vežba br. 6kfiziolbiohem.vet.bg.ac.rs/wp-content/uploads/2019/03/...probe za dokazivanje 4-5 ml...
TRANSCRIPT
UNIVERZITET U BEOGRADU FAKULTET VETERINARSKE MEDICINE
KATEDRA ZA FIZIOLOGIJU I BIOHEMIJU
Vežba br. 6
Kvalitativno i kvantitativno određivanje hlorida mokraće (po Moohr-u) Dokazivanje slobodnih i vezanih sulfata mokraće
IV vežba- ključna pitanja i zadaci Neorganski sastojci mokrace?
Hloridi mokraće (koncentracija, regulacija, probe za dokazivanje)?
Sulfati mokraće (vezani-slobodni, kako i gde nastaju, probe za dokazivanje )?
VI vežba- ključna pitanja i zadaci
Zadaci: 1. Izvesti probe za dokazivanje hlorida u mokraći, kvalitativno sa AgNO3
i kvantitativno dokazivanje (titracija po Moohr-u) . Napisati prinip reakcije i vrednost za titraciju po Moohr-u
2. Izvesti probe za dokazivanje sulfata u mokraći (proba sa BaOH i indikan reakcija)
Neorganski sastojci u mokraći
Voda 95-97%
Natrijum, kalcijum, kalijum, amonijum, hloridi, fosfati, sulfati, bikarbonati
Hloridi
Najvećim delom kao soli Na i K
Koncentracija NaCl u mokraći je 10 g/l - sve domaće životinje
Količina Cl jona zavisi od funkcionalnog stanja kore nadbubrežne žlezde
Aldosteron Dezoksikortikosteron
Hloridi
Кonc. Cl je smanjena kod:
Hloridi
Probe za dokazivanje- kvalitativno
3-4 ml mokraće
Nekoliko kapi AgNO3
Pojava belog taloga
Princip
AgNO3+NaCl = AgCl + NaNO3
beli talog
Hloridi Probe za dokazivanje- kvantitativno
10 ml mokraće
1 ml kalijum-hromata (ima ulogu indikatora)
Titracija po Moohr-u
0,17 M AgNO3
Titrovati do pojave crvene boje od Ag2CrO4
Karl Friedrich Mohr 1806-1879
Hloridi Probe za dokazivanje- kvantitativno
Titracija po Moohr-u-princip
Bela boja
Crvena boja
Hloridi Probe za dokazivanje- kvantitativno
Titracija po Moohr-u- računica
1 ml AgNO3 odgovara 0,01 g NaCl
Broj utrošenih ml AgNO3 × 0,01= g NaCl/10 ml mokraće
g NaCl/10 ml mokraće × 100= g NaCl/I mokraće
Hloridi Probe za dokazivanje- kvantitativno
Titracija po Moohr-u- korekcija
Ag pored Cl jona vezuje i ksantin i mokraćnu kiselinu
Dobijeni rezultat se množi sa 0,607-korekcioni faktor
Ag
Sulfati
1. Slobodni ili neorganski sulfati jedinjenja sa Na, K, Ca, Mg, NH3
2. Vezani- estarski vezana sumporna kiselina za aromatične alkohole (fenol, krezol, indol,skatol)
80-90 %
Fenol-sumporna, krezol-sumporna, indoksil-sumporna, skatoksil sumporna kiselina
Sulfati
SO4
K+
Sulfati
Kod opstipacije i truležnih procesa u crevima je povećana koncentracija vezanih sulfata u mokraći
Sulfati Probe za dokazivanje
4-5 ml mokraće
3 ml zasićenog BaCl2-taloži fosfate
3-4 ml Ba(OH)2- beli talog od fosfata i slobodnih sulfata
1.
Dodati filtratu istu zapreminu HCl
2.
Ukoliko se odmah pojavi talog vezanih sulfata ima u većoj konc. od fiziološke
Taloženje sa Ba(OH)2
Ukoliko se pojavi talog nakon kuvanja vezanih sulfati u fiziološkoj konc.
3.
Sulfati Probe za dokazivanje
4-5 ml mokraće
2 × više HCL
1.
Dodati 1-2 kapi razblaženog FeCl3
Indikan reakcija
Dodati 2 ml hloroforma
1.
2.
Sadržaj ponovo izmešati
Fiziološki blago pozitivna, kod patoloških promena izrazito pozitivna
+ Pojava indigo plave boje
Sulfati Probe za dokazivanje
Indikan reakcija
Sulfati Probe za dokazivanje
Indikan reakcija-princip
HCl odvaja indoksil iz K soli indoksil sumporne kiseline HCl
FeCl3
FeCl3 oksiduje indoksil u indigo plavo
Indigo plavo rastvoreno u hloroformu
Hvala na pažnji Hvala na pažnji