várkuti boglárka: az erőkifejtés kulcsa: a miozin aktivációs húrok - budapest science meetup...
TRANSCRIPT
AZ ERŐKIFEJTÉS KULCSA: A MIOZIN AKTIVÁCIÓS HUROK
Boglárka Várkuti
Eötvös Loránd TudományegyetemBiológiai Intézet, Biokémiai TanszékMolekuláris Biológiai és Bioinformatikai KutatócsoportVezető: Dr. Málnási-Csizmadia András
téma: enzimek szerkezetvizsgálata
A novel actin binding site of myosin required for effective muscle contraction.Várkuti BH, Yang Z, Kintses B, Erdélyi P, Bárdos-Nagy I, Kovács AL, Hári P, Kellermayer M, Vellai T, Málnási-Csizmadia ANat Struct Mol Biol. 2012 Feb 12;19(3):299-306. doi: 10.1038/nsmb.2216.
BEVEZETÉS I: A MIOZIN
összes sejtünkben jelen van állatok, növények, gombák
sokféle funkció
izomösszehúzódás, sejtosztódás, sejtrészecskék szállítása …
azonos mechanizmus aktin (vele/nélküle)
BEVEZETÉS II: AZ AKTIN ÉS A MIOZIN
miozin
aktin
aktin aktiváció több nagyságrenddel gyorsabb működés hatékonyabb motor
aktivációs hurok
EREDMÉNYEK I: IN VITRO
kísérletes eredmények: miozin aktivációs hurka köti az aktint
aktivációs hurok mutációja enzim ugyanúgy működőképes nincs aktin aktiváció!! specifikus
fluoriméter„stopped-flow” / megállított áramlású tranziens kinetikai műszer
A MUTÁCIÓK LÉTREHOZÁSA
mutációk
aktivációs hurok mutációk aktin aktiváció hiány nem hatékony enzimműködés
EREDMÉNYEK II: IN VIVO - GYORSASÁG
génpuska
vad típus
transzgénikusvad
transzgénikustestfalmiozin mutáns
testfalmiozin hiányos
gyors ~ 180-200 µm/s
elég gyors ~ 150-180 µm/s
lassú~ 50-80 µm/s
nagyon lassú~ 20-40 µm/s
aktivációs hurok mutációk lassú kukacok
EREDMÉNYEK II: IN VIVO - ERŐ
vad típus
transzgénikusvad
transzgénikustestfalmiozin mutáns
testfalmiozin hiányos
erős ~ 20 µN
erős ~ 20 µm
gyenge ~ 1-2 µN
gyenge ~ 1-2 µN
atomerőmikroszkóp
aktivációs hurok mutációk gyenge kukacok
mizozin aktivációs hurok specifikusan felelős aktin aktivációért motor hatékonyságáért defektes aktivációs hurok lassúság, gyengeség
sejt hatékony működéséhez elengedhetetlen miozin defektusokhoz komoly betegségek köthetőek (?)
KONKLÚZIÓ