zakresy temperatur życia bakterii -...
TRANSCRIPT
![Page 1: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/1.jpg)
Listeria monocytogenesListeria monocytogenes
![Page 2: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/2.jpg)
Klasyfikacja
Domena Bacteria
Typ Firmicutes
Klasa Bacilli
Rząd Bacillales
Rodzina Listeriaceae
Rodzaj Listeria
Brochothrix
![Page 3: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/3.jpg)
Rodzaj Listeria
Listeria monocytogenes
Listeria ivanovii
Listeria innocua
Listeria welshimeri
Listeria seeligeri
Listeria grayi
Listeria marthii
Klasyfikacja
Listeria rocourtiaeListeria weihenstephanensisListeria fleischmanniiListeria aquatica Listeria floridensisListeria cornellensis Listeria grandensis Listeria ripariaListeria booria
![Page 4: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/4.jpg)
Organizm Patogenność Liczba chromosomów
Zawartość
% GC
Rozmiar
(Mb)
Geny Białka
L.monocytgenes EGD-e patogenny dla ludzi i zwierząt
1 38 2.94 2.940 2.846
L. innocua
ATCC 33091
niepatogenny 1 37.4 2.89 2.983 2.938
L. ivanovii patogenny - głównie dla
zwierząt
1 37.1 2.93 2.889 2.650
L.seeligeri serovar 1/2b
Str SLCC3954
niepatogenny 1 37.4 2.8 2.807 2.710
L. welshimeri
serovar 6b
Str SLCC5334
niepatogenny 1 36.4 2.81 2.864 2.774
L. grayi DSM 20601 niepatogenny 1 41.6 2.59 2.690 2.625
L. marthii FSLS4-120 niepatogenny 1 38.6 2.88 2.969 2.963
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genome/
![Page 5: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/5.jpg)
0.5 – 2 μm długości, 0.4 - 0.5 μm szerokości
regularne, nieprzetrwalnikujące, gramdodatnie pałeczki wykazujące tendencję do polimorfizmu
względnie tlenowa
nie wytwarza otoczek
Charakterystyka L. monocytogenes
![Page 6: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/6.jpg)
katalazo-dodatnia, oksydazo-ujemna
posiada od 2 do 6 perytrychalnie ułożonych rzęsek
zdolność ruchu w wąskim zakresie temp. 20 - 25 C; w temp. 37 C – nieruchliwa
na agarze z krwią wytwarza wąską strefę β – hemolizy
Charakterystyka L. monocytogenes
![Page 7: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/7.jpg)
Warunki wzrostu
![Page 8: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/8.jpg)
Występowanie L. monocytogenes
gleba
przewody pokarmowe wielu gatunków zwierząt domowych
dzikich
wody powierzchniowe
ścieki
gnijące szczątki roślin
kiszonki
2-10% zdrowych ludzi jest nosicielami
![Page 9: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/9.jpg)
surowce pochodzenia zwierzęcego i roślinnego oraz produkty spożywcze:
1. surowe mleko
2. przetwory mleczne: sery (sery miękkie maziowe i pleśniowe), lody,
masło
3. surowe mięso (wołowe, drobiowe, wieprzowe)
4. przetwory mięsne: surowe i półsurowe kiełbasy,
próżniowo pakowane wędliny
5. świeże oraz mrożone warzywa i owoce
6. ryby, owoce morza
środowisko zakładów przetwórstwa spożywczego szczególnie w miejscach chłodnych i wilgotnych
przedmioty codziennego użytku (ścierki do naczyń, zlewozmywaki, chłodziarki, wanny)
![Page 10: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/10.jpg)
Listerioza
U zwierząt około 90% zachorowań na listeriozę jest spowodowane przez L. monocytogenes, a 10% przez L. ivanovii.
U człowieka prawie wszystkie przypadki listeriozy wywołuje L. monocytogenes, rzadko L. seeligeri i L. ivanovii.
![Page 11: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/11.jpg)
przewód pokarmowy
uszkodzona skóra
błony śluzowe układu oddechowego
spojówki
łożysko
Wrota zakażenia u ludzi
![Page 12: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/12.jpg)
Układ pokarmowy – główne wrota wnikania L. monocytogenes do organizmu gospodarza
Po przełamaniu bariery przewodu pokarmowego, bakterie wędrują wraz z krwią i limfą do węzłów chłonnych, śledziony i wątroby.
W wątrobie, gdzie występuje najliczniej, większość niszczona jest przez makrofagi, a tylko część namnaża się w hepatocytach.
Z wątroby może przedostać się do krwi (bakteriemia), prowadząc do posocznicy lub do inwazji mózgu lub łożyska.
![Page 13: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/13.jpg)
Grupa ryzyka
Kobiety w ciąży
Noworodki
Osoby o obniżonej odporności układu immunologicznego
Osoby zaawansowane wiekowo (> 65 lat)
![Page 14: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/14.jpg)
Listerioza u człowieka charakteryzuje się zmianami chorobowymi o
różnym umiejscowieniu.
Występują cztery postacie kliniczne choroby:
1) postać żołądkowo-jelitowa
2) płodowa
2) posocznica noworodków
3) zakażenie ośrodkowego układu nerwowego charakteryzujące
się zapaleniem mózgu, zapaleniem mózgu i opon mózgowych
Zakażenia u ludzi wywoływane przez L. monocytogenes
![Page 15: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/15.jpg)
Zakażenia u ludzi wywoływane przez L. monocytogenes
Łagodny nieżyt żołądkowo-jelitowy
(ang. listerial gastroenteritis)
Objawy zakażenia - dolegliwości ze strony przewodu pokarmowego: dreszcze, bóle głowy, bóle brzucha, nudności, biegunka, bóle mięśni, wymioty, zmęczenie.
![Page 16: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/16.jpg)
Ostra infekcja (ang. invasive listeriosis)
kobiety w ciąży - infekcja manifestująca się łagodnymi objawami klinicznymi przypominającymi grypę (podwyższona temperatura, bóle głowy, bóle mięśni) lub zapalenie dróg moczowych
noworodki: listerioza wczesna – sepsa ujawniająca się bezpośrednio po urodzeniu lub w pierwszym tygodniu życia (śmiertelność 15-50%) listerioza późna – objawy pojawiają się zwykle pomiędzy 8 a 30 dniem życia i jest to zwykle zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych (śmiertelność 10-20%)
![Page 17: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/17.jpg)
osoby o obniżonej odporności immunologicznej i osoby starsze – zakażenie ośrodkowego układu nerwowego (zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych) lub zakażenie ogólne z typowymi objawami posocznicy. Rzadziej występuje porażenie nerwów czaszkowych i ropnie mózgu. Często zmianom w ośrodkowym układzie nerwowym towarzyszą zaburzenia psychiczne, a u około 25% pacjentów ataki padaczkowe.
inne możliwe powikłania to: ropnie gałki ocznej, zapalenie wsierdzia, zapalenie i ropnie wątroby, zapalenie otrzewnej, zapalenie żołądka i jelit, infekcje skórne i szkieletowe.
![Page 18: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/18.jpg)
Antybiotykoterapia listeriozy
Lekiem skutecznym w alternatywnym leczeniu, szczególnie u chorych wykazujących alergię na β–laktamy, jest trimetoprim w połączeniu z sulfonamidami, takimi jak sulfametoksazol (tzw. kotrimoksazol) lub erytromycyna.
W leczeniu bakteriemii u kobiet w ciąży z powodzeniem stosuje się wankomycynę i erytromycynę.
![Page 19: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/19.jpg)
EFSA Journal, 2015; 13(12):4329
![Page 20: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/20.jpg)
![Page 21: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/21.jpg)
EFSA Journal, 2015; 13(12):4329
Liczba hospitalizacji i śmiertelność spowodowana przez czynniki zoonotyczne w 2104 r.
![Page 22: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/22.jpg)
Rozdział 1. Kryteria bezpieczeństwa żywności
Rozporządzenie Komisji (WE) nr 2073/2005 z dnia 15 listopada 2005 r. w sprawie kryteriów mikrobiologicznych dotyczących środków spożywczych
![Page 23: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/23.jpg)
Symbole oznaczają: n - liczba próbek pobranych do badańm - wartość równa lub poniżej której wszystkie wyniki uznawane są za zadowalająceM - wartość maksymalna liczby drobnoustrojów. Wynik jest niezadowalający, jeśli liczba drobnoustrojów w jednej lub kilku próbkach ma wartość M lub ją przekracza.c - liczba próbek, w których dopuszcza się liczbę drobnoustrojów pomiędzy m i M. Wynik jest zadowalający jeśli liczba drobnoustrojów w pozostałych próbkach ma wartość m lub niższą.
![Page 24: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/24.jpg)
Według prawa UE (EG) nr 2073/2005 producent musi badać różne artykuły spożywcze w obszarze produkcji na obecność patogenów, np. L. monocytogens.
Metody EN ISO oparte na hodowli są wyraźnie przywołane w tym prawie. Jednakże uzyskanie wyniku ujemnego może wymagać > 4 dni (dla L. monocytogenes).
(EG) nr 2073/2005 dopuszcza również zastosowanie metod alternatywnych, jeżeli ich walidacja w stosunku do metod ISO zapewnia równoważne wyniki.
![Page 25: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/25.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczne
znormalizowane metody PN ISO*
(International Organization for Standarization)
uznane urzędowo
identyfikacja drobnoustrojów do poziomu rodzaju i/lub gatunku
![Page 26: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/26.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczne
ICS: 07.100.30. Mikrobiologia żywności
PN-EN ISO 7218:2008Mikrobiologia żywności i pasz. Wymagania ogólne i zasady badań mikrobiologicznych.
PN-EN ISO 7218:2008/A1:2013-10 (oryg.)
PKN-CEN ISO/TS 11133-1:2009 Mikrobiologia żywności i pasz. Wytyczne dotyczące przygotowania i wytwarzania pożywek. Część 1: Ogólne wytyczne dotyczące kontroli jakości pożywek przygotowywanych w laboratorium.
ISO/TS 11133-2:2003/A1:2011Microbiology of food and animal feeding stuffs. Guidelines on preparation and production of culture media. Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media
![Page 27: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/27.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczneICS: 07.100.30. Mikrobiologia żywności PN-EN ISO 6887-1:2000 Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek, zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych do badań mikrobiologicznych. Ogólne zasady przygotowania zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych.
PN-EN ISO 6887-2:2005 Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek, zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych do badań mikrobiologicznych. Część 2: Specyficzne zasady przygotowania mięsa i przetworów mięsnych.PN-EN ISO 6887-3:2005 Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek, zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych do badań mikrobiologicznych. Część 3: Specyficzne zasady przygotowania ryb i przetworów rybnych.PN-EN ISO 6887-4:2005Mikrobiologia żywności i pasz -- Przygotowanie próbek, zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych do badań mikrobiologicznych. Część 4: Specyficzne zasady przygotowania produktów innych niż mleko i przetwory mleczne, mięso i przetwory mięsne oraz ryby i przetwory rybne.
![Page 28: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/28.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczne
ICS: 07.100.30. Mikrobiologia żywności
PN-EN ISO 7932:2005 Mikrobiologia żywności i pasz. Horyzontalna metoda oznaczania liczby przypuszczalnych Bacillus cereus. Metoda liczenia kolonii w temperaturze 30 stopni C.
PN-EN ISO 10272-1:2007 Mikrobiologia żywności i pasz. Horyzontalna metoda wykrywania obecności i oznaczania liczby Campylobacter spp. Część 1: Metoda wykrywania.
PN-EN ISO 13720:2010 (oryg.)Mięso i przetwory mięsne. Oznaczanie liczby przypuszczalnych Pseudomonas sp.
![Page 29: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/29.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczne
ICS:71.100.70 Kosmetyki. Środki higieny osobistej
PN-EN ISO 21148:2009 (oryg.)Kosmetyki – Mikrobiologia. Ogólne wytyczne badań mikrobiologicznych
PN-EN ISO 11930:2012 (oryg.)Kosmetyki - Mikrobiologia. Test skuteczności i ocena zakonserwowania produktów kosmetycznych
PN-EN ISO 16212:2011(oryg.) Kosmetyki-Mikrobiologia. Oznaczenie liczby drożdzy i pleśni.
PN-EN ISO 18416:2009 (oryg.)Kosmetyki-Mikrobiologia. Wykrywanie Candida albicans
![Page 30: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/30.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczne
ICS: 07.100.20 - Mikrobiologia wody
PN-EN ISO 8199:2010 Jakość wody. Ogólne wytyczne oznaczania liczby bakterii metodą hodowli
PN-EN ISO 7899-1:2002 Jakość wody. Wykrywanie i oznaczanie ilościowe enterokoków kałowych. Część 1: Zminiaturyzowana metoda do badania wód powierzchniowych i ścieków (najbardziej prawdopodobna liczba bakterii)
PN-EN ISO 7899-2:2004 Jakość wody. Wykrywanie i oznaczanie ilościowe enterokoków kałowych. Część 2: Metoda filtracji membranowej
![Page 31: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/31.jpg)
Konwencjonalne metody mikrobiologiczne
namnożenie drobnoustrojów na odpowiednich podłożach
namnażająco-wybiórczych (metody jakościowe)
analiza wielu cech morfologicznych, biochemicznych czy
serologicznych bakterii, które wyrosły w postaci kolonii
na podłożach agarowych
![Page 32: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/32.jpg)
PN-EN ISO 11290-1:1999+A1:2005
![Page 33: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/33.jpg)
Bulion pół-Frasera i Frasera - podłoża do selektywnego namnażania Listeria sp. Oprócz składników odżywczych (peptony, ekstrakty) zawierają eskulinę i chlorek litu. Do podłoża po sterylizacji wprowadzany jest roztwór cytrynianu amonowo-żelazowego i dodatek selektywny w postaci roztworu: akryflawiny i kwasu nalidyksowego (w bulionie pół-Frasera jest go połowę mniej). Antybiotyki i chlorek litu silnie hamują wzrost bakterii gramujemnych i większość gramdodatnich. Dodatkowo chlorek litu jest czynnikiem wybiórczym, ze względu na tolerancję wyższych stężeń tej soli przez Listeria spp. Szczepy Listeria hydrolizują eskulinę do eskuletyny i glukozy. Eskuletyna tworzy czarny kompleks z żelazem (III) pochodzącym z cytrynianu. Hodowla na tym podłożu po namnożeniu pałeczek Listeria spp. przybiera czarnoszarą lub czarną barwę.
wzrost L.mnocytogenes na podłożu bulion Frasera
![Page 34: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/34.jpg)
podłoże chromogenne ALOA (agar Listeria wg Ottaviani i Agosti)
chromogenny substrat:
5-bromo-3-chloro-3-indoxyl--D-glukopiranozyd –
wykrywanie aktywności - -D-glukozydazy = kolonie niebieskozielone (wszystkie gatunki Listeria)
substrat
L--fosfatydyloinozytol
wykrywanie aktywności fosfolipazy C specyficznej dla fosfatydyloinozytolu (PI-PLC) = mętne halo
Dodatkowo zawiera: mieszaninę antybiotyków (kwas nalidyksowy, ceftazidim, polimyksynę B, cykloheksimid lub amfoterycynę B), chlorek litu.
![Page 35: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/35.jpg)
podłoże agar Oxford
podłoże wybiórczo-różnicujące zawierające w swoim składzie m. in. mieszaninę antybiotyków (siarczan kolistyny, cefotetan, fosfomycynę, cykloheksymid), akryflawinę, eskulinę, chlorek litu i
cytrynian amonowo-żelazowy(III).
podłoże agar Palcam
podłoże wybiórczo-różnicujące zawierające w swoim składzie m in. mieszaninę antybiotyków (polimyksynę B, ceftazidim) akryflawinę, mannitol, czerwień fenolową, glukozę, eskulinę, chlorek litu, cytrynian amonowo-żelazowy(III).
![Page 36: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/36.jpg)
Testy potwierdzające dla Listeria spp.
barwienie Grama
katalaza
zdolność ruchu
test na hemolizę
test CAMP
fermentacja ramnozy i ksylozy
Testy potwierdzające dla L. monocytogenes
![Page 37: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/37.jpg)
L. ivanovii
SR
S - Staphylococcus aureus
(ATCC 25923 lub 49444; NCTC 7428 lub 1803)
R - Rhoodococcus equi
(ATCC 6939 lub NCTC 1621)
L. monocytogenes
R s
L. innocuaR s
Test CAMP
Christie–Atkins–Munch–Peterson test
![Page 38: Zakresy temperatur życia bakterii - zmo.biol.uw.edu.plzmo.biol.uw.edu.pl/files/docs/PdP_2016_DK_L.monocytogenes-_15.12... · Mikrobiologia żywności i pasz. Przygotowanie próbek,](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062601/5c758d4b09d3f220278b78bc/html5/thumbnails/38.jpg)