Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud

DRA: lvarez Cisneros Yenisey Merit

UEA: Biologa Molecular

Tema: Vectores De Clonacin

Integrantes: Daz Gonzlez Snchez Yanelli Monserrat Hernndez Ramrez Hctor Cirilo Loyo Martnez Alondra Fernanda Sols Arzate Alejandro.

Antecedentes Trabajos en : Gentica, Biologa celular, se materializaron en los laboratorios de: Idearon tcnicas para la localizacin, el aislamiento, la preparacin y el estudio de pequeos segmentos de ADN procedentes de cromosomas. Se discuti el uso de plsmidos como vectores de clonacin de segmentos de ADN individuales.Herbert BoyerPaul BergStanley N. Cohen

Vectores de Clonacin. Clonacin. TcnicasHan hecho posible la genmica y la proteomica: Es decir estudio de genes y protenas a nivel celular Estudios han transformado la investigacin en: Agricultura.Medicina Ecologa

Clonacin Separacin de un gen especifico o de un fragmento de DNA, para unirse a una molcula pequea , para despus poderse replicar, creando mltiples copias del DNA. Clon Relacin Es una copia idntica

Clonacin Se tiene 5 etapas principales

Cortar el DNA en Lugares precisos.

Seleccin de una pequea molcula de DNA capaz de auto replicarse. ( estos DNA se denominan Vectores de clonacin )

Unin covalente de dos fragmentos de DNA

Traslado del DNA del tubo de ensayo a una clula husped.

Seleccin e identificacin de las clulas husped que contiene el DNA recombinante.

Qu es un vector de clonacin?Es una molcula pequea de ADN que puede replicarse de manera autnoma en un husped. ( clula bacteriana o de levaduras )

Se utilizan en la clonacin por que pueden seguir su desarrollo normal a pesar de que secuencias adicionales de ADN sean incorporados en su material gentico.

Se auto replican utilizando la maquinaria de la clula husped.

Algunos Ejemplos de Vectores.PlsmidosBacterifagos Csmidos

PLSMIDOS Molculas circulares de ADN de doble cadena que se replican de modo extracromosmico en bacterias

En ellos se encuentran genes que le confiere al organismo que los posee resistencia a algunos antibiticos.

Clonacin utilizando el fago lambda como vector.

Se extrae el DNA de una preparacin de fago lambda y se elimina el grupo central de genes por tratamiento con una enzima de restriccin. El DNA a clonar se corta con la misma enzima y se liga entre los brazos del cromosoma de lambda. Luego se empaqueta el cromosoma recombinante dentro de las protenas del fago para formar un virus recombinante. Este virus puede infectar clulas bacterianas y replicar su cromosoma, incluido el inserto de DNA.

Bacterifagos Son virus que infectan a las bacterias, constituidos segn su ncleo de ADN o ARN y una cubierta proteica.

Presentan cola y son incapaces de replicarse autnomamente por lo que necesitan infectar a la clula para poder hacerlo.

El ms utilizado es el bacterifago lambda por ser eficiente para introducir sus bases pares de DNA en la bacteria.

Puede ser usado como vector para clonar fragmentos de DNA.

CSMIDOS Son bsicamente plsmidos.

Emplean la habilidad de las partculas infecciosas del bacterifago lambda para empaquetar piezas lineales de ADN e introducirlas en las bacterias.

Son vectores que se reproducen de igual manera que los plsmidos en las bacterias. Cromosomas artificiales Levadura. Es un tipo de vector de clonacin .

Permite clonar hebras de ADN de gran tamao

Capaz de replicarse en el husped (levadura comn usada en panadera ).

Cuenta con una estructura semejante a los cromosomas de levadura normal.

Tipos de vectores de clonacin utilizados en E. coli

Tipo de vector Mtodo de introduccin en E. coliMtodo de propagacinTamao del fragmento de DNA que se puede clonarPlsmidos: modificados por tcnicas de DNA recombinanteTransformacin; las clulas se vuelven competentes para incorporar el plsmido recombinante; una vez transformadas las clulas se seleccionan mediante un marcador seleccionableReplicacin del plsmido tamao del fragmento hasta 15.000 pbBacterifago Infeccin con fagos Replicacin del fagoHasta 23.000 pbCsmidos construidos a partir de plsmidos y de genes Se necesitan el empaquetamiento en invitro Replicacin a modo de plsmidoHasta 45.000 pb

En conclusinLos vectores de clonacin nos ayudan a obtener segmentos de ADN idnticos, esto se tiene que llevar a cabo con especficas encimas utilizadas en la tecnologa del ADN recombinante, es una forma fcil de conocer e investigar los procesos y la molcula de ADN, ha permitido la identificacin de genes implicados en muchos procesos biolgicos. En general, el resultado es una amplificacin selectiva de un gen o fragmento de ADN particular

PALABRAS CLAVE:Edonucleasas de restriccinDNA ligasa Vector de clonacinPlsmidoBacterifagoCsmido

GRACIAS POR SU ATENCIN