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Versuch 10: MHK & MBK
02.03.2016
Martin Mackowiak
Praktikum Mikrobiologie 2016
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Versuchsziel
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
• Bestimmung von MHK und MBK verschiedener Desinfektionsmittel für Pseudomonas aeruginosa
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Definitionen
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
• Desinfektion (= Entseuchung) Selektive Abtötung bzw. irreversible Inaktivierung aller Krankheitserreger
• MHK (Minimale Hemmkonzentration) Niedrigste Konzentration, die das Auswachsen des Inokulums innerhalb von 18 + 2 h verhindert (bakteriostatisch oder bakterizid) • MBK (Minimale bakterizide Konzentration)
Niedrigste Konzentration, bei der 99,9 % der Bakterien des Inokulums abgetötet wurden
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Desinfektionsmittel
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
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Desinfektionsmittel
Praktikum Mikrobiologie 2015
02.03.2016 | Martin Mackowiak
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Testorganismus
Praktikum Mikrobiologie6
02.03.2016 | Martin Mackowiak
• Pseudomonas aeruginosa
o Ubiquitär in Boden und Wasser o Stäbchenförmig (2-4 µm) o Gram-negativ o Polar begeißelt o Nicht sporenbildend o Fakultativ pathogen (opportunistisch) o Auslöser systemischer oder lokaler, akuter oder chronischer Infektionen o Beispiele:
• Lungenentzündung • Cystische Fibrose (CF) • Entzündung von Haut und Bindegewebe, Mittelohr, etc.
http://www.pseudomonas.com/images/paeruginosa.jpg
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Durchführung MHK
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
• Am Arbeitsplatz: o Herstellung einer Bakteriensuspension (OD600 = 0,2 + 0,03) o Von dieser Suspension 100 µl in 10 ml 2x NB überführen o Erst dann zur Sterilbank kommen!
• An der Sterilbank: o Herstellung von Verdünnungsreihen der untersuchten Desinfektionsmittel
mit der Mehrkanalpipette
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Durchführung MHK
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
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Durchführung MHK
Praktikum Mikrobiologie 2016
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50 µL NaCl 100 µl
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Durchführung MHK
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
verwerfen
50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl
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Durchführung MHK
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
50 µL verd. Bakteriensuspension
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Zeitplan
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
Gruppen Durchführung MHK Auswertung MHK &
Durchführung MBK
Auswertung MBK
1 – 9 Mittwoch (Tag 3)
Donnerstag (Tag 4)
Freitag (Tag 5)
10 – 18 Donnerstag (Tag 4)
Freitag (Tag 5)
Montag (Tag 6)
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Zeitplan Mittwoch
Praktikum Mikrobiologie 2016
02.03.2016 | Martin Mackowiak
Uhrzeit Gruppe
10:30 1
10:55 2
11:20 3
11:45 4
12:45 5
13:10 6
13:35 7
14:00 8
14:25 9