Vežba broj 19

Određivanje leukocitarne formule u razmazu periferne krvi

Leukocitarna formula predstavlja procentualni odnos pojedinih vrsta leukocita u određenom uzorku krvi. Krvni razmaz se boji po Papenhajnu. Pojedini delovi ćelije oboje se različitim bojama: DNK jedra i RNK citoplazme se boje baznim bojama, dok se proteini citoplazme i hemoglobin oboje kiselim bojama (eozin). Obojeni razmazi posmatraju se na mikroskopu pod imerzijom (uveličanje 100x) i uz dodatak jedne kapi kedrovog ulja. Imerzija se uroni u kedrovo ulje da bi se snop svetlosti bolje prelamao. Za razliku od brojanja leukocita u komori gde koristimo veće okulare (10x), kod diferenciranja leukocita koristimo okulare 7. Prvo se počne diferenciranje leukocita od tanjeg kraja krvnog razmaza. Leukociti se diferenciraju u cik-cak liniji. Brojanje leukocita dužinom krvnog razmaza se obavlja od početka do kraja razmaza, sve dok se ne izbroji željeni broj. Ukoliko se broji u cik-cak pravcu radi se tako što se krvni razmaz pomera za dva mikroskopska polja unutar razmaza i četiri mikroskopska polja napred. Pri tome se svaki leukocit ubeleži na tabeli gde ima 10 kolona i u svaku kolonu beleži se 10 leukocita, tako da ukupno dobijemo 100.

Vrsta Leukocita I II III IV V VI VII VIII IX X %Štapićasti 0-5

Neutrofilni 40-65

Eozinofilni 2-4

Bazofilni 0-1

Limfociti 20-45

Monociti 4-8

Ukupno 100 Le

Izračunavanje vrednosti

Vrednosti mogu biti:1. relativne i2. apsolutne

I-način izračunavanja-Diferenciranjem leukocita dobijamo određenu vrstu leukocita u %. To su tzv. relativni brojevi. Izračunavanjem možemo dobiti i apsolutan broj, koji se može lako izračunati kada se % pojedinih vrsta leukocita pomnoži sa ukupnim brojem leukocita u 1 mm3 izraženim u stotinama ili pomoću formule:

Tako npr. ako u 1 mm3 ima 5000 (5,0x109/l) leukocita, onda apsolutni broj pojedinih leukocita iznosi:

- segmentovani (60%)

- eozinofilni (3%)

- bazofilni (1%)

Izraženo u SI jedinicama izgleda ovako:ako imamo:

- 3% eozinofila pišemo 0,03- 60% segmentovanih pišemo 0,60- 30% limfocita pišemo 0,30- 6% monocita pišemo 0,06- 1% bazofila pišemo 0,01

II-naćin izračunavanja

Npr.

Normalne vrednosti za pojedine parametre

Ćelija Od Do JedinicaŠtapićasti 0 5 %Segmentovani 45 70 %Eozinofilni 2 4 %Bazofilni 0 1 %Limfociti 20 45 %Monociti 4 8 %Referentne vrednosti se menjaju sa uzrastom.