veŽe iz iohemije - predavanja | goran poš, hptš · pdf filebiohemija vežbe 2...

HEMIJSKO-PREHRAMBENA I TEKSTILNA ŠKOLA „UROŠ PREDID“

CENTAR ZA OBRAZOVANJE ODRASLIH ZRENJANIN

VEŽBE IZ BIOHEMIJE za vanredne učenike

prilagođene programu biohemije za smer prehrambeni tehničar

2009.

Biohemija vežbe 1

HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin

Vežba 1 DOBIJANJE KOLOIDA I ZAŠTITNO DEJSTVO KOLOIDA

Dobijanje koloida iz visokodisperznih sistema agregacijom

Ogled br.1

Pribor i hemikalije

epruvete izvor svetlosti kartonska kutija sa uskim prorezom 10% rastvor FeCl3 destilovana voda

Postupak rada U prvu epruvetu sipati rastvor FeCl3, a u drugu destilovane vode. Epruvete

prosvetliti. Zatim epruvetu sa FeCl3 zagrevati, nakon zagrevanja ponovo prosvetliti. Zabeležiti zapažanja.

Zaključak

Ogled br.2

Pribor i hemikalije

epruvete izvor svetlosti kartonska kutija sa uskim prorezom 10% rastvor FeCl3 rastvor kalijum heksacijanoferata(II) K4[Fe(CN)6] destilovana voda

Postupak rada

U prvu epruvetu sipati rastvor FeCl3, a u drugu rastvor K4[Fe(CN)6], a u tredu destilovane vode. Sadržaje epruveta prosvetliti. Potom, sva tri rastvora pomešati i ponovo prosvetliti. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 2


Dobijanje koloida iz prirodnih koloida Ogled br.3

Pribor i hemikalije

epruvete izvor svetlosti kartonska kutija sa uskim prorezom skrob destilovana voda

Postupak rada

U epruvetu sipati 10 cm3 destilovane vode i na vrh kašikice skroba. Rastvor homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.4 Pribor i hemikalije

epruvete izvor svetlosti kartonska kutija sa uskim prorezom belance destilovana voda

Postupak rada

U epruvetu sipati 10 cm3 destilovane vode i malo rastvora belanceta. Rastvor homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 3


Ogled br.5 Pribor i hemikalije

epruvete izvor svetlosti kartonska kutija sa uskim prorezom mleko destilovana voda

Postupak rada

U epruvetu sipati 8 cm3 destilovane vode i 2 cm3 mleka. Rastvor homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Dobijanje koloida iz grubodisperznih sistema Ogled br.6

Pribor i hemikalije

epruvete izvor svetlosti kartonska kutija sa uskim prorezom sumpor destilovana voda

Postupak rada

U epruvetu sipati 10 cm3 destilovane vode i malo sumpora. Rastvor homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 4


Zaštitna dejstva koloida Ogled br.7

Pribor i hemikalije

plastična posuda mikser ulje destilovana voda žumance

Postupak rada

U plastičnu posudu odmeriti iste zapremine ulja i vode. Rastvor homogenizovati pomodu miksera. Nekoliko slededih minuta posmatrati promenu, a potom sistemu dodati malo žumanceta i sve homogenizovati mikserom. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 5


Vežba 2 UTICAJ SPOLJAŠNJIH FAKTORA NA AKTIVNOST ENZIMA Ogled br.1: Uticaj temperature na aktivnost enzima

Pribor i hemikalije

metalni novčid mašice izvor toplote (plamenik) krompir vodonik peroksid H2O2

Postupak rada

Odsedi kolut svežeg krompira, zagrejati novčid na plameniku i pritisnuti ga na sveži odrezak. Sačekati izvesno vreme i potom kanuti rastvor H2O2 na kolutid krompira. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.2: Uticaj kiselina na aktivnost enzima

Pribor i hemikalije

pipeta krompir razblažen rastvor hlorovodonične kiseline HCl razblažen rastvor sumporne kiseline H2SO4 razblažen rastvor sirdetne kiseline CH3COOH vodonik peroksid H2O2

Postupak rada

Odsedi tri koluta svežeg krompira i na svaki kolut do polovine pipetom naneti po jednu kiselinu. Sačekati izvesno vreme i kanuti na svaki kolut po kap H2O2. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 6


Ogled br.3: Uticaj baza na aktivnost enzima Pribor i hemikalije

pipeta krompir razblažen rastvor natrijum hidroksida NaOH razblažen rastvor kalijum hidroksida KOH razblažen rastvor amonijum hidroksida NH4OH vodonik peroksid H2O2

Postupak rada

Odsedi tri koluta svežeg krompira i na svaki kolut do polovine pipetom naneti po jednu bazu. Sačekati izvesno vreme i kanuti na svaki kolut po kap H2O2. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.4: Uticaj organskih supstanci na aktivnost enzima

Pribor i hemikalije

pipeta krompir etanol C2H5OH fenol C6H5OH benzen C6H6 vodonik peroksid H2O2

Postupak rada

Odsedi tri koluta svežeg krompira i na svaki kolut do polovine pipetom naneti po jednu bazu. Sačekati izvesno vreme i kanuti na svaki kolut po kap H2O2. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 7


Vežba 3 KVALITATIVNO DOKAZIVANJE UGLJENIH HIDRATA Ogled br.1: Ispitivanje rastvorljivosti ugljenih hidrata

Pribor i hemikalije

epruvete rastvor glukoze rastvor fruktoze rastvor saharoze rastvor skroba etanol destilovana voda

Postupak rada

Uzeti 4 epruvete i u njih sipati po 1 cm3 svakog od gore navedenih rastvora ugljenih hidrata. U sve epruvete dodati po 1 cm3 destilovane vode, promudkati sadržaj svih epruveta i po potrebi zagrejati. Na isti način ispitati rastvorljivost u etanolu, ali bez zagrevanja. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.2: Reakcija ugljenih hidrata sa Feling- i Tolens-rastvorima

Pribor i hemikalije

epruvete vodeno kupatilo izvor toplote rastvor glukoze rastvor fruktoze rastvor saharoze rastvor skroba rastvori Feling I i II Tolens-ov reagens

Biohemija vežbe 8


Postupak rada Uzeti 4 epruvete i u njih sipati po 1 cm3 svakog od gore navedenih

rastvora ugljenih hidrata. U sve epruvete dodati po 1 cm3 rastvora Feling I i II i epruvete promudkati. Sadržaj epruveta zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje. Na isti način ispitati dejstvo Tolens-ovog reagensa na naveden rastvore u druge 4 epruvete. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.3: Dokazivanje glukoze i fruktoze u medu

Pribor i hemikalije

epruveta čaša izvor toplote rastvor meda rastvori Feling I i II

Postupak rada Sipati u epruvetu po 1 cm3 rastvora Feling I i II i dodati 1 cm3 rastvora

meda. Sadržaj epruvete zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 9


Ogled br.4: Dokazivanje glukoze u vodu Pribor i hemikalije

epruveta čaša avan sa tučkom izvor toplote jabuka rastvori Feling I i II

Postupak rada U avanu sa tučkom isitniti krišku jabuke i iscediti malo soka u

epruvetu. Dodati po 1 cm3 rastvora Feling I i II, a potom sadržaj epruvete zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.5: Hidroliza saharoze

Pribor i hemikalije

epruveta čaša izvor toplote rastvor saharoze rastvori Feling I i II razblažena sumporna kiselina, H2SO4 čvrst natrijum hidrokarbonat, NaHCO3

Postupak rada

Sipati u epruvetu 3 cm3 rastvora saharoze i 1 cm3 razblažene H2SO4. Sadržaj epruvete zagrevati na vodenom kupatilu 15 minuta. Nakon toga sadržaju dodati čvrst NaHCO3 i po 1 cm3 rastvora Feling I i II, a potom sadržaj epruvete zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje. Zabeležiti zapažanja.

Biohemija vežbe 10


Zaključak Ogled br.6: Dokazivanje skroba u krompiru i hlebu

Pribor i hemikalije

krompir komadid hleba rastvor joda u kalijum jodidu, I2/KI

Postupak rada

Rasedi krompir i sipati nekoliko kapi rastvora joda. Isto to uraditi i na komadidu hleba. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.7: Hidroliza skroba pomodu kiselina

Pribor i hemikalije

epruvete čaša izvor toplote rastvor skroba rastvor konc. sumporne kiseline, H2SO4 rastvor joda u kalijum jodidu, I2/KI razblaženi rastvor NaOH rastvori Feling I i II

Biohemija vežbe 11


Postupak rada U čašu sipati 25 cm3 rastvora skroba i 2 cm3 H2SO4. Dobijeni rastvor

podeliti na pet jednakih delova u pet epruveta. Svih 5 epruveta zagrevati na vodenom kupatilu i u određenom vremenskom intervalu izvaditi po jednu epruvetu i ispitivati Feling rastvorom, a potom i rastvorom joda. Zabeležiti zapažanja i popuniti tabelu. Zaključak

Vreme boja rastvora

skrob I2/KI

2 min

5 min

8 min

12 min

20 min

Biohemija vežbe 12


Vežba 4 BOJENE I TALOŽNE REAKCIJE PROTEINA Ogled br.1: Biuretska reakcija

Pribor i hemikalije

epruveta rastvor belanceta 1% rastvor bakar sulfata, CuSO4 10% rastvor NaOH

Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i dodati 2 cm3 rastvora NaOH i nekoliko kapi rastvora CuSO4. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.2: Ksantoproteinska reakcija

Pribor i hemikalije

epruveta rastvor belanceta konc. azotna kiselina, HNO3 amonijum hidroksid, NH4OH

Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i dodati 2 cm3 rastvora HNO3 i nekoliko kapi rastvora NH4OH. Sadržaj epruvete pažljivo zagrevati, potom epruvetu ohladiti i dodati još nekoliko kapi NH4OH. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 13


Ogled br.3: Taloženje proteina zagrevanjem Pribor i hemikalije

epruveta izvor toplote rastvor belanceta

Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i sadržaj epruvete zagrevati plamenikom. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.4: Taloženje proteina pomodu natrijum sulfata

Pribor i hemikalije

epruveta rastvor belanceta čvrst natrijum sulfat, Na2SO4

destilovana voda Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i na vrh kašikice Na2SO4. Sadržaj epruvete dobro promudkati, a potom dodati malo destilovane vode. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 14


Ogled br.5: Taloženje proteina pomodu konc. azotne kiseline Pribor i hemikalije

epruveta rastvor belanceta konc. azotna kiselina, HNO3

Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta. Epruvetu postaviti koso, pa pažljivo niz zid epruvete pipetom dodati nekoliko kapi HNO3 (vodedi računa da se slojevi ne izmešaju). Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.6: Taloženje proteina solima teških metala

Pribor i hemikalije

epruvete rastvor belanceta rastvor olovo acetata, Pb(CH3COO)2

rastvor bakar sulfata, CuSO4 rastvor živa(II)hlorida, HgCl2

destilovana voda

Postupak rada U tri epruvete sipati po 2 cm3 rastvora belanceta. Dodati potom u

prvu nekoliko kapi (CH3COO)2, u drugu CuSO4 i u tredu HgCl2. Epruvete promudkati i zabeležiti zapažanja. Dodati destilovane vode i zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 15


Ogled br.7: Taloženje proteina alkoholom Pribor i hemikalije

epruveta rastvor belanceta etanol 96%

čvrst natrijum hlorid, NaCl Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i 5 cm3 etanola. Sadržaj epruvete promudkati, a zatim dodati na vrh kašikice čvrstog NaCl i ponovo promudkati. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Ogled br.8: Dokazivanje sumpora u belančevinama

Pribor i hemikalije

epruveta rastvor belanceta konc. rastvor NaOH (33%)

rastvor olovo acetata, Pb(CH3COO)2 Postupak rada

Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta, 2 cm3 NaOH i nekoliko kapi olovo acetata. Sadržaj epruvete promudkati, a zatim zagrevati plamenikom nekoliko minuta. Zabeležiti zapažanja. Zaključak

Biohemija vežbe 16


Vežba 5 ODREĐIVANJE IZOELEKTRIČNE TAČKE KAZEINA

Kazein je glavni protein mleka iz grupe fosfoproteina, prisutan je u koncentraciji od 35 g/l. Za proteine je karakteristično da pokazuju minimalnu rastvorljivost na svojoj izoelektričnoj tački. Ova osobina se koristi pri izolaciji proteina.

Izolovanje kazeina iz mleka

U erlenmajer sipati 100 cm3 mleka, zatim, zagrevati do 40oC, dodati uz mešanje 100 cm3 acetatnog pufera (smeša sirdetne kiseline i natrijum acetata). Smešu potom ohladiti do sobne temperature i procediti je kroz gazu. Talog ispirati nekoliko puta destilovanom vodom, a zatim sa 30 cm3 etanola. Talog ponovo filtrirati i ispirati sa mešavinom jednakih delova etanola i etra i na kraju sa 50 cm3 etra. Dobijeni talog osušiti na vazduhu. Određivanje izoelektrične tačke kazeina

Pribor i hemikalije 0.1M rastvor sirdetne kiseline, CH3COOH 0.1M rastvor natrijum acetata, CH3COONa bromkrezol zeleno (indikator) rastvor kazeina

Pripremanje rastvora kazeina

Odmeriti 0.2g kazeina i preneti u normalni sud od 50 cm3, dodati 5 cm3 rastvora CH3COONa i oko 10 cm3 destilovane vode. Smešu zagrevati na temperaturi od 40 do 50oC na vodenom kupatilu. Nakon toga, smešu ohladiti i dopuniti do 50 cm3 destilovanom vodom.

Postupak rada Uzeti 5 epruveta i prema datoj šemi pripremiti rastvore slededih pH vrednosti:

Epruveta V(CH3COOH)

cm3 V(CH3COONa)

cm3 V kazeina

cm3 pH

vrednost

1 9 0 1 3.8

2 7 2 1 4.4

3 5 4 1 4.7

4 3 6 1 5.1

5 1 8 1 5.7

Biohemija vežbe 17


Posle dodatka kazeina svaku epruvetu promudkati i ostaviti da stoji 5 minuta. Zabeležiti u kojim epruvetama je došlo do zamudenja i stvaranja taloga. Dodati potom, u sve epruvete 2 do 3 kapi indikatora i dobijene boje uporediti sa pH skalom.

Zaključak

veŽe iz iohemije - predavanja | goran poš, hptš · pdf filebiohemija vežbe 2...

Documents