vérképző szervek betegségeinek laboratóriumi diagnosztikája · citogenetika/fish molekuláris...
TRANSCRIPT
2008.09.26.
1
Vérképző szervek betegségeinek Vérképző szervek betegségeinek laboratóriumi diagnosztikájalaboratóriumi diagnosztikája
VérkenetVérkenetCsontvelő aspirátum (kenet+beágyazott)Csontvelő aspirátum (kenet+beágyazott)Csontvelő szövettan (crista biopsia)Csontvelő szövettan (crista biopsia)Áramlásos citometriaÁramlásos citometriaCitogenetika/FISHCitogenetika/FISHMolekuláris diagnosztikaMolekuláris diagnosztika
Komplex diagnosztika malignus hematológiai megbetegedésekben
Klinikai dg.Klinikai dg.Klinikai dg.Klinikai dg.
morfológiai dg.morfológiai dg.
Immunológiai dg.Immunológiai dg.
citogenetikai dg.citogenetikai dg.
Molekuláris dg.Molekuláris dg.
2008.09.26.
2
klinikumklinikumklinikumklinikumklinikumklinikumklinikumklinikum morfológiamorfológiamorfológiamorfológiamorfológiamorfológiamorfológiamorfológia fenotípufenotípufenotípufenotípufenotípufenotípufenotípufenotípussssssss
genotípusgenotípusgenotípusgenotípusgenotípusgenotípusgenotípusgenotípus
szövettanszövettanszövettanszövettanszövettanszövettanszövettanszövettancitológiacitológiacitológiacitológiacitológiacitológiacitológiacitológia
immunhisztológiaimmunhisztológiaimmunhisztológiaimmunhisztológiaimmunhisztológiaimmunhisztológiaimmunhisztológiaimmunhisztológiaáramláscitometriaáramláscitometriaáramláscitometriaáramláscitometriaáramláscitometriaáramláscitometriaáramláscitometriaáramláscitometria
molekulárimolekulárimolekulárimolekulárimolekulárimolekulárimolekulárimolekuláris vizsgálats vizsgálats vizsgálats vizsgálats vizsgálats vizsgálats vizsgálats vizsgálat
tünettantünettantünettantünettantünettantünettantünettantünettan
A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a A vizsgálatok egymásra építettsége a hematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikábanhematológiai diagnosztikában
Áramlás citometriai panelek I.
AL I.IgG izotípus kontrollok
CD14 – HLA-DR – CD45
CD13 – CD7 – CD19blasztok esetén
Myeloid vonal T-sejtes vonal B-sejtes vonal
CD15 – CD33 – CD45
CD36 – CD64 – CD45
Co – CD34 – CD45
MPO – CD34 – CD45
CD7 – CD8 – CD4
CD5 – CD7 – CD3
icCD3 – CD1a – CD2
(ploiditás gyerek leukémiában)
CD20 – CD10 – CD19
CD9 – CD34 – CD19
CD10 – CD38 – CD19
IgM – CD19 – CD45
Co – CD19 – CD45
icIgM – CD19 – CD45
(ploiditás gyerek leukémiában)
AL, MDS, CMPD, CML blasztos kr.
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
2008.09.26.
3
Áramlás citometriai panelek II.
Ly I.
IgG izotípus kontrollok
Κ – λ – CD19
CD3 - CD8 – CD4
CD10 – CD19 – CD45
T-sejtes vonal
TCRα/β – TCRγ/δ – CD2
CD3 – CD26 – CD4(Sezary szindr., Mycosis Fung. esetén)
B-sejtes vonal
CD5 – CD23 – CD19
CD38 – CD56 – CD19
CD103 – CD22 – CD20
Zap70 kontrollal
ha CLLSzűk CLL
CD10 – CD19 – CD45
CD5 – CD23 – CD19
co– CD38 – CD19
Zap70 – CD38 – CD19
Szűk Myeloma multiplex.
CD10 – CD19 – CD45
CD38 – CD56 – CD19
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
A crista biopszia indikációiA crista biopszia indikációi
•• Punctio siccaPunctio sicca
•• Citopénia, hypocelluláris hematológiai betegségekCitopénia, hypocelluláris hematológiai betegségek
•• Ciológiai abnormitás további vizsgáltaCiológiai abnormitás további vizsgálta
•• Csontvelői infiltráció megítéléseCsontvelői infiltráció megítélése
•• Stromareakció megítéléseStromareakció megítélése
•• Kezelés monitorozása, reziduális betegség vizsgálataKezelés monitorozása, reziduális betegség vizsgálata
•• Immunológiai, infektológiai, onkológiai indikációkImmunológiai, infektológiai, onkológiai indikációk
2008.09.26.
4
Aspiratio Biopszia
Citológia Hisztológia
Egyedi jelleg Struktúra
Csontvelőbiopsziás előkészítés: biopszia Yamshidi tűvel a spina iliaca post. sup területéről
2008.09.26.
5
Crista biopsiás minta feldolgozása Crista biopsiás minta feldolgozása
•• Fixálás (10%pufferezett formalin, min. 6 óra)Fixálás (10%pufferezett formalin, min. 6 óra)•• Dekalcinálás (EDTA, 1 éjszaka)Dekalcinálás (EDTA, 1 éjszaka)•• VíztelenítésVíztelenítés•• Paraffinba ágyazás Paraffinba ágyazás •• Metszés (2Metszés (2--4 um vastagság)4 um vastagság)•• DeparafinálásDeparafinálás•• RehidrálásRehidrálás•• FestésFestésFeldolgozás ideje kb. 3 napiFeldolgozás ideje kb. 3 napi
Szövettani vizsgálatai lehetőségek Szövettani vizsgálatai lehetőségek csontvelőmintákon I. csontvelőmintákon I.
Szöveti összefüggések vizsgálata hagyományos festésekkelSzöveti összefüggések vizsgálata hagyományos festésekkel
•• Sejtmorfológia (dysmorfológia)Sejtmorfológia (dysmorfológia)
•• SejtSejt-- és stroma viszonya és stroma viszonya
•• Csontvelő mennyiségi összetétele Csontvelő mennyiségi összetétele
•• Sejtek elosztása (topográfia, sejtcsoportok)Sejtek elosztása (topográfia, sejtcsoportok)
•• Speciális sejttípusok, zárványtestek, tárolási zavarokSpeciális sejttípusok, zárványtestek, tárolási zavarok
•• Csontos állományhoz, erekhez való viszonyCsontos állományhoz, erekhez való viszony
2008.09.26.
6
Szövettani vizsgálatai lehetőségek Szövettani vizsgálatai lehetőségek csontvelőmintákon II. csontvelőmintákon II.
Szöveti komponensek feltüntetése speciális festésekkelSzöveti komponensek feltüntetése speciális festésekkel
•• Citológiai részletek, metachromasia (Giemsa)Citológiai részletek, metachromasia (Giemsa)
•• Enzimaktivitás (chloroacetátEnzimaktivitás (chloroacetát--eszteráz, mieloperoxidáz)eszteráz, mieloperoxidáz)
•• Rácsrost (reticulin, Gömöri)Rácsrost (reticulin, Gömöri)
•• Kollagén (Van Gieson, picrosyrius)Kollagén (Van Gieson, picrosyrius)
•• Vas (BerliniVas (Berlini--kék)kék)
•• Glikogén, komplex szénhidrátok (PAS) Glikogén, komplex szénhidrátok (PAS)
Szövettani vizsgálati lehetőségek Szövettani vizsgálati lehetőségek csontvelőmintákon III. csontvelőmintákon III.
ImmunhisztokémiaImmunhisztokémia
•• Sejtes összetétel (BSejtes összetétel (B--sejt, Tsejt, T--sejt, histiocyta, stb.)sejt, histiocyta, stb.)
•• Klonalitás (kappa, lambda)Klonalitás (kappa, lambda)
•• Sejtkiválasztás, sejtproliferáció (bclSejtkiválasztás, sejtproliferáció (bcl--2, bcl2, bcl--6, Ki6, Ki--67)67)
•• Aberráns markerek (CD5, cyclin D1)Aberráns markerek (CD5, cyclin D1)
•• Terápia asszociált markerek (CD20, CD52)Terápia asszociált markerek (CD20, CD52)
•• Ritka sejttípusok (HodgkinRitka sejttípusok (Hodgkin--sejt, micrometastasis)sejt, micrometastasis)
2008.09.26.
7
Immunmarkerek differenciálódás szerintImmunmarkerek differenciálódás szerintBlaszt fenotípus: CD34Blaszt fenotípus: CD34
CD117CD117CD72(transzferrin rec.)CD72(transzferrin rec.)TdtTdt
CG eredet: CDCG eredet: CD--1010bclbcl--66
Érett BÉrett B--sejt: CD19sejt: CD19CD20CD20CD79CD79felszíni kappa, lambdafelszíni kappa, lambda
Plazmasejt: CD138Plazmasejt: CD138MUM1MUM1citoplasmat. kappa, lambdacitoplasmat. kappa, lambda
MonoMono--/histiocyta: CD68/histiocyta: CD68lizozimlizozim
TT--sejt: sejt: CD2, CD3CD2, CD3CD5, CD7CD5, CD7CD4, CD8CD4, CD8
Megakaryocita: CD31, CD61, Megakaryocita: CD31, CD61, VIIIVIII-- faktorfaktor
Erythroid sejtek: glycophorin AErythroid sejtek: glycophorin A
Granulocyta: Granulocyta: MPOMPO
Dendritikus sejtek: CD21Dendritikus sejtek: CD21CD23CD23
Langerhans sejtek: SLangerhans sejtek: S--100100CD1a CD1a
A csontvelő biopsziás lelet fő részeiA csontvelő biopsziás lelet fő részei
•• ÉrtékelhetőségÉrtékelhetőség
•• CellularitásCellularitás
•• Hemopoietikus sejtvonalak arányaHemopoietikus sejtvonalak aránya
•• Hemopoietikus aktivitás jellemzéseHemopoietikus aktivitás jellemzése
•• Patológiás sejtszaporulat jellemzésePatológiás sejtszaporulat jellemzése
•• Lymphoid sejtek és egyéb reaktiv jelenségek Lymphoid sejtek és egyéb reaktiv jelenségek
•• Nem hemopoietikus sejtek és folyamatok (stroma, tárolás, Nem hemopoietikus sejtek és folyamatok (stroma, tárolás, stb.)stb.)
•• Összefoglaló véleményÖsszefoglaló vélemény
•• DiagnózisDiagnózis
2008.09.26.
8
Lymphadenomegaliával jelentkező beteg anamnéziseLymphadenomegaliával jelentkező beteg anamnézise
Infekció?Infekció?Háziállatok ? Macskakarmolás?Háziállatok ? Macskakarmolás?Gyógyszerszedés?Gyógyszerszedés?Utazás egzotikus külföldi országba?Utazás egzotikus külföldi országba?Autoimmun betegség?Autoimmun betegség?Szexuális irányultság? Szexuális irányultság? Lymphomás beteg a családban?Lymphomás beteg a családban?
Fizikális vizsgálat:Fizikális vizsgálat: nyirokcsomó status?nyirokcsomó status?hepatosplenomegalia?hepatosplenomegalia?vena cava superior syndroma?vena cava superior syndroma?
Lymphoma klasszifikáció : WHO 2000Lymphoma klasszifikáció : WHO 2000
B sejtes tumorokB sejtes tumorok
prekurzor Bprekurzor B--sejtes tumorsejtes tumor
érett Bérett B--sejtes tumoroksejtes tumorok
TT--sejtes és ?Ksejtes és ?K--sejtes tumoroksejtes tumorok
prekurzor Tprekurzor T--sejtes tumoroksejtes tumorok
érett Térett T--sejtes és ?Ksejtes és ?K--sejtes tumoroksejtes tumorok
2008.09.26.
9
Érett (perifériás) BÉrett (perifériás) B--sejtes tumoroksejtes tumorok
BB--sejtes krónikus lymphocytás leukémia /kis lymphocytás lymphomasejtes krónikus lymphocytás leukémia /kis lymphocytás lymphomaBB--sejtes prolymphocytás leukémiasejtes prolymphocytás leukémiaLymphoplasmocitás lymphomaLymphoplasmocitás lymphomaSplenikus marginális zóna lymphomaSplenikus marginális zóna lymphomaHajassejtes leukémiaHajassejtes leukémiaPlazmasejtes myeloma/plasmocytomaPlazmasejtes myeloma/plasmocytomaNodális marginális zóna BNodális marginális zóna B--sejtes lymphomasejtes lymphomaExtranodális marginalis zóna BExtranodális marginalis zóna B--sejtes lymphoma MALT típussejtes lymphoma MALT típusFollikularis lymphomaFollikularis lymphomaKöpenysejtes lymphomaKöpenysejtes lymphomaDiffúz nagy BDiffúz nagy B--sejtes lymphomasejtes lymphomaMediastinalis (thymikus) nagy BMediastinalis (thymikus) nagy B--sejtes lymphomasejtes lymphomaIntravascularis nagy BIntravascularis nagy B--sejtes lymphomasejtes lymphomaPrimer effusionalis lymphomaPrimer effusionalis lymphomaBurkitt lymphomaBurkitt lymphomaLymphomatoid granulomatosisLymphomatoid granulomatosis WHO felosztás, 2000WHO felosztás, 2000
Érett perifériás TÉrett perifériás T-- és ?Kés ?K--sejtes tumoroksejtes tumorok
TT--sejtes prolymphocytas leukémiasejtes prolymphocytas leukémiaTT--sejtes large granularis lymphocytas leukémiasejtes large granularis lymphocytas leukémiaAggresszív NKAggresszív NK--sejtes leukémiasejtes leukémiaAdult TAdult T--sejtes lymphoma/leukémia (HTLV1+)sejtes lymphoma/leukémia (HTLV1+)Extranodális NK/TExtranodális NK/T--sejtes lymphoma, nasalis típussejtes lymphoma, nasalis típusEnteropathiaEnteropathia--típusú Ttípusú T--sejtes lymphomasejtes lymphomaHepatosplenikus Hepatosplenikus γ/δγ/δ TT--sejtes lymphomasejtes lymphomaSubcután panniculitisszerű TSubcután panniculitisszerű T--sejtes lymphomasejtes lymphomaBlastos NKBlastos NK--sejtes lymphomasejtes lymphomaMycosis fungoides/Sezary szindrómaMycosis fungoides/Sezary szindrómaAnaplasztikus nagysejtes lymphoma, T/0 sejtes, primér cután típusAnaplasztikus nagysejtes lymphoma, T/0 sejtes, primér cután típusPeriferiás TPeriferiás T--sejtes lymphoma (másképpen nem meghatározott)sejtes lymphoma (másképpen nem meghatározott)Angioimmunoblastos TAngioimmunoblastos T--sejtes lymphomasejtes lymphomaAnaplasztikus nagysejtes lymphoma, T/0 sejtes, szisztémás típus.Anaplasztikus nagysejtes lymphoma, T/0 sejtes, szisztémás típus.
WHO felosztás, 2000WHO felosztás, 2000
2008.09.26.
10
Prognosztikus csoportokPrognosztikus csoportok BB--SejtesSejtesMérsékelt malignitású (indolens)Mérsékelt malignitású (indolens) Krónikus lymphoid leukémia (CLL)Krónikus lymphoid leukémia (CLL)
Waldenström macroglobulinaemiaWaldenström macroglobulinaemiaHajas sejtes leukémia (HSL)Hajas sejtes leukémia (HSL)Splenikus marginális zóna lymphomaSplenikus marginális zóna lymphomaFollicularis lymphoma Grade IFollicularis lymphoma Grade I--IIIIPlasmocytoma/myelomaPlasmocytoma/myeloma
Mérsékelten agresszív lymphomákMérsékelten agresszív lymphomák Köpenysejtes lymphomaKöpenysejtes lymphomaFollicularis lymphoma Grade IIIFollicularis lymphoma Grade III
Agresszív lymphomaAgresszív lymphoma Diffúz nagyDiffúz nagy--BB--sejtes NHLsejtes NHL
Nagyon agresszív lymphomákNagyon agresszív lymphomák Prekurzor BPrekurzor B-- Lymphoblastos lymphoma/ALLLymphoblastos lymphoma/ALL
Burkitt lymphomaBurkitt lymphoma
A BA B--sejtes nemsejtes nem--Hodgkin lymphomák klinikai Hodgkin lymphomák klinikai felosztásafelosztása
A lymphomák prognosztikai csoportosításának alapja A lymphomák prognosztikai csoportosításának alapja
Szövettani vizsgálat Szövettani vizsgálat
A betegség stádiumának meghatározásaA betegség stádiumának meghatározása
NyakNyak——mellkas és hasmellkas és has--kismedence CT kismedence CT
CsontvelőbiopsziaCsontvelőbiopszia
Nemzetközi prognosztikai index (IPI score) kiszámításaNemzetközi prognosztikai index (IPI score) kiszámítása
2008.09.26.
11
a „rituximab-éra „
A CD20 antigén, mint az immunterápia célpontja
Őssejt Pre-Pre- éretlen érett Activált PlasmaB sejt Pre-B sejt B sejt B sejt B sejt sejt
sIgM sIgM+D
sIgMsIgGsIgA
HCR HCRHCRκκκκR/D
HCRλλλλR/D
IgMIgGIgA
Antigén independens Antigén dependens
CD20expresszió
Malignitások: Precursor B-sejt leukémiák
B-sejteslymphomák/CLL
M. Waldenström/myeloma
2008.09.26.
12
Coiffier et al, N Engl J Med 236, 346, 2002
CHOP versus CHOP+ rituximab diffúz nagy B-sejtes lymphomában (DLBCL)
MabThera: MabThera: Egér/humán kiméra Egér/humán kiméra monomonokklonlonáállisis antiantitesttest
Variábilis régióVariábilis régió ((egéregér))specifikusan kötődik aspecifikusan kötődik a CD20CD20--hozhoz
HumHumáán n κ κ κ κ κ κ κ κ konstanskonstans rréégigióó
HumHumáánn
KiméraKiméra IgGIgG11
prepre--BB-- ésés BB--sejteksejtekCD20 CD20 molekulájához molekulájához
kötődikkötődik
2008.09.26.
13
B-CLL: mérsékelt malignitású NHL
Monomorph lymphoid csontvelőinfiltrátum CLL-ben
Perif vér flow citometria
CD5+/CD19+ sejtek
CLL-ben
2008.09.26.
14
Fizikális vizsgálatTeljes vérkép, ly morfológia, reticulocytaFelszíni markerek
• a fő sejtpopul.B-markerekre +(CD19, CD20,CD23) és CD5+• a B sejtek monoklonálisak, vagy kappa vagy lambda expresszióval• a sejtfelszíni immunglobulinok denzitása alacsony
• Elkülönítendő kórképek T-CLLprolymphocytás leukémia hajas sejtes leukémia és variáns formájaSplenikus lymphoma villosus lymphocytákkalLGL-sejtes leukémianon-Hodgkin lymphomák leukémiás fázisa
(folliculus centrum sejtes vagy MCL)
CLL diagnosztikára vonatkozó ajánlások NCI 1996
MalignusB sejt CD20+
CD52+
CD19+
2008.09.26.
15
Új prognosztikai (a kórjóslatot elősegítő) tényezők Új prognosztikai (a kórjóslatot elősegítő) tényezők
a lassú és a gyors kórlefolyású esetekbena lassú és a gyors kórlefolyású esetekben
Kétféle B sejttípus elkülönítése Kétféle B sejttípus elkülönítése
sejtfelszíni tulajdonságoksejtfelszíni tulajdonságok pl. CD 38 pl. CD 38
ZAP70ZAP70
citogenetikai eltérések pl. 17citogenetikai eltérések pl. 17--es kromoszómaes kromoszóma
egyik karjának hiányaegyik karjának hiánya
Diagnózis : -morfológia
-flow cytometria
Prognosztikai értékelés :-Klinikai stádium-Interfázis FISH
-IgVH mutációs státusz-ZAP-70-CD38
Alacsony, közepes és magas kockázat
Fiatal(abb) CLL-es betegen a diagnóziskor
Mikor történjék CLL-ben az új prognosztikai
markerek meghatározása CLL-ben?
2008.09.26.
16
Hajas sejtes leukémia (HSL)Hajas sejtes leukémia (HSL)
Incidencia: 3 eset / millió lakos / év
Klinikum: splenomegalianincs tapintható lymphadenomegalia
Vérkép: - pancytopenia,- monocytopenia,- hajas sejtek aránya kicsi → kimutatás:
buffy coat készítményben
Immunológia: CD103+, CD19+, CD21–, FMC-7+, CD11c+
2008.09.26.
17
Süllyedés, vérképSüllyedés, vérkép
Myeloma multiplex: diagnosztika
Fehérje elektroforézis Fehérje elektroforézis (szérum, vizelet)(szérum, vizelet)
csontröntgenekcsontröntgenek
csontvelővizsgálatcsontvelővizsgálat
2008.09.26.
18
Süllyedés, vérkép Süllyedés, vérkép
Diagnosztika myeloma multiplexbenDiagnosztika myeloma multiplexben
Fehérje elektroforézis Fehérje elektroforézis (szérum, vizelet)(szérum, vizelet)
csontröntgenekcsontröntgenek
csontvelővizsgálatcsontvelővizsgálat
M-komponens kimutatása fehérje elektroforézissel
Süllyedés, vérkép Süllyedés, vérkép
Fehérje elektroforézis Fehérje elektroforézis (szérum, vizelet)(szérum, vizelet)
csontröntgenekcsontröntgenek
csontvelővizsgálatcsontvelővizsgálat
Lytikus csontelváltozások
Diagnosztika myeloma multiplexbenDiagnosztika myeloma multiplexben
2008.09.26.
19
Süllyedés, vérkép Süllyedés, vérkép
Fehérje elektroforézis Fehérje elektroforézis (szérum, vizelet)(szérum, vizelet)
csontröntgenekcsontröntgenek
csontvelővizsgálatcsontvelővizsgálat
Aspirált csontvelő: Diffúz plazmasejtes infiltráció
Diagnosztika myeloma multiplexbenDiagnosztika myeloma multiplexben
Süllyedés, vérkép Süllyedés, vérkép
Fehérje elektroforézis Fehérje elektroforézis (szérum, vizelet)(szérum, vizelet)
csontröntgenekcsontröntgenek
csontvelővizsgálatcsontvelővizsgálat
Szövettani vizsgálat:Diffúz plazmasejtes infiltráció
Diagnosztika myeloma multiplexbenDiagnosztika myeloma multiplexben
2008.09.26.
20
Klinikai stádium megállapítása (Durie-Salmon, 1975)
I. Stádium: A sejttömeg kicsi (0,6 x 1012/m2)
II. Stádium: a kettő közt
III. Stádium: A sejttömeg nagy (1,2 x 1012/m2)
haemoglobin < 100 g/L
szérum kalcium > 2,6 mmol/L
előrehaladott csontdestrukció
monoklonális szérum IgG > 7 g / dl, IgA > 5 g/dl
vizelet könnyűlánc-ürítés > 4 g / 24 óra
A: szérum kreatinin <170 µµµµmol/L (<2 mg/dl)
B: szérum kreatinin >170 µµµµmol/L (<2 mg/dl)
International Staging System of the International Staging System of the International Myeloma Working GroupInternational Myeloma Working Group
StádiumStádium ββββββββ2 microglobulin2 microglobulin(mg/dl)(mg/dl)
serum albuminserum albumin(g/dl)(g/dl)
Átlagos túlélésÁtlagos túlélés(hónap)(hónap)
I.I. < 3.5< 3.5 > 3.5> 3.5 6262
II.II. < 3.5< 3.5 < 3.5< 3.5 4444
II.II. 3.5 3.5 –– 5.55.5 NANA 4444
III.III. > 5.5> 5.5 NANA 2929
2008.09.26.
21
Képalkotó eljárások myeloma multiplexban
CTCT
MRIMRI
CsontröntgenekCsontröntgenek
A betegség kiterjedtségének és súlyosságának megállapítása a diagnóziskor
Mellkasrtg (PA)Mellkasrtg (PA)Nyaki gerinc rtg (APNyaki gerinc rtg (AP--oldalirányú+nyitott szájjal)oldalirányú+nyitott szájjal)DL gerincDL gerincHumerus, femur rtg. Humerus, femur rtg. koponya AP+oldalir.koponya AP+oldalir.Medence APMedence AP+tüneteket okozó területek+tüneteket okozó területek
Myelodysplasia syndromaMyelodysplasia syndroma
2008.09.26.
22
Myelodysplasia syndroma - általános jellemzők__________________________________________
Mono- bi vagy tricytopenia a perifériás vérben
A csontvelő normo-/hypercelluláris
(ritkán hypoplastikus)
Ineffektív hemopoezis, fokozott apoptosis
A betegek egy részében akut leukémia alakul ki
Myelodysplasia syndroma - általános jellemzők_______________________________________________
Medián életkor 64 év.
Éves incidencia 4-5/100 000 az általános populációban,
ezen belül <50 év: 0.5/100 000,
>80 év 89/100 000
?emi arány: férfi:nő=1.2:1
2008.09.26.
23
MDS- diagnózis
• Anaemia
• Granulopeniatünetei
• Thrombocytopenia vagy thrombocytosis
• + kóros, diszfunkcionáló granulocyták, thrombocyták
Csontvelőkenet+cristabiopszia
+ citogenetika
Myelodysplasia syndroma - csontvelőkenet
Dyserythropoesis
Dysgranulopoesis
dysmemegakaryopoesis
Matolcsy, Udvardy, Kopper Hematológiai betegségek atlasza, Medicina, 2006
2008.09.26.
24
• Refrakter anémia (RA)• RA gyűrűs (Ring) szideroblasztokkal (RARS)• Refrakter cytopénia több rendszert érintő
dysplasiával • RAEB-1 (Refrakter anaemia with excess of
blasts)• RAEB-2• MDS/MPDS• Del(5q)
MDS- WHO klasszifikáció
Myelodysplasia syndroma- refrakter anaemia Ring (gyűrűs) sideroblastokkal
2008.09.26.
25
MDS - 5q- szindróma___________________________________________Anaemia, makrocytosisThrombocytosisJellegzetes megakar.morfológia
-Indolens klinikai lefolyás
- Az AML kialakulásának esélye kicsi
International Prognostic Score System (IPSS) MDS-ben
_______________________________
- A csontvelői blastaránytól
- Citogenetikától és a
- Citopenia mértékétől függEzen besorolás alapján becsülhető
- a várható túlélés
- az akut myeloid leukaemiává transzformálódás valószínűsége
2008.09.26.
26
International Prognostic Scoring System (IPSS) kockázati csoportok
Kis Intermed-1
Intermed-2
Nagy
score 0 0,5-1,0 1,5-2,0 2,5 v. felett
AML kial. 19% 30% 33% 45%
Medián idő AL-ig
9,4 év 3,3 év 1,1év 0,2 év
Medián túlélés
5,7 év 3,5 év 1,2 év 0,4 év
Heveny leukémiákHeveny leukémiák
2008.09.26.
27
Akut leukémia- általános jellemzők
• Csontvelő eredeű, nagy malignitású, klonális, heterogén betegségcsoport,
• Hasonlóság mellett különböző célsejt (AML-ALL) immunfenotípus,citogenetikai eltérés, klinikai megjelenés,terápiás válasz.
• Tüneteit általában nem maga a daganatsejt okozza,hanem az általa elnyomott normális vérképzés hiánya: anémia, thrombocytopenia,neutropenia
Akut leukémiák általános jellemzői
• Diagnózis kritériumai:
• a csontvelőben a nonerythroid elemek több mint 20%-a blast (vagy Auer pálca észlelhető.)
• A blastok myeloid,monocyta,ritkán erythroid ill megakaryocyta irányú=AML, vagy B és T sejt irányú=ALL differenciálódást mutatnak.
• Bi-fenotípusos: a blastok néha myeloid és lymphoid jeleket is expresszálnak
AML: - de novo ill
- szekunder (myelodysplasiából vagy krónikus myeloproliferativ betegség talaján)
ALL : B, T sejtes ill. érett B sejtes.
2008.09.26.
29
Akut leukémia : Általános jellemzők
• Epidemiológia
• AML
3 - 4 beteg/100 000 lakos/év 30 év alatt 17beteg/100 000 lakos/év 75 év felett
mérsékelt férfi predominancia
ALL:1,4 beteg/100 000 lakos/év(időskorban ez is emelkedik)
AML/ALL= 3
•Prognózis:általában rossz,
• függ: - életkortól,
- citogenetikától,
- általános állapottól
60 év alatt jó cytogenetika és jó általános állapot
80% CR és 50% gyógyulás!!
Akut leukémia: prognózis
2008.09.26.
30
Akut leukémiaI Általános jellemzők
• Etiológia
Környezeti:kémiai anyagok,
sugárzás,
cytostatikumok
Genetikai: Down kór (22-es trisomia)
Ataxia-teleangiektázia (ATM 11q 23 del).
•Akut leukémia: laboratóriumi diagnosztika
•LABORATORIUMI VIZSGÁLATOK:
•vérkép: leukocytosis, blastsejtek (Auer pálca),• anemia, thrombocytopeniakémia: magas hugysav, LDH • hemostasis:DIC thrombocytopenia Citokémia:POX,Sudán fekete stb-(ma már nem jelentős
Flow Cytometria: CD 13-14-33-34 AML CD –2-3-10-19- ALL
Citogenetika: konvencionális és FISH
PCR:molekuláris vizsgálatok
2008.09.26.
31
Akut leukémiaIII leukemogenezis
• A leukémiát mutációk hozzák létre: „two-hit” hipotézis - a II csoportú mutáció a sejtek érésében fontos transzkripciós faktorokat károsítja, ezáltal az érés szempontjából fontos fehérjék messengerRNS ei nem képződnek,a sejt nem tud kiérni, de még nincsen proliferációs előnye(van-vegetál)
• az I. csoportú mutációk adják meg a proliferációs előnytazáltal,hogy a sejtmembrán növekedési receptor jelátvitelét zavarják[.ligand nélküli folyamatos jelátvitel lesz
• (III tip receptorok flt-3, c-kit,ill RAS,STAT rendszer aktiválódás)Egyed M: Heveny leukémiák in: Dank, Demeter (szerk): Fókuszban az onkológia, onkohematol,, 2006
II. Mutációs csoport
- CBF (core binding faktor) mutációk
(t 8;21) AML1-ETO
Inv(16) CBFβ-MYH11
- RA receptort érintő transzlokációkt(15;17)
2008.09.26.
32
Akut leukémia csoportosítás
• WHO beosztás
• FAB(French-American-British) AML: M0-M7 ALL:L1- L3
• Cytogenetika:– jó prognózisú t(8;21), t(15;17), inv (16)
- neutralis progn.:normal karyotípus,8-as trisomia,del llq 23
- rossz prognózis:komplex abnormalitás, jelentős genetikai anyagvesztés stb.
Akut leukémia (AML)IV kezelés
2008.09.26.
33
Az FLT3 (fms-szerű tirozin kináz-3) génmutációinak AML-ben prognosztikus
szerepe van
[FLT3 ITD]; az FLT3 gén ITD (internal tandem duplikáció) mutáció kimutatása: DNS-mintából fluoreszcens
PCR-t követő kapilláris elektroforézissel
[FLT3 D835]: az FLT3 gén 835. pozíciójában (tirozin kináz domén, TKD) található aszparaginsav (D835) pontmutációinak kimutatása DNS-mintából PCR-t követő restrikciós fragmens hossz analízissel (RFLP)
A mutációk jelenléte fontos az AML-es beteg prognózisának megítélésekor és esetlegesen a kezelést is befolyásolhatja.
Akut myeloid leukémia kezelési elvek__________________________________
Egyed M: Heveny leukémiák in: Dank, Demeter (szerk): Fókuszban az onkológia, onkohematol,, 2006
2008.09.26.
34
A felnőttkori akut lymphoid leukémia
• ALL előfordulása: 1,4 beteg / 100 000 lakosférfiakban kissé gyakoribb
WHO besorolás- prekurzor B-sejtes lymphoblastoslymphoma/leukemia- „ T-sejtes „ „- Burkitt lymphoma/leukémia
Rizikóbecslás akut lymphoid leukémiában
2008.09.26.
35
Idült myeloproliferatív betegségekIdült myeloproliferatív betegségek
Idült myeloproliferatív betegségekIdült myeloproliferatív betegségek
Krónikus lefolyású, őssejt eredetű klonális megbetegedések
A csontvelőben egy- vagy több sejtvonal proliferációja
Jellemző:
leukocytosis thrombocytosis
+ hepatosplenomegalia
2008.09.26.
36
Idült myeloproliferatív betegségekIdült myeloproliferatív betegségek
Miért idült ?
Akut és krónikus myeloproliferatív betegség megkülönböztetése ___________________________________________________
akut myeloid leukémiát definiáló sajátság alapján:
20 %-os vagy afeletti blast-arány a csontvelőben és/vagy a perif. és ennek következményei
Krónikus myeloid leukémiaKrónikus myeloid leukémia
[Ph kromoszóma, t(9;22)(q34;q11), [Ph kromoszóma, t(9;22)(q34;q11), BBCR/ABLCR/ABLpozitív]pozitív]
Polycythemia veraPolycythemia vera
Krónikus idiopathiás myelofibrosisKrónikus idiopathiás myelofibrosis
(extramedullaris hematopoiesissel)(extramedullaris hematopoiesissel)
Essentialis thrombocythaemiaEssentialis thrombocythaemia
Krónikus neutrofil leukémiaKrónikus neutrofil leukémia
Krónikus eosinofil leukémia(és a hypereosinofilia syndroma)Krónikus eosinofil leukémia(és a hypereosinofilia syndroma)
A krónikus myeloproliferatív betegségek A krónikus myeloproliferatív betegségek WHOWHO felosztásafelosztása
2008.09.26.
37
Krónikus fázis
átlagosan 5-6 év
Akcelerált fázis
Átlagos tartam
6–9 hónap
Blasztos krízis
Átlagos túlélés
3–6 hónap
Előrehaladott fázisok
KórlefolyásKórlefolyás: : a a CMLCML fázisaifázisai
––A A dg. az esetek dg. az esetek 50%50%--ban rutin labor vizsgálatok során derül kiban rutin labor vizsgálatok során derül ki
––Az esetek Az esetek 85%85%--ra ra a krónikus fázisban derül fénya krónikus fázisban derül fény
Krónikus myeloid leukémia (CML): Az összes leukémia esetek 15-20%-a
Incidencia: 1,7-2,2 /100 000 lakos/év, az életkorral nő
1.1. 2.2. 3.3. 4.4. 5.5. 6.6.
myeloblast; promyelocyta myelocyta; metamyelocyta pálca szegmentmyeloblast; promyelocyta myelocyta; metamyelocyta pálca szegment
Fehérvérsejt érési sor
GAP (granulocyta alk. phosph.). aktivitás
GAP ++++ granulocytaGAP negatív granulocyta
2008.09.26.
38
Fúziós proteintirozinkináze aktivitással
22
bcr
abl
Ph
(22q-)
bcr-abl
9 9
(q+)
A CML diagnózisának sine qua nonA CML diagnózisának sine qua non--ja: ja: aa Ph Ph kromoszómapozitivitáskromoszómapozitivitás: :
citogenetika: citogenetika: t(9;22)t(9;22)transzlokációtranszlokációMolekulárisan: BCR/ABL pozitivitásMolekulárisan: BCR/ABL pozitivitás
genetikai oka a 9. és 22. Kromoszóma hosszú karjai közti reciprok transzlokáció következtében a 22. Kromoszómán ( ún. Philadelphia kromoszóma) létrejövõ
bcr/abl fúziós gén,
melynek fehérje terméke kóros tirozinkináz aktivitással rendelkezik és felelős a
leukémiás folyamatért.
A fokozott TK aktivitás miatt
- növekedési faktor független proliferáció,
- csökkent apoptózis
- csökkent adhézió áll fenn.
CML: klonális megbetegedés
2008.09.26.
39
Klinikai adatok: leukocytosis, basophilia, thrombocytosis.
splenomegalia
Morfológia:
perifériás vér és csontvelőkenet
Az integrált megközelítés lehetősége malignus hematológiai megbetegedésekben: CML
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
KariotípusKariotípus
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
Diagnosztikai komplexitás CML-ben
2008.09.26.
40
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
KariotípusKariotípus
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
Fuziós PROTEIN
TYROSINKINASE aktivitással
22
bcr
abl
Ph
(22q-)
bcr-abl
9 9
(q+)
Diagnosztika krónikus myeloid leukémiában
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
KariotípusKariotípus
tt (9;22) FISH (Fluoreszcens (9;22) FISH (Fluoreszcens in situ hibridizáció)in situ hibridizáció)
BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
normális
t (9;22)
Diagnosztika CML-ben
2008.09.26.
41
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
KariotípusKariotípus
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
BCR-ABL fúziós gén képződése
Diagnosztika krónikus myeloid leukémiában
Hematológiai válasz Hematológiai válasz
A CML kezelése során végzettutánkövetéses vizsgálatok
Citogenetikai válaszCitogenetikai válasz
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
Molekuláris válasz: BCR/ABL Molekuláris válasz: BCR/ABL transzkript mennyiségi transzkript mennyiségi meghatározásmeghatározás
•Normalis vérsejtszámokFvs <10 x 109/LThrc <450 x 109/Léretlen sejtek hiánya
• splenomegalia • norm. fizikális status• a kezelést a beteg tolerálja
2008.09.26.
42
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
A CML kezelése során végzettutánkövetéses vizsgálatok
Citogenetikai válaszCitogenetikai válasz
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
(G sávozással vizsgált mintában, legalább 20 metafázis alapján)
• Minimális (MCgR)Ph+ sejtosztódás: 35 - 95 %, de
a kiindulási értékhez képest kevesebb
• Parciális (PCgR)Ph+ sejtosztódás: 1 - 34 %
• Komplett (CCgR)Ph+ sejtosztódás: 0 %
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
A CML kezelése során végzettutánkövetéses vizsgálatok
Citogenetika Citogenetika
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
Klonális evolúció
2008.09.26.
43
Szövettani szubtípus Szövettani szubtípus meghatározásmeghatározás
A CML kezelése során végzett utánkövetéses vizsgálatokMolekuláris monitorozás mint a klinikai döntéshozatal alapja
KariotípusKariotípus
tt (9;22) FISH(9;22) FISH
Molekuláris válasz: Molekuláris válasz: BCR/ABL transzkript BCR/ABL transzkript mennyiségi meghatározásmennyiségi meghatározás
BCR-ABL fúziós gén képződése
Időpont Fvs
X G/l
Thr
X G/l
Hb
g/l
Citogenetika FISH Kvant. RT-PCR
(TaqMan)
2002.12 79,0
Blast: 25%
3268 84 46, X,Y (1)
46, XY t(9,22)( 29)
- 1309
CML score: 4277
(nagy rizikó)
2003.03 4,1 500 134 46, X,Y (24)
46, XY t(9,22)( 6)
12% bcr/abl+
32
2003.05 4,9 179 146 Neg. negatív -
Csv.hypoplasia
2003.o6 4,9 211 141 Neg. negatív Csv: extrém hypoplasia
92
2003.o8 4,1 163 147 Neg. - negativ
2003.11 4,9 150 141 Neg.. - 0,75
2008. 09. 4,6 186 146 Neg.Neg. tt (9;22)(9;22)
negativnegativ
negativ
2008.09.26.
44
ÉvekÉvek GyógyszerGyógyszer MonitorozásMonitorozás Várható túlélésVárható túlélés19501950--5959 busulphanbusulphan fvs, lépméretfvs, lépméret 33--4 év4 év19601960--6969 hydroxyureahydroxyurea „„ 44--5 év5 év
(Litalir)(Litalir)
19701970--7979 allogénallogén citogenetikacitogenetika 5555--60% hosszú távú túlélés60% hosszú távú túléléscsontvelőátültetéscsontvelőátültetés
19801980--8989 interferoninterferon--aa citogenetikacitogenetika 66--7 év7 év(Intron(Intron--A,A,RoferonRoferon--A)A)
1999 óta1999 óta (imatinib, Glivec) (imatinib, Glivec) citogenetikacitogenetika még nem ismertmég nem ismertkvantitativ RTkvantitativ RT--PCRPCR
2005 óta2005 óta (dasatinib, Sprycel) (dasatinib, Sprycel)
A CML kezelésének és a terápiás válasz monitorozásának A CML kezelésének és a terápiás válasz monitorozásának lehetőségeilehetőségei
Prof. Dr Kelemen Endre
2008.09.26.
45
www.ebmt.org
Európai Őssejttranszplatációs Csoport tevékenységének alakulása CML-ben
Az új szerekkel (tirozinkinázgátlókkal) végzett kezelés soránAz új szerekkel (tirozinkinázgátlókkal) végzett kezelés sorána a CMLCML fázisai közti határok eltolódhatnakfázisai közti határok eltolódhatnak
Krónikus fázis
átlagosan 5-6 évstabilizáció
Akcelerált fázis
Átlagos tartam
6–9 hónap
Blasztos krízis
Átlagos túlélés
3–6 hónap
Előrehaladott fázisok
A klasszikus 3 fázisú kórelfolyás megváltozhatBaccarani, 2006
2008.09.26.
46
POLYCYTHAEMIA RUBRA VERA (PRV)
Pancytosissal járó krónikus myeloproliferativ megbetegedés.Pancytosissal járó krónikus myeloproliferativ megbetegedés.
Mindhárom csontvelői sejtrendszer autonom proliferációja, a Mindhárom csontvelői sejtrendszer autonom proliferációja, a
vörösvérsejtrendszer hyperplasiája dominál. vörösvérsejtrendszer hyperplasiája dominál.
Előfordulása:Előfordulása: általában 55 éves kor felett általában 55 éves kor felett
Férfi:nő arány: 1: 1Férfi:nő arány: 1: 1
A polycythaemia vera diagnózis kritériumai:A polycythaemia vera diagnózis kritériumai:
A kategória:A kategória:1. megnövekedett vörösvértest volumen (Cr 51 izotóp)1. megnövekedett vörösvértest volumen (Cr 51 izotóp)
2. Artériás vér oxigén telítettsége >92%2. Artériás vér oxigén telítettsége >92%
3. splenomegalia3. splenomegalia
B kategória:B kategória:
1. thrombocytosis 1. thrombocytosis
2. leukocytosis (láz és fertőzés nélkül)2. leukocytosis (láz és fertőzés nélkül)
3. a granulocyta alkalikus foszfatáze aktivitás növekedett3. a granulocyta alkalikus foszfatáze aktivitás növekedett
4. serum B12 növekedett4. serum B12 növekedett
Dg kimondható: ha 3 A kategóriás kritérium, vagy az 1 és 2 A kritérium + 2 B kategóriás kritériumDg kimondható: ha 3 A kategóriás kritérium, vagy az 1 és 2 A kritérium + 2 B kategóriás kritériumteljesül.teljesül.
2008.09.26.
47
Polycythaemia verában javasolt (kiegészitő) vizsgálatok:
CsontvelőbiopsziaCsontvelőbiopszia
Polimorf megakaryocytaszaporulat, nagy megakaryocyták, Polimorf megakaryocytaszaporulat, nagy megakaryocyták,
fokozott csontvelői cellularitás: panmyelosisfokozott csontvelői cellularitás: panmyelosis
lehet rácsrostszaporulatlehet rácsrostszaporulat
szérum erythropoetin (Epo) szint meghatározásszérum erythropoetin (Epo) szint meghatározás
Csontvelőhisztológia: normal cellularitás
2008.09.26.
48
Csontvelőbiopszia: fokozott cellularitás trilineáris hyperplasiával
PV
Szerzett JAK2 mutációSzerzett JAK2 mutáció
Pontmutáció a JAK2 gén JH2 pseudokináz doménjében (V617F)
A tirozinkináze fehérje 617-es poziciójában a Valin helyett
Phenylalanin van
2008.09.26.
49
JAK V 617 F mutációanalizis
a JAK-2 pozitivitás gyakorisága
PV ET MF(65-97%) (23-57%) (35-90%)
78 35 50 %
Erősebb poiztiv, mint negativ prediktiv érték
a DNS vizsgálat nem helyettesiti ugyan a csontvelőbiopsziát, de nagyon hasznos
Áramlás citometriai panelek I.
AL I.IgG izotípus kontrollok
CD14 – HLA-DR – CD45
CD13 – CD7 – CD19blasztok esetén
Myeloid vonal T-sejtes vonal B-sejtes vonal
CD15 – CD33 – CD45
CD36 – CD64 – CD45
Co – CD34 – CD45
MPO – CD34 – CD45
CD7 – CD8 – CD4
CD5 – CD7 – CD3
icCD3 – CD1a – CD2
(ploiditás gyerek leukémiában)
CD20 – CD10 – CD19
CD9 – CD34 – CD19
CD10 – CD38 – CD19
IgM – CD19 – CD45
Co – CD19 – CD45
icIgM – CD19 – CD45
(ploiditás gyerek leukémiában)
AL, MDS, CMPD, CML blasztos kr.
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
2008.09.26.
50
Áramlás citometriai panelek II.
Ly I.
IgG izotípus kontrollok
Κ – λ – CD19
CD3 - CD8 – CD4
CD10 – CD19 – CD45
T-sejtes vonal
TCRα/β – TCRγ/δ – CD2
CD3 – CD26 – CD4(Sezary szindr., Mycosis Fung. esetén)
B-sejtes vonal
CD5 – CD23 – CD19
CD38 – CD56 – CD19
CD103 – CD22 – CD20
Zap70 kontrollal
ha CLLSzűk CLL
CD10 – CD19 – CD45
CD5 – CD23 – CD19
co– CD38 – CD19
Zap70 – CD38 – CD19
Szűk Myeloma multiplex.
CD10 – CD19 – CD45
CD38 – CD56 – CD19
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
Real-time PCR assay-k
1. BCR-ABL minor génfúzió, t(9;22)(q34;q11)felnőtt ALL-ben 25-30%, gyerek 2-5%, AML-ben ritkábban, CML nagy részében2. BCR-ABL major génfúzió, t(9;22)(q34;q11)CML nagy részében, ALL ~35%-ban
3. BCL2-IgH génfúzió, t(14;18) FL
4. PML-RARA génfúzió, t(15;17)(q22;q21)M3 AML-ben,5. CBFB-MYH11 génfúzió Inv(16)(p13q22)8-9% of newly diagnosed AML,6. TEL-AML1 génfúzió t(12;21)(p13;q22)gyerek precursor-B-ALL ~25%-ban7. MLL-AF4 génfúzió t(4;11)(q21;q23)leggyakoribb 11q23 transzlokáció precursor B-ALL-ben, a terápia indukált ALL mintegy 40-60%-ában.8. AML1-ETO génfúzió t(8;21)(q22;q22)AML ~8%9. SIL-TAL1 génfúzió, 1p32 intrakromoszómális mikrodelécio a leggyakoribb kromoszóma-aberráció gyerek T-ALL-ben. Az esetek 5-25%-ban,CD3- és TCR ab+ esetekben.
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
2008.09.26.
51
FISH PRÓBÁK IFISH PRÓBÁK I
Akut myeloid leukaemiaAkut myeloid leukaemia
t(9;22) ESt(9;22) ES BCRBCR//ABLABL
t(8;21) DFt(8;21) DF AML1AML1//ETOETO
t(15;17) DFt(15;17) DF PMLPML//RARARARA
11q23 split11q23 split MLMLLL
inv16 splitinv16 split CBCBFBFB
BB--sejtes akut leukaemiasejtes akut leukaemia
t(12;21) ESt(12;21) ES TELTEL//AML1AML1
t(9;22) ESt(9;22) ES BCRBCR//ABLABL
11q23 split11q23 split MLMLLL
Chronicus lymphoid leukaemiaChronicus lymphoid leukaemia
CEP12CEP12 1212
17p1317p13 p53p53
13q1413q14 13q1413q14
11q22.211q22.2 ATMATMES ES -- extra signalextra signal
DDC C -- dual colordual color
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
FISH PRÓBÁK IIFISH PRÓBÁK II
Chronicus myeloid leukaemiaChronicus myeloid leukaemia
t(9;22) ESt(9;22) ES BCRBCR//ABLABL
22q11 split22q11 split BCBCRR
CEP8CEP8 88
Myelodysplasias syndromaMyelodysplasias syndroma
CEP7/7q31CEP7/7q31 77//7q317q31
5p15/5q335p15/5q33 5p155p15//5q335q33
Burkitt lymphomaBurkitt lymphoma
CEP8/t(8;14) TCCEP8/t(8;14) TC cc--mycmyc//IgHIgH
8q24 split8q24 split cc--mmycyc
ES ES -- extra signalextra signal
DDC C -- dual colordual color
Follicularis lymphomaFollicularis lymphoma
t(14;18) DCt(14;18) DC IghIgh//BCL2BCL2
14q32 split14q32 split IgIgHH
18q21 split18q21 split BCBCL2L2
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
2008.09.26.
52
FISH PRÓBÁK IIIFISH PRÓBÁK III
Köpenysejtes lymphomaKöpenysejtes lymphoma
t(11;14) DCt(11;14) DC CCND1CCND1//IgHIgH
11q13 split11q13 split CCCCND1ND1
Myeloma multiplexMyeloma multiplex
t(11;14) DCt(11;14) DC CCND1CCND1//IgHIgH
13q1413q14
t(4;14)t(4;14)
p53p53
11q11q
ES ES -- extra signalextra signal
DDC C -- dual colordual color
Myeloma multiplex, új betegMyeloma multiplex, új beteg
17p17p
t(11;14)t(11;14)
t(4;14)t(4;14) Myeloma multiplex, relapszusMyeloma multiplex, relapszus
1q1q
17p17p
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
FISH PRÓBÁK IVFISH PRÓBÁK IV
Egyéb próbákEgyéb próbák
3q27 split3q27 split BCBCL6L6
CEPXYCEPXY XXYY
CEP17CEP17 1717
CEP3/3pCEP3/3p 33//3p3p
Anaplasias nagysejtes Anaplasias nagysejtes lymphomalymphoma
2p232p23--24 split24 split ALALK1K1
ES ES -- extra signalextra signal
DDC C -- dual colordual color
SOTE I Pathológia Dr Csomor Judit, Prof. Matolcsy András
2008.09.26.
53
A morfológia szerepe a congenitalisA morfológia szerepe a congenitalisthrombocytopeniák osztályozásábanthrombocytopeniák osztályozásában
A MayA May--Hegglin anomália:Hegglin anomália:
egy autosomalis dominánsan öröklődő, egy autosomalis dominánsan öröklődő, a fehérvérsejtekben látható un. Döhlea fehérvérsejtekben látható un. Döhle--szerűszerűtestekkel járó macrothrombocytopenia. testekkel járó macrothrombocytopenia.
EgyEgy családcsalád kétkét tagján,tagján, anyánanyán ésés fiánfián diagnosztizáltukdiagnosztizáltuk aa betegségetbetegségetésés észleltükészleltük aa társulótársuló veseérintettségetveseérintettséget
((DemeterDemeter J,J, LelkesLelkes G,G, �emes�emes L,L, KenézKenéz A,A, TurbuczTurbucz P,P, dede ChatelChatel RR:: FamilialFamilial
occurrenceoccurrence ofof MayMay--HegglinHegglin anomalyanomaly:: isis thethe accompanyingaccompanying renalrenal failurefailure partpart
ofof aa newnew subentity?subentity? AnnAnn HaematolHaematol 8080,, 368368--371371,, 20012001))..
2008.09.26.
54
1996-ban egy 41 éves nőbeteget vettünk fel klinikánkra magas láz miatt.Anamnézisében 1984-ben ITP dg-al (vélelmében) végzett splenektomia.Thrombocytaszám: 40 G/.
A perifériás vérkenetben óriásthrombocyták és fehérvérsejtek többségébenDöhle-szerű kék zárványteseket láttunk.
Elektronmikroszkóposan a zárványtestek párhuzamos filamentumokból állnak
2008.09.26.
55
AnyaAnya Beteg fiúgyermekBeteg fiúgyermek
Klinikai tünetekKlinikai tünetek Easy bruisingEasy bruising
Vérzési idő (Ivy)Vérzési idő (Ivy) Simplate II: 15 perc felettSimplate II: 15 perc felett
ThrombocytaThrombocyta
AutomatávalAutomatávalFKFK--MikroszkóppalMikroszkóppal
1616--39x1039x1099 /l/l3939--60x1060x1099 /l/l
2020--27x1027x1099 /l/l4040--43x1043x1099 /l/l
MPVMPV 11,511,5--12,212,2 1111--11,511,5
Thrombocyta morfológiaThrombocyta morfológia Óriás thrombocytákÓriás thrombocyták
Fvs morfológiaFvs morfológia Orsó alakú kék zárványtestekOrsó alakú kék zárványtestek
VesefunkcióVesefunkció Krónikus uraemiaKrónikus uraemia NormálisNormális
ProteinuriaProteinuria 2,72,7--3,5 g/die3,5 g/die 1,92 g/die1,92 g/die
AudiológiaAudiológia Súlyos retrocochleáris Súlyos retrocochleáris halláscsökkenéshalláscsökkenés
NormálisNormális
May-Hegglin anomáliában szenvedő betegeink klinikai adatai
Kék zárványtestek, un. DöhleKék zárványtestek, un. Döhle--szerű testek a betegek neutrophil granulocitáiban szerű testek a betegek neutrophil granulocitáiban (May(May--GrünwaldGrünwald--Giemsa)Giemsa)