CÔNG TY TNHH DP & TTB Y Tế Hoàng Nhật Minh Chuẩn đoán sớm bệnh Sốt Xuất Huyết

Dengue NS1 Antigen Một thử nghiệm miễn dịch nhanh để phát hiện lượng kháng nguyên của virus Dengue NS1 trong máu

toàn phần/ huyết thanh/ huyết tương người.

Chỉ sử dụng trong xét nghiệm chuẩn đoán

SỬ DỤNG MỤC ĐÍCH

Unimed FirstSignTM – Dengue NS1 Ag Test là một xét nghiệm miễn dịch định tính trong ống nghiệm để phát hiện nhanh kháng nguyên Virus Dengue NS1 trong máu toàn phần/huyết thanh/huyết tương người. Kết quả kiểm tra được dùng để hỗ trợ trong chẩn đoán bệnh sốt xuất huyết cấp tính..

GIỚI THIỆUBệnh sốt xuất huyết là một trong những bệnh quan trọng nhất trên thế giới do muỗi gây ra trong sự hoành hành của bệnh tật, tử vong. Virus sốt xuất huyết (có 4 tuýp huyết thanh là 1,2,3,4) thuộc về nhóm flavivirus, và được truyền trong tự nhiên qua muỗi Aedes aegyptivà Aedes albopictus lưu hành rộng rãi trong các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới của thế giới. Quan trọng nhất của muỗi là được thuần hóa cao ở đô thị, muỗi vằn Aedes aegypti, sự nhiễm trùng sốt xuất huyết nguyên phát, còn được gọi là Sốt xuất huyết, là loại phổ biến nhất của bệnh sốt xuất huyết. Nó gắn liền với mức độ nhẹ đến sốt cao, đau đầu, đau cơ và phát ban da. Nhiễm trùng thứ cấp được biết như sốt xuất huyết (DHF) hoặc Hội chứng sốc Sốt xuất huyết, và thường sốt cao và trong nhiều trường hợp, với sự xuất huyết và suy tuần hoàn. Tỷ lệ tử vong ở bệnh nhân Hội chứng sốc sốt xuất huyết có thể cao đến 44%. Bệnh sốt xuất huyết thường thể hiện là một cơn sốt đột ngột kèm với đau đầu, đau ở lưng và chân tay nổi hạch và phát ban . Bệnh nhân được chẩn đoán sốt xuất huyết trong các vùng dịch tễ thường có nhiễm trùng thứ phát, trong khi bệnh nhân ở những vùng không dịch tễ thường được chẩn đoán nhiễm trùng tiên phát. Phản ứng kháng thể đặc hiệu với virus Bệnh sốt xuất huyết cho phép chuẩn đoán huyết thanh học và sự khác biệt giữa nhiễm sốt xuất huyết nguyên phát và thứ phát.

Bệnh sốt xuất huyết NS1 (phi cấu trúc protein I) là một glycoprotein bảo tồn cao. Kháng nguyên NS1 đã được tìm thấy trong các mẫu của bệnh nhân bị nhiễm bệnh từ ngày đầu tiên lên đến ngày thứ 9 sau khi khởi phát sốt. Việc phát hiện kháng nguyên NS1 để chẩn đoán sớm bệnh sốt xuất huyết trước khi kháng thể huyết thanh học được phát hiện. Do đó, nó có thể giúp các bệnh nhân được chẩn đoán và điều trị kịp thời

NGUYÊN TẮC THỬ NGHIỆMFirstSignTM - Dengue NS1 Ag Test là một thử nghiệm sắc ký miễn dịch một bước. Khi mẫu được thêm vào thanh màng nó di chuyển qua màng cộng hợp, (thanh màng được phủ trước với nguyên liệu bắt giữ là kháng thể kháng kháng nguyên  Dengue NS1 trên vùng vạch thử.) Hỗn hợp này di chuyển dọc theo màng và phản ứng với kháng thể kháng nguyênNS1 được phủ trên vùng thử nghiệm. Nếu NS1 hiện diện, kết quả là sự hình thành của một vạch màu ở khu vực thử nghiệm. Nếu không có NS1 trong mẫu, khu vực này sẽ khôngxuất hiện vạch màu. Mẫu tiếp tục di chuyển đến khu vực kiểm soát và tạo thành vạch màu hồng sang màu tím, cho thấy các thử nghiệm đang phản ứng và kết quả hợp lệ.

CÁC NGUYÊN VẬT LIỆU ĐƯỢC CUNG CẤP1. Dụng cụ thử nghiệm Dengue NS1 Ag Mỗi cassette chứa một dải kiểm tra với kháng thể đặc hiệu NS1 trên khu vực thử nghiệm của lớp màng và màu kháng nguyênNS1 kháng thể - liên hợp vàng.

Trang 1

CÔNG TY TNHH DP & TTB Y Tế Hoàng Nhật Minh Chuẩn đoán sớm bệnh Sốt Xuất Huyết

2. Hướng dẫn sử dụng3. Pipet hút mẫu

VẬT LIỆU KHÔNG CUNG CẤP1. Dụng cụ để chứa mẫu bệnh nhân.2. Đồng hồ bấm giờ

BẢO QUẢN VÀ TÍNH ỔN ĐỊNHCác túi niêm phong trong các bộ thử nghiệm có thể được lưu trữ ở nhiệt độ từ 4-30oC trong thời hạn sử dụng ghi trên túi.

THẬN TRỌNG1. Bộ Kit này chỉ sử dụng cho chuẩn đoán IN VITRO.2. Bộ kit này chỉ sử dụng CHUYÊN NGHIỆP.3. Đọc hướng dẫn kỹ trước khi thử nghiệm.4. Sản phẩm này không chứa bất cứ thành phần có nguồn gốc của người.5. Không sử dụng các thành phần trong bộ kit sau ngày hết hạn.6. Xử lý tất cả các mẫu vật có nguy cơ lây nhiễm.7. Theo quy trình tiêu chuẩn của phòng thí nghiệm và an toàn sinh học kẻ thù bàn giao và xử lý hóa chất có khả năng lây nhiễm. Khi các thủ tục kiểm nghiệm được hoàn tất, xử lý mẫu vật sau khi hấp họ ở 121oC trong ít nhất 20 phút. Ngoài ra, họ có thể được điều trị bằng 0,5% Sodium Hipochlorite cho 1-2 giờ trước khi xử lý.8. Không pipette thuốc thử bằng miệng và không hút thuốc oe ăn uống trong khi thực hiện xét nghiệm.9. Đeo găng tay trong toàn bộ thủ tục.

THU MẪU VÀ CHUẨN BỊ

1. Huyết thanh, máu toàn phần/mẫu huyết tương nên được thu thập dưới điều kiện phòng thí nghiệm tiêu chuẩn.

2. Không lấy mẫu bệnh nhân trước khi có yêu cầu. Việc thu thập mẫu bằng các kỹ thuật đã được phê duyệt.

3. Thử nghiệm hoạt động tốt nhất trên toàn bộ các mẫu máu / huyết thanh / huyết tương tươi. Nếu xét nghiệm không thể thực hiện ngay lập tức, huyết thanh / huyết tương có thể được bảo quản ở 2-8oC đến 3 ngày trong trường hợp chưa thử nghiệm. Để lưu trữ mẫu lâu dài, mẫu huyết thanh / huyết tương có thể được đông lạnh ở-20oC trong vòng 3 tháng hoặc-70oC trong khoảng thời gian lâu hơn. Tránh sự lặp lại của việc đóng băng và tan băng của mẫu. Natri azit có thể được thêm vào như là một chất bảo quản lên đến 0,1% mà không ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.

Tiến Hành:

1. Mang bịch chứa kit ra ngoài để ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.

2. Mở bịch lấy test ra ngoài và phải được sử dụng ngay.

3. Dán ký hiệu hoặc tên bệnh nhân lên test.

4. Dùng transfer pipet (cung cấp kèm) hút mẫu thử

5. Nhỏ 3-4 giọt (120-160µl) mẫu thử vào ô “S” trên test

6. Đọc kết quả tại 20 phút ( nếu mẫu dương tính (+) thì kết quả hiển thị nhanh hơn.

(Chú ý: Sau 20 phút kết quả sẽ không chính xác)

Trang 2

CÔNG TY TNHH DP & TTB Y Tế Hoàng Nhật Minh Chuẩn đoán sớm bệnh Sốt Xuất Huyết

Bước 1,2,3 Bước 4 Bước 5 Bước 6

CÁCH ĐỌC KẾT QUẢ:

1. Mẫu dương tính (+) trên cửa sổ đọc kết quả xuất hiện 2 vạch màu hồng tại vạch T và Vạch C

2. Mẫu âm tính (-) trên cửa sổ đọc kết quả chỉ xuất hiện 1 vạch màu hồng tại vách C .

3. Kết quả sai, sau 20 phút mà các vạch trên cửa sổ đọc kết quả không xuất hiện vạch nào hoặc chỉ xuất hiện 1

vạch màu hồng tại vạch T.

QUẢN LÝ CHẤT LƯỢNG1. Băng tần kiểm soát là một thuốc thử nội bộ và kiểm soát thủ tục. Nó sẽ xuất hiện nếu thử nghiệm đã được

thực hiện một cách chính xác và các thuốc thử đang phản ứng.2. Thực hành phòng thí nghiệm tốt đề nghị sử dụng hàng ngày của vật liệu kiểm soát để chứng thực độ tin cậy

của dụng cụ. Một vật liệu kiểm soát mà không được cung cấp với bộ thử này có thể được thương mại hóa.

NHỮNG HẠN CHẾ

1. Thử nghiệm là để phát hiện định tính về Dengue NS1 và / hoặc kháng thể kháng sốt xuất huyết trong máu, huyết thanh hoặc mẫu huyết tương và không chỉ ra số lượng các phân tích.2. Thử nghiệm chỉ sử dụng chẩn đoán trong ống nghiệm.3. Một kết quả xét nghiệm âm tính không thể loại trừ một nhiễm trùng gần đây.4. Phổ biến có phản ứng huyết thanh chéo trong nhóm Flavivirus, chẳng hạn như virus sốt xuất huyết, viêm não Nhật Bản, viêm não tick-borne, virus sốt vàng và virus West Nile.5. Trong tất cả các trường hợp chẩn đoán, chẩn đoán lâm sàng không chỉ dựa trên một kết quả thử nghiệm duy nhất mà phải được kết hợp với tất cả các biểu hiện lâm sàng.

GIÁ TRỊ MONG ĐỢI

Trang 3

CÔNG TY TNHH DP & TTB Y Tế Hoàng Nhật Minh Chuẩn đoán sớm bệnh Sốt Xuất Huyết

Sốt xuất huyết NS1 kháng nguyên có thể lưu hành trong máu của con người từ ngày 1 đến ngày thứ 9 sau khi bắt đầu sốt. Tuy nhiên, mức độ kháng nguyên giảm xuống nhanh chóng với mức độ tăng cao của kháng thể.

ĐẶC ĐIỂM THỰC HIỆN1. Độ nhạy. Trong bảng có 51 mẫu nghi ngờ nhiễm bệnh sốt xuất huyết sớm, kết quả xét nghiệm được tóm tắt như sau.

Số mẫu NS1 IgM IgG Tỷ lệ phần trăm17 Dương tính Âm tính Âm tính 33.3%14 Dương tính Dương tính Âm tính 25.9%5 Dương tính Âm tính Dương tính 9.8%4 Dương tính Dương tính Dương tính 7.8%1 Âm tính Dương tính Âm tính 2.0%4 Âm tính Âm tính Dương tính 7.8%1 Âm tính Dương tính Dương tính 2.0%5 Âm tính Âm tính Âm tính 9.8%

33,3% mẫu cho thấy kết quả NS1dương tính trước khi có thể phát hiện kháng thể. Điều đó chứng minh rằng thử

nghiệm NS1 có thể giúp phát hiện bệnh sốt xuất huyết trong khoảng thời gian bị nhiễm bệnh khi kháng thể

chưa tăng lên mức phát hiện. Với một mình NS1, tỷ lệ dương tính là 78,4%. Với xét nghiệm kháng thể, tổng tỷ

lệ dương tính tăng lên đến 90,2%. Nó chứng minh rằng sự kết hợp của cả hai xuất huyết NS1 và xét nghiệm

kháng thể có thể tăng cường độ nhạy của bệnh sốt xuất huyết sớm.

2. Độ đặc hiệu

Tổng cộng có 79 mẫu của các nhà tài trợ máu tốt đã được thử nghiệm. Kết quả kiểm tra được tóm tắt như sau.

Loại mẫu Số lượng mẫu Âm Tính Dương Tính Độ đặc hiệu

Huyết thanh 31 31 0 100%Huyết tương 28 28 0 100%

Máu toàn phần 20 20 0 100%Độ đặc hiệu với các mẫu của nhà tài trợ máu tốt được thử nghiệm là 100%.

3. Can thiệp

Các hợp chất được liệt kê dưới đây với nồng độ nêu không ảnh hưởng kết quả xét nghiệm.

Acetaminophen 136µg/mLAlbumin 47 mg/mLBilirubin 7.40 mg/mLCholesterol 260 mg/mLCreatinine 6.90 mg/mLDigoxin 3.00 ng/mLEthanol 2.10 mg/mLGlucose 3.90 mg/mLImmunoglobin A 2.20 mg/mLImmunoglobin G 10.00 mg/mLImmunoglobin M 1.10 mg/mLTotal Protein 70.40 mg/mLTriglycerides 1.90 mg/mLUrea nitrogen 700 µg/mLUrie acid 92 µg/mL

Trang 4