em Bioquímica (LGBioq) da Universidade Federal do Maranhão (UFMA).TRANSCRIPT
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MONITORIABIOQUIMICA
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UrináliseUniversidade Federal do Maranhão
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Introdução
Os caractereses gerais da urina são:
Volume enviado, volume de 24 horas ou volume de 12 horas, densidade específica, reação, cor, depósito e cheiro.
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Volume Enviado
Não há necessidade de a urina ser colhida em frasco estéril.
O volume enviado deve ser de toda a primeira micção da manhã.
O volume é dependente da dieta do paciente.
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Volume de 24 HorasColhida de forma que na manhã do dia anterior ao envio de urina ao laboratório, despreza-se a urina de primeira micção, colhendo-se toda a urina das micções posteriores durante o dia e as noturnas de antes de o paciente deitar-se.
No dia de envio ao laboratório, a urina da primeira micção deve ser colhida em frasco separado.
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Volume de 24 Horas
Na urina de 24 horas determinam-se:
O volume, a densidade e as pesquisas.
Na urina de primeira micção determina-se:
Sedimentoscopia.
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Volume de 12 Horas
Colhida de forma que se despreza a urina das 7PM do dia anterior ao envio de urina ao laboratório, recolhendo-se todas as demais amostras até a hora de o paciente deitar-se.
No dia de envio ao laboratório, a urina da primeira micção deve ser colhida em frasco separado por volta das 7AM.
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Volume de 12 Horas
Na urina de 12 horas determinam-se provas de depuração (clearance) para:
Ureia e creatinina.
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Volume EsperadoApesar de o volume ser dependente da dieta do paciente, espera-se os seguintes valores para urina de 24 horas:
Adulto normal 1200-1800mL
Crianças de 6-12 anos de idade600-900mL
(metade do valor de referência para adulto normal)
Crianças de 1-4 anos de idade300-450mL
(¼ do valor de referência para adutlo normal)
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Volumes AnormaisA poliúria (aumento de volume urinário), oligúria (diminuição de volume urinário) e anúria (dimuição drástica ou depleção de volume urinário) estão associadas a:
Poliúria(>2500mL por dia)
Diabetes mellitus, diabetes insipidus, uremia, nefrite crônica etc.
Oligúria(<400mL por dia)
Nefrite aguda, atrofia tubular renal, diarreia, vômitos, doenças cardiorrespiratórias etc.
Anúria(<45mL por dia)
Nefroses, obstruções mecânicas do trato urinário etc.
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Densidade EspecíficaA densidade específica ou gravidade espcífica é medida com auxílio do urodensímetro, a densidade normal da urina humana fica entre 1010 e 1030.
Um urodensímetro está calibrado para uma determinada temperatura; em caso de não correspondência, adicionar/subtrair uma unidade ao valor de densidade obtido para cada intervalo de 3ºC acima/abaixo da temperatura para que o urodensímetro está calibrado.
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Densidade Específica
Exemplo deurodensímetro
de vidro
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Densidade EspecíficaValores anormais de densidade estão associados ao aumento da osmolaridade para valores acima do normal, e diminuição da osmolaridade para valores abaixo do normal:
Densidade aumentada(>1010-1030)
Diabetes mellitus, casos de desidratação, oligúria etc.
Densidade diminuída(<1010-1030)
Diabetes insipidus e ingestão de grandes quantidades de líquidos
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ReaçãoA reação normal da urina é ácida.
A medida deve ser feita poucas horas após a micção para evitar a alcalinização pela ação bacteriana por decomposição da ureia e produção de amônia.
Averiguar se a dieta do paciente é normal, pois algumas dietas desencadeiam uma maré alcalina.
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ReaçãoA reação pode ser medida papel azul de tornassol ou por tiras reativas.
Paple detornassol
azul
Paple detornassolvermelho
Tirasreativas
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CorA cor normal da urina é amarelo, seja amarelo claro ou amarelo escuro.
Apesar de a cor, tal qual o volume, ser dependente da dieta do paciente, as seguintes cores são indicadores patológicos:
Âmbar Icterícias parenquimatosas
Avermelhado Hematúrias
Esverdeado Uso de determinados medicamentos
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DepósitosEm geral os depósitos estão ausentes na urina recente.
As causas mais recorrentes são:
Resfriamento de urina e precipitação de urato, de forma que o aquecimento da urina dissolve os precipitados de urato.
A presença dos fosfastos em urinas alcalinas.
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CheiroA urina apresenta odor sui generis, isto é, a urina apresenta odor característico.
Tal qual cor e volume, o odor da urina pode sofrer grandes variações pelo pela dieta e pelo uso de medicamentos.
O odor pútrido indica decomposição da urina.
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Tira ReagenteO uso de tiras reagentes é capaz da determinação de concentrações de:
Bilirrubina, cetonas, densidade específica, glicose, leucócitos, nitrito, proteínas diversas, hemoglobina e urobilinogênio.
As tiras reagentes também são capazes da determinação do pH.
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Tira ReagenteCada tira reagente é composta de:
Um suporte plástico para apoio e identificação; e de
Áreas impregnadas com reagentes químicos.
Após a urina ser devidamente coletada, trnasferir alíquota suficiente para submersão de tira reagente em proveta graduada, permanecendo por 120s.
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Tira ReagenteUma vez transcorridos os 120s, comparar com a escala padrão presente no rótulo do embalagem contenedora da tira reagente.
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Tira ReagenteDensidade
específica (60s)
pH (60s)
Leucócitos (60-120s)
Hemoglobina (60s)
Nitrito (60s)
Cetonas (60s)
Bilirrubina (60s)
Urobilinogênio (60s)Proteínas
diversas (60s)Glicose (60s)
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Expressão de ResultadosPara expressar os resultados obtidos pelas áreas impregnadas usa-se:
Negativo, traços e positivo;
O positivo tem maior ou menor concentração indicada por +, + +, + + + e + + + +.
Atentar-se a observações escritas na bula de cada produto e de responsabilidade de seus fabricantes.
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Para Combur10 Test® UX, da Roche, tem-se:
Expressão de Resultados
Bilirrubina
Negativo
BilirrubinaPositivo (+)
BilirrubinaPositivo (+ +)
Bilirrubina
Positivo (+ + +)
Cetona
Negativo
CetonaPositivo (+)
CetonaPositivo (+ +)
Cetona
Positivo (+ + +)
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Para Combur10 Test® UX, da Roche, tem-se:
Expressão de Resultados
Densidade 1-1,03
Glicose
Negativo
Glicose
Positivo (+) - 50mg/dL
Glicose Positivo (+ +) - 100mg/dLGlicose
Positivo (+ + +) - 300mg/dL
Glicose
Positivo (+ + + +) - 1.000mg/dL
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Para Combur10 Test® UX, da Roche, tem-se:
Expressão de Resultados
Hemoglobina
Negativo
HemoglobinaPositivo (+) - 5-10 eritrócitos/µL
Hemoglobina Positivo (+ +) - 25 eritrócitos/µLHemoglobinaPositivo (+ + +) - 50 eritrócitos/µL
Hemoglobina
Positivo (+ + + +) - 250 eritrócitos/µL
Leucócitos
Negativo
LeucócitosPositivo (+) - 10-25 leucócitos/µL
LeucócitosPositivo (+ +) - 75 leucócitos/µL
Leucócitos
Positivo (+ + +) - 500 leucócitos/µLNitrito Negativo/positivo
![Page 27: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/27.jpg)
Para Combur10 Test® UX, da Roche, tem-se:
Expressão de Resultados
pH 5-9
Proteínasgerais
NegativoProteínas
geraisPositivo (+) - 30mg/dLProteínas
gerais Positivo (+ +) - 100mg/dLProteínas
gerais
Positivo (+ + +) - 500mg/dL
Urobilinogênio
Normal
UrobilinogênioPositivo (+) - 1mg/dL
Urobilinogênio Positivo (+ +) - 4mg/dLUrobilinogênioPositivo (+ + +) - 8mg/dL
Urobilinogênio
Positivo (+ + + +) - 12mg/dL
![Page 28: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/28.jpg)
Exame Microscópio da Urina
Caso as tiras reagentes apontem positividade para hemoglobina e leucócitos é necessária a submissão de parte da amostra da urina a um exame microscópico para melhor análise.
Deve-se idenficar e quantificar os elementos insolúveis na urina.
![Page 29: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/29.jpg)
Reação de BenedictA reação com reagente de Benedict serve para a identificação de açúcares redutores, dos quais a glicose é mais comum na urina, na forma de glicosúria.
Reagente de Benedict: 17,3g de citrato de sódio + 10g de carbonato de cálcio dissolvidos em 60mL de água quente, adicionados de 1,73g de sulfato de cobre dissolvido em 10mL de H2O
❖ Fundamento teórico: os carboidratos que possuem carbono anômero livre são capazes de reduzir íons de Cu2+, Ag e Bi2+. A redução de Cu2+ é obtida em meio alcalino, a quente.
![Page 30: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/30.jpg)
Reação de Benedict
2mL de ácidonítrico
3mL de urinafiltrada
Banho termostáticopor cerca de 5min
![Page 31: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/31.jpg)
Reação de Benedict
No reagente de Benedict encontra-se em equilíbrio o sal complexo de cuprocitrato de sódio com hidróxido cúprico, de forma que a adição de açúcares redutores e as ações de álcali e calor levam à formação de fragmentos parcialmente oxidáveis. Em uma primeira fase, há a redução de hidróxido cúprico (azul) a hidróxido cuproso (amarelo). Em uma segunda fase, continuada pela ação do calor, o hidróxido cuproso desidrata e forma óxido cuproso (vermelho).
Não há mudança de cor (permanece azul) Negativo
Verde-azulado ou verde Traços
Verde (qualquer tom) com precipitado amarelo +
Castanho ou marrom + +
Vermelho-tijolo + + +
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Reação de Heller
A reação de Heller serve para a identificação de proteínas na urina ou proteinúria - a mais comum proteína passível de estar na urina é a ovalbumina.
Ácido nítrico
❖ Fundamento teórico: o ácido nítrico é um bom fornecedor de ânions, de forma que suas interações com proteínas na urina provocam a formação de um sal onde essas proteínas da urina atuam como cátions.
![Page 33: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/33.jpg)
Reação de Heller
❖ O ácido nítrico deve ser lentamente colocado no fundo do tubo de ensaio, de forma que a urina filtrada e o ácido nítrico não se misturem.
2mL de ácidonítrico
3mL de urinafiltrada
![Page 34: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/34.jpg)
Reação de Heller
A formação nativa de uma proteínas é estável apenas numa faixa estreita de valores de pH, uma vez que em determinados valores de pH onde há excesso de cargas positivas, as repulsões coulombianas correspondentes concorrem para desestabilizar a estrutura compacta da proteína. Assim, na reação de Heller, a partir de tratamento com ácido nítrico, induz-se alteração na carga líquida de proteínas e consequente precipitação, onde o ácido nítrico atua como fornecedor de ânions e as proteínas atuam como fornecedor de cátion.
Não há formação de anel branco entre a urina filtrada e o ácido nítrico
Negativo
Há a formação de anel branco entre a urina filtrada e o ácido nítrico
Positivo
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A reação de ácido sulfossalicílico serve para a identificação de proteínas na urina ou proteinúria - a mais comum proteína passível de estar na urina é a ovalbumina.
❖ Fundamento teórico: o ácido sulfossalicílico é um bom fornecedor de ânions, de forma que suas interações com proteínas na urina provocam a formação de um sal onde essas proteínas da urina atuam como cátions.
Reação do Ácido Sulfossalicílico
![Page 36: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/36.jpg)
Reação do Ácido Sulfossalicílico
5 gotas de solução de ácido
sulfossalicílico
5mL de urinafiltrada
![Page 37: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/37.jpg)
Reação do Ácido Sulfossalicílico
Não há turvação ou precipitação Negativo
Há turvação ou precipitação Positivo
A formação nativa de uma proteínas é estável apenas numa faixa estreita de valores de pH, uma vez que em determinados valores de pH onde há excesso de cargas positivas, as repulsões coulombianas correspondentes concorrem para desestabilizar a estrutura compacta da proteína. Assim, na reação do ácido sulfossalicílico, a partir de tratamento com ácido sulfossalicílico, induz-se alteração na carga líquida de proteínas e consequente precipitação, onde o ácido sufossalicílico atua como fornecedor de ânions e as proteínas atuam como fornecedor de cátion.
![Page 38: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/38.jpg)
Os corpos cetônicos mais comuns são:
Ácido acetoacético;
Acetona (dimetilcetona); e
Ácido β-hidroxibutírico.
Corpos Cetônicos
Descarboxilação
Redução
![Page 39: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/39.jpg)
Corpos CetônicosA determinação de corpos cetônicos na urina ou cetonúria pode ser feita de várias formas:
Pelo reagente de Rothera;
Pelo teste de Lange; e
Pelo reagente de Imbert, cujo protocolo é aqui exemplificado.
![Page 40: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/40.jpg)
A reação com reagente de Imbert serve para a identificação corpos cetônicos na urina ou cetonúra - o mais comum corpo cetônico passível de estar na urina é a acetona (dimetilcetona).
Nitroprussiato de sódio
Ácido acético glacial
❖ Fundamento teórico: nitroprussiato de sódio fornecido pelo reagente de Imbert reage com a acetona, formando composto colorido.
Reação com Reagentede Imbert
![Page 41: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/41.jpg)
Reação com Reagentede Imbert
5mL de urinafiltrada
1mL de reagentede Imbert
Agitar
2mL de hidróxidode amônio
❖ Ao colocar o hidróxido de amônio, cuidar para que ele escorra lentamente pela parede do tubo.
![Page 42: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/42.jpg)
Em meio alcalino e com ácido acético glacial, o nitroprussiato de sódio fornecido pelo reagente de Imbert reage com a acetona, formando composto colorido.
Não há formação de anel roxo entre a urina filtrada e o ácido nítrico
Negativo
Há a formação de anel roxo entre a urina filtrada e o ácido nítrico
Positivo
Reação com Reagentede Imbert
![Page 43: Urinálise](https://reader034.vdocuments.pub/reader034/viewer/2022042700/557d80efd8b42a58788b4d18/html5/thumbnails/43.jpg)
ReferênciasHIRANO, ZMB et al. Bioquímica - Manual Prático. 1 ed. Blumenau: Edifurb, 2008.
DOS SANTOS, APSA et al. Bioquímica Prática. Disponível em: <http://www.repositorio.ufma.br:8080/jspui/handle/1/445>. Acesso em: 3 set 2013.